Survivin调控相关基因在新疆哈萨克族食管癌中的表达

目的：探讨与凋亡相关因子Survivin调控相关的基因c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF在新疆哈萨克族食管癌中的作用。方法：从50例新疆哈萨克族食管癌标本中筛选出Survivin mRNA差异表达（癌组织中的表达量高于远端无癌组织）的32例癌组织及远端无癌组织标本,采用RT-PCR方法检测c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF mRNA在标本中的表达;并分析这些基因的表达与临床病理因素间的关系。结果：在哈萨克族食管癌中,c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF mRNA的表达阳性率依次为93.75%,78.13%、68.75%、65.63%、87.5%和84.38%;半定量光密度扫描结果显示,c-IAP2、STAT3、PTEN、VEGF mRNA在癌组织中的表达均显著高于无癌组织（P均〈0.05）;Survivn mRNA的阳性表达率与c-IAP2、STAT3、PTEN、VEGF mRNA的表达呈正相关;在食管癌组织中cyclinD1 mRNA的表达与c-IAP2、Bcl-2、PTEN mRNA的表达具有相关性（P〈0.05）,PTEN的表达与c-IAP2、STAT3、cyclinD1、VEGF mRNA的表达具有相关性（P〈0.05）;cyclinD1 mRNA的表达与哈萨克族食管癌组织的分化程度相关,Bcl-2、STAT3 mRNA的表达与食管癌淋巴结转移相关,VEGF mRNA的表达则与食管癌患者性别、癌组织分化程度相关（P〈0.05）。结论：Survivin调控相关的基因c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF在新疆哈萨克族食管癌发生发展过程中可能发挥着重要的作用。     

不同分期肺癌患者血清中PDCD5蛋白、CEA和CYFRA21-1表达水平变化及临床意义

目的 探讨不同分期肺癌患者血清中程序化细胞死亡分子5(programmed cell death5,PDCD5)蛋白、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)和细胞白蛋白19(Cytokeratin-19,CYFRA21-1)表达水平变化及临床意义.方法 选取肺癌患者184例作为肺癌组,并...     

新疆哈萨克族食管癌与正常组织间差异表达miRNA的筛查及验证

目的：筛查并验证新疆哈萨克族食管癌组织与正常组织间差异表达的miRNAs,并初步探讨这些miRNAs在食管癌发生演进中的作用。方法：采用miRNA表达谱基因芯片分析系统筛查哈萨克族食管癌组织及远端正常食管组织中差异表达的miRNAs,实时荧光定量PCR检测验证差异显著miRNA的表达情况,分析miRNAs表达与食管癌临床病理指标的关系。结果：与远端正常组织相比较,miR-21、miR-132、miR-130b在哈萨克族食管癌组织中表达上调（P < 0.05）,miR-141、miR-143、miR-133b、miR-195表达下调（P < 0.05）;miR-140表达变化无统计学意义;miR-21、miR-132、miR-143与食管癌临床分期有关,miR-21、miR-132、miR-143、miR-133b与淋巴结转移有关,miR-21、miR-141、miR-143、miR-133b与食管癌组织分化程度有关（P < 0.05）。结论：本研究采用基因芯片筛查出新疆哈萨克族食管癌组织与远端正常组织中差异表达的miRNAs,实时荧光定量PCR结果与基因芯片检测结果基本一致,miRNA表达的变化与新疆哈萨克族食管癌的发生发展有关。     

新疆哈萨克族食管癌survivin启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义

目的： 检测消化道肿瘤早期相关基因survivin mRNA在哈萨克族食管癌组织中的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态,并进一步探究survivin启动子甲基化是否参与了食管癌的发生。方法：提取哈萨克族食管癌患者癌组织及远端无癌组织RNA,RT-PCR检测组织中survivin mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)检测survivin启动子区CpG 岛的甲基化状态。结果：在20对食管癌组织标本中,癌组织中survivin mRNA阳性表达率 (95%)明显高于远端无癌组织 (65%) (P＜0.05)。癌组织及远端无癌组织中survivin基因启动子区CpG岛多为杂合型甲基化,且两种组织间甲基化状态无明显差异 (P＞0.05)。结论：survivin mRNA表达水平的增高在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起到了一定的作用,但其表达与启动子区CpG岛甲基化无关,提示甲基化并未直接调控该基因的表达并促进哈萨克族食管癌的发生发展。     

新疆哈萨克族和汉族食管癌患者金属硫蛋白-3 CpG岛甲基化的研究

目的： 检测分析和比较新疆哈萨克族和汉族食管癌及癌旁组织中金属硫蛋白-3 (metallothionein-3,MT-3)基因启动区CpG岛的甲基化情况,为寻找新疆哈萨克族食管癌诊断治疗的分子标记物提供线索。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应 (methylation specific polymerase chain reaction,MSP)的方法,检测33例哈萨克族和30例汉族食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中MT-3 基因启动子区CpG岛的甲基化发生状况。 结果：33例哈萨克族食管癌组织和癌旁组织标本中MT-3基因启动子区甲基化发生率分别为66.7% (22/33)和27.3% (9/33),差异有统计学意义 (χ2=10.280,P=0.001);30例汉族食管癌组织和癌旁组织标本中MT-3基因启动子区甲基化发生率分别为56.7% (17/30)和26.7% (8/30),差异亦有统计学意义 (χ2=5.554,P=0.018)。哈、汉民族之间癌组织和癌旁组织MT-3基因启动子区甲基化率的差异均无统计学意义 (χ2=0.666,P=0. 414;χ2=0.003,P=0.957)。 结论：MT-3基因启动子区CpG岛的甲基化可能与食管癌的发生与发展有关,但不是哈族食管癌患者的特异性致病因素。     

新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化及其与预后的关系

目的：探讨和比较新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（methvlation-specific polymerase chain reaction,MSF）测定哈、汉两民族共71例食管癌及癌旁组织标本FHIT基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标及FHIT基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果：36例哈族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为58.3%和19.4%,35例汉族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为51.4%和14.3%,两民族癌组织FHIT基因的甲基化率均明显高于癌旁组织（P〈0.01）;哈、汉民族食管癌患者癌组织之间、癌旁组织之间FHIT基因启动子甲基化率无显著性差异（P〉0.05）。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移区域数是影响哈、汉民族食管癌预后的独立危险因素,女性性别是保护因素。结论：FHIT基因启动子区甲基化状态与新疆哈族、汉族食管癌的发生有密切的关系,但可能与食管癌预后无关。     

Testin基因在结直肠癌组织中的表达及临床意义

背景与目的:人类Testin基因是一个定位于染色体7q31.2的候选抑癌基因.本实验研究人结直肠癌中候选抑癌基因Testin的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测60例患者结直肠癌组织及对应正常组织(距肿瘤15 cm以上)中Testin的表达.同时分析Testin的表达与患者临床病理特征的关系.结果:结直肠癌组织中Testin mRNA的表达水平显著低于正常组织(P<0.01);免疫组化结果显示Testin在31.7%(19/60)的结直肠癌组织中呈阳性,而在正常组织中有86.7%(52/60)阳性(P<0.01).统计分析结果发现,Testin蛋白与mRNA的表达与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、Dukes分期、T分期、有无淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05).浸润越深、分化程度越低、Dukes分期越晚、T分期越晚、有淋巴结转移和有远处转移的癌组织的Testin表达明显降低;Testin蛋白与mRNA的表达呈显著正相关(r=0.75,P<0.05).结论:Testin在结直肠癌中的表达量显著下降,可能与结直肠癌的浸润、分化和转移相关,提示Testin基因表达下调可能对结直肠癌的发生、发展具有重要作用.可能成为判断结肠癌预后和浸润转移的生物学指标.     

Wnt信号通路上关键基因在哈萨克族食管癌中的表达

目的：探讨Wnt信号通路上关键基因CK2和SFRP2在哈萨克族食管癌中的表达意义。方法：选取2007年-2014年经手术病理证实为哈萨克族原发性食管鳞癌患者75例,癌旁组织75例。采用免疫组化方法检测食管鳞癌及癌旁组织中CK2、SFRP2的蛋白表达,结合患者临床资料,获得相关病理参数,应用统计学方法,探讨二者在Wnt信号通路上的相互作用及与其他临床资料的关系。结果:（1）食管鳞癌组织中CK2高表达、SFRP2低表达,癌旁组织中SFRP2高表达、CK2低表达（P＜0.05）,临床病理参数方面CK2的表达与肿瘤浸润深度相关（P＜0.05）,与其他临床病理参数无关。SFRP2表达与民族、年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、血管神经侵犯不相关（P﹥0.05）。CK2和SFRP2在哈萨克族食管鳞癌组织中的表达呈负相关（P＜0.05）。结论:CK2、SFRP2在Wnt信号通路上可能参与食管癌的发生、发展;CK2、SFRP2可能是治疗食管癌的潜在分子靶点。     

凋亡抑制基因Livin在人胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究凋亡抑制基因Livin在人胃癌组织中的表达及其与组织分化程度、淋巴结转移等临床病理参数之间的关系。方法应用RT-PCR方法检测Livinα和Livinβ mRNA表达水平,卡方检验分析两组之间表达水平差异。将胃癌临床病理参数与表达水平进行等级相关分析和检验,探讨二者之间的相关性。结果 40例胃癌患者中,Livin表达阳性率52.5%,且Livinα和Livinβ两种异构体均见表达。20例正常胃组织中均未见Livin mRNA表达,阳性率0%（P〈0.05）。Livin的表达与胃癌的分化程度以及是否有淋巴结转移之间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析示Livin的表达与胃癌的浸润深度、TNM分期之间呈正相关,但Livin的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。Livin的表达与年龄、性别、胃癌的生长部位差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 Livin在胃癌组织中特异性的表达,可能作为胃癌免疫及基因治疗的一个有效靶点。     

70例子宫内膜异位症相关卵巢癌患者PDCD4、PDCD5蛋白的表达及临床意义

目的:研究PDCD4、PDCD5蛋白在子宫内膜异位症相关卵巢癌(EAOC)中的表达水平及其临床意义.方法:收集2010年2月至2015年2月到我院妇科确诊的70例子宫内膜异位症相关卵巢癌(EAOC)患者作为观察组,并选取同一时间段内到我院确诊的70例单纯性卵巢癌患者作为对照组.应用免疫组化法(Fnvisinn)检测两组卵巢癌患者卵巢组织中程序性死亡4因子(PDCD4)和程序性死亡5因子(PDCD5)蛋白的表达水平,并且将两组资料显示结果进行对比分析.结果:观察组患者PDCD4蛋白的阳性表达率为20.0％,对照组患者阳性表达率为31.4％,观察组PDCD4蛋白的阳性表达率明显低于对照组,两组数据差异明显(P＜0.05).观察组患者中PDCD5蛋白的阳性表达率为21.4％,对照组患者中阳性表达率为34.3％,观察组PD-CD5蛋白的阳性表达率明显低于对照组,两组数据差异明显(P＜0.05).观察组患者PDCD4 (0.39 ±0.11)和PDCD5蛋白(0.41 ±0.12)的含量都明显降低,且低于对照组,两组数据具有明显差异(P＜0.05).结论:通过检测子宫内膜异位症相关卵巢癌患者PDCD4、PDCD5蛋白的表达水平,可以有效地诊断患者病情的恶化程度,了解病情发展情况,明确病情类型,有助于患者病情的控制和治疗,值得推广应用.     

胃癌组织中促凋亡因子PDCD5的表达及意义

目的探讨PDCD5蛋白在胃癌及癌旁组织中表达的特点,并根据其与胃癌生物学行为之间的关系分析对胃癌诊断以及预后评估的意义。方法采用免疫组织化学SP法检测50例胃癌及癌旁组织中PDCD5蛋白,以人工阅片评分以及Image- Pro Plus 6.0图像分析软件半定量分析两种方法判断其表达。结果PDCD5蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(22.0%)明显低于癌旁组织(76.0%),并且在胃癌组织中的阳性率与分化程度(P＜0.01)、浸润度(P＜0.05)、淋巴转移(P＜0.05)相关。图像软件半定量分析结果显示PDCD5在胃癌组织中表达IOD为(8033.83±7719.14),显著低于癌旁组织(50224.35±39934.31),并且不同类型胃癌组织中IOD水平与分化程度、浸润度、淋巴转移相关之间存在显著相关性(P＜0.01)。结论人工阅片评分及图像分析软件半定量分析两种方法结果一致,PDCD5蛋白低表达于胃癌组织,在不同分化程度、浸润度以及有无淋巴转移组间的表达都有显著差异。PDCD5蛋白低表达预示肿瘤有较强的侵袭性,可用于判断胃癌预后。     

PDCD5在人子宫内膜癌中的表达及对细胞凋亡的影响

目的 探讨PDCD5对子宫内膜癌细胞克隆形成,增殖以及凋亡的作用.方法 收集行手术切除的子宫内膜癌及对应癌旁组织共60例,采用qRT-PCR,western blot分别检测PDCD5 mRNA水平及蛋白水平在子宫内膜癌及对应癌旁组织中的表达情况,通过重组PDCD5(rhPDCD5)处理HEC1A子宫内膜癌细胞,检测其对细胞增殖、克隆形成及细胞凋亡的影响.结果 子宫内膜癌组织中PDCD5表达水平显著低于对应癌旁组织(P＜0.05);肿瘤组织中PDCD5低表达与病理分期、组织学分级、肌层浸润以及肿瘤淋巴结转移均具有显著相关性(P＜0.05);低表达PDCD5的患者总生存时间均显著缩短(P＜0.05);重组的PDCD5蛋白能够通过促进子宫内膜癌细胞凋亡抑制细胞增殖和克隆形成能力.结论 PDCD5在子宫内膜癌组织中低表达并与子宫内膜癌临床病理特征及不良预后显著相关,并能够通过促进子宫内膜癌细胞凋亡进而抑制细胞增殖及克隆形成,PDCD可能参与子宫内膜癌发生发展进程,并可作为早期诊断及预后评价的重要分子.     

PDCD5蛋白联合米非司酮对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响

目的 观察PDCD5蛋白协同米非司酮(MIF)对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响.方法 MTT法分别检测10、20、50和100μmol/L MIF作用于PC-3M细胞24～96 h的吸光度(A)值.扩增包含PDCD5序列的真核表达载体PCI-neo-PDCD5,用脂质体介导的方法转染前列腺癌PC-3M细胞.在转染PDCD5的细胞中分别加入10、20 μmol/L MIF,继续培养24 h,MTT比色法检测细胞增殖,RT-PCR方法检测细胞增殖相关基因CyclinDl、Ki-67的表达.结果 MTT实验表明,与对照组相比,10 μmol/L MIF组的A值差异无统计学意义(P<0.05),20、50和100 μmol/L MIF组的A值显著降低(P<0.05),MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈剂量依赖性;PDCD5真核表达载体成功转染PC-3M细胞并得到了瞬时表达,转染PCI-neo-PDCD5并加入MIF后,与对照组及单独应用MIF组相比,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),增殖相关基因CyclinD1、Ki-67表达降低.结论 PDCD5蛋白能够协同米非司酮抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖,可能是通过调节某些增殖相关基因的表达来实现的,并有望成为前列腺癌的辅助治疗药物.     

PDCD5与Caspase-3在人非小细胞肺癌中的表达

目的:研究PDCD5及Caspase-3在人非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)组织中的表达及其相关性,探讨二者在非小细胞肺癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组织化学法检测54例NSCLC肿瘤组织和20例癌旁正常肺组织中PDCD5和Caspase-3蛋白的表达情况.结果:PDCD5和Caspase -3在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常肺组织(79.6%vs100%,75.9%vs100%,P＜0.05),且二者在肺癌中的表达随NSCLC临床分期的上升及组织学分级的下降逐渐减弱.结论:PDCD5和Caspase-3在非小细胞肺癌组织中表达下调,且二者在肺癌组织中的表达呈正相关,PDCD5可能作为Caspase-3蛋白的正调控因子促进细胞凋亡.     

PDCD5与Caspase-3在人非小细胞肺癌中的表达

目的：研究PDCD5及Caspase-3在人非小细胞肺癌（non-smallcelllungcarcinoma,NSCLC）组织中的表达及其相关性,探讨二者在非小细胞肺癌发生、发展中的作用。方法：采用免疫组织化学法检测54例NSCLC肿瘤组织和20例癌旁正常肺组织中PDCD5和Caspase-3蛋白的表达情况。结果：PDCD5和Caspase-3在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常肺组织（79.6%vs100%,75.9%vs100%,P〈0.05）,且二者在肺癌中的表达随NSCLC临床分期的上升及组织学分级的下降逐渐减弱。结论：PDCD5和Caspase-3在非小细胞肺癌组织中表达下调,且二者在肺癌组织中的表达呈正相关,PDCD5可能作为Caspase-3蛋白的正调控因子促进细胞凋亡。     

转染PDCD5基因促进顺铂诱导前列腺癌细胞的凋亡作用

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5（PDCD5）对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI 双染法检测细胞的凋亡率、电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果顺铂对DU145细胞的生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;成功构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞;流式细胞术和电子显微镜都显示PDCD5联合顺铂（25 μmol/L）促进细胞的凋亡作用比联合顺铂（10 μmol/L）和单独使用顺铂明显,Western blot结果显示,顺铂联合PDCD5能明显降低Bcl-2的表达,而Bax的表达变化不明显。结论单独PDCD5过表达不引起DU145细胞的凋亡,但PDCD5能显著增强顺铂诱导DU145细胞凋亡的作用,其机制之一是通过降低Bcl-2/Bax的表达比率实现的。     

PDCD5对胃癌SGC-7901细胞株细胞周期的影响

目的:通过检测PDCD5蛋白对胃癌细胞株SGC-7901的细胞周期的影响,探讨PDCD5蛋白对胃癌的作用。方法:培养胃癌细胞株SGC-7901。构建pEGFP-C1-PDCD5质粒并转染SGC-7901细胞,使其表达PDCD5蛋白。另外在SGC-7901细胞的培养基中,加入重组人PDCD5(rhPDCD5)蛋白直接作用。采用MTT比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光技术和Western blot检测相关周期蛋白的变化。结果:在以上两种作用方式下,SGC-7901的增殖均受到抑制,细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞出现G0/G1期阻滞(P<0.05)。经过两种作用方式处理后的细胞周期蛋白Cyclin D1和Cyclin E明显下降(P<0.01)。结论:转染PDCD5质粒与rhPDCD5蛋白均能够起到对胃癌细胞株SGC-7901周期阻滞的作用。且两种方式作用的效果和机制无明显差异。可以为临床胃癌治疗提供新的思路。     

新的凋亡相关基因PDCD5在细胞凋亡中的作用及应用前景

PDCD5是人类新基因,参与细胞凋亡调控过程,与许多凋亡异常相关疾病的发生发展有着密切的相关性.多项研究表明PDCD5与药物协调应用可以达到治疗目的,PDCD5是一个新的肿瘤抑制基因,其在凋亡相关性疾病中的应用有待更深入的研究.     

PEBP4基因在食管癌中的表达及其临床意义

目的 探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(phosphatidylethanolamine-binding protein 4,PEBP4)基因在食管癌组织中的表达及其与食管癌临床病理的相关性,并探讨其在食管癌侵袭转移过程中的作用.方法 采用RT PCR、免疫组织化学和Western blot方法检测56例食管癌组织中PEBP4 mRNA和蛋白的表达情况,采用RNA干扰技术,下调Eca-109人食管癌细胞中PEBP4表达后,观察Eca-109细胞侵袭能力的变化.结果 全组56例食管癌患者,PEBP4 mRNA和蛋白在食管癌组织中的表达显著高于癌旁相对正常黏膜组织(P＜0.05),在淋巴结转移及远处转移阳性患者癌组织中的表达显著高于在淋巴结转移和远处转移阴性患者癌组织中的表达(P＜0.05);但PEBP4的表达与食管癌患者的性别、年龄及肿瘤大小及分化程度无关(P＞0.05).下调PEBP4蛋白表达可以显著降低Eca-109细胞的侵袭转移能力(P＜0.01).结论 PEBP4蛋白的过表达可能与食管癌的发生及侵袭转移有关.