维生素E通过抑制二酰基甘油-蛋白激酶C通路对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

近年来，有关细胞内信息传导与细胞功能调节在糖尿病并发症的研究中越来越引起人们的重视。二酞基甘油（ＤＡＧ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）是细胞内重要的信息传导系统，ＤＡＧ－ＰＫＣ通路活性异常在糖尿病肾病发病机制中起着关键性作用［１］。以往研究发现，维生素Ｅ对糖尿病大鼠肾脏有保护作用［２］。本研究中，我们探讨维生素Ｅ对肾脏的保护作用是否同纠正ＤＡＧ－ＰＫＣ通路活性异常有关。 一、材料和方法 １．实验动物分组及模型制作：体重２００～２５０ ｇ，雄性 ＷＳＩＳＩ大鼠５０只（山东大学实验动物中心提供），随机分为正常对…     

晚期糖基化终末产物和蛋白激酶C对糖尿病大鼠肾脏的影响

目的探讨糖尿病状态下肾小球晚期糖基化终末产物（ＡＧＥ）与蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的关系及其对肾脏的影响。方法给予糖尿病大鼠胰岛素和氨基胍治疗，测定血糖，糖化血红蛋白Ａ１Ｃ（ＨｂＡ１Ｃ）、肾小球ＡＧＥ（ＧＴＥＡＧＥ）、蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）、肾小球基底膜厚度（ＧＢＭＴ）和尿Ｐｒ／Ｃｒ比值。结果糖尿病大鼠在血糖、ＨｂＡ１Ｃ和ＡＧＥ水平增高的同时，ＰＫＣ活性、尿Ｐｒ／Ｃｒ比值和ＧＢＭＴ都显著增加（Ｐ值小于００１）；胰岛素可减少ＨｂＡ１Ｃ和ＡＧＥ形成，恢复ＰＫＣ活性，氨基胍可减少ＡＧＥ形成，但对ＰＫＣ活性无影响。两种药物均可减缓尿Ｐｒ／Ｃｒ比值和ＧＢＭＴ增加（Ｐ＜００１或Ｐ＜００５）。结论慢性高血糖可增高肾小球ＰＫＣ活性，非酶促糖基化可能未直接参与ＰＫＣ活性改变，但ＰＫＣ可加强ＡＧＥ对肾脏的影响。减少ＡＧＥ形成，改善ＰＫＣ活性对糖尿病肾病的防治尤为重要。     

胰岛素及卡托普利对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

糖尿病肾病（ＤＮ）的发生与众多血管活性物质和细胞因子的作用密切相关,而这种作用主要通过蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）所介导［１］。胰岛素、血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）治疗可延缓ＤＮ肾功能恶化。我们以往的研究显示初发糖尿病大鼠肾小球内ＰＫＣ活性即增强［２］,本研究的目的为进一步观察胰岛素、ＡＣＥＩ（卡托普利）对糖尿病大鼠各阶段肾小球ＰＫＣ活性的影响。 一、材料与方法 １．动物：Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ雄性大鼠１４２只,１５０～１７０ｇ。分为正常对照组刚组）,糖尿病组（ＤＭ）组,胰岛素组（ＤＩ组）及卡…     

糖尿病肾病发病过程中肾小球蛋白激酶C活性变化的研究

随着分子生物学及其相关技术的应用，人们发现众多血管活性物质和细胞因子在糖尿病肾病的发生与发展中起着关键性的作用。这些物质的共同信号传导途径或作用往往通过蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ， ＰＫＣ）介导。我们利用γ－３２ＰＡＴＰ底物磷酸化的方法，探讨糖尿病肾病发病过程的不同阶段肾小球ＰＫＣ活性变化规律。 一、材料与方法 １．糖尿病实验模型的制备和分组：取体重 １５０～１７０ ｇ ＳＤ系雄性大鼠９６只，随机分为正常对照２周、４周、１２周组，糖尿病大鼠２周、４周、１２周组，共６组，每组各１６只。经…     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

研究表明,血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）能够减少糖尿病肾病的尿蛋白、延缓肾小球硬化的发生［１］;然而血管紧张素Ⅱ受体１拮抗剂（ＡＴ１ＲＡ）对糖尿病肾病的作用尚不清楚。我们通过观察ＡＴＩＲＡ──缬纱坦（ｖａｌｓａｒｔａｎ）对糖尿病大鼠蛋白尿、血压及肾组织转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）和原癌基因蛋白Ｃ－Ｆｏｓ的影响,探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用和机理。 一、材料与方法 １．材料：（１）雄性ＳＤ大鼠４０只,体重２３０～２７０ ｇ（河南医科大学动物实验中心提供）;（２）链脲佐菌素（Ｓｔｒｅ…     

缺血预处理改善骨骼肌功能的研究

目的：探讨缺血预处理法改善缺血骨骼肌功能的临床价值。方法：用ＳＤ大鼠１２只，以右后肢为动物实验模型。分为缺血组（对照组，鼠６只），即缺血４小时后再灌注１小时的方法；缺血预处理组（实验组，鼠６只），缺血过程同对照组，但在缺血前预先经过２次缺血５分钟、再灌注１０分钟的处理。实验时，分别于缺血前、缺血１、４小时及再灌注１小时时，测定两组实验侧肢体腓肠肌最大肌张力的变化。实验结束后分别测量血ＭＤＡ、ＣＰＫ及大鼠右后肢９９ｍＴｃ亚甲基二磷酸计数。结果：实验组最大肌张力的变化（缺血４小时、再灌注１小时时）较对照组有明显改善；血ＭＤＡ、ＣＰＫ及肌肉９９ｍＴｃ亚甲基二磷酸较对照组显著降低。结论：缺血预处理不仅能改善骨骼肌的缺血耐受性，而且能有效地改善骨骼肌的功能     

平滑肌收缩蛋白在进行性肾病变中的变化

为了调查在进行性肾病变中平滑肌收缩蛋白（α－ＳＭＡ）的变化规律，我们采用自然发病的高脂血症白鼠（ＳＨＣ）［１，２，３］一种局灶性节段性肾小球硬化（ＦＳＧＳ）的动物模型，对α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）、肌球蛋白（Ｓｍｅｍｂ）、类肌钙蛋白（ｃａｌｌｐｏｎｉｎ）在整个肾病进展过程中的变化进行了系统观察，现将结果报告如下。 一、材料与方法 １ 动物及方法：雄性ＳＨＣ大白鼠由日本武田药品研究所提供，雄性ＳＤ大白鼠由日本　　 社提供。实验分两个阶段，第１阶段取雄性６周龄ＳＨＣ大鼠和ＳＤ大鼠各６只，每隔 ２周…     

丹参防治胆源性胰腺炎作用的实验研究

我们采用流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）及细胞内钙离子荧光探针Ｆｌｕｏ３ＡＭ和钙通道阻断剂丹参，探索胆源性胰腺炎（ｂｉｌｉａｒｙｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ，ＢＰ）大鼠胰腺细胞内浓度的变化机制及丹参对ＢＰ的防治效果。１．实验动物及分...     

烧伤小鼠活化T细胞内游离钙浓度、蛋白激酶C活性的变化及意义

采用ＴＢＳＡ１０％Ⅲ度烧伤小鼠模型探讨了烧伤后小鼠活化Ｔ细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的变化及其同Ｔ细胞功能之间的关系。结果显示，烧伤后活化Ｔ细胞内［Ｃａ２＋ｉ］降低，ＰＫＣ活性下降，且这一变化同烧伤小鼠Ｔ细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２受体α（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平降低，ＩＬ－２生成减少，ＩＬ－２Ｒα表达受抑，Ｔ淋巴细胞转化降低密切相关。钙离子导入剂Ａ２３１８７及ＰＫＣ激活剂ＴＰＡ在体外可分别提高烧伤小鼠活化Ｔ细胞内［Ｃａ２＋］ｉ、ＰＫＣ活性至正常对照水平，也可明显提高烧伤小鼠Ｔ细胞ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒα的基因表达水平，但不能使之恢复正常。提示活化Ｔ细胞内［Ｃａ２＋］ｉ、ＰＫＣ活性降低是导致烧伤后Ｔ细胞功能受抑的原因之一。     

牛磺酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激和非酶糖基化的抑制作用

目的　研究牛磺酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应和非酶糖基化的抑制效果。方法　链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠用牛磺酸治疗１４ 周后,评价牛磺酸对糖尿病大鼠肾脏氧自由基代谢和非酶糖基化产物的影响。结果　与对照组大鼠比较,糖尿病大鼠肾皮质超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ） 活性明显降低,而丙二醛含量明显增加;血清和肾皮质晚期糖基化终末产物（ＡＧＥｓ） 水平升高和肾小球ＡＧＥｓ 的形成增加。牛磺酸治疗可明显增加糖尿病大鼠肾脏ＳＯＤ 和ＣＡＴ活性,减低肾皮质ＭＤＡ含量,显著降低糖尿病大鼠血清、肾脏ＡＧＥｓ 水平,减少肾小球ＡＧＥｓ 的形成。结论　牛磺酸能明显抑制糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应和非酶糖基化。     

补肾中药对肾虚骨质疏松症大鼠红细胞膜PKC、 Ca2+-Mg2+- ATP酶活性影响的实验研究

本实验研究切除卵巢造成肾虚骨质疏松症大鼠模型。通过观测红细胞膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和Ｃａ２＋－Ｍｇ２＿－ＡＴＰ酶的活性，探讨肾虎骨质疏松症病理机制中肌醇脂质系统的变化，并结合全身和脊柱骨密度（ＢＭＤ）指标观察了补肾中药（密骨灵）的疗效，与正常对照组、模型空白组和阳性药（骨疏康颗粒剂）对照组进行对照，探讨补肾法的防治机理。结果表明；模型空白组大鼠红细胞膜ＰＫＣ和Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性明显低于正常组（ｐ均＜０．０５）；密骨灵组与骨疏康组大鼠全身、脊柱ＢＭＤ和红细胞膜ＰＫＣ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性均明显高于模型空白组（ｐ均＜０．０５），并且与正常组大鼠无明显差别（ｐ均＞０．０５）；密骨灵组大鼠红细胞膜Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性高于模型空白组和骨疏康组（ｐ＜０．０５），并且与正常组无显著性差异（ｐ＞０．０５）；密骨灵组大鼠红细胞膜ＰＫＣ活性高于骨疏康组（Ｐ＜０．０５）。结论：肾虎骨质疏松症具有红细胞膜ＰＫＣ和Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的改变；密骨灵可以恢复肾虎骨质疏松症大鼠全身骨量，达到防治目的；补肾中药可以恢复红细胞膜ＰＫＣ活性和钙镁泵的活性，是补     

性激素对系膜细胞增殖的影响

由肾小球肾炎和高血压性肾小球硬化所致的终末期肾功能衰竭中男性发病率高于女性。多种肾脏病发展男性快于女性［１］。肾小球硬化包括细胞增殖和细胞外基质合成，我们实验观察性激素对体外培养大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）增殖和基质合成的直接影响。一、材料和方法１．ＭＣ的培养与鉴定：雄性ＳＤ大白鼠４只，６～８周龄，１５０～２００ｇ，由河南医科大学动物实验中心提供。ＭＣ的培养与鉴定按谌贻璞等建立的方法进行［２］。２．性激素对ＭＣ增殖的影响：（１）对活细胞计数的影响：将亚培养第五代ＭＣ种于２４孔（１００００个／孔）培…     

黄腐酸钠对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的研究黄腐酸钠对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法观察黄腐酸钠对肾小球形态，肾小球基底膜超微结构，尿白蛋白排出率的影响及血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）、纤溶酶原激活剂抑制物（ＰＡＩ１）活性改变。结果糖尿病大鼠血浆ｔＰＡ活性明显降低，而ＰＡＩ１活性升高。黄腐酸钠明显降低糖尿病大鼠尿白蛋白，抑制肾小球肥大，延缓肾小球基底膜增厚及足突融合，显著提高血浆ｔＰＡ活性而降低ＰＡＩ１活性。结论黄腐酸钠对糖尿病肾病具有保护作用。此作用可能与提高血浆纤溶活性有关。     

山莨菪碱对环孢素A肾毒性的保护作用

环孢素Ａ（ＣｓＡ）是目前在器官移植中防止排斥反应最常用的药物。我们观察了山莨菪碱对大鼠ＣｓＡ肾毒性的防护作用，并探讨了其可能机制。一、材料与方法１．材料健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只，体重２００～３００ｇ（由江西省动物研究所提供）；ＣｓＡ注射液（由瑞...     

四种合成人抑制素α亚基片段对大鼠黄体细胞孕酮分泌的影响及与蛋白激酶A系统的关系

应用大鼠黄体细胞离体培养方法，观察４种人工合成人抑制素α亚基Ｎ末端片段：Ｐ￣(２２)（７～２８）、Ｐ￣(３２)（１～３２）、Ｐ￣(３２)－Ｔｙｒ（１～３２－Ｔｙｒ）和Ｐ￣(２９)（３７～６５）对基础孕酮及绒毛膜促性腺激素（（ｈＣＧ）和卵泡刺激素（ＦＳＨ）致孕酮分泌作用的影响。结果表明：（１）４种α片段（１００ｎｇ）均显著抑制大鼠黄体细胞的基础孕酮分泌。除Ｐ￣(２２)无抑制作用外，其余３种片段不同程度地减弱ｈＣＧ和ＦＳＨ刺激的孕酮分泌。（２）４种α片段也显著抑制Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（１００ｎｍｏｌ／Ｌ）、ｄｂｃＡＭＰ（２０ｎｍｏｌ／Ｌ）及蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）（１０μｇ）刺激基础孕酮分泌效应。表明各α片段对ＰＫＡ系统从受体水平到ｃＡＭＰ环节，直到ＰＫＡ水平均有抑制作用，α片段抑制孕酮分泌与ＰＫＡ系统有关。     

糖尿病大鼠肾小球及内髓集合管细胞对一氧化氮反应的异常

目的观察糖尿病大鼠肾脏中一氧化氮（ＮＯ）依赖性３′，５′环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）的改变，推测ＮＯ在糖尿病肾病中的可能作用。方法分离肾小球及内髓集合管（ＩＭＣＤ）细胞，采用放免法测定ｃＧＭＰ含量。结果糖尿病大鼠肾小球ｃＧＭＰ基础水平明显升高，ＮＧ单甲基Ｌ精氨酸（ＬＮＭＡ）仅可部分纠正该异常，肾小球对Ｌ精氨酸、乙酰胆碱及硝普钠的刺激反应明显减弱。ＩＭＣＤ细胞对Ｌ精氨酸的反应也下降。结论糖尿病大鼠肾小球及ＩＭＣＤ细胞均存在ＮＯ代谢异常。     

腹膜透析对转化生长因子β1在残存肾中表达的影响

探讨清除循环中毒素后生长因子和残存肾小球的改变。方法采用分子杂交技术和组织病理分析方法在肾次全切除的残存肾大鼠模型上研究腹膜透析（ＰＤ）对转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ在残存肾中表达的影响和肾小球硬化的变化。分模型组和ＰＤ组，第８周ＰＤ组开始作腹膜透析至第１２周。分别在第７周和１２周各组杀检６只作肾病理检查（ＨＥ．ＰＡＳ染色）和ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ缝隙点样杂交。结果在实验的第７周两组间肾小球硬化指数（ＧＳＩ）及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均无显著性差异。第十二周，ＰＤ组的ＧＳＩ及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均显著低于模型组。ＧＳＩ改变程度与ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达丰度变化呈明显正相关（ｒ＝０．６５Ｐ＜０．０５）。结论腹膜透析可明显减少ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达并延缓残存肾小球的硬化     

心跳骤停期间及心肺复苏前后前脑M受体变化的实验研究

目的 探讨心跳聚停（ＣＡ）期间及心肺复苏（ＣＰＲ）前后前脑Ｍ受体变化的规律。方法 采用窒息致大鼠ＣＡ的动物模型,５５只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随发为正常对照组（ｎ＝８）、手术对照组（ｎ＝７）、ＣＡ１组（ｎ＝８）;窒息１０ｍｉｎ,ＣＡ２组（ｎ＝８）;窒息３０ｍｉｎ,以及ＣＰＲ前组（ｎ＝８）;窒息１０ｍｉｎ和ＣＰＲ后组（ｎ＝９）：窒息１０ｍｉｎ后复苏,自主循环恢复后继续机械通气３０ｍｉｎ,实验结束时断头取脑,     

线粒体钙和脂质过氧化在老年大鼠缺血型急性肾功能衰竭中的变化

研究了老年和青年大鼠肾皮质线粒体在缺血型急性肾功能衰竭（ＮＲＦ）中的钙含量（ＭＣＣ）和钙摄取率（ＭＣＵ）及脂质过氧化终解产物丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果发现老年大鼠ＭＣＣ、ＭＣＵ在正常、缺血４５分和缺血４５分再灌注１小时后和青年大鼠比较无显著性差异；而老年大鼠ＭＤＡ在正常时即高于青年大鼠。缺血和缺血再灌注损伤后也显著高于青年大鼠。说明老年肾对急性缺血损伤易感性和氧自由基损伤有关，而与细胞内钙超负荷关系不明显。     

选择性肝动脉、门静脉、肝胆管单一或联合栓塞术对大鼠肝癌生长及肝肾和免疫功能影响的实验研究

本实验研究探讨了肝动脉、门静脉、肝胆管单一或联合栓塞术对动物肝癌生长及肝肾和免疫功能的影响，旨在为临床治疗肝癌开辟新技术领域。一、材料与方法１．实验分组与方法：选用２５４只大鼠肝癌模型，随机分为３组：（１）对照组１２只；（２）肝癌栓塞（ＨＣＣＥ）组１...