不阻断肝门肝切除术在肝癌治疗临床应用研究

目的探讨肝癌采用不阻断肝门切除术治疗临床效果。方法选取2011年6月~2016年6月连云港市第二人民医院肝胆外科行肝切除术的原发性肝癌患者41例,随机分为肝门阻断组(阻断组)21例和不阻断肝门组(不阻断组)20例,阻断组术中采用全肝入肝血流阻断,不阻断组术中不阻断入肝血流,比较两组临床资料。结果两组术中出血量、手术时间差异无统计学意义(P0.05)。术后住院时间不阻断组明显少于阻断组(P0.05)。两组术前白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)及谷丙转氨酶(ALT)均差异无统计学意义(P0.05),而术后1d及7d阻断组TBIL、ALT均显著高于不阻断组,ALB显著低于不阻断组,有统计学差异(P0.05)。阻断组并发症发生率为38.1%,而不阻断组为5%,明显低于阻断组(P0.05)。结论采用不阻断肝门肝切除治疗肝癌具有一定的安全性和可行性,减少了对肝功能的影响,降低了术后并发症发生率,相对安全可靠,可操作性强,值得在临床推广应用。     

大鼠骨髓源性肝干细胞脾内移植后的分化

目的探索大鼠骨髓源性肝干细胞（BDHSC）脾内移植后的分化情况。方法利用肝细胞生长因子（HGF）体外诱导大鼠BDHSC,并植入60只成年SD大鼠脾内,两组（n=30）分别于术后7天和14天处死动物后取脾,RT—PCR及免疫组化检测移植细胞的AFP及白蛋白的表达。结果移植后7天,AFP mRNA、白蛋白mRNA和AFP的阳性表达率分别为73．3％、46．7％、56．7％;移植后14天,AFP mRNA阳性表达率（23．3％）显著下降（P〈0．01）,白蛋白mRNA阳性表达率（20%）显著下降（P〈0．05）,AFP阳性表达率（26．7％）亦显著下降（P〈0．05九,结论体外诱导大鼠BDHSC脾内移植后,其原有的肝干细胞特性逐渐丧失     

腹腔镜解剖性肝切除术在原发性肝癌治疗中的临床应用研究

目的 探究腹腔镜解剖性肝切除术在原发性肝癌治疗中的临床应用研究.方法 选取2018年10月至2019年7月在普宁市人民医院确诊的98例原发性肝癌患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组各49例.对照组患者采用腹腔镜下非解剖性肝切除术,观察组患者采用腹腔镜下解剖性肝切除术.比较两组患者术中情况、术后并发症、术后两组...     

解剖性肝切除术对原发性肝癌的治疗效果及安全性分析

目的探讨和分析在原发性肝癌患者中解剖性肝切除术的疗效与安全性。方法对我院在2016年2月至2018年6月诊治的95例原发性肝癌患者,以入院顺序分乙组、甲组,甲组患者为48例,乙组患者为47例。此次研究乙组是非解剖性肝切除术,研究甲组是解剖性肝切除术,总结手术情况、并发症肝功能、预后。结果甲组的出血量、输血量都小于乙组,差异显著,P <0.05。甲组的手术时间大于乙组,P <0.05。甲组并发症的总发生率小于乙组,P <0.05。甲组的丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素、直接胆红素都小于乙组,差异显著,P <0.05。甲组的病死率、肝外转移率、肝内复发率都小于乙组,差异显著,P <0.05。结论在原发性肝癌患者中,解剖性肝切除术的手术时间长,但出血量和输血量少,且预后较好、安全性高、有效改善肝功能。     

微波肝切除治疗原发性肝癌的临床研究

目的评价微波肝切除治疗原发性肝癌的效果。方法对６７例原发性肝癌随机分为两组。一组采用微波肝切除术３１例;另一组采用常规肝切除术３６例作为对照。结果微波肝切除组术后１、３、５年生存率分别为９０．３％（２８／３１）、４９．４％（１５／３１）、２９．０％（９／３１）;常规肝切除组术后１、３、５年生存率分别为８８．９％（３２／３６）、４３．９％（１６／３６）、２５．０％（９／３６）。两组生存率差异无显性     

神经干细胞及临床应用展望

1　背景知识在实验培养中能无限增殖并能向不同方向或谱系分化的细胞统称干细胞。成体的血液系统、皮肤和黏膜早已发现有干细胞的存在 ,这些干细胞在一生中维持着血细胞、皮肤和黏膜上皮的更新。至于神经系统 ,人们过去认为 :在胚胎初始发育过程中 ,存在着大量的神经干细胞 ,其迁移定位后 ,部分干细胞最终分化成各种类型的神经细胞 ,到胚胎晚期 ,神经干细胞逐渐减少 ,以至出生后完全消失 ,即认为在成体神经系统不存在干细胞 ,神经系统一旦发育成熟 ,细胞即不能再生。这也导致了临床上对正常神经细胞数量减少之类的疾病产生“治疗无望”的看…     

肝癌肝动脉栓塞化疗术的治疗及护理

目的：分析116例原发性肝癌患者肝动脉化疗栓塞的护理。方法：对2006年6月～2008年6月间的116例肝癌患者进行回顾性分析,评价术前、术中、术后的护理。结果：116例患者均能顺利完成肝动脉栓塞化疗术。结论：术前给予支持治疗,做好术前、术中和术后的护理,可预防并发症的发生。     

肝干细胞研究进展

目前对肝硬化、肝功能衰竭等患者除了用肝脏移植手术以外缺乏有效的治疗手段，各种人工肝支持也只能在短期内维持患者的生命，但是肝脏器官移植中供体肝脏的来源十分有限，而研究发现移植入肝硬化等疾病患者的肝细胞具有增殖形成克隆的能力，故人们对用肝细胞的移植来治疗肝病寄予厚望，对肝干细胞的研究为肝病的细胞移植、肝脏组织工程和基因治疗提供了新的思路，带来了新希望。     

非规则肝切除治疗原发性肝癌

目的探讨原发性肝癌行非规则切除的处理方法。方法在近８年中对１０３例肝癌行非规则肝切除,术式包括联合肝段切除、部分肝段切除、联合右前后叶部分切除、左内叶楔形切除及左右半肝切除、左三叶肝切除等。对中央型（Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ）肝切除,由于其于第一、二肝门的关系密切,紧贴或累及大血管,切除时应预置血管阻断带。Ⅷ段切除时应注意至少保留肝中或肝右静脉一支,以利肝静脉回流。肝断面处理提倡尽可能对拢缝合。结果无手术中死亡     

解剖性与非解剖性肝切除术治疗晚期肝癌的安全性及临床疗效对比

目的:对比分析晚期肝癌患者中行解剖性肝切除术与非解剖性肝切除术安全性与临床疗效的优劣。方法:回顾性分析98例行肝切除术的晚期肝癌患者临床资料,59例行解剖性肝切除术的患者归入研究组、39例行非解剖性肝切除术的患者归入对照组,对比两组患者术中、术后效果。结果:(1)术中效果显示,观察组手术时间平均为(271.5±97.4)min,切缘有效率为89.8%,优于对照组(188.5±70.7)min和53.8%,差异有统计学意义(P<0.05);但两组术中出血量、术中输血量无统计学意义(P>0.05);(2)观察组预后效果要优于对照组,术后3d血清ALT均值为(270.5±94.1)U/L,对照组则高达(501.6±115.6)U/L,术后1年复发率、生存率也优于对照组,上述各项差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:解剖性肝切除术具有更高的安全性与临床疗效,对于须行肝切除的晚期肝癌患者,更值得采用。     

肿瘤干细胞理论及肿瘤干细胞分离和鉴定研究进展

肿瘤是当今社会对人类健康和生命危害最大的疾病之一,即使在人类医学科技迅速发展的今天,对于肿瘤的治疗仍是一大难题,其根本原因是对肿瘤的发生、发展、转移和复发的机制尚不清楚。近些年来,研究人员通过对肿瘤细胞表面标志物、增殖能力和致瘤能力等的深入研究,提出了肿瘤干细胞理论,即肿瘤中存在着少数具有无限自我更新能力和异种免疫缺陷动物致瘤能力的干细胞样肿瘤细胞,它们在肿瘤的发生、生长和转移等生物学过程中起着决定性的作用,该理论的提出给肿瘤治疗提供了新的思路和策略。本文将对肿瘤干细胞理论的形成和发展过程,肿瘤干细胞的特性以及肿瘤干细胞的分离和鉴定最新研究进展进行综述。     

人脂肪间充质干细胞分离培养及其生物学特性的实验研究

目的探索人脂肪间充质干细胞（adipose tissue—derived mesenchymal stem cells,ADMSCs）分离培养的方法及体外扩增的条件,观察ADMSCs的生物学特性。方法以腹部手术患者皮下脂肪组织为材料,采用I型胶原酶消化法及贴壁法分离培养ADMSCs,在含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基中贴壁培养,倒置显微镜观察,流式细胞仪检测细胞表面标记CD29、CD44、CD105、CD31、CD34、CD106的表达,透射电镜及扫描电镜下观察ADMSCs超微结构,流式细胞仪测定细胞周期。结果原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好。CD29、CD44、CD105均呈阳性表达,阳性率分别为95.3％、98．6％和86．5％;而CD31、CD34、CD106阳性率分别为3．5％、2．6％、1．3％。透射电镜观察显示ADMSCs表现出早期幼稚细胞形态的特点,流式细胞仪检测显示84．8％的细胞处于G0/G1期。结论酶消化法能有效地从人脂肪组织分离培养人ADSCs,细胞生长稳定,增殖能力活跃,为今后ADMSCs的分离培养提供了更简单有效的方法。     

曲格列酮对HepG2及CD133+肝癌干细胞的毒性差异研究

目的分离与鉴定肝癌细胞HepG2中CD133标记的肝癌干细胞（LCSC）,初步探讨曲格列酮（Tro）对HepG2及CD133⁺ LCSC的细胞毒性差异。方法利用流式细胞仪分选纯化HepG2中的CD133⁺和CD133^-细胞,采用悬浮微球形成法、平板克隆形成法、Transwell侵袭和迁移实验检测HepG2、CD133⁺和CD133^-细胞的自我更新能力;BALB/c裸鼠体内成瘤实验检测HepG2和CD133 LCSC细胞的成瘤能力;流式细胞术检测HepG2、CD133⁺ LCSC细胞周期,MTT法测定其对索菲替尼的耐药性;MTT法检测Tro对HepG2、CD133⁺ LCSC的毒性情况,全自动生化分析仪测定其对细胞上清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）和总蛋白（TP）水平的影响,荧光法检测Tro对细胞CYP450总活性和ROS水平的影响。结果 CD133标记的CSC在HepG2中占（0.72±0.05）%,CD133⁺细胞分选后纯度为98.7%;CD133+细胞微球形成能力、克隆形成能力以及Transwell迁移与侵袭能力、肿瘤形成能力明显高于亲本（P<0.05、0.01）;CD133⁺细胞群大多处于G₀/G₁期,G₂/M期未阻滞,并且对索菲替尼表现较大耐药性（P<0.05、0.01）;Tro处理12、24、48、72 h后,CD133⁺ LCSC半数抑制浓度（IC₅₀）显著低于HepG2（P<0.05、0.01）;80 μmol/L Tro处理48 h时,LCSC上清AST、TP、LDH、ALB、BUN生化指标不同程度升高,CYP450总活性和ROS水平出现明显抑制（P<0.05、0.01）。结论成功筛选和鉴定具有高增殖能力的CD133+HepG2 CSC,其在Tro引起肝细胞毒性方面较HepG2细胞更敏感,细胞毒性差异显著,为Tro靶向CD133+LCSC的细胞毒性研究提供新思路。     

Role of stem cells in normal liver and cancer

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the third most common cause of cancer-related mortality in the world because current treatments, including both surgical and non-surgical ones, cannot effectively cure this disease. Increasing evidence has revealed the importance of cancer stem cells (CSCs) in hepatocarcinogenesis, and the idea of targeting CSCs sheds light on more effective therapeutic strategies for HCC. In this review, normal stem cells and putative CSCs in the liver are briefly introduced. Studies about signaling pathways that regulate pathophysiological activities of liver CSCs and the therapeutic potential by targeting CSCs are also summarized and discussed.     

肿瘤干细胞的研究进展

随着对肿瘤研究的不断深入,以及对干细胞了解的日益加深,越来越多的证据提示肿瘤中某些细胞具有干细胞特性,并提出了肿瘤干细胞的学说,认为肿瘤的生长、转移以及耐药等均于肿瘤干细胞的关系密切.该文综述了肿瘤干细胞的发现、特点,以及在肿瘤的诊断、治疗和预后判断中的作用.     

大鼠肝实质及非实质细胞分离和质量检测

目的　探索分离肝实质细胞及非实质细胞的合理条件。方法　应用胶原酶 /蛋白酶E消化分离和低速离心技术 ,以细胞活率、细胞产量和细胞纯度等指标检测细胞质量。结果　在 37℃ ,0 5g·L-1的胶原酶作用 30min ,80 0r·min-1离心条件下 ,肝实质细胞产量 (98× 10 9± 4× 10 9·L-1)、纯度 (97%± 2 % )和活率 (>90 % )最好。胶原酶和蛋白酶E合用 ,肝非实质细胞产量最高 (2 8 6× 10 9± 3 7× 10 9·L-1) ,Kupffer细胞纯度合理 (16 0 %± 3 5 % ) ,且Kupffer细胞含量符合体内正常分布。结论　本实验方法分离细胞对于进一步研究肝实质 ,尤其肝非实质细胞功能有实际意义。     

肝损伤血清体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞

目的探讨肝损伤血清诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞的可行性。方法分离、纯化hMSCs后用含10％肝损伤血清的培养基诱导培养，倒置显微镜连续观察细胞形态变化，并分别于诱导后7、14、21d行免疫细胞化学、糖原染色检测诱导后细胞的功能。结果①MSCs形态均一，呈长梭形；②实验组MSCs在诱导5—7d后细胞形态开始变为不规则圆形、三角形或多角形；③免疫细胞化学：实验组细胞第7天AFP表达呈阳性，第14天AFP表达消失；Alb第14天开始表达，表达量逐渐增强，可持续至第21天；④PAS染色：实验组在诱导21d时细胞有合成糖原的能力，可见胞浆呈红色。结论肝损伤血清可诱导MSCs向类肝细胞分化，为细胞移植治疗肝衰竭提供新的探索思路。     

Combined delivery of salinomycin and docetaxel by dual-targeting gelatinase nanoparticles effectively inhibits cervical cancer cells and cancer stem cells

Intra-tumor heterogeneity is widely accepted as one of the key factors, which hinders cancer patients from achieving full recovery. Especially, cancer stem cells (CSCs) may exhibit self-renewal capacity, which makes it harder for complete elimination of tumor. Therefore, simultaneously inhibiting CSCs and non-CSCs in tumors becomes a promising strategy to obtain sustainable anticancer efficacy. Salinomycin (Sal) was reported to be critical to inhibit CSCs. However, the poor bioavailability and catastrophic side effects brought about limitations to clinical practice. To solve this problem, we previously constructed gelatinase-stimuli nanoparticles composed of nontoxic, biocompatible polyethylene glycol-polycaprolactone (PEG-PCL) copolymer with a gelatinase-cleavable peptide Pro-Val-Gly-Leu-Iso-Gly (PVGLIG) inserted between the two blocks of the copolymer. By applying our “smart” gelatinase-responsive nanoparticles for Sal delivery, we have demonstrated specific accumulation in tumor, anti-CSCs ability and reduced toxicity of Sal-NPs in our previous study. In the present study, we synthesized Sal-Docetaxel-loaded gelatinase-stimuli nanoparticles (Sal-Doc NP) and confirmed single emulsion as the optimal method of producing Sal-Doc NPs (Sal-Doc SE-NP) in comparison with nanoprecipitation. Sal-Doc SE-NPs inhibited both CSCs and non-CSCs in mice transplanted with cervical cancer, and might be associated with enhanced restriction of epithelial-mesenchymal transition (EMT) pathway. Besides, the tumorigenic capacity and growing speed were obviously suppressed in Sal-Doc-SE-NPs-treated group in rechallenge experiment. Our results suggest that Sal-Doc-loaded gelatinase-stimuli nanoparticles could be a promising strategy to enhance antitumor efficacy and reduce side effects by simultaneously suppressing CSCs and non-CSCs.     

骨髓间充质干细胞调控肝星状细胞增殖和胶原合成的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）对肝星状细胞（HSCs）增殖、胶原合成的影响。方法 （1）BMSCs对HSCs增殖的影响：利用transwell共培养体系,按1：1细胞比例在6孔塑料培养板上室接种BMSCs（1×105cells/well）,下室接种HSCs;对照组成纤维细胞代替BMSCs接种于上室;空白组为HSCs单独培养。培养24、48、72h后MTT法检测HSCs增殖抑制率;（2）BMSCs对HSCs胶原合成的影响：实验分为3组,A：HSCs组,B：HSCs＋TGF-β1组,C：共培养＋TGF-β1组。按上述方法进行BMSCs、HSCs共培养,培养液中加入TGF-β1诱导活化。培养72h后,取出BMSCs并换液,24h后收集培养液,用ELISA方法测定Ⅰ型胶原浓度,收集HSCs,RT-PCR检测HSCsα-SMA以及Ⅰ型胶原的基因表达。结果培养24、48、72 h后,共培养组较对照组可明显提高HSCs增殖抑制率（P〈0.01）;比较B组,C组Ⅰ型胶原浓度显著下降（P〈0.01）,同时HSCsα-SMA及Ⅰ型胶原基因表达出现显著下调（P〈0.01）。结论 BMSCs在体外可明显抑制HSCs增殖以及抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达和Ⅰ型胶原合成。     

以肝星状细胞为靶标的抗肝纤维化治疗进展

任何病因导致的慢性肝损伤,均可发展为肝纤维化。损伤肝脏的纤维化形成过程中,活化肝星状细胞(HSC)是主要细胞类型,并有重要细胞因子参与。目前治疗都以阻止活化HSC在损伤部位聚集和细胞外基质沉积为目标。该文就以HSC为靶标的抗肝纤维化最新治疗方案作一综述。