EGF,TGFβ1,抗TGFβ1中和抗体对大鼠深Ⅱ°烫伤创面愈合的影响

目的：观察ＥＧＦ，ＴＧＦβ１和抗ＴＧＦβ１中和抗体对大鼠深Ⅱ°烫伤创面愈合的影响。方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠３２只，体重２００ｇ￣２５０ｇ，随机分为４组：①对照组（Ｂ．Ｃ）；②ＥＧＦ组；③ＴＧＦβ１组；④抗ＴＧＦβ１中和抗体组；用恒温恒压电烫伤仪制作深Ⅱ°烫伤模型，每日换药并测绘创面形状，以图像分析仪计算创面面积，定期取活检做组织学检查。结果：①对照组创面于５ｄ开始明显缩小，平均２８ｄ愈合；②ＥＧＦβ     

大鼠浅Ⅱ度烫伤愈合渗出液细胞中生长因子mRNA的表达动态

为探讨生长因子在浅Ⅱ度烫伤愈合中的作用提供基础资料，从分子水平研究了烫伤愈合渗出液细胞中生长因子ｍＲＮＡ的表达动态。在ＳＤ大鼠背部埋入海绵，于热烫伤浅Ⅱ度后６ｈ和１、３、７、１０、１４ｄ分别取渗出液细胞，提取细胞总ＲＮＡ，用逆转录聚合酶链反应方法，以βａｃｔｉｎ为内对照，计算ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达量的变化。结果表明：伤后６ｈ，ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ均有表达；伤后３ｄＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ均出现表达峰，表达水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；伤后１０ｄＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ出现表达峰，表达水平也明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。这提示它们在烫伤愈合的不同时期协同发挥效应。     

人烧伤创面应用表皮生长因子的临床评价

应用ＥＧＦ于人的Ⅱ度、深Ⅱ度烧伤创面和刃厚供皮区创面，观察其出现上皮组织时间和创面完全愈合时间。结果：用ＥＧＦ的浅Ⅱ度烧伤创面和刃厚供皮区创面比对照创面早愈合３ｄ左右（Ｐ＜０．０５），而用ＥＧＦ的深Ⅱ度烧伤创面与对照创面愈合时间没有明显差异（Ｐ＞０．００５）。     

小鼠深Ⅱ°烫伤创面愈合过程中成纤维细胞凋亡的意义

目的：了解深Ⅱ°烫伤创面愈合过程中创面成纤维细胞的凋亡及其意义。方法：雄性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠２０只,采用恒温恒压电烫仪于其背部造成直径２．５ｃｍ的深Ⅱ°烫伤创面。分别于烫伤前及烫伤后７,１４和２１ｄ各取５只,拉颈活杀取材。光镜观察计数创面成纤维细胞,利用末端标记技术检测成纤维细胞凋亡数量,同时,利用电镜观察凋亡细胞的形态。结果：创面成纤维细胞数量自伤后７ｄ即较正常对照组明显增加,至伤后１４ｄ达到最高     

深Ⅱ度烧伤愈合中TGFβ_1表达变化

目的研究ＴＧＦ在深Ⅱ度烧伤愈合中表达变化,为临床合理应用外源性ＴＧＦ提高疗效,缩短疗程提供实验依据。方法在ＳＤ大鼠背部埋入海绵,于热烫伤深Ⅱ度后１、３、５、７、１０ｄ分别取渗出液细胞,采用ＲＴ－ＰＣＲ和地高辛原位杂交方法检测渗出液细胞中ＴＧＦβ1;的ｍＲＮＡ表达量的变化;取人深Ⅱ度烧伤后５、７、１２ｄ手术得到烧伤皮肤及其临近的正常皮肤,采用ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组化方法各时相烧伤皮肤及其临近的正常皮肤ＴＧＦβ１的ｍＲＮＡ与蛋白质的表达变化。结果在大鼠深Ⅱ度烧伤愈合时渗出液细胞中ＴＧＦβ１在５～１４ｄ有高表达。人深Ⅱ度烧伤后烧伤皮肤ＴＧＦβ１的ｍＲＮＡ和蛋白质在７ｄ出现表达峰,在其临近的正常皮肤中ＴＧＦβ1表达稳定。结论通过该研究说明在深Ⅱ度烧伤早期ＴＧＦβ１较高表达促进愈合,为临床合理应用外源性ＴＧＦβ１提高疗效,缩短疗程提供实验依据。     

hEGF促大鼠皮肤烫伤创面愈合作用研究

本实验采用大白鼠皮肤烫伤模型ｈＥＧＦ对烫伤创面愈合的促进作用。结果１％ＡｇＳ霜剂组，１％ＡｇＳ＋５μｇ／ｍｌｈＥＧＦ和１％ＡｇＳ＋１μｇ／ｍｌｈＥＧＦ霜剂组对烫伤创面促愈合作用与霜剂治疗组比较有显著性差异（Ｐ〈０．１）；则１％ＡｇＳ霜剂组与１￥ＡｇＳ＋５μｇ／ｍｌｈＥＧＦ、１％ＡｇＳ＋１μｇ＝ｍｌｈＥＧＦ霜剂组间无显著性差异（Ｐ〉０．１）。     

人结肠癌中EGFR,EGF及TGF—a的基因表达

本文报道了人结肠癌细胞系中表皮生长因子受体及其配体即表皮生长因子和转化生长因子的基因表达。从人结肠癌细胞系细胞提取总ＲＮＡ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ吸印转移后，用［ａ－＾３２Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的ＥＧＦ、ＴＧＦａ及ＥＧＦＲｃＤＮＡ探针进行杂交，放射自显影结果表明三个结肠癌细胞系中均有ＥＧＦｍＲＮＡ及ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达。ＬＳＴ１７４、ＨＴ１０中亦有ＴＧＦａ的基因表达，Ｌｏｖｏ无ＴＧＦａ的表达。结果说明人     

RT—PCR检测人烧伤愈合中TGF—β1的表达

目的 通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ表达变化的研究,阐明ＴＧＦ０－β１对促进愈合的调节作用。方法 取入深Ⅱ度烧伤后５ｄ、７ｄ、１２ｄ手术切除的烧伤区组织,采用ＲＴ－ＰＣＲ后电泳扫措求积方法,检测各时相烧伤皮肤组织ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达量的变化。结果 人深Ⅱ度烧伤皮肤ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在伤后７ｄ出现表达高峰,５ｄ与１２ｄ也有表达增强。结论 ＴＧＦβ１结烧伤     

人结肠癌中EGFR、EGF及TGF－α的基因表达

本文报道了人结肠癌细胞系（ＬＳＴ１７４、ＨＴ１０、Ｌｏｖｏ）中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及其配体即表皮生长因子（ＥＧＦ）和转化生长因子（ＴＧＦα）的基因表达。从人结肠癌细胞系细胞提取总ＲＮＡ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ吸印转移后，用［α－３２Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的ＥＧＦ、ＴＧＦα及ＥＧＦＲｃＤＮＡ探针进行杂交，放射自显影结果表明三个结肠癌细胞系中均有ＥＧＦｍＲＮＡ及ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达。ＬＳＴ１７４ＨＴ１０中亦有ＴＧＦα的基因表达，Ｌｏｖｏ无ＴＧＦα的表达。结果说明人结肠癌存在生长因子自泌循环。这些癌细胞系中自泌的生长因子作用于自身的ＥＧＦＲ，不断地刺激其自身增殖，这可能是癌细胞自主无休止生长的主要原因之一。     

Ⅱ度烧伤创面应用人重组表皮生长因子的临床观察

目的：观察重且人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）对Ⅱ度烧伤创面愈合的促进作用。方法：７０例成年烧伤患者设用药组与同体对照组。用药组应用ｒｈＥＧＦ于浅Ⅱ度创面、深Ⅱ度创面。对照组应用生理盐水,分别观察浅Ⅱ度创面于８天,深Ⅱ度创面于１５天时的愈合百分率及创面完全愈合时间。结果：用药组的浅Ⅱ度创面比对照组愈合早３天左右（Ｐ〈０．０５）。而用药组的深Ⅱ度创面于伤后１５天时的愈合百分率与对照组差异无显著性（Ｐ〉０     

小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中内源性表皮生长因子的变化规律及其意义

目的　探讨内源性表皮生长因子 (EGF)的变化规律及其与创面愈合的关系。方法　采用免疫组织化学、核酸分子杂交及图象分析等方法 ,分别在蛋白质和转录水平检测深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中 ,小鼠体内EGF主要合成器官EGF及其mRNA的表达。结果　颌下腺EGF的表达量于伤后 1d较对照组明显降低 (P <0 .0 1) ,伤后 5d恢复至伤前水平并持续至伤后 2 1d ;其mRNA的表达强度伤前和伤后均为弱阳性～阳性。肾脏EGF的表达量于伤后 1d～ 5d较对照组明显降低 (P <0 .0 1) ,伤后 7d ,其表达量高于对照组并持续到伤后 2 1d(P <0 .0 1) ;其mRNA的表达强度伤前和伤后 3d均为弱阳性 ,伤后 7d～ 2 1d增强为阳性。伤后十二指肠EGF的表达量始终低于对照组 (P <0 .0 1) ;其mRNA的表达强度较对照组减弱。结论　在小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中 ,颌下腺合成的EGF参与早期组织修复 ,肾脏合成的EGF参与创面的后期修复 ,十二指肠合成的EGF未参与皮肤烫伤创面的修复。     

深Ⅱ度烧伤创面细胞bFGF和PDGF对愈合的影响

目的研究bFGF和PDGF在深Ⅱ度烧伤愈合中的表达特点,以及与创面愈合中的关系。为临床合理应用外源性的bFGF和PDGF提供实验依据。方法采用地高辛细胞原位杂交方法检测SD大鼠深Ⅱ度烫伤模型在伤后不同时段的创面渗出液细胞的bFGF和PDGF中mRNA表达变化。结果实验组的bFGF是在5d开始表达,在7d达到高峰,然后缓慢下降,至14d时还有一定水平的表达,对照组bFGF的表达水平都较低,仅在5d有低水平表达,14d已基本无表达。在检测PDGF时,实验组1～3d处于较低水平表达,7d开始高水平表达,10d是表达的高峰,随后下降。对照组PDGF的表达在1～3d处于较低水平,5～14d有一个低水平的mRNA表达延迟峰段。结论创面渗出液细胞bFGF、PDGF的mRNA表达的启动、表达的高峰和减弱与深Ⅱ度烧伤的创面愈合状况有关,与相关细胞在创面聚集、诱导和分泌bFGF、PDGF有关。     

芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响

目的:研究芦荟对大鼠浅度烫伤创面愈合及表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:建立大鼠浅度烫伤模型,制备芦荟凝胶。实验动物分两组:自然愈合组(对照组);芦荟凝胶组(试验组)。通过免疫组化染色及图像分析,测定伤后2、6、10、18、24d的创面愈合率及创面组织中EGF、bFGF的表达。结果:1创面愈合率:芦荟凝胶组在10、18、24d各时相点的创面愈合率较自然愈合组高,差异有显著性(P<0.05)。尤以24d时相点更明显(P<0.01)。2EGF的表达:芦荟凝胶组总体的EGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后10、18d时EGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。3bFGF的表达:芦荟凝胶组总体的bFGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后18、24d时bFGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤的愈合有促进作用,其机制可能与促进EGF、bFGF的表达有关。     

孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面bFGF、EGF表达的影响及意义

目的:研究孵育鸡蛋膜对大鼠深Ⅱ度烧伤创面碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)、上皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)表达的影响及意义.方法:以鸡蛋膜、暴露处理为孵育鸡蛋膜对照,测定伤后7、14、21 d创面愈合率、创面羟脯氨酸含量、EGF和bFGF表达量.结果:孵育鸡蛋膜在各时间点愈合率高于暴露组,伤后7 d EGF,bFGF表达高于对照组.结论:孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面愈合有促进作用,其促愈机理与覆盖孵育鸡蛋膜后创面EGF,bFGF表达增高相关.     

碱性成纤维细胞生长因子对肌成纤维细胞的作用及其对创面愈合的影响

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对烧伤创面内肌成纤维细胞转归的影响 ,深入探讨bFGF在组织修复中的作用机制。方法　利用大鼠 30 %深Ⅱ°烫伤模型 ,采用原位杂交与免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合时组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (caspase- 3)mRNA和蛋白的表达情况 ,并运用免疫组化法观察α -平滑肌肌动蛋白 (ASMA)、转化细胞生长因子 - β1(TGF -β1)的变化情况 ,并对照观察创面应用外源性bFGF后以上各项指标的变化。 结果　创面组织中 β -平滑肌肌动蛋白的表达早期变化不明显 ,伤后第 7天明显升高并达到高峰 ,随后逐渐减弱。创面外用bFGF ,伤后 7～ 14dASMA的表达明显增强。伤后 3h开始 ,TGF - β1的表达逐渐升高 ,至 14d略有所下降。外有bFGF后TGF - β1的表达明显增加 ,并强于单纯烫伤组。伤区局部加用外源性的bFGF ,caspasemRNA和蛋白的表达规律与单纯烫伤组相似 ,呈现先升高后降低 ,再升高样的变化。但第一次峰值低 ,第二次的峰值高于单纯烫伤组。结论　肌成纤维细胞数量的增加与凋亡过程是创面愈合的重要环节。外源性应用bFGF可能够通过提高TGF - β1的分泌 ,进而协同其他生长因子对肌成纤维细胞形成和凋亡发挥作用 ,最终影响愈合的结局。     

表皮生长因子对肾缺血再灌流修复的影响

探讨肾缺血再灌流损伤修复过程中颌下腺、胰腺、肾脏产生的表皮生长因子（ＥＧＦ）的作用及作用机制。方法选用大鼠右肾切除、左肾缺血６０ｍｉｎ继之再灌流不同时间模型,观察颌下腺切除后对肾功能和形态恢复的影响。用免疫组化和ＷｅｓｔｅｒｍＢｌｏｔ方法观察肾缺血再灌流损伤修复过程中肾组织增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,胰腺、颌下腺、肾脏和血清ＥＧＦ以及肾组织ＥＧＦ受体（ＥＧＦＲ）表达的变化。结果颌下腺切除后,损伤后的肾功能和肾组织形态结构恢复到正常的时间明显延长。ＰＣＮＡ免疫组化显示,６０ｍｉｎ肾缺血再灌流２４ｈ出现再生,再灌流３ｄ再生修复达到高峰,再灌流７ｄ基本消失。与此相对应,颌下腺、胰腺在再灌流１、３ｄ时ＥＧＦ表达明显增强,血清ＥＧＦ含量增多,肾组织ＥＧＦＲ表达明显增强;再灌流７ｄ时,颌下腺、胰腺ＥＧＦ表达、血清ＥＧＦ含量及肾组织ＥＧＦＲ表达均基本恢复正常。结论颌下腺、胰腺所产生的ＥＧＦ在损伤后肾小管上皮的修复中可能起重要作用,ＥＧＦ可能通过ＥＧＦＲ介导机制促进损伤肾小管上皮的修复     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对烫伤大鼠创面愈合及新生血管化的影响

目的:研究重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)对烫伤创面组织愈合及新生血管化的影响。方法:72只SD大鼠于背部制备直径3 cm的深Ⅱ度烫伤创面。根据创面不同处理方式将大鼠随机分为实验组(创面局部应用rhGM-CSF凝胶剂)和对照组(创面局部应用不含rhGM-CSF的凝胶基质),每组36只。分别于创面形成后当日和第1、3、7、10、14、21天观察创面并计算创面愈合率;免疫组织化学染色观察创面组织中新生血管内皮细胞表面标志物CD31表达,计算微血管密度。结果:自创面形成后第7天起,实验组创面愈合率明显高于对照组(P0.01),实验组创面组织中CD31表达及微血管密度也均明显高于对照组(P0.01)。结论:外用rhGM-CSF具有促进烫伤创面愈合作用,其机制可能与上调创面组织中CD31表达、使新生血管再生加速有关。     

感觉神经肽P物质对肉芽组织成纤维细胞表达表皮生长因子与成纤维细胞生长因子-2及受体的调控作用

目的 从基因水平探讨感觉神经肽SP对肉芽组织成纤维细胞表达表皮生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）及受体的调控作用。方法 由在体和离体实验两部分组成。在体实验采用Wistar大鼠50只,随机分为辣椒素组和对照组。辣椒素组大鼠皮下注射辣椒素50mg/kg毁损感觉神经,1周后行皮肤全层切割伤,采用免疫组化结合图像分析,观察伤后3-12d伤口肉芽组织内神经肽P物质（SP）含量。采用原位杂交方法观察EGF、表皮生长因子受体（EGFR）、FGF-2、成纤维细胞生长因子受体-1（FGFR-1）的基因表达,对照组除不化学毁损感觉神经外,余处理同辣椒素组。离体实验采用RT-CPR技术观察不同浓度（10^-9～10^-5mol/L)SP作用于培养肉芽组织成纤维细胞后,上述生长因子及受体的表达。结果 在体实验示,肉芽组织SP免疫阳性染色与EGF、FGF-2及其受体表达有关,化学毁损感觉神经,肉芽组织SP免疫阳性染色减弱,上述因子及受体的表达也明显抑制。离体实验发现,上调培养肉芽组织成纤维细胞内源性EGF和EGFR mRNA表达的SP浓度为10^-8～10^-6mol/L和10^-6～10^-5mol/L,上调FGF-2和FGFR-1 mRNA表达的SP浓度分别为10^-9～10^-5mol/L和10^-6～10^-5mol/L。结论 伤口愈合中,感觉神经释放的SP参与肉芽组织成纤维细胞表达EGF、FGF-2及受体mRNA的调控。     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶对深Ⅱ度烧伤创面溶痂的影响

目的:验证重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）对深Ⅱ度烧伤创面坏死组织溶痂的作用效果,并分析其可能的机制。方法:将70只SD大鼠用热液烧伤的方法（75℃,8 s）制成背部深Ⅱ度烧伤创面,将烧伤大鼠随机分为实验组和对照组各35只。对照组创面局部外用不含rhGM-CSF的凝胶基质,实验组创面局部外用rhGM-CSF凝胶（100 μg/10 g）。分别于制创后1、3、5、7、10、14和21 d观察2组动物创面情况并摄像;计算不同时相点的溶痂率;免疫组织化学染色观察创面中性粒细胞和巨噬细胞浸润情况。结果:烧伤后第5~10天,实验组大鼠创面溶痂率均明显高于对照组（P<0.01）;创面免疫组织化学检查显示烧伤第3~7天,实验组创面局部炎症细胞浸润均较对照组明显增多（P<0.01）。结论:外源性rhGM-CSF的应用可促进深Ⅱ度烧伤创面早期炎症细胞的浸润,促进创面溶痂,从而促进深Ⅱ度烧伤创面愈合。