苦参碱对P物质诱导角质形成细胞和真皮成纤维细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的研究苦参碱对P物质诱导皮肤表皮角质形成细胞系HaCaT细胞和真皮成纤维细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法采用MTT法考察苦参碱对两种皮肤细胞生存性的影响;ELISA方法测定P物质诱导两种皮肤细胞分泌MCP-1的时效关系与量效关系。以P物质刺激HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,加入不同剂量的苦参碱共孵育24h,测定苦参碱对MCP-1表达的影响。结果以10-8mol/LP物质刺激HaCaT细胞和真皮成纤维细胞24h可以显著增加两种皮肤细胞MCP-1的分泌量,不同浓度的苦参碱均可以抑制皮肤细胞MCP-1的分泌。结论苦参碱可能通过抑制趋化因子MCP-1的表达而发挥抗皮肤炎症作用。     

黄芩甙对成纤维细胞iNOS表达的影响

表皮的组织结构和功能有赖于角质形成细胞增殖分化平衡,失衡是许多皮肤病如银屑病等的特征。研究表明成纤维细胞源性多种因子可调节角质形成细胞增殖分化平衡,银屑病成纤维细胞表型和功能改变参与银屑病的发病机制[1,2]。由一氧化氮合成酶(NOS)介导合成的一氧化氮(NO)参与各种过度增殖和炎症性疾病。在哺乳动物发现3种NOS异构体,两种依赖于细胞内钙离子水平的升高,称原生型(cNOS),包括局限于内皮细胞的内皮型(eNOS)和表达在中枢神经系统的神经型(bNOS)。第三种诱导型(iNOS)不依赖细胞内钙离子水平,正常情况下不表达,但通过炎症细胞…     

T细胞在银屑病发病机制中作用的研究进展

银屑病是一种常见的病因不清的慢性炎症性疾病，过去认为银屑病是由于角质形成细胞生长异常或炎症导致，认为角质形成细胞是发病机制中的关键因素［１］。近年来，随着免疫学研究的进展，这种观点有所改变，许多学者认为Ｔ细胞在银屑病发病机制中起着非常重要的作用。１Ｔ细胞是银屑病发病机制中主要的效应细胞 近来研究表明，银屑病皮损中浸润的Ｔ细胞有重要作用。一些特异性Ｔ细胞免疫抑制剂，如抗ＣＤ３和抗ＣＤ４单克隆抗体、以ＩＬ－２为基础的淋巴细胞选择性毒素、Ｔ细胞免疫抑制剂如环抱素Ａ和ＦＫ５０６，在银屑病治疗中有一定效果…     

皮肤成纤维细胞与角质形成细胞蛋白质组双向电泳图谱的比较

目的建立人皮肤成纤维细胞与角质形成细胞的双向凝胶电泳图谱,并利用计算机图像分析技术初步分析其差异表达的蛋白质。方法采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人皮肤成纤维细胞与角质形成细胞的总蛋白质,凝胶经银染显色后,Im agingM aster 2D图像分析软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质。结果①人皮肤成纤维细胞与角质形成细胞凝胶的平均蛋白质点数分别为685±34和592±27,平均匹配的点数分别为593±29和483±22,匹配率达86.6%和81.7%;②通过比较分析上述两种细胞的双向凝胶电泳图谱,得到平均匹配蛋白点数为315±25。差异表达蛋白点数为281个,其中117个点仅在成纤维细胞中表达,124个点仅在角质形成细胞中表达,126个点在成纤维细胞中为高表达,145个点在成纤维细胞中为低表达。结论本研究建立了分辨率高且重复性较好的人皮肤成纤维细胞与角质形成细胞的双向凝胶电泳图谱,发现两者间存在一些差异表达的蛋白质,为皮肤蛋白质组学的进一步研究奠定基础。     

皮肤科学基础

20 0 10 0 0 1　影响新生鼠角质形成细胞及成纤维细胞Fas及其配体表达的因子 /贺为东 (中国医大一院皮肤科 )…∥中华医学杂志 (英文版 ) .- 2 0 0 0 ,113(9) .- 833～ 835以 RNase防护法及流式细胞分析法检测角质形成细胞和成纤维细胞 Fas及 Fas配体 (Fas L)的表达 ,并观察了维甲酸 (RA)及地塞米松 (Dex)对其表达的影响。结果发现 Fas m RNA被新生鼠角质形成细胞表达 ,全反式维甲酸上调而 Dex下调。RA和 Dex同时也增加角质形成细胞 Fas蛋白的表达。新生鼠角质形成细胞表达 Fas L m RNA,RA和 Dex对其都有上调作用。新生鼠成纤维…     

自噬与角质形成细胞、扁平苔藓的相关性研究

细胞自噬是真核生物中高度保守的生命现象,在维持细胞内环境稳态中发挥重要作用。角质形成细胞是皮肤屏障的主要组成细胞,自噬参与角质形成细胞(KC)的多种病理生理过程,参与多种皮肤病的发病。扁平苔藓(LP)是一种常见的慢性炎症性疾病,其具体病因和发病机制尚不清楚。近年来研究表明自噬参与了扁平苔藓的发病。本文就自噬与角质形成细胞、扁平苔藓的相关性研究综述如下。     

糖皮质激素受体-α、核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的:探讨糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)-α、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR-α、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达及其分布。结果:GR-α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致,GR-α不但在表皮呈弥漫性表达,还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而,与正常对照皮肤相比,GR-α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF-κB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中,在正常对照组皮肤中均为胞质表达,而在慢性皮炎组中为胞质表达和(或)胞核均有表达。TNF-α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异,为弱阳性反应。结论:慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR-α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。     

转化生长因子-β1 mRNA在银屑病皮损和外周血单一核细胞中的表达

银屑病是一种以表皮角质形成细胞(KC)过度增生为特征的皮肤慢性炎症性疾病。许多细胞因子促进了KC的增生，但转化生长因子β1(TGF—β1)对KC具有抑制生长作用。笔者的前期研究结果显示：TGF—β1在银屑病表皮KC中表达减少或缺失，那么在银屑病皮损损TGF—β1mRNA表达水平如何?患者外周血单一核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)中     

中波紫外线和长波紫外线晒灯对白介素-6、α-肿瘤坏死因子和细胞间粘附分子-1 表达的不同影响

作者利用体外模型分别测定了宽谱中波紫外线(ＵＶＢ)和发射光谱主要为长波紫外线 (ＵＶＡ)的晒灯对正常人表皮角质形成细胞 (ＮＨＥＫ )、白介素(ＩＬ) - 6 ,肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ) -α水平和ｍＲＮＡ表达以及γ -干扰素诱导正常人成纤维细胞生成细胞间粘附分子 (ＩＣＡＭ ) - 1ｍＲＮＡ表达的影响。　　材料和方法 :ＮＨＥＫ来自Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ(ＳａｎＤｉｅｇｏ ,ＣＡ ,Ｕ .Ｓ .Ａ .)提供的新生儿包皮。放入完全角质形成细胞基础培养基后置于 37℃、5 %ＣＯ2 孵箱。ＵＶ照射前 ,将 2× 10 5个细胞接种到 3.5ｃｍＰｅｔｒｉ组织培养板…     

A2A受体在皮肤细胞上的功能

皮肤是人体最外层的器官，它保护人体免受外界刺激的影响。皮肤主要由表皮、真皮、皮下组织三个部分构成，其中表皮主要由角质形成细胞组成，真皮主要由成纤维细胞组成。腺苷在体内是一种广泛存在的细胞代谢物，其受体分为A1、A2A、A2B和A3亚型，其中A2A受体在皮肤中大部分细胞上有表达。目前研究表明，A2A受体的激活对皮肤中的细胞有不同的影响作用。本文将对A2A受体在皮肤中角质形成细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、免疫细胞上的功能作用进行简要的综述。     

成纤维细胞生长因子受体在人正常皮肤和伤口处的免疫定位

成纤维细胞生长因子(FGF)是一个有22个成员的细胞因子家族，与细胞表面受体结合调节细胞生长、增殖、分化和基质合成并参与炎症反应，其作用与细胞分化及生化状态和理化环境有关。目前发现有4种成纤维细胞生长因子受体(FGFR)，作者采用免疫组化技术检测了4种受体在正常皮肤和伤口处的表达。结果：①正常皮肤中FGFR的表达：FGFR-1表达于表皮各层、皮肤附属器、竖毛肌、血管和真皮成纤维细胞；FGFR-2在表皮、毛囊、皮脂腺、小汗腺、血管和成纤维细胞有表达，而且在基底层呈强阳性；FGFR-3在基底层的上部和毛囊内层呈强阳性；FGFR-4主要见于血管平滑肌、竖毛肌和小汗腺；②头皮生长期毛囊FGFR的表达：FGFR-1在毛发基质细胞、内外根鞘和毛乳头细胞强表达；FGFR-2的表达定位与FGFR-1相似，并且在毛囊根部基质细胞呈强阳性而角化区较弱；FGFR-3在毛球至峡部的内毛根鞘内段强表达，也见于外毛根鞘峡部和已分化的皮脂腺细胞及皮脂腺导管；FGFR-4仅见于毛囊周结缔组织鞘；③伤口处FGFR的表达：新生表皮基底层细胞FGFR-1和3呈强表达，而FGFR-2和4的表达较弱；基底层上部的细胞FG．FR-3强表达，而FGFR-1和2表达弱；肉芽和瘢痕组织中成纤维细胞／肌纤维母细胞表面FGFR-1和3的表达较强，而2和4呈弱阳性，而浸润单核细胞表面FGFR-1和3表达较强。讨论：正常表皮中4种FGFR表达的变化，提示在角质形成细胞分化过程中4种受体的表达发生着改变。研究表明，表皮细胞特异性表达FGFR-3亚型Ⅲb，而间质细胞同时表达FGFR-3的两个亚型Ⅲb和Ⅲc。其中Ⅲb与aFGF和FGF-9结合，而Ⅲc与aFGF和FGF-4高亲和力结合，与bFGF结合力弱而不与FGF-5结合。bFGF位于表皮基底层而aFGF则主要存在于棘层。aFGF和FGFR-3在基底层上部的正在分化的角质形成细胞中共表达，提示aFGF可能通过自分泌作用参与角质形成细胞的分化过程。Finch等发现基质细胞表达对人角质形成细胞有强促分裂作用的角质形成细胞生长因子，并发现其受体表达于正常人表皮基底层及银屑病表皮基底层和基底层上方的角质形成细胞。本研究发现，基底层中FGFR-2的表达，可能是角质形成细胞生长因子受体在表皮基底层和外毛根鞘的定位。Gonzalez等发现FGFR-1及其mRNA主要表达于表皮生发层，由此推测bFGF可能通过FGFR-1对基底细胞有促分裂作用，而aFGF则促进棘细胞的有丝分裂。动物实验表明：FGF和FGFR的表达与毛发的生长周期和发育有关。作者发现4种FGFR在正常人皮肤生长期毛囊的表达模式不同，特别在毛球根部毛母质细胞中FGFR-2的表达呈强阳性，结合动物实验结果，本研究提示真皮乳头FGF-2活化毛母质细胞表达FGFR-2并刺激毛母质细胞增生和毛发生长；毛囊内FGFR-1的表达，提示FGFR-1可能在角质形成细胞向毛发分化的终末过程中起一定的作用。FGFR-3在生长期毛囊中内外毛根鞘和皮脂腺的终末分化细胞中表达而在毛基质细胞内不表达，这可能是由于分化类型的差异，角质形成细胞表达不同的FGFR。     

银屑病皮损中巨噬细胞移动抑制因子作用的证据

巨噬细胞移动抑制因子(ＭＩＦ)最初被认为是一种Ｔ细胞起源的淋巴因子,近来有研究表明ＭＩＦ可拮抗糖皮质激素的免疫抑制作用,且在体外发现抗ＭＩＦ中和抗体可抑制Ｔ细胞增殖和ＩＬ-2的生成,在体内可抑制抗原启动的Ｔ细胞活化和抗体生成。为了阐述ＭＩＦ在炎症性皮肤病中的作用,作者用免疫组化、蛋白印迹和逆转录-聚合酶链反应(ＲＴ-ＰＣＲ)等方法对银屑病患者皮肤中ＭＩＦ的生成和定位进行了研究。①免疫组化结果表明正常人皮肤角质形成细胞(ＫＣ)和内皮细胞(ＥＣ)内ＭＩＦ呈中度表达,其在血管处主要表达于ＥＣ上,银屑病皮损处基底层ＫＣ处…     

紫外线对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的影响

目的:研究中波紫外线辐射对体外培养的表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞产生基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-3的直接和间接影响,研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的保护作用。方法:体外培养角质形成细胞株HaCaT和真皮成纤维细胞,中波紫外线辐射、不同浓度IL-6刺激及EGCG处理后,ELISA方法测定上清液中Pro-MMP-1和MMP-3蛋白含量,半定量RT-PCR方法测细胞中mRNA含量。结果:UVB30mJ/cm2辐射后角质形成细胞分泌的pro-MMP-1和MMP-3并未增加(P>0.05),真皮成纤维细胞合成和分泌MMP-1和MMP-3mRNA含量和蛋白水平均显著增加(P<0.05),IL-6(8、16、24pg/mL)可显著增加成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3(P<0.05)。EGCG(0.15、0.3mM)能够显著抑制紫外线诱导成纤维细胞产生MMP含量的增加(P<0.05),但IL-6刺激成纤维细胞所产生的MMP-1和MMP-3的增加不受EGCG的影响(P>0.05)。结论:中波紫外线辐射并不能直接导致角质形成细胞分泌MMP-1和MMP-3增加,但紫外线辐射后角质形成细胞分泌的IL-6可促进成纤维细胞产生MMP。EGCG对IL-6刺激成纤维细胞产生MMP增加没有影响,但它可以显著抑制紫外线辐射直接导致的成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的增加,对防治皮肤光老化可能有一定作用。     

角质形成细胞无血清培养基条件下构建组织工程皮肤

目的 探讨在角质形成细胞无血清培养基条件下,用人成纤维细胞、角质形成细胞和黑素细胞接种于人去表皮真皮构建组织工程皮肤.方法 胰酶和胶原酶消化处理健康小儿包皮,获得表皮和真皮细胞悬液.分别将角质形成细胞、黑素细胞传至第3代,成纤维细胞传至第5代,调整细胞密度为2.5×105/ml.制备人去表皮真皮(含部分基底膜成分),先将成纤维细胞悬液种于6孔板板底,24 h后将人去表皮真皮放入6孔板,角质形成细胞、黑素细胞悬液接种于人去表皮真皮表面(成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞比例为1∶4∶1.实验组用角质形成细胞无血清培养基培养,对照组用含10％ FBS的DMEM、K-SFM、M254,3种培养液比例为1∶1∶1的混合培养基培养,人去表皮真皮作为空白对照.液下培养3d后,空气液面培养相结合的方式进行培养,每3天换液1次,2周后取培养的组织工程皮肤分别行HE染色,Melan-A、S-100、HMB45、CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Vimentin、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色及PAS染色并取正常皮肤做阳性对照.结果 经过14d的气液培养,实验组出现完整的新生表皮结构,CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Melan-A、S-100、HMB45、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色阳性;对照组出现完整的新生表皮结构,可见角质层,CKpan、P63、K5/6、K14、Ki67、Laminin免疫组化染色阳性.结论 角质形成细胞、黑素细胞及成纤维细胞与人去表皮真皮在角质形成细胞无血清培养基条件下,体外可构建组织工程皮肤.     

物理性皮肤病

20120893 TGF-β1对人工皮肤光损伤炎症因子IL-1α,IL-6,TNF-α影响的研究/姚露(昆明医学院一附院),罗雯,顾华…∥皮肤病与性病.-2011,33(5).-252～254将角质形成细胞和成纤维细胞接种到胶原支架中体外构建人工皮肤,将人工皮肤分为四个实验组,即阴     

由HaCaT细胞组成的皮肤类似物中,HaCaT细胞具有接受贮存黑素小体的能力但黑素细胞不只限于基底层

ＨａＣａＴ细胞是一种永生的角质形成细胞系 ,可无限制的获取 ,并有分化特征 ,因此广泛用于正常表皮角质形成细胞的替代物。但此细胞和黑素细胞间的相互作用尚不清楚。作者探讨了ＨａＣａＴ细胞在皮肤类似物上是否和正常角质形成细胞一样 ,能与黑素细胞相互作用。　　皮肤成纤维细胞和表皮的黑素细胞均来源于包皮。ＨａＣａＴ细胞和成纤维细胞都生长在ＤＭＥＭ培养基中。黑素细胞生长在黑素细胞培养基 (ＭＧＭ )中。实验中用第 4代的成纤维细胞和第 2代生长的黑素细胞。ＨａＣａＴ细胞和黑素细胞分别按 1∶1和10∶1比例接种在两种不同的培养…     

Th17细胞与特应性皮炎

Th17细胞是一种新发现的辅助性T细胞亚型,在自身免疫性疾病、宿主防御反应和变态反应性疾病中发挥作用.特应性皮炎患者急性皮损中IL-17表达显著增高,其皮肤树突细胞通过表达大量IL-23诱导Th17细胞分化.Th17细胞可能通过增强Th2记忆细胞功能、促进角质形成细胞免疫活性,诱导转化生长因子-β1、IL-11、IL-6等炎症因子表达,从而参与特应性皮炎炎症反应和组织重塑等病理生理过程.     

成纤维细胞在银屑病发病机制中的作用

银屑病是一种以角质形成细胞的过度增殖和异常分化为特征的慢性炎症性皮肤病。银屑病全层皮肤均存在异常,多种细胞和细胞因子在银屑病发病中起重要作用。成纤维细胞作为真皮组织的重要组成部分,在皮肤组织创伤修复方面发挥作用;还为角质形成细胞的增殖、分化和成熟提供合适的微环境;可通过表达某些黏附分子、受体或表面标记及分泌多种细胞因子,影响其他细胞的功能,从而在银屑病发展中起重要的调节作用。     

扁平苔藓皮损中CD95配体、颗粒酶B和半胱氨酸蛋白水解酶-3的检测及其意义

扁平苔藓是一常见的累及皮肤和黏膜的慢性炎症性疾病,组织病理表现为真皮上部许多淋巴细胞浸润,形成致密的淋巴细胞浸润带.许多研究提示,浸润的CD8+T细胞(CTL)的细胞毒作用可能参与杀伤抗原特异怀角质形成的细胞.     

蓝光影响人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞及黑素细胞生物活性的初步研究

目的初步探讨蓝光对人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞与黑素细胞生物活性的影响。方法收集2021年6月至2021年12月昆明医科大学第一附属医院10例3 ～ 12岁健康儿童包皮环切术后的废弃包皮, 分离表真皮后采用选择培养基分离角质形成细胞、成纤维细胞、黑素细胞。根据预实验结果采用0、5、10、20、30、40 J/cm2剂量440 ～ 450 nm蓝光分别照射上述3种细胞, 继续培养0、6、24、48 h, 在各时间点采用CCK8法检测细胞增殖活力;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测角质形成细胞分泌白细胞介素18(IL-18)、IL-33、神经生长因子(NGF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞分泌IL-33、角质形成细胞生长因子(KGF)的浓度;NaOH裂解法检测黑素细胞黑素合成率;Western印迹检测黑素细胞酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸相关蛋白酶1(TRP-1)及多巴色素异构酶(DCT)的相对表达。采用双因素方差分析进行组效应、时间效应和交互效应的分析。结果各剂量蓝光照射后不同时间, 角质形成细胞组间(F时间 = 516.20、F剂量 = 421.20、F交互 ...