microRNA与食管癌

microRNAs(miRNA8)是一个长度为21～25个核苷酸非编码的小RNA大家族,人类基因组编码了超过1 000个miRNA[1],通过干扰mRNA的翻译而下调靶基因的表达.生物信息学数据表明[2],miRNA几乎参与体内所有的基本的信号传导途径,包括许多重要肿瘤相关基因的表达.     

miRNA调控实体肿瘤发生发展机制研究进展

microRNA（miRNA）是广泛存在于动物、植物、微生物体内,在转录后水平调控mRNA翻译和降解的内源性染色体编码的小分子RNA。研究证实miRNA对实体肿瘤细胞的发生、增殖、分化、侵袭及转移均具有重要意义。目前miRNA与肿瘤相关性的研究主要集中在检测实体肿瘤组织或体液中miRNA的表达量,明确其对于肿瘤发生、发展的意义;寻找具有临床意义的miRNA靶点,并通过调控其表达抑制肿瘤增殖与转移。miRNA检测方法的进步,也为临床检测miRNA提供了可能。本文对miRNA在实体肿瘤发生发展的作用及其调控机制、以及未来研究方向作综述。     

微RNA与肿瘤

微RNA(miRNA)是一类非编码单链小分子RNA,在转录后水平调节基因的表达。最新研究发现miRNA与人类肿瘤密切相关,甚至有人认为某些miRNA就是肿瘤基因或肿瘤相关基因。现综述miRNA与人类肿瘤发生、发展、诊断、治疗和预后的研究进展。     

微RNA与肿瘤

微RNA（miRNA）是一类非编码单链小分子RNA,在转录后水平调节基因的表达。最新研究发现miRNA与人类肿瘤密切相关,甚至有人认为某些miRNA就是肿瘤基因或肿瘤相关基因。现综述miRNA与人类肿瘤发生、发展、诊断、治疗和预后的研究进展。     

肺癌侧群细胞microRNA表达谱检测及初步分析

背景与目的 目前研究认为侧群细胞(side population cell,SP cell)富集了肿瘤干细胞,是肿瘤生长和发展的根源;并且SP细胞对放化疗高度耐受,成为肿瘤复发转移的重要因素.为此,我们探讨了肺癌SP细胞与非SP细胞(non-SP)miRNA分子表达谱差异,旨在为进一步研究miRNA在肺癌干细胞中的作用机制打下基础.方法 利用Hoechst 33342染料法,通过流式细胞仪紫外激光分选功能分选出A549细胞中的SP细胞和non-SP细胞,分别采用Trizol一步法提取两者的总RNA,利用miRNA芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 肺癌SP细胞和non-SP细胞miRNA表达谱存在明显差异.与non-SP细胞相比,在SP细胞中上调2倍以上的miRNA有9条,下调2倍以上的miRNA有25条.结论 差异表达的miRNA能参与肺癌干细胞的发生发展过程,为进一步揭示肺癌干细胞发生的分子机制提供了依据.     

人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株中微小RNA的表达谱

目的:分析人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株PC9/AB2与亲本细胞株PC9中微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的差异.方法:应用Agilent human miRNA芯片分别检测PC9/AB2细胞与PC9细胞miRNA的表达谱,随后采用Agilent Feature Extraction软件分析并筛选差异表达的miRNA,应用生物信息软件预测筛选出的差异表达miRNA的潜在靶基因.应用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)验证芯片检测结果.结果:与PC9细胞比较,PC9/AB2细胞中有36个miRNA表达上调＞2倍,有24个miRNA表达下调＞2倍.RFQ-PCR验证了芯片的结果.软件预测发现,16个miRNA有潜在靶基因,其中11个miRNA的靶基因＞100个.结论:筛选获得的差异表达miRNA可能通过调控其靶基因而参与人肺腺癌细胞对吉非替尼的耐药.     

microRNA与骨肉瘤相关性研究进展

骨肉瘤是一种常见的原发性恶性骨肿瘤,好发于儿童和青少年.由于其高度的复发性和转移性,患者多预后不良,因此寻求一种新型的治疗靶点非常迫切.近年来,大量研究发现microRNA(miRNA)可干扰多种基因的表达,对肿瘤的发生和发展具有重要的调控作用.随着miRNA对骨肉瘤的作用机制不断被揭示,多种新型分子靶点被挖掘,为深入研究骨肉瘤的发病、转移、诊断、治疗和预后提供了新的方向.本文结合近年的最新报道,对影响骨肉瘤的相关miRNA及其与骨肉瘤作用机制的研究进展进行综述.     

成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证

背景与目的:microRNA(miRNA)是一类非编码蛋白,并参与转录后调节的单链小分子RNA(约20～25个碱基),对基因表达具有重要调控作用,与肿瘤的发生存在着密切的关系.本研究拟克隆成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中miRNA,并对部分功能性基因进行验证.方法:以SOSP-9607细胞作为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200 nt),多聚腺苷酸化和5'连接子连接后,通过RT-PCR进行反转录和扩增,克隆到pCR 4-TOPO载体上得到大约109 bp DNA片段,测序后经过生物信息学分析确定miRNA的表达情况.根据当前miRNA的研究现状,在克隆到的miRNA中选取部分功能性miRNA和新发现miRNA,合成相应探针后与从SOSP-9607细胞、HeLa细胞和成骨肉瘤组织中分离出的小片段RNA进行Northern印迹验证.结果:克隆测序后得到182个克隆体,经生物信息学分析发现有47个miRNA(25种),其中含有23种已知的miRNA和2种Nature杂志上预测的miRNA(miR-165和miR-166).选取的三条实体瘤相关的miRNA(miR-21、miR-20a、miR-17-5p)以及两条预测的miRNA进行Northern印迹验证,miR-21、miR-20a、miR-17-5p在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中均表达,预测的miR-165和miR-166在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中亦均表达,但miR-166在HeLa细胞中没有表达.结论:克隆了SOSP-9607细胞中的miRNA,并验证了部分功能性miRNA的表达,提示miRNA与肿瘤发生可能有密切的关系.     

MicroRNA-145对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的 MicroRNA145(miRNA145)是microRNA家族中的重要一员,已被证实在多种肿瘤细胞中呈现低表达,并认为miRNA 145作为一种抑癌基因可以影响肿瘤细胞的生长和侵袭能力,但其在骨肉瘤中的作用未见相关报道.该研究旨在探讨miRNA145对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响.方法 用脂质体法将miRNA145真核表达质粒瞬时转染入人骨肉瘤细胞(MG63),实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA145质粒转染组3组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA145的表达,MTT增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率.结果 转染后miRNA145质粒转染组细胞增殖速度明显下降,细胞周期停止在G1期之前,凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miRNA145可以有效地抑制骨肉瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡.     

食管癌相关微小RNA研究进展

研究发现微小RNA(miRNA)参与细胞的增殖、分化和凋亡等细胞进程,在包括食管癌在内的各种肿瘤中异常表达.miRNA与癌基因或者抑癌基因的mRNA完全或者部分配对,促进mRNA的降解或者抑制mRNA的翻译.研究发现很多miRNA在食管癌的发生发展和预后中发挥重要作用.miR-21与细胞程序性死亡蛋白4(PDCD4) ...     

microRNA与肺癌发生发展关系的研究进展

微小核糖核酸(microRNA,miRNA）是一类由大小为19~24个核苷酸(nucleotide,nt)构成的非编码小分子RNA,广泛存在于真核生物中。研究发现,miRNA通过调控相应靶基因的表达等多种途径参与癌症的发生发展等一系列过程,其中部分miRNA的靶基因已经成为治疗癌症的靶向基因。肺癌是世界范围内发病率与病死率均居首位的恶性肿瘤,目前缺乏理想的早期诊断手段及有效的治疗方法。目前大量研究表明,miRNA表达异常与肺癌的发生发展密切相关。本文就miRNA与肺癌发生发展关系的研究新进展作一综述。     

卵巢上皮癌原发耐药相关microRNA的初步研究

目的 探讨难治性卵巢上皮癌耐药相关microRNA(miRNA),并预测其调控的靶基因,为进一步进行卵巢上皮癌耐药相关生物学通路研究提供基础.方法 收集接受满意肿瘤细胞减灭术的100例Ⅱb~Ⅲc期卵巢上皮癌患者的一般资料和组织学标本,根据术后化疗效果将患者分为铂类敏感组(n=91)和难治性卵巢癌组(n=9),每组各选取3例患者使用TaqMan Real-time PCR microRNA Array进行分析,得出差异表达的miRNA.根据靶基因预测网站的分析、miRNA及其靶基因在肿瘤中的研究,筛选出目标miRNA作为区分难治性卵巢癌组与铂类敏感组的标志物以待进一步研究.结果 miRNA表达谱芯片得到两组差异表达的miRNA共118个,其中难治性卵巢癌组与铂类敏感组相比,表达降低的miRNA有42个,表达升高的miRNA有76个.综合现有文献及靶基因预测网站分析,选取6个miRNA作为区分难治性卵巢癌组与铂类敏感组的目标miRNA.与铂类敏感组相比,miRNA-21和miRNA-27a在难治性卵巢癌组中表达明显升高(P﹤0.001),miRNA-100、miRNA-770-5p、miR-NA-200c和miRNA-497在难治性卵巢癌组中表达降低(P﹤0.05).结论 miRNA-21等118个miRNA可能与卵巢上皮癌耐药相关,miRNA-21、miRNA-27a的升高及miRNA-100、miRNA-770-5p、miRNA-200c、miRNA-497的降低可能提示卵巢上皮癌原发耐药.     

Development of miRNA‐based therapeutic approaches for cancer patients

Over the past few decades, siRNA and miRNA have attracted a great deal of attention from researchers and clinicians. These molecules have been extensively studied from the standpoint of developing biopharmaceuticals against various diseases, including heart disease, diabetes and cancers. siRNA suppresses only a single target, whereas each miRNA regulates the expression of multiple target genes. More importantly, because miRNA are also secreted from cancer cells, and their aberrant expression is associated with tumor development and progression, they represent not only therapeutic targets but also promising biomarkers for diagnosis and prognosis. Therefore, miRNA may be more effective tools against cancers, in which multiple signal pathways are dysregulated. In this review, we summarize recent progress in the development of miRNA therapeutics for the treatment of cancer patients, and describe delivery systems for oligonucleotide therapeutics.     

宫颈癌及癌前病变组织中microRNAs的差异表达

目的 寻找与宫颈癌及宫颈癌前病变相关的microRNA。 方法 利用miRNA芯片,筛查宫颈 癌组织、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中差异表达的miRNA,并用实时定量RT-PCR在60份宫颈组 织标本中对4个miRNA进行验证。利用生物信息学对部分差异表达的miRNA的靶基因进行功能分析。 结果 与正常宫颈组织比较,宫颈癌及高级别宫颈病变（HSIL）中存差异表达的miRNAs,其中在宫 颈癌中下调最明显的是miR-218（下调倍数为0.175）,上调最明显的是miR-21（上调倍数为5.68）。 实时定量RT-PCR验证结果与miRNA芯片结果基本一致。功能分析显示预测的miR-218及miR-21的靶基 因与肿瘤的生长、侵袭转移有关。结论 宫颈癌及癌前病变中存在异常表达的miRNA,它们在宫颈癌 发生过程中可能起癌基因或抑癌基因的作用。     

Bioinformatic Prediction of SNPs within miRNA Binding Sites of Inflammatory Genes Associated with Gastric Cancer

Polymorphisms in miRNA binding sites have been shown to affect miRNA binding to target genes, resultingin differential mRNA and protein expression and susceptibility to common diseases. Our purpose was to predictSNPs (single nucleotide polymorphisms) within miRNA binding sites of inflammatory genes in relation to gastriccancer. A complete list of SNPs in the 3’UTR regions of all inflammatory genes associated with gastric cancer wasobtained from Pubmed. miRNA target prediction databases (MirSNP, Targetscan Human 6.2, PolymiRTS 3.0,miRNASNP 2.0, and Patrocles) were used to predict miRNA target sites. There were 99 SNPs with MAF>0.05within the miRNA binding sites of 41 genes among 72 inflammation-related genes associated with gastric cancer.NF-κB and JAK-STAT are the two most important signaling pathways. 47 SNPs of 25 genes with 95 miRNAswere predicted. CCL2 and IL1F5 were found to be the shared target genes of hsa-miRNA-624-3p. Bioinformaticmethods could identify a set of SNPs within miRNA binding sites of inflammatory genes, and provide data anddirection for subsequent functional verification research.     

MicroRNA signatures in human cancers

MicroRNA (miRNA) alterations are involved in the initiation and progression of human cancer. The causes of the widespread differential expression of miRNA genes in malignant compared with normal cells can be explained by the location of these genes in cancer-associated genomic regions, by epigenetic mechanisms and by alterations in the miRNA processing machinery. MiRNA-expression profiling of human tumours has identified signatures associated with diagnosis, staging, progression, prognosis and response to treatment. In addition, profiling has been exploited to identify miRNA genes that might represent downstream targets of activated oncogenic pathways, or that target protein-coding genes involved in cancer.     

microRNA在胃癌中的生物学作用

microRNA（miRNA）是一类含量丰富且高度保守的非编码小RNA分子,调控细胞分裂、分化、调亡等重要的生物学过程,并且在很多疾病中表达失调。miRNA在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。目前,对miRNA的研究正逐步从肿瘤分子研究走向临床应用领域,作为生物标志物用于癌症的诊断以及作为靶分子用于治疗已逐渐得到确认。本文对miRNA在胃癌中作为一个潜在的生物标志物用于诊断、预后、药物反应以及易感性的预测等方面的潜能进行综述。      

Novel genetic variants in microRNA genes and familial breast cancer

MicroRNA (miRNA) plays an important role in tumorigenesis, but whether miRNA is a cancer predisposition factor or not is still unknown. Considering the fact that miRNA regulates a number of tumor suppressor genes (TSGs) and oncogenes, genetic variations in miRNA genes could affect the levels of expression of TSGs or oncogenes and, thereby, cancer risk. To test this hypothesis, we screened genetic variants in 17 selected miRNA genes, which are predicted to regulate key breast cancer genes, in 42 patients with familial breast cancer. Seven novel genetic variants were observed in 7 primary or precursor miRNA genes. Among them, 1 rare variant in the precursor of miR‐30c‐1 and 1 rare variant in the primary precursor of miR‐17 were only observed in noncarriers of BRCA1/2 mutations. In functional assays, these 2 variants resulted in conformational changes in the predicted secondary structures, and consequently altered the expression of mature miR‐30c‐1 and miR‐17. In the target in vitro assay, we observed that miR‐17 could bind to the 3′UTR of BRCA1 mRNAs, which is predicted to be a target for miR‐17. Our findings suggest that functional genetic variants in miRNA genes can potentially alter the regulation of key breast cancer genes. Whether they confer genetic susceptibility to breast cancer remains to be determined. © 2008 Wiley‐Liss, Inc.     

miR-218在子宫颈癌组织中的表达及预测的靶基因的生物信息学分析

目的 探讨miR-218在子宫颈癌组织中的表达,并对其预测的靶基因进行生物信息学分析,为miR-218在子宫颈癌发生中的作用机制研究提供理论基础.方法 利用miRNA芯片技术检测3份子宫颈癌组织及3份正常子宫颈组织中miRNA表达谱,用实时定量聚合酶链反应（PCR）法在55例子宫颈组织中进行验证.通过生物信息学预测miR-218的靶基因,并对其靶基因进行基因本体（G0）功能富集分析及KEGG信号转导通路富集分析.结果 芯片结果显示子宫颈癌组织中有15个miRNA表达上调（＞2倍）,10个miRNA表达下调（＜0.5倍）,其中miR-218下调最明显.miR-218预测靶基因集合功能富集于生物学调控、蛋白代谢、细胞迁移和黏附、细胞分化等生物学过程,以及蛋白结合、连接酶活性等分子功能上;KEGG通路分析涉及癌通道、黏附连接、胰岛素信号通路、凋亡等信号转导通路及前列腺癌、急性和慢性髓系白血病等疾病通路.结论 miR-218在子宫颈癌组织中呈低表达,miR-218预测靶基因集合显著富集在与肿瘤发生相关的信号通路中.