健骨颗粒含药血清对成骨细胞增殖的影响

目的：探讨健骨颗粒含药血清对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响。方法：采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用MTT法、流式细胞术检测成骨细胞增殖情况及细胞周期分布。结果：与同浓度生理盐水血清相比,20%健骨颗粒含药血清能明显促进体外培养成骨细胞增殖（P〈0.05）,明显降低G0/G1期细胞分数（P〈0.01或P〈0.05）,提高S期、G2/M期细胞分数和增殖指数（P〈0.01或P〈0.05）。结论：健骨颗粒含药血清能推进体外培养成骨细胞细胞周期,从而促进成骨细胞增殖。     

骨康方对大鼠MSCs体外向成骨细胞分化和ALP的影响

目的:观察骨康方对大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)体外增殖并向成骨细胞分化和其对碱性磷酸酶(ALP)活性的作用。方法:用流式细胞仪鉴定第3代MSCs表面抗原,采用不同浓度的含骨康方药血清联合诱导剂对大鼠MSCs定向诱导分化,观察MSCs诱导前后形态学变化,MTT法观察各组对MSCs的增殖作用并绘制细胞生长曲线,检测ALP活性。结果:CD34表达为阴性,CD44表达为阳性。原代MSCs及诱导后形态正常。细胞生长曲线示各组MSCs数量均随时间延长增加,联合使用高、中浓度骨康方药加诱导剂可显著提高MSCs增殖,并向成骨细胞增殖。联合使用高、中、低不同浓度骨康方药加诱导剂均可显著提高MSCs分化为成骨细胞的ALP活性。结论:骨康方能促进大鼠体外MSCs增殖,并向成骨细胞分化。且能提高成骨细胞的ALP活性,从而增强其成骨能力。     

淫羊藿甙对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的了解淫羊藿甙对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,探讨淫羊藿“补肾壮阳,益精健骨”的作用机制.方法体外培养大鼠成骨细胞,在96孔培养板和24孔培养板内分别加入0.2ml和0.4ml的4×105个/ml细胞,并在相应培养基中加入淫羊藿甙,终浓度分别为20μg/L、40μg/L、60μg/L,不加淫羊藿甙者作为对照.培养24h、48h、72h后检测细胞的增殖能力及碱性磷酸酶的活性.在6孔板内放置盖玻片,每孔内加入1×105个细胞,并加入淫羊藿甙(终浓度为20μg/L),继续培养24h、48h,用于I型胶原蛋白免疫组化研究.结果淫羊藿甙对大鼠成骨细胞的增殖无明显的刺激作用,但能促进成骨细胞合成分泌碱性磷酸酶和I型胶原蛋白.结论淫羊藿甙可促进成骨细胞的分化,使骨形成增加,起到“健骨”的作用.     

骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响

观察中药骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法：将实验动物随机分成中药组、罗盖全组和蒸馏水组3组，通过体外分离和培养成骨细胞体系，运用分光光度计测定含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果：成骨细胞在10％的血清中培养7天时，用分光光度计测定ALP活性。发现骨康含药血清和罗盖全含药血清均能明显提高成骨细胞的ALP活性，骨康血清组和罗盖全血清组对成骨细胞ALP活性的平均影响率分别为128．1％和129．1％。结论：中药骨康含药血清能明显提高成骨细胞的碱性磷酸酶活性。     

左归丸含药血清对成骨细胞增殖功能的影响

左归丸出自明代名家张景岳的<景岳全书·新方八阵>.我们以往的研究显示,左归丸对卵巢切除大鼠所致骨质疏松具有明显的治疗作用[1].本实验拟采用体外成骨细胞培养的方法,进一步探讨左归丸治疗骨质疏松症的机理.     

壮骨胶囊含药血清对小鼠成骨细胞增殖 及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响

目的观察壮骨胶囊含药血清对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)增殖、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)合成的影响,探讨壮骨胶囊对骨代谢、骨形成机制的作用。方法壮骨胶囊由射干、白芍等组成。实验分为对照组、壮骨胶囊高、中、低剂量组(4.3、2.15、1.08 g生药/kg),给药组灌胃给予Wistar大鼠壮骨胶囊,对照组给于等体积水,连续给予7 d后,采血离心制备对照组空白血清及含药组血清;以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为研究对象,用空白血清及含药血清处理体外培养的MC3T3-E1成骨细胞,采用CCK8法检测成骨细胞增殖能力,IFCC速率法测定ALP活性,酶联免疫法测定BGP分泌量。结果壮骨胶囊含药血清各剂量组对体外培养的MC3T3-E1细胞增殖有显著的促进作用,高、中剂量组48 h可促进成骨细胞增殖(同对照组比较,P 0.05),高、中、低剂量组72 h均能促进成骨细胞增殖(同对照组比较,P 0.01,P 0.05);高、中剂量组含药血清作用于MC3T3-E1细胞72 h后,ALP活性、BGP分泌量较对照组明显提高(P 0.01,P 0.05)。结论壮骨胶囊含药血清具有促进骨形成作用,这可能与其促进成骨细胞增殖,增加成骨细胞ALP的合成和BGP的分泌,从而改善骨代谢有关。     

续断“发汗”前后水煎液及含药血清对人成骨样MG-63细胞、幼鼠成骨细胞增殖的影响

目的探讨续断"发汗"前后水煎液及含药血清对人成骨样MG-63细胞、成骨细胞增殖的影响。方法将人成骨样MG-63细胞、幼鼠成骨细胞分别与续断"发汗"前后水煎液及大鼠含药血清共同培养。MTT法检测细胞增殖,硝基苯磷酸盐法检测成骨细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性。结果续断水煎液和含药血清均能显著促进MG-63细胞和成骨细胞增殖(P0.01),并能显著提高成骨细胞的ALP活性(P0.01),且相同剂量未"发汗"组作用普遍优于或非劣于"发汗"组。结论结合前期成分研究,推断续断"发汗"前后成分的改变影响了其促进细胞增殖和分化的作用,为其进一步研究奠定基础。     

补肾健脾药物血清对体外培养的成骨细胞增殖与分化的影响

目的观察补肾健脾药物血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响.方法用多次酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,加入含不同药物浓度的补肾健脾药物血清条件培养液共同培养;改良Gomori钙钴法染色鉴定,MTT法测定细胞增殖率,对硝基苯酚法检测碱性磷酸酶(ALP)活性.骨疏康和尼尔雌醇作为阳性对照药物.结果补肾健脾中药组成骨细胞的增殖、ALP活性均显著高于空白对照组(P＜0.05),与骨疏康和尼尔雌醇组比较有显著性差异.结论补肾健脾中药可通过增加成骨细胞的增殖与分化而促进骨形成.     

骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响

观察中药骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响.方法:将实验动物随机分成中药组、罗盖全组和蒸馏水组3组,通过体外分离和培养成骨细胞体系,运用分光光度计测定含药血清对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响.结果:成骨细胞在10%的血清中培养7天时,用分光光度计测定ALP活性,发现骨康含药血清和罗盖全含药血清均能明显提高成骨细胞的ALP活性,骨康血清组和罗盖全血清组对成骨细胞ALP活性的平均影响率分别为128.1%和129.1%.结论:中药骨康含药血清能明显提高成骨细胞的碱性磷酸酶活性.     

复元活血汤含药血清对大鼠成骨细胞功能的影响

目的：探讨复元活血汤含药血清对大鼠成骨细胞功能的影响及其作用机制。方法：取2月龄SD雄性大鼠12只,随机分为2组,每组6只,分别给予20 g.kg-1复元活血汤生药灌胃（含药血清组）和同等量的生理盐水灌胃（空白血清组）,每天2次,14 d后腹主动脉采血。取新生SD大鼠2只,采用二次酶消化法消化幼鼠颅盖骨获取成骨细胞,采用血清药理学方法,分别采用含胎牛血清的培养液（胎牛血清组）、含复元活血汤生药灌胃大鼠血清的培养液（含药血清组）和含生理盐水灌胃大鼠血清的培养液（空白血清组）培养成骨细胞。分期测定体外培养的大鼠成骨细胞的增殖功能、分化功能、矿化功能及碱性磷酸酶含量。结果：①成骨细胞增殖功能。时间效应F=381.260,P=0.000;组别效应F=1 071.170,P=0.000;时间与组别交互效应F=22.500,P=0.000。②成骨细胞分化功能。时间效应F=159.950,P=0.000;组别效应F=62.120,P=0.000;时间与组别交互效应F=2.400,P=0.029。③成骨细胞矿化功能。时间效应F=115.500,P=0.000;组别效应F=4.370,P=0.082;时间与组别交互效应F=56.300,P=0.000。④成骨细胞碱性磷酸酶含量。时间效应F=2 175.670,P=0.000;组别效应F=1 201.370,P=0.000;时间与组别交互效应F=428.870,P=0.000。结论：复元活血汤能明显地促成骨细胞的增殖和分化功能,其作用可能与成骨细胞合成和分泌碱性磷酸酶有关。     

芦丁含药血清对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖与分化成熟的影响

目的 研究芦丁含药血清(Serum of rats administered Rutin,SR)对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响.方法 ①取出生24 h 内的Wistar 大鼠颅骨,采用酶解法分离获得成骨细胞,培养于含10%类标准胎牛血清(...     

补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的观察补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞(MC3T3-E1)碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨其对成骨细胞分化的作用机制。方法将20只SD大鼠随机分为含药血清组和无药血清组,各10只。含药血清组大鼠予补肾活血固齿方灌胃,无药血清组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,均灌胃7 d后抽取腹主动脉血制备成含药血清和无药血清。胎牛血清组为直接购买的PAA胎牛血清。分别用含10%含药血清、10%无药血清及10%胎牛血清的培养基培养MC3T3-E1细胞24、48、72 h,检测MC3T3-E1细胞中ALP的含量。结果含药血清组培养24、48、72 h后MC3T3-E1细胞ALP含量均高于胎牛血清组及无药血清组同期水平,比较差异均有统计学意义(P0.05),但胎牛血清组与无药血清组同期差异无统计学意义(P0.05);含药血清组MC3T3-E1细胞ALP含量随培养时间的延长而明显增加(P0.05)。结论补肾活血固齿方可增强MC3T3-E1细胞中ALP活性,促进MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化,且均有一定时间依赖性。     

壮骨颗粒含药血清对兔骨髓基质干细胞体外增殖及分化的影响

研究壮骨颗粒含药血清对骨髓基质干细胞体外成骨活性的影响。方法:采用体外细胞培养技术,采用壮骨颗粒对细胞进行体外诱导培养,并设置空白血清对照组,进行MTT、免疫组织化学染色及ALP测定,观察壮骨颗粒对骨髓基质细胞的诱导作用。结果:在促细胞增殖方面:实验组作用显著(P<0.01),在第3d开始增殖,第6d达到平台期;而对照组对数增殖期明显延长(P<0.01);在促细胞分化方面:壮骨颗粒血清组在2d、3d、5dALP活性水平高于对照组(P<0.01)。常规形态学观察,壮骨颗粒组诱导的细胞在形态上类似于成骨细胞,免疫组化染色提示诱导细胞具有骨细胞表型。结论:壮骨颗粒组应用可促进细胞增殖,并诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。     

参松养心胶囊对陈旧性心肌梗死患者自主神经功能的影响

目的观察参松养心胶囊对陈旧性心肌梗死患者心脏自主神经功能的影响。方法将104例陈旧性心肌梗死患者随机分为2组。治疗组52例予参松养心胶囊治疗,对照组52例予谷维素治疗。2组均治疗4周后统计临床疗效,并观察2组治疗前后焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)评分、正常RR间期标准差(SDNN)、平均值的标准差(SDANN)、标准差的平均值(SDANN index)、差值均方的平方根(RMS SD)、差值50 ms的百分比(PNN50)及QT间期离散度(QTd)。结果治疗组总有效率90.38%,对照组总有效率65.39%,2组比较差异有统计学意义(P0.05),治疗组疗效优于对照组。2组治疗后SAS、SDS评分均降低(P0.05),且治疗组降低优于对照组(P0.05)。2组治疗后SDNN、SDANN、SDANN index均升高(P0.05),RMS SD、PNN50均降低(P0.05),且治疗组治疗后升高SDNN、SDANN、SDANN index,降低RMS SD、PNN50均优于对照组(P0.05)。结论参松养心胶囊治疗陈旧性心肌梗死可以通过抑制迷走神经张力和相对提高交感神经张力来恢复自主神经系统的平衡,提高患者的心率并改善症状。     

薯蓣皂苷元对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:研究薯蓣皂苷元对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配基(OPG/RANKL) mRNA的影响,探讨薯蓣皂苷元预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法:在体外培养的大鼠成骨细胞培养基中分别加入不同浓度的薯蓣皂苷元作用不同时间,用MTT法检测药物对成骨细胞增殖的影响,检测成骨细胞内ALP活性分析药物对成骨细胞分化的影响,用半定量RT-PCR检测成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的表达量,分析药物对破骨细胞重要信号传导通路OPG/RANKL/RANK系统的影响。结果:3.64×10-8-3.64×10-7mol/L的薯蓣皂苷元作用于大鼠成骨细胞3d,可促进成骨细胞的增殖(P<0.01),上调成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的比值(P<0.01);作用7d,可提高成骨细胞内ALP活性(P<0.05或P<0.01)。结论:适量浓度薯蓣皂苷元可促进成骨细胞的增殖、分化及抑制破骨细胞的形成。     

坤泰胶囊联合复方沙棘籽油栓治疗萎缩性阴道炎疗效观察

目的观察坤泰胶囊联合复方沙棘籽油栓治疗萎缩性阴道炎的临床疗效。方法将80例萎缩性阴道炎患者随机分为2组,治疗组40例予坤泰胶囊联合复方沙棘籽油栓治疗,对照组40例仅予复方沙棘籽油栓治疗。疗程14 d,分别于治疗后第10~14 d及第28~35 d随访,并评价其治疗效果。结果 2组2次随访后各项症状、体征评分及总积分均降低,与治疗前比较差异均有统计学意义(P0.05)。2组第1次随访后各项症状、体征评分及总积分组间比较差异无统计学意义(P0.05),第2次随访各项评分比较差异有统计学意义(P0.05)。第1次随访2组疗效比较差异无统计学意义(P0.05),第2次随访治疗组疗效明显优于对照组(P0.05)。结论坤泰胶囊联合复方沙棘籽油栓治疗萎缩性阴道炎,能有效缓解萎缩性阴道炎症状、体征,疗效显著。     

巴戟天药物血清对成骨细胞生物学特性的影响

目的:通过观察巴戟天药物血清对体外培养成骨细胞(OB)增殖及其活性的影响,探讨巴戟天壮骨作用的实质。方法:取新生SD大鼠头盖骨提取成骨细胞,给巴戟天药物血清,测定巴戟天对成骨细胞(OB)增殖、分泌碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)及转化生长因子(TGF-β1)的影响。结果:巴戟天醇提物及巴戟天正丁醇部位能显著刺激OB增殖;巴戟天中正丁醇部位低剂量组可促进分化中的OB分泌ALP和OC,并可促进OB表达TGF-β1。结论:巴戟天中正丁醇部位低剂量组能够促进OB分泌碱性磷酸酶、表达TGF-β1mRNA,从而促进骨的生长。     

护肝宁片对非酒精性脂肪肝患者肝功能、血脂指标及影像学的影响

目的观察护肝宁片对非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝功能、血脂及影像学的影响。方法将50例NAFLD患者随机分为2组,治疗组25例予护肝宁片治疗,对照组25例予多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗,疗程为12周。比较2组治疗前后肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)]、血脂指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)]及肝脏B超显像变化,同时观察不良反应。结果 2组治疗后,ALT、AST、γ-GT、TC、TG及肝脏灰阶值均较治疗前均明显改善(P0.05,P0.01)。在改善ALT、TC及肝脏灰阶值方面,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。结论护肝宁片治疗NAFLD安全有效,且改善ALT、TC及肝脏灰阶值方面优于多烯磷脂酰胆碱。     

荨麻属植物对骨形成影响的研究

目的观察4种荨麻属植物的8种不同提取物对骨形成的影响。方法以成骨样细胞MC3T3-E1为靶细胞，以表皮生长因子为阳性对照，4种荨麻属植物的8种不同提取物分为50，100，200μg/ml 3个浓度组，采用CCK-8（cell counting kit-8）活细胞计数法测定4种荨麻属植物的8种不同提取物对成骨样细胞MC3T3-E1的增殖作用，同时测定碱性磷酸酶的活性。结果三角叶荨麻根的醇提物，宽叶荨麻全草的醇提物和醇提物水层过D101大孔树脂40％洗脱部分在50到200μg／ml的浓度下能显著促进成骨样细胞MC3T3-E1增殖。同时这3种提取物一定程度上也增强了碱性磷酸酶的活性，但无显著性差异。结论三角叶荨麻和宽叶荨麻提取物在体外对成骨样细胞MC3T3-E1的作用提示其在体内可能促进骨形成过程。     

归肾丸加减联合耳穴贴压对月经过少患者血清性激素水平的影响

目的观察归肾丸加减联合耳穴贴压对月经过少患者血清性激素水平的影响。方法将81例月经过少患者随机分为2组。治疗组40例予归肾丸加减联合耳穴贴压治疗,对照组41例予戊酸雌二醇联合黄体酮胶丸治疗。2组均治疗3个月经周期后统计临床疗效,并观察2组治疗前后卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E_2)及催乳激素(PRL)。结果治疗组总有效率95.00%,对照组总有效率78.05%,2组比较差异有统计学意义(P0.05),治疗组疗效优于对照组。2组治疗后FSH、LH、PRL水平均高于本组治疗前(P0.05),E_2水平低于本组治疗前(P0.05);治疗组治疗后FSH、LH、PRL水平均高于对照组治疗后(P0.05),E_2水平低于对照组治疗后(P0.05)。结论归肾丸加减联合耳穴贴压治疗月经过少疗效确切,并能改善患者血清性激素水平。