丝裂原活化蛋白激酶信号通路在类风湿性关节炎发病中的作用研究进展

类风湿性关节炎（RA）是一种常见的自身免疫性疾病，主要特征为滑膜增生和骨侵蚀，最终导致关节畸形而致残。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路是真核细胞中参与调节细胞有丝分裂、分化和凋亡及炎症和应激反应的重要通路之一，与RA的发生发展密切相关。RA患者关节内细胞因子可与对应受体结合，激活胞内上游调控因子，以三级酶联的方式激活MAPK信号通路。活化的MAPK蛋白通过激活下游转录因子，一方面促进滑膜细胞增生和软骨细胞凋亡，另一方面导致滑膜细胞和软骨细胞中多种基质金属蛋白酶高表达而过度水解细胞外基质，最终造成关节损伤。本文就MAPK信号通路在RA发病中的作用进行综述，以期为RA的基础研究提供参考。     

MAPKs信号转导在类风湿性关节炎滑膜细胞中作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-actived protein kinase,MAPK)是真核生物信号传递网络中的重要途径之一,在基因表达调控和细胞质功能活动中发挥关键作用。在哺乳动物机体中,5种不同的MAPK信号转导通路中ERK1/2信号转导通路调控细胞生长和分化,JNK和p38MAPK信号转导通路在炎症与细胞凋亡等应激反应中发挥重要作用。信号转导途径的活化是类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)慢性滑膜炎的典型特征,通过这一途径诱导滑膜细胞胞质蛋白磷酸化,使转录因子和核蛋白如c-Fos、c-Jun、AP-1和NF-κB等磷酸化,从而促进细胞增殖和活化。上述机制研究对于RA发病机制的深入了解以及研制开发治疗RA的新型药物具有重要的意义。     

腰椎间盘退变组织中P-p38 MAPK的表达

目的探讨腰退变椎间盘组织中丝裂原活化蛋白激酶(P-p38 MAPK)的表达。方法应用免疫组织化学方法和ELISA检测10例正常腰椎间盘组织和30例腰退变椎间盘组织中P-p38MAPK的表达量。结果腰退变椎间盘组织中P-p38 MAPK的表达量明显高于正常腰椎间盘组织[(0.657±0.086)μg/L vs.(0.165±0.024)μg/L](P<0.05)。结论退变椎间盘中P-p38 MAPK含量明显高于正常椎间盘组织,提示其可能参与了腰椎间盘的退变过程。     

基质金属蛋白酶-2和金属蛋白酶抑制剂-1在类风湿关节炎发病机制中的作用

目的观察基质金属蛋白酶(MMP)-2和金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1在类风湿关节炎(RA)滑膜组织及滑膜下组织的阳性表达,探讨其在RA发病中的作用。方法应用免疫组织化学ABC法检测65例RA组织MMP-2和TIMP-1表达情况,比较其在滑膜和滑膜下组织中的分布特点。另选取10例骨关节炎(OA)和7例半月板损伤的正常滑膜(NS)作对照。结果①MMP-2阳性表达率:RA 66%,OA 20%,NS 14%;TIMP-1阳性表达率:RA 63%,OA 30%,NS 0。②MMP-2在RA滑膜组织阳性表达率为40%,在滑膜下组织阳性表达率为61%;TIMP-1在RA滑膜组织的阳性表达率为60%,在滑膜下组织中的阳性表达率为35%。③MMP-2与TIMP-1之间,无明显的相关性表达。结论①MMP-2和TIMP-1在RA的发病机制中发挥作用;②RA滑膜的不同组织部位MMP和TIMP的表达存在差异。     

类风湿关节炎滑膜细胞信号转导机制研究进展

滑膜细胞因子IL 1、TNF α、EGF、TGF β、PDGF、IGF 1在RA发病过程中可活化细胞内两条重要的信号通路 :受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 Ras MAPK途径和非受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 JAK STAT途径 ,其中受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 Ras MAPKs信号转导路径异常是RA慢性滑膜炎的典型特征。研究G蛋白 AC cAMP信号转导通路及该通路与酶偶联受体 Ras MAPKs信号转导通路间的交互联系将具有十分重要的意义。     

谷胱甘肽S转移酶(GSTP1)和MAPK在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨谷胱甘肽S转移酶(GSTP1)和细胞促有丝分裂蛋白激酶(MAPK)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测40例前列腺癌组织及42例前列腺增生组织中GSTP1和MAPK的表达,分析GSTP1和MAPK的表达与Gleason分级之间的关系。结果 GSTP1在前列腺增生组织中为高表达,40例前列腺癌组织中GSTP1表达率在高、中、低分化癌中分别为58.3%、20.0%、16.7%,呈下降趋势,2组GSTP1表达差异有统计学意义(P<0.01)。4-HNE在前列腺增生组织中阳性表达率低较低,仅为5.0%。MAPK在前列腺增生组织中阳性表达低较低,为7.1%。MAPK在18例低分化前列腺癌组织中有14例高表达,达4分;在高、中、低分化癌中分别为91.7%、90.0%、100.0%,呈明显上升趋势。2组中MAPK表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论 GSTP1表达缺失和MAPK的高表达,可能在前列腺癌的进展中起重要作用。     

Expression of P-p38 mitogen-activated protein kinase in degenerated intervertebral disc

目的 探讨腰退变椎间盘组织中丝裂原活化蛋白激酶(P-p38 MAPK)的表达.万法 应用免疫组织化学方法和ELISA检测10例正常腰椎间盘组织和30例腰退变椎间盘组织中P-p38MAPK的表达量.结果 腰退变椎间盘组织中P-p38MAPK的表达量明显高于正常腰椎间盘组织[(0.657±0.086) μg/L vs.(0.165±0.024)tg/L](P＜0.05).结论 退变椎间盘中P-p38 MAPK含量明显高于正常椎间盘组织,提示其可能参与了腰椎间盘的退变过程.     

IL-23p19 mRNA在RA患者滑膜组织及滑膜细胞中的表达

目的:探讨类风湿性关节炎(RA)与骨性关节炎(OA)患者滑膜组织及体外培养滑膜成纤维细胞(SF)中白细胞介素(IL)-23p19mRNA分泌来源及对RA诊断的意义。方法:收集行滑膜切除术及关节置换术的6例RA患者及6例OA患者滑膜组织,酶消化法对滑膜组织行SF体外培养,RT-PCR方法检测RA和OA滑膜组织、SF中IL-23p19mRNA表达水平,RA患者滑膜组织、SF中IL-1βmRNA的表达水平。结果:(1)6例RA患者和4例OA患者滑膜组织、SF或OASF中IL-23p19mRNA表达均为阳性,且RA患者滑膜组织中的表达高于OA患者,RASF中的表达量显著高于OASF中阳性标本的表达量(均P<0.05)。(2)6例RA患者滑膜组织中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平呈正相关(r=0.900,P<0.05),6例RASF中IL-1βmRNA表达均阳性,且与IL-23p19mRNA表达水平正相关(r=0.883,P<0.05)。结论:IL-23参与了RA的发病过程,并且可由RA患者中的SF分泌,IL-23可作为RA与OA鉴别诊断的指标之一,IL-1β很可能是IL-23在RA中发挥致病作用的途径之一。     

p38 MAPK抑制剂对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探究p38MAPK抑制剂对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用。方法采用随机数字表法将60只大鼠分为三组,A组为假手术组,B组为重症胰腺炎模型组,C组为重症胰腺炎模型加p38MAPK抑制剂组;检测三组大鼠的肺组织病理学切片、肺组织湿干重比、髓过氧化物酶活性以及p38MAPK mRNA的表达水平。结果 B组大鼠与A组大鼠相比,其肺组织损伤病理评分、肺组织湿干重比、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性以及肺组织p38MAPK mRNA的表达水平均显著升高,而C组大鼠与B组大鼠相比上述指标均有所下降,P<0.05。结论 p38MAPK抑制剂能减少TNF-α的释放,降低炎症反应,为临床上治疗重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的提供新的方向。     

丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对急性肺损伤影响

目的探讨p38MAPK抑制剂SB203580对大鼠急性肺损伤影响。方法采用LPS建立SD大鼠急性肺损伤模型，随机分为对照组、LPS组、SB203580组。造模后注射p38MAPK抑制剂SB203580，在1h、3h、6h及12h时，剖杀大鼠，观察肺组织病理改变，ELISA法测血清中的TNF—α及IL-6；免疫组化检测肺组织中的p38MAPK及其磷酸化-p38MAPK。结果注射LPS后，SB203580治疗组较LPS组血清中的TNF—α及IL-6显著减少（P〈0．05 or 0.01）；肺组织中的磷酸化-p38MAPK的表达显著减轻，而p38丝裂原活化蛋白激酶未明显减轻。结论p38MAPK抑制剂SB203580可减轻血清中的TNF-α及IL-6和肺组织中的磷酸化-p38MAPK的表达，从而减轻LPS诱导的急性肺损伤。     

川贝母对哮喘模型小鼠气道炎症及ERK/MAPK信号通路的影响

目的:考察川贝母对哮喘模型小鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,探讨其治疗哮喘的可能机制。方法:以卵蛋白致敏小鼠建立哮喘模型。将造模成功的40只小鼠随机分为模型组(灌胃0.5%羧甲基纤维素)、阳性对照组(腹腔注射0.5 mg/kg地塞米松)和川贝母低、高剂量组(灌胃9.0、18.0 mg/kg),每组10只;另选10只正常小鼠作为正常组(灌胃0.5%羧甲基纤维素)。每天给药1次,连续28 d。给药结束后,对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中总细胞和分类细胞(中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞)进行计数;光镜下观察小鼠支气管平滑肌病理组织形态,并进行炎症评分;酶联免疫吸附法测定肺组织中ERK、磷酸化ERK(p-ERK),p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)活性;Western blot法测定肺组织中ERK、p-ERK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法测定肺组织中ERK、p38 MAPK m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠BALF中总细胞计数、分类细胞计数、炎症评分和肺组织中p-ERK、p-p38 MAPK活性均显著升高(P<0.01),肺组织中p-ERK、p-p38 MAPK蛋白表达以及ERK、p38 MAPK m RNA表达均显著增强(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:川贝母可改善哮喘模型小鼠气道炎症,其机制可能与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关。     

心肌梗死大鼠心室重塑的动态观察

目的 观察大鼠心肌梗死后转化生长因子-β(TGF-β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)以及p-p38MAPK的动态变化,探讨它们在心室重塑过程中的作用.方法 结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,并设假手术组为对照.术后1、7、14和21 d检测大鼠血流动力学指标,HE染色观察梗死区域组织病理变化;Western blot检测心肌组织TGF-β、p38MAPK以及p-p38MAPK蛋白的表达水平.结果 与假手术组相比,心肌梗死组大鼠心脏功能明显下降,心肌梗死大鼠心肌纤维化程度逐渐增加,心肌组织TGF-β,蛋白表达进行性增加,p38MAPK蛋白表达基本不变,而磷酸化蛋白p-p38MAPK表达则是先上升后下降.结论 大鼠心肌梗死后TGF-β蛋白表达逐渐升高,它的升高可能激活了p38MAPK的磷酸化过程,TGF-β是大鼠心肌梗死后心室重塑病理生理过程中的重要因子之一.     

基于网络药理学和分子对接的薏苡附子散对类风湿性关节炎及慢性心力衰竭“异病同治”作用机制探讨

目的 基于网络药理学和分子对接方法探讨薏苡附子散治疗类风湿性关节炎(RA)及慢性心力衰竭(CHF)"异病同治"的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选薏苡附子散的活性成分,并利用 Pubchem 数据库获得 Smile 号,进而通过 Swiss Target Prediction 数据库获取活性成分对应的靶点。在 GeneCards 和 OMIM数据库平台预测 RA 及 CHF 疾病作用靶点。对活性成分靶点与疾病交集靶点进行蛋白质相互作用(PPI)网络构建及核心靶点筛选,并进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。筛选核心成分和核心靶点,利用 AutoDock 软件进行分子对接验证。结果 从薏苡附子散中共筛选得到符合条件的活性成分 10 个,活性成分潜在作用靶点 403 个,RA 疾病靶点 1 112 个,CHF 疾病靶点 2 983 个,取交集,获得药物、疾病交集靶点 69 个。GO 富集分析结果显示主要与炎症反应的调节、MAPK 级联调控、对氧化应激的反应、骨化的调节、平滑肌细胞增殖等相关;KEGG 通路富集分析得到 236 条通路,与RA及CHF相关且排序较靠前的通路有 PI3K-Akt 信号通路、NF-κB 信号通路、MAPK 信号通路等。分子对接结果表明,薏苡附子散中的核心成分多根乌头碱、水黄皮素、豆甾醇具有与核心靶点 TNF、SRC、ESR1 和 PTGS2良好的结合潜力。结论 薏苡附子散治疗 RA 和 CHF 具有多靶点效应,涉及多条生物过程和信号通路,可能通过调控炎症反应、氧化应激反应、血管生成和发育、心脏收缩调节及 MAPK 级联调控等发挥"异病同治"作用。     

地塞米松抑制哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶的表达

目的:探讨支气管哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶(p38 MAPK)表达的变化以及地塞米松对其影响.方法:复制大鼠哮喘模型,随机分成3组:正常对照组、哮喘对照组和地塞米松(DEX)干预组.分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-5含量和肺组织磷酸化p38 MAPK表达的变化,并观察气道阻力、BALF中EOS计数以及肺组织病理学变化.结果:哮喘对照组大鼠肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平及气道阻力、BALF中IL-5含量和EOS计数均较正常对照组显著增加(P＜0.01);DEX干预组上述指标较哮喘对照组显著降低(P＜0.01),肺组织病理学损伤程度明显减轻.肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平与气道阻力、BALF中IL-5含量和EOS计数之间分别呈显著正相关(r=0.77、0.63、0.65,P＜0.01).结论:p38 MAPK可能参与了支气管哮喘的发病过程.DEX对哮喘的治疗作用至少部分与抑制磷酸化p38 MAPK的表达有关.     

丝裂原活化蛋白激酶38在糖尿病小鼠肾组织中的表达

目的研究丝裂原活化蛋白激酶38（p38MAPK）在链脲左菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠肾组织中的表达及活化情况,从分子信号角度探讨糖尿病肾病。肾纤维化的发病机制。方法采用STZ腹腔注射诱导小鼠糖尿病模型,并检测血糖、血肌酐、24h尿白蛋白排泄率、肾小球细胞外基质;用免疫组织化学方法检测糖尿病小鼠肾组织磷酸化p38MAPK和TGFβ的表达,用RT-PCR的方法检测肾组织p38MAPK和TGFβmRNA的表达。结果腹腔注射STZ后,模型组小鼠均出现明显的多食、多饮、多尿和体质量下降等糖尿病症状,血糖明显升高,血肌酐水平明显增高,24h尿白蛋白排泄率明显增加,肾小球细胞外基质明显增宽。正常。肾组织有基础的磷酸化p38MAPK和p38MAPKmRNA表达,糖尿病形成后4周,磷酸化p38MAPK和p38MAPKmRNA在肾组织中的表达明显增高,并持续增加到8周,第12周至16周磷酸化p38MAPK和p38MAPKmRNA的表达有所减少。正常肾组织有基础的TGFβ1蛋白和mRNA表达。糖尿病形成后4周,TGFβ1蛋白和mRNA在。肾组织中的表达均明显增高,并持续增加到12周,第16周肾组织TGFβ1的表达有所减少。肾组织磷酸化p38MAPK和TGFβ1的表达趋势一致,并呈明显正相关（r=0．64,P〈0．01）,且与肾小球细胞外基质的积聚密切相关。结论p38MAPK的表达和活化可能通过介导TGFβ1的表达参与了小鼠糖尿病肾病模型肾纤维化的发生。     

N-乙酰半胱氨酸影响p38有丝分裂原活化蛋白激酶对顺铂诱导急性肾损伤的保护作用

目的研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠急性肾损伤(acute kidney in-jury,AKI)后组织细胞凋亡的影响和与p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)的关系。方法静脉注射CDDP制备大鼠AKI模型。大鼠随机分为正常对照组、AKI模型对照组、NAC低剂量组(50 mg.kg-1)、NAC中剂量组(100 mg.kg-1)、NAC高剂量组(200 mg.kg-1)、特异性p38MAPK抑制剂SB203580组(10mg.kg-1)。大鼠预先连续给药3 d,给予CDDP,再继续给药5 d。TUNEL法进行细胞凋亡检查。试剂盒测定肾脏组织caspase-3。Western blot测定caspase-3、Bax、Bcl-2、磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)表达。结果与正常对照组相比,CDDP诱导AKI模型组肾组织凋亡细胞增加,caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.01)。与AKI模型组相比,NAC与SB203580减少凋亡细胞、降低肾脏组织caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达和增加Bcl-2表达(P<0.01)。结论 NAC可有效防治CD-DP诱导大鼠AKI,并与p38MAPK相关。     

单味中药及其提取物与类风湿关节炎滑膜异常增殖

<正>类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以滑膜异常增生为特征的慢性炎症性自身免疫性疾病。主要表现为滑膜组织增生性侵蚀性生长,其生长性质和病理学行为在许多方面类似于肿瘤组织的特性,对软骨组织造成进行性破坏。越来越多研究表明:引起RA关节滑膜组织过度增生导致关节畸形的基本原因可能是滑膜细胞异常增殖——即滑膜组织内细胞的增殖和凋亡间的平衡失调[1]。RA属中医"痹证"范畴,具有反复发作、致     

白细胞介素-37的生物属性及与类风湿关节炎的关系

<正>白细胞介素(IL)-37是2000年发现的IL-1家族的新成员,并在2001年根据其前体肽命名为IL家族的第七因子IL-1F。其功能为一个基本的先天炎症免疫抑制剂。目前,关于IL-37与自身免疫病类风湿关节炎(RA)之间关系的研究仍然处于空白。RA是一种以炎症反应造成的肉芽组织和纤维增生,使得关节腔内的血供严重受损的免疫系统疾病。严重的缺血使得局部出现坏死,以累及周围关节为主,其基本病理改变为滑膜炎。RA的滑膜组织中有大量的CD4+T细胞及其分泌的IL-2、干扰     

Ang-2和VEGF在类风湿关节炎滑膜组织中的表达研究

目的研究Ang-2和VEGF在类风湿关节炎滑膜组织中的表达及其对类风湿关节炎血管新生和病情进展的意义。方法选取34例RA和30例OA患者的滑膜组织，分别用免疫组化方法检测Ang-2和VEGF在类风湿关节炎滑膜组织中的表达水平及二者的相关性。结果RA滑膜组织衬里层与衬里下层的成纤维细胞、巨噬细胞样细胞、血管内皮细胞均见Ang-2和VEGF的阳性表达分布，两者比较，阳性细胞的染色程度、染色细胞数与分布范围大致相等。RA患者滑膜Ang-2和VEGF表达水平明显高于对照组。结论Ang-2和VEGF与RA的发生、发展密切相关，VEGF可能通过上调Ang-2促进RA的血管新生．阻抗Ang-2和VEGF有望成为类风湿关节炎治疗新的靶点。     

代谢组学在类风湿关节炎中应用的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性炎症性疾病,影响着全身多个器官和组织。随着研究新技术、新方法的出现,RA的代谢组学研究也取得了一定的进展。该文就代谢组学在RA早期生物标志物筛选、疾病发病机制等方面的应用进行综述,以期为RA的预防和诊治提供参考。