二氯化钴所致缺氧对A549细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的:探讨CoCl2作用不同时间所致缺氧对体外培养的人肺腺癌A549细胞株增殖、凋亡和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:对肺腺癌细胞A549分别进行常氧和氯化钴模拟缺氧培养,采用MTT法检测CoCl2作用不同时间所致缺氧对A549细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法测定缺氧不同时间HIF-1αmRNA表达水平的变化。AnnexinV-FITC/PI双标记染色,流式细胞术检测CoCl2作用不同时间缺氧肿瘤细胞凋亡情况。结果:CoCl2对A549细胞增殖抑制作用表现出时间依赖性抑制作用。常氧条件下的A549细胞即有一定水平的HIF-1αmRNA的表达,随着CoCl2作用时间的延长,HIF-1αmRNA水平呈升高趋势,与正常对照组比较,各缺氧组差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、CoCl2作用4、12、24、48 h组细胞凋亡率分别为(0.60±0.10)%、(1.10±0.10)%、(8.63±0.75)%、(12.80±0.85)%和(19.33±0.80)%。结论:CoCl2对A549细胞具有上调HIF-1αmRNA表达作用,可抑制细胞的增殖和一定的凋亡诱导作用,这些说明HIF-1α可能在肺癌的发展中扮演着重要的作用。     

乏氧对肺腺癌A549细胞P糖蛋白和多药耐药相关蛋白表达的影响

目的 通过研究乏氧对人肺腺癌细胞株A549的P糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响,探讨乏氧在引起肿瘤细胞多药耐药中的作用。方法 乏氧条件下(2％O2)人肺腺癌细胞株A549体外培养24h,丙酮固定后运用免疫组织化学的方法对乏氧诱导因子-1α(HIE-1α)、P-gp和MRP的表达进行检测,并用MTT法检测乏氧条件下A549细胞在阿霉素和顺铂作用下的存活率。结果 乏氧条件下人肺腺癌细胞株A549中乏氧诱导因子-1α、P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白的表达明显较正常氧浓度下增高,HIF-1α与P-gp、MRP的表达增高存在明显的相关性。乏氧条件下人肺腺癌细胞株A549对阿霉素的耐药性明显增强。结论 在人肺腺癌A549细胞中HIF-1α蛋白表达与P-gp和MRP表达存在明显的相关性。     

Expression and Implication of Hypoxia Inducible Factor-1α in Prostate Neoplasm

Regionsofhypoxiaareknowntoexistwithinmanytumors.Neovascularizationandincreasedglycolysis,twouniversalcharacteristicsofsolidtumors,representadaptationstoahypoxicmicroenvironmentthatarecorrelatedwithtumorinvasion,metastasis,andlethality.Theabilityoftumorcel…     

脊索瘤细胞系CM-319中放化疗抵抗相关基因的表达及临床意义

[目的]探讨多药耐药相关基因如缺氧诱导因子1d（HIF-1α）、多药耐药基因（MDR1）及多药耐药相关蛋白（MRP1）在脊索瘤细胞系CM－319中的表达及临床意义。[方法]用RT—PCR检测HIF－1α、MDR1、MRP1基因表达,间接免疫荧光及免疫细胞化学Envision法检测HIF－1α、MRPl蛋白在CM－319中的表达情况,并分析其与放化疗抵抗的关系。[结果]常氧条件下,在脊索瘤细胞系中能检测到HIF～1α及MRP1 mRNA的表达,但未检测到MDR1 mRNA的表达（P〈0．01）,间接免疫荧光及免疫细胞化学可以检测到HIF-1α表达在细胞浆及核中,而MRP1主要表达在细胞浆中。[结论]HIF-1α与MRP1的过度表达在脊索瘤的放化疗抵抗中可能具有重要作用,而MDR1表达未被检测到,提示脊索瘤的放化疗抵抗主要与HIF－1α和MRP1相关。     

EGCG对低氧诱导下胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 将人胃癌细胞株SGC7901进行传代培养,并采用氯化钴（CoCl2）建立低氧模型,实验设空白对照组（常氧组）、低氧对照组及低氧加不同浓度的EGCG组.分别采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting检测细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的表达.结果 低氧条件下,低浓度EGCG短时间内（24 h）对SGC7901细胞生长无明显抑制作用（P〉0.05）;但随着浓度的升高和作用时间的延长,EGCG可抑制低氧SGC7901细胞的增殖（P〈0.01）,100 μg/mL EGCG作用72 h后,其抑制率可达（76.3±2.9）%.流式细胞仪检测显示,EGCG在低氧环境下可呈时间-剂量依赖性地诱导胃癌细胞凋亡（P〈0.05或P〈0.01）.EGCG可明显抑制低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达（P〈0.05或P〈0.01）,并下调VEGF-A mRNA表达（P〈0.05或P〈0.01）,但对HIF-1α mRNA的转录无明显影响（P〉0.05）.结论 低氧条件下,EGCG可抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A的表达有关.     

EGCG对低氧诱导下胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 将人胃癌细胞株SGC7901进行传代培养,并采用氯化钴（CoCl2）建立低氧模型,实验设空白对照组（常氧组）、低氧对照组及低氧加不同浓度的EGCG组。分别采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting检测细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的表达。结果 低氧条件下,低浓度EGCG短时间内（24 h）对SGC7901细胞生长无明显抑制作用（P>0.05）;但随着浓度的升高和作用时间的延长,EGCG可抑制低氧SGC7901细胞的增殖（P<0.01）,100 μg/mL EGCG作用72 h后,其抑制率可达（76.3±2.9）%。流式细胞仪检测显示,EGCG在低氧环境下可呈时间—剂量依赖性地诱导胃癌细胞凋亡（P<0.05或P<0.01）。EGCG可明显抑制低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）,并下调VEGF-A mRNA表达（P<0.05或P<0.01）,但对HIF-1α mRNA的转录无明显影响（P>0.05）。结论 低氧条件下,EGCG可抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A的表达有关。     

低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响

目的 探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61（Cyr61/CCN1）表达的影响。 方法 分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达。分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达。 结果 两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加（P<0.05或P<0.01）。 结论 低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达。     

人金属硫蛋白1H基因对肺腺癌细胞A549耐药性的影响

目的：探讨金属硫蛋白1H（metallothionein 1H,MT1H）基因对人肺腺癌A549细胞耐药性的影响．方法：构建真核表达载体pcDNA3．1（-）-MT1H,利用脂质体介导将其转染肺腺癌A549细胞,G418筛选阳性克隆．分别以RT—PCR和Western方法检测MTIH mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测细胞对顺铂的药物敏感性;流式细胞仪（FCM）检测顺铂诱导细胞凋亡率．结果：转染pcDNA3．1（-）-MT1H的细胞,其MT1H mRNA和蛋白表达水平显著高于亲本细胞及转染空载体细胞,细胞对顺铂药物敏感性明显下降,顺铂诱导的凋亡率明显降低．结论：MT1H能促进A549细胞耐药,可能和降低顺铂诱导细胞凋亡有关．     

人参皂甙Rg3对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549DDP逆转作用及其机理的研究

目的探讨人参皂甙Rg3对耐顺铂(CDDP)人肺腺癌细胞系A549DDP的逆转作用及其机理.方法以A549DDP及其亲本细胞A549为研究对象,MTT法观察Rg3对A549DDP耐药的逆转作用,采用免疫组化及RT-PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测耐药相关蛋白MDR1、MRP、LRP表达.结果 MTT法显示低细胞毒浓度Rg3(10 μmol)有效逆转A549DDP细胞耐药7.3倍,而20、30 μmol Rg3分别逆转耐药1.3、1.2倍;10 μmol Rg3预处理A549DDP细胞12、24、36及48 h后分别逆转耐药1.0、1.6、7.6及10.4倍,表明Rg3逆转耐药呈时间依赖性.免疫组化和RT-PCR显示:A549DDP细胞MDR1、MRP、LRP呈过量表达,以Rg3(10 μmol)预处理A549DDP 12、24、36及48 h后,MDR1、MRP表达减弱,呈时间依赖性,而LRP表达无明显时间依赖性.结论 Rg3具有中度逆转肿瘤耐药作用,并呈时间依赖性.     

缺氧诱导滋养细胞转化生长因子3β表达与调控

目的：探讨低氧对滋养细胞转化生长因子3B(TGF-3β)的表达的诱导作用，以及缺氧诱导因子1(HIF-1)对TGF-3β表达的调控作用．方法：滋养细胞来源的BeWo细胞系分4组培养：正常对照组、缺氧组、HIF—1α反义组和HIF-1α正义组．HIF-1α反义组和HIF-α正义组先加入HIF-1α寡核苷酸，常氧条件培养6h，再低氧条件培养48h．48h后，收集细胞，实时定量PCR方法检测TGF-3β和HIF-1α mRNA表达水平，Western blot方法检测TGF-3β和HIF-1α蛋白表达水平．结果：与正常对照组相比，缺氧组的HIF-1α mRNA和蛋白表达增加，TGF-3β mRNA和蛋白表达也升高；与HIF—1α 正义组比较，HIF-1α反义组HIF-1α mRNA和蛋白表达降低，TGF-3β mRNA和蛋白表达也下降．结论：缺氧可以诱导滋养细胞TGF-3β表达，并且缺氧对TGF-3β表达的诱导作用可能通过HIF-1调控．     

Up-regulation of HIF-1α and VEGF Expression by Elevated Glucose Concentration and Hypoxia in Cultured Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Summary： In order to explore the effect of high glucose concentration and high glucose concentration with hypoxia on the production of hypoxia-inducible factor-1α （HIF-1α） and vascular endothelial growth factor （VEGF）, human RPE cells were cultured in 5,56 mmol/L glucose （control group）, 5.56 mmol/L glucose with 150 !a mol/L COCl2 （hypoxic group）, 25 mmol/L glucose （high glucose group） and 25 mmol/L glucose with 150 μmol/L COCl2 （combination group）. RT-PCR was used to detect the expression of HIF-1α and VEGF mRNAs. Western blot analysis was used to measure the levels of HIF-1α and VEGF proteins. Although the small amount of HIF-1α protein was able to be detected in high glucose group but not in control group, there was no significant difference between the expression of HIF-1α mRNA of RPE cells in high glucose group and that of RPE cells in control group. As compared with RPE cells in control group, the mRNA expression and the protein synthesis of VEGF in high glucose group were up-regulated. As compared with RPE cells in hypoxic group, the expression of HIF-1α mRNA of RPE cells in combination group was not different, but the protein synthesis of HIF-1α, the mRNA expression and the protein synthesis of VEGF were more obviously up-regulated. In conclusion, high concentration glucose mainly influence the protein synthesis of HIF-1α of RPE cell, and HIF-1α protein is able to be accumulated in high concentration glucose. Under hypoxia, the HIF-1α protein induced by high concentration glucose is more stable, and the expression of VEGF is obviously increased. It is suggested that high concentration glucose may play a role in retinal neovascularization, especially at ischemia stage of diabetic retinopathy.     

Construction of Eukaryotic Expression Vector of Human CC10 Gene and Expression of CC10 Protein in Lung Adenocarcinoma A549 Cell Line

Summary： A mammalian expression plasmid pcDNA3. 1-hCC10 was constructed and identified, then CC10 protein expression in A549 lung cancer cell line was detected. A 273 bp cDNA fragment was amplified from the total RNA of normal lung tissue by using RT-PCR and cloned into expression plasmid cDNA3. 1, and the recombinant plasmid was identified by employing double digestion restriction enzymes HindⅢ and BanH 1 and the cDNA sequence was assayed by the Sanger dideoxymediated chain termination method. The segment was then transfected into the A549 lung cancer cell line. The protein expression of CC10 was detected by immunofluorescence and Western blot. Our results showed that the cDNA fragment included the entire coding region （273 bp）. The re combinant eukaryotic cell expression vector of pcDNA3. 1-hCC10 was successfully constructed, and the sequence of the insert was identical to the published sequence. A549 cells line transfected with the pcDNA3. 1-hCC10 expressed high level of CC10 protein. The recombinant plasmid cDNA3. 1- hCC10 may serve as an effecnve tool for the study of tumorogenesis and tumor treatment.     

重铬酸钾对人肺腺癌A549细胞hMGMT蛋白表达的影响

目的:研究不同浓度重铬酸钾(K2Cr2O7)对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制效应以及对O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(hMGMT)蛋白表达的影响.方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定9种不同浓度K2Cr2O7,(0.000、0.010、0.040、0.160、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000.μmol/L)对A549细胞的增殖抑制率;用损伤修复试验观察在不同浓度K2Cr2O7,作用下人肺腺癌A549细胞的划痕修复情况;以β-actin为参照,应用Western blotting技术检测不同浓度K2Cr2O7,对人肺腺癌A549细胞hMGMT表达的影响.结果:MTT比色法检测显示,大于0.625μmol/L浓度组K2Cr2O7,可抑制细胞活性,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).损伤修复试验显示,与空白对照组比较,0.625、1.250.2.500和5.000 μmoL/L的K2Cr2O7,抑制细胞损伤修复,而0.312、0.160、0.040μzmoL/L的K2Cr2O7促进细胞损伤修复.Western blotting显示,0.312、0.160、0.040 μmoL/L的K2Cr2O7对hMGMT蛋白的表达具有促进作用,0.625、1.250、2.500和5.000 μmoL/L的K2Cr2O7,对hMGMT蛋白的表达具有抑制作用.结论:低浓度的K2Cr2O7,对人肺腺癌A549细胞的增殖、损伤修复和hMGMT蛋白的表达呈现低剂量兴奋效应;高浓度K2Cr2O7,对hMGMT蛋白的表达则呈现抑制作用.     

人肺腺癌A549细胞系多重抗药性的形成

本文采用阿霉素逐步诱导人肺腺癌Ａ５４９细胞系，在体外持续培养６个月，获得了具有抗药性的Ａ５４９／Ｒ２细胞，该细胞能在０．２μｇ／ｍｌ ＡＤＭ下持续增殖。通过测定抗癌药物作用的５０％抑制浓度发现，Ａ５４９／Ｒ２细胞对ＡＤＭ的抗药性为Ａ５４９的７－１１８倍，同时对表阿霉素、长春新碱、足叶乙甙（ＶＰ－１６）也具有显著抗药性，对氮芥、丝裂霉素和卡铂低度抗药、对５－氟脲嘧啶、氨甲喋呤和平阳霉素无抗药性。Ａ５     

Expression and Clinical Implication of HIF-1α and VEGF-C in Non-small Cell Lung Cancer

To study the expression and implication of HIF-1α and VEGF-C in non-small cell lung cancer （NSCLC） and its relationship with clinical pathological features of NSCLC, immunohisto-chemical SP was used to detect the expression of HIF-1α and VEGF-C proteins in 48 NSCLC tissues and the same para-cancerous tissues. The positive rates of HIF-1α and VEGF-C were 70.8% （34/48） and 68.8% （33/48） respectively. The expression of HIF-1α protein was detected in a significantly greater proportion in NSCLC carcinoma tissues than that in para-cancerous tissues （12.5% and 16.7%, P〈0.05）. The positive rates of HIF-1α and VEGF-C were correlated with lymph node metastasis and TNM stage. No relationship was found between the two factors and age, sex, pathological subtypes and histological grades. The positive rates between HIF-1α and VEGF-C were correlated （P〈0.05）. HIF-1α and VEGF-C were over-expressed in NSCLC. They may be involved in the carcinogenesis of NSCLC, and play an important role in invasion and metastasis of NSCLC. HIF-1α and VEGF-C work synergically in the process of NSCLC.     

FHL1对肺腺癌细胞株A549生物学特性的影响

 目的 研究FHL1的表达对人肺腺癌细胞株A549生物学特征的影响。方法 以FHL1 mRNA及shRNA慢病毒载体转染肺腺癌细胞株A549,并采用Western blot及RT-PCR法筛选检测稳定过表达FHL1肺腺癌细胞株模型及低表达细胞株模型;运用CCK-8实验、Transwell实验、流式细胞仪、细胞集落形成实验等方法对其增殖、侵袭、凋亡及锚定非依赖性生长生物学特性进行检测评估。结果 FHL1稳定过表达及低表达组的Western blot及RT-PCR法检测显示病毒转染效果可靠稳定;CCK-8实验提示低表达组的细胞增殖情况明显高于过表达组及空白组(P=0.002 2);流式细胞仪检测提示过表达组的细胞总体凋亡率为50.48%,明显高于两个低表达组(16.41%、20.12%)及空白对照组(25.90%),差异有统计学意义(P<0.001);Transwell实验提示过表达组细胞表现出的侵袭性明显低于低表达组及空白组差异有统计学意义(P<0.001);成集落实验显示过表达组细胞株形成的集落数为28.7±6.0,明显少于两个低表达组(157.0±6.4、150.7±9.5),差异有统计学意义(P<0.001)。结论 稳定过表达FHL1肺腺癌细胞株A549模型及低表达模型构建成功。FHL1的表达对于肺腺癌细胞株A549的增殖、侵袭及转移均有抑制作用,并能够诱导其加速凋亡。     

人肺腺癌细胞A549对蜱媒脑炎病毒的易感性分析

目的 研究蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)在易感细胞中的培养特性,为抗病毒药物的筛选研究提供合适的细胞模型。方法 qRT-PCR检测TBEV在Vero细胞内RNA复制,蛋白质印迹检测病毒蛋白表达。显微镜下观察TBEV感染A549细胞的病变。免疫荧光检测TBEV感染A549、Vero细胞内病毒包膜蛋白的表达。空斑实验检测TBEV在A549和Vero细胞内的滴度。结果 同TBEV孵育48 h相比,孵育72 h的Vero细胞内TBEV RNA水平升高,并检测到TBEV包膜蛋白的表达。Vero细胞培养的TBEV滴度为2×106 PFU/mL。TBEV感染A549细胞引起明显的细胞病变效应。包膜蛋白的表达水平在TBEV感染的A549细胞远高于Vero细胞。同Vero细胞相比,TBEV感染A549细胞上清内的病毒滴度升高(P<0.05)。结论 Vero细胞可用于培养TBEV,A549细胞对TBEV更易感。     

沉默lncRNA-UCA1对乏氧诱导NSCLC细胞A549放射抵抗的作用机制

目的探究沉默长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(lncRNA-UCA1)对乏氧诱导的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549放射抵抗的作用机制。 方法选取NSCLC细胞A549及人正常支气管上皮细胞HBE,平板克隆实验、qRT-PCR分别检测不同NSCLC细胞在常氧和乏氧状态下对放射的敏感性及lncRNA-UCA1的表达水平。将A549细胞实验分为si-NC组(未干预)及si-RNA组(转染lncRNA-UCA1)。流式细胞术检测乏氧状态下两组细胞放射敏感性、细胞分期和凋亡率。裸鼠成瘤实验检测乏氧状态下两组裸鼠成瘤能力。Western blotting检测两组B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、磷酸化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(p-Akt)及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)含量。 结果A549细胞放射敏感性显著高于HBE;乏氧状态下A549细胞lncRNA-UCA1表达水平显著高于常氧状态。沉默lncRNA-UCA1可以逆转放射诱导的周期阻滞,诱导细胞凋亡。与si-NC组比较,si-RNA组肿瘤增殖变慢,肿瘤体积变小,p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白含量显著下调,BAX蛋白含量显著上调。 结论沉默lncRNA-UCA1能激活Akt/mTOR通路抑制NSCLC A549细胞的放射抵抗,增加其放射治疗敏感性。     

5-氮杂-2＇-脱氧胞苷对人肺腺癌A549细胞株的生长抑制作用

目的：探讨5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-Aza-dC）对人肺腺癌A549细胞株的抑制作用及其机制。方法：采用四甲基偶氮噻唑氮蓝（MTT）法测定5-Aza-dC对A549细胞生长的影响;考马斯亮蓝G-250染色法测定5-Aza-dC作用后A549细胞蛋白质含量;Hoechst 33258荧光染色检测A549细胞凋亡和形态改变。结果：40～100μg/mL 5-Aza-dC对A549细胞的增殖有明显抑制作用,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,并具有明显的时效和量效关系,同时蛋白质相对含量下降。60～100μg/mL 5-Aza-dC作用后A549细胞出现明显形态改变且凋亡增加。结论：5-Aza-dC对人肺腺癌A549细胞的生长具有抑制作用,并引起蛋白质相对含量明显下降和细胞凋亡,其机制可能与阻滞细胞周期,蛋白质功能改变及诱导细胞凋亡有关。     

Survivin与VEGF基因反义寡核苷酸联合应用人肺腺癌A549细胞作用研究

目的：探讨脂质体介导的血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）与生存素（Survivin）基因反义寡核苷酸联合应用对人肺腺癌细胞系A549生长的影响。方法：构建 VEGF 与 Survivin基因反义寡核苷酸,以脂质体转染人肺腺癌A549细胞。实验分为对照组、脂质体对照组、VEGF反义转染组（VEGF ASODN组）、Survivin反义转染组（Survivin ASODN组）、联合转染组（VEGF ASODN+Survivin ASODN组）。采用RT-PCR检测VEGF与Survivin基因表达;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡、检测VEGF与Survivin蛋白表达;MTT观测细胞生长;平板集落实验分析细胞增殖克隆能力。结果：脂质体介导的VEGF与Survivin基因反义寡核苷酸联合转染组A549细胞存活率和增殖克隆能力明显低于其余组,差异有统计学意义（P=0.043,P=0.049,P=0.038,P=0.023）。流式细胞仪分析显示联合转染组细胞周期被阻滞,Survivin蛋白表达低于其余组,与对照组差异有统计学意义（P=0.017,P=0.002）,VEGF蛋白表达低于其余组,与对照组差异有统计学意义（P=0.013,P=0.003）。RT-PCR检测结果显示联合转染组VEGF与Survivin基因表达低于其余组。结论：VEGF与Survivin基因反义寡核苷酸联合应用抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,延长细胞周期,抑制 VEGF与Survivin基因表达。为后续的动物实验打下了理论依据。