人白细胞介素—6受体cDNA的克隆

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术座人的外周血单个核细胞中扩增出人ＩＬ－６受体的特异性ｃＤＮＡ片段，经琼脂糖电泳证实扩增片段大约为１４００碱基对。运用ＤＮＡ重组技术，将获得的片段连接到ｐＵＣ１８质粒中，经转化，筛选，酶切鉴定构建出重组质粒ｐＵＣＩＬ－６受体。     

可溶性白细胞介素—6受体基因的扩增,克隆及序列分析

从Ｈｅｌａ细胞中提取总ＲＮＡ，以此总ＲＮＡ为模板，应用反转录ＰＣＲ方法扩增可溶性白细胞介素－６受体基因，把得到的基因片段重组到质粒ＰＵＣ１９上，经转化、筛选和鉴定得到含有可溶性白细胞介素－６受体基因的克隆。测定其全部９９９ｂｐ核苷酸顺序，测出的核苷酸顺序与文献报道的顺序有二处不同，据此推导出的氨基酸顺序有二处变化。     

应用RT—PCR技术克隆人白细胞介素6的cDNA

0引言人白细胞介素6（11。－6）是一种由212个氨基酸组成的多功能细胞因子「‘’，我们应用反转录一聚合酶链反应（RT－P（二）的方法，成功地从人Hel。a细胞中克隆了11。－6的CDNA，为后续的表达奠定了基础．l材料和方法1．l材料人Hel。a细胞系购自中科院细胞生物所；pUC19及JM103为本实验室保存；Taq聚合酶、AMV反转录酶、T4ljNA连接酶及MagicPCR纯化试剂盒为Promega产品；重组a干扰素和DMEM培养基为GIBCO产品；内切酶为华美公司产品；PCRdl物PI：5’CGGAATTCATGC－CAGlxACCCCCAGGAG3’pZ：5’（7G（iGATCC…     

人白细胞介素17cDNA的克隆及表达

目的 获取重组的人白细胞介素17以进行科学研究和应用。方法 应用RT－PCR的方法，从经PHA活化的人外周血单个核细胞中扩增hIL-17cDNA的编码序列，将其克隆至测序载体pBS SKⅡ（ ）中进行测序，再将其亚克隆至表达载体pBV220中，在大肠杆菌XL1－Blue中进行表达。结果 克隆获得了hIL-17cDNA，经热诱导后使hIL-17蛋白在大肠杆菌中的表达量达到了39．7％。结论 通过克隆hIL-17cDNA的编码序列及热诱导使hIL-17蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。     

精神分裂症患者血清白细胞介素6及可溶性白细胞介素2受体浓 …

目的：探讨免疫机制在精神分裂症（Ｓｃｈ）发病过程中所起的作用及不同亚型间的免疫功能差异。方法：用ＥＬＩＳＡ法对３９例Ｓｃｈ病人（其中Ⅰ型２０例,Ⅱ型１９例）的血清白细胞介素６（ＩＬ－６）及可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）浓度进行检测,并与１７例健康者作对照。结果：Ｓｃｈ病 清白细胞介素６及可溶性白细胞介素２受体浓度明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。Ⅰ、Ⅱ型Ｓｃｈ病人血清ＩＬ－６浓度有统计学意义     

白细胞介素4受体和哮喘

Th1/Th2亚群的失衡可能是哮喘发病的主要机制。本文主要对在哮喘发病过程中起主要作用的Th2型细胞因子IL-4及其受体的生物学作用及其与哮喘的关系作一综述。对IL-4及其受体的研究，不仅使我们深入了解过敏性疾病。自身免疫性疾病和感染性疾病的发病机制，而且为治疗这类疾病提供了一个新的思路。     

RT－PCR制备人IL－3 cDNA的改进

ＲＴ－ＰＣＲ制备人ＩＬ－３ｃＤＮＡ的改进Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｎｔｈｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｈ－ＩＬ－３ｃＤＮＡｂｙＲＴ－ＰＣＲ￥／／陈鸿书，曹廷兵，姚家慧，陈嵩（重庆第三军医大学基础部基因工程实验室）重庆，６３００３８人白细胞介素－３（ｈ－Ｉ...     

人可溶性白细胞介素—6受体基因在昆虫细胞内的克隆与表达

目的：在昆虫细胞中表达人可溶性白细胞介素－6受体（sIL-6R)基因。方法：将人sIL-6R cDNA克隆至杆状病毒转移载体pAcGP67B中,再将重 组转移载体质粒与野生病毒AcNPV DNA共转染昆虫细胞sf9;经同源重组后,以终点稀释和斑点杂交法筛选重组杆状病毒;采用空斑分析法纯化重组的病毒,然后以纯化的重组病毒感染昆虫细胞Sf9。结果：斑点杂交实验证实,纯化得到的重组病毒含有人sIL-6R基因,SDS－PAGE结果显示,表达产物sIL-6R相对分子质量为47000左右,Western blot和受体配基结合实验表明,表达产物具有与其配基特异性地结合的能力,结论,杆状病毒－昆虫细胞能分泌表达sIL-6R,表达产物具有免疫活性和生物活性。     

IGF－I受体cDNA的克隆及序列分析

ＩＧＦ－Ｉ受体在心血管病及肿瘤的发病过程中具有重要作用。本文应用逆转录—聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，克隆了人胎肝组织中ＩＧＦ－Ｉ受体的β亚基ｃＤＮＡ，并对这一ｃＤＮＡ进行了亚克隆和序列分析。本工作为进一步探讨ＩＧＦ－Ｉ受体在动脉粥样硬化、心肌肥厚以及肝癌中的作用奠定了基础。     

肺癌患者血清可溶性白细胞介素6受体含量观察

目的探讨可溶性白细胞介素６受体（ｓＩＬ－６Ｒ）在肺癌免疫机制中的作用及临床意义。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测２１例肺癌患者和２０例正常对照者的血清ｓＩＬ－６Ｒ水平。结果肺癌组患者血清ｓＩＬ－６Ｒ水平（７８．２±２２．１ｎｇ／ｍｌ）明显高于健康对照组（３６．０±１５．０ｎｇ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１）。肺癌Ⅰ～Ⅱ期者血清ｓＩＬ－６Ｒ水平（６５．６±１８．３ｎｇ／ｍｌ）明显低于Ⅲ～Ⅳ期者（９０．２±２６．６ｎｇ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１）。肺癌化疗后血清ｓＩＬ－６Ｒ水平较化疗前下降,但差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ｓＩＬ－６Ｒ参与肺癌的发生和发展。测定肺癌患者血清中可溶性白细胞介素６受体水平,对肺癌的病情监测有一定价值     

人自然杀伤细胞抑制性受体P58.2基因克隆与鉴定

目的：P58．2基因克隆与鉴定。方法：采用RT—PCR技术，从正常人外周血单个核细胞中扩增自然杀伤细胞抑制性受体P58．2基因全长cDNA，经酶切后构建重组克隆载体，双酶切和测序鉴定。结果：RT—PCR获得了预期的扩增产物P58．2全长cDNA，成功构建了pSPORT1-P58．2重组克隆载体，酶切、酶谱分析与预期结果相符。DNA测序结果与GenBank登记的人P58．2cDNA全长碱基序列一致。结论：pSPORT1-P58．2重组克隆载体构建成功；P58．2基因序列与文献报道一致，为下一步构建表达载体和基因转染等工作打下良好的基础。     

慢性病毒性肝炎及肝硬化患者白细胞介素4和白细胞介素6含量的研究

为了探讨慢性病毒性肝炎的发病机理，应用ELISA方法分别对75例慢性过延性肝炎、慢性活动性肝炎、慢性重症肝炎、肝炎后肝硬化患者血清白细胞介素4（IL—4）、白细胞介素6（IL－6）含量进行了检测，同时探讨了IL—6含量变化与血清胆红素水平及凝血酶原活动度的关系，结果表明，各级病人血清IL－4含量与对照组比较无明显差别（P＞0．05）；各组病人中IL－6含量与对照组比较明显升高（P＜0．01），以慢性重症肝炎为最高，说明IL－6在慢性肝炎的发生发展中起一定作用；该组病人共75例，其中IL－6水平与血清胆红素水平呈明显正相关，与凝血酶原活动度（FTA）呈明显负相关，提示IL－6可以反映肝细胞坏死程度，可以做为判断肝脏功能的又一实验室指标。     

洛伐他汀对慢性肾脏病患者尿白细胞介素-6的影响

目的观察洛伐他汀对慢性肾脏病(CKD)患者尿白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨他汀类药物对肾脏的保护作用.方法将血脂正常的CKD患者89例随机分成两组,治疗组在综合治疗的基础上口服洛伐他汀(20～40mg/d),对照组维持综合治疗,疗程为6个月.观察治疗前后尿IL-6的变化.结果治疗组尿IL-6显著下降(P＜0.05),肾功能改善,血脂无明显变化;对照组各指标无明显变化.结论洛伐他汀有非降脂的肾保护作用,改善肾功能.     

老年人可溶性白细胞介素-2受体和白细胞介素-6的研究

本文对老年人血清中可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)浓度、外周血单个核细胞(PBMC)经 PHA 刺激后白细胞介素-6(IL-6)产生和增殖能力做了研究;同时检测了血清中免疫球蛋白和 C_3含量。结果显示,老年人血清 SIL-2R水平(878.57±256.54U/ml)比青年人 SIL2R 水平(583.65±171.29U/ml)显著升高(P<0.05),IL-6产生能力也显著升高(P<0.001),而老年人淋巴细胞增殖反应明显降低(P<0.001)。老年人血清中免疫球蛋白浓度与青年人相比,IgG 无显著差异(P>0.05);IgM、IgA 均显著升高(P<0.001;P<0.01)。老年人血清中 C_3浓度比青年人明显升高(P<0.001)。这些结果提示,老年人的细胞免疫和体液免疫功能均有改变。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF THE DETERMINATION OF SOLUBLE INTERLEUKIN－2 RECEPTOR IN PATIENTS WITH THYROID DISORDERS

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＴＨＥＤＥＴＥＲＭＩＮＡＴＩＯＮＯＦＳＯＬＵＢＬＥＩＮＴＥＲＬＥＵＫＩＮ－２ＲＥＣＥＰＴＯＲＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＴＨＹＲＯＩＤＤＩＳＯＲＤＥＲＳＷａｎｇＤｅｑｕａｎ（王德全）ＷａｎｇＸｉｕｗｅｎ（王...     

白细胞介素-1 5对嗜中性粒细胞非特异性免疫功能的影响

目的 :探讨白细胞介素 15对嗜中性粒细胞非特异性免疫功能的影响。方法 :以不同浓度IL - 15预处理人外周血嗜中性粒细胞 ,然后检测其各噬能力、杀菌活性的变化 ,同时检测其受LPS刺激的产生活性氧、合成分泌NO及IL - 8的情况。结果 :IL - 15可明显提高PMN的吞噬、杀菌活性 ,并调高PMN受LPS刺激后NO和IL - 8的产量 (P <0 .0 5 ) ;但活性氧的产量无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论 :IL - 15可增强PMN的非特异性免疫功能 ,是一种重要的天然免疫作用分子。     

IL-6及其受体mRNA在胃癌发生发展中的表达及意义

目的：观察白细胞介素6（interleukin-6,IL-6)及白细胞介素－6受体（IL－6receptor,IL-6R)在胃正常粘膜，癌前病变，早期胃癌，进展期胃癌中的表达，探讨它们与癌发生发展的关系及临床意义。方法：应用原位杂交技术检测91例不同胃粘膜标本中IL－6及其受体mRNA表达情况，其中正常粘膜20例，慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生和（或）肠上皮化生20例，早期胃癌25例，进展期胃癌26例，结果：IL－6 mRNA在正常粘膜，癌前病变，早期胃癌，进展期胃癌中的阳性表达率分别为10％，55％，84％，84．6％，IL－6受体mRNA在胃粘膜不同病变中的阳性表达率分别为10％，50％，80％，88．4％，IL－6及其受体mRNA在正常粘膜中的表达明显低于癌前病变（P＜0．05），IL－6及其受体mRNA在癌前病变中的表达明显低于早期胃癌（P＜0．05），而早期胃癌中的IL－6及其受体mRNA的表达与进展期胃癌无明显差异（P＞0．05），结论：IL－6及其受体与胃癌的发生发展有着密切关系。     

食管癌、胃癌组织的低密度脂蛋白受体分析

以１２５Ⅰ－ＬＤＬ为配体对食管癌、胃癌及其相应的正常组织进行了ＬＤＬ受体水平的测定，同时分析了各组织中蛋白质、ＤＮＡ的含量，以探讨食管癌和胃癌发生与ＬＤＬ代谢之间的关系。结果显示，癌组织和正常组织的ＬＤＬ受体亲和性差异无显著性，但癌变组织的蛋白质、ＤＮＡ和ＬＤＬ受体水平均明显高于相应正常组织。癌细胞需要大量的胆固醇满足其有丝分裂，细胞通过受体升高机制使ＬＤＬＲ增多，以增加对ＬＤＬ的摄取和利用。     

肺癌患者化疗前后血清sIL-6R测定的临床意义

目的 :通过检测肺癌患者化疗前、后血清中sIL - 6R水平 ,探索化疗前、后sIL - 6R在肺癌患者体内变化的规律 ,为评价疗效、判断预后寻找一个客观指标。方法 :健康对照组 2 0例 ,肺癌患者 2 0例 ,分别抽取空腹血 ,肺癌患者分别于化疗前、后抽血离心后 ,留取血清 ,用ELISA方法检测。结果 :对照组血清sIL - 6R水平为 4 6 .83± 6 .70 μg/L ;肺癌组化疗前、后血清sIL - 6R水平分别为 6 6 .2 0± 9.33μg/L和 2 8.90± 8.6 μg/L。经配对t检验 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 :肺癌患者体内存在着sIL - 6R的异常表达。化疗前后血清sIL - 6R水平低于化疗前 ,而且低于对照组 ,提示化疗药物不但抑制了肿瘤细胞的增殖和生长 ,而且也抑制了人体的免疫系统 ,sIL - 6R与肺癌的发生、发展和转归密切相关。