癸酸缓释颗粒对玫瑰孢链霉菌发酵产达托霉素的影响

以玫瑰孢链霉菌NTF206发酵生产达托霉素(1),考察了癸酸缓释颗粒对其产量的影响.采用正交试验设计优化了癸酸缓释颗粒配方,较优组合为癸酸10％,硬脂酸1.0％,聚乙二醇1.5％,琼脂粉1.2％.在此基础上优化癸酸缓释颗粒补加工艺为:初始补加时间36 h,每次补加浓度为4.8 ml/L,补加周期36 h,最终1效价达121.8 mg/L,比对照组提高了79％,补加次数比对照组减少了50％.     

达托霉素的菌种选育及补料发酵工艺

通过对玫瑰孢链霉菌SIPI-U-16进行亚硝基胍(NTG)诱变以及二甲基硫(DMS)结合链霉素抗性筛选,获得突变株SIPI-D-267,达托霉素产量为520 mg/L.优化了菌株SIPI-D-267发酵过程中癸酸的添加量,结果显示,在5L小罐中培养48 h后,以2.0 ml·(h·L)-1的速度流加癸酸-油酸甲酯(1:1),达托霉素产量提高到1 680 mg/L.     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论 紫外、微波及LiCl复合诱变后经抗生素抗性筛选,结合发酵培养基优化,可有效提高菌株的达托霉素发酵产量。     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论     

组合抗性筛选法选育达托霉素高产菌株

目的利用组合抗性筛选法选育达托霉素高产菌株。方法以玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus ATCC 11379)为出发菌株,通过在不同浓度梯度的达托霉素和链霉素复合抗性平板上进行抗性筛选。结果筛选到一株高产达托霉素的突变株D1000-S3-2,经摇瓶发酵验证达托霉素发酵单位可达59mg/L,比出发菌株提高了63.8%。结论实验证明组合抗性筛选是一种简单高效筛选方法。     

玫瑰孢链霉菌基因组挖掘研究进展

玫瑰孢链霉菌是重要抗生素达托霉素的产生菌。基因组挖掘发现该菌具有丰富的次级代谢产物合成潜力,激活沉默次级代谢产物生物合成基因簇,发现了10多种具有多种生物活性的次级代谢产物。本文回顾了玫瑰孢链霉菌次级代谢产物的研究进展,以及激活这些沉默生物合成基因簇的研究策略。这些研究为其他链霉菌基因组挖掘提供了有效的思路和方法学参考。     

玫瑰孢链霉菌基因组挖掘研究进展

Streptomyces roseosporus is an important industrial producer of the first line antibiotic daptomycin. Genome mining has revealed a large cryptic secondary metabolism gene clusters. Several activation strategies have been applied to this strain and allowed the identification of over 10 secondary metabolites. This paper focuses on recent advances in the strategies for activating cryptic gene cluster in S. roseosporus by genomics     

补加葡萄糖对始旋链霉菌发酵生产普那霉素的影响

在摇瓶及5L发酵罐中研究了补加葡萄糖对始旋链霉菌（Streptomyces pristinaespiralis）XC416发酵生产普那霉素的影响。摇瓶发酵结果表明，初始葡萄糖浓度以40g／L为宜，通过在对数生长期补加20g／L的葡萄糖可以使生物量增加23％～31％，普那霉素的产量可以提高20％～36％；在稳定期补加20s／L的葡萄糖虽然对生物量影响不大，但能显著提高菌体合成抗生素的能力，使普那霉素的产量提高56％～76％；而在对数生长期中后期和稳定期前期分两次各补加10g／L的葡萄糖，则能使普那霉紊的产量提高1．92倍。5L发酵罐补料分批发酵结果表明，在对数生长期和抗生素合成的初期分三次共流加36g／L葡萄糖不仅有效地延长了抗生素的合成期，还提高了菌体合成抗生紊的能力及产物得率．最终使普那霉紊的产量提高1．02倍。     

七尾霉素的研究 1 玫瑰链霉菌高产菌株的筛选

玫瑰链霉菌能登亚种OS-3966(Streptomyces rosa subsp.notoensis OS-3966)经紫外线和亚硝基胍处理,研究了变株产生七尾霉素能力的变化。利用紫外线和咖啡因复合诱变处理母株,筛得了500-90-1,500-90-5,500-150-1和500-120-1等高产变株,七尾霉素的产量比母株提高了近3倍,其产物组分与母株相同。同时观察了这些变株在各种培养基上的培养特征。     

毒三素链霉菌生产利普司他汀的发酵与提取工艺

研究了以豆油为主要碳源和能源的培养基中毒三素链霉菌的发酵代谢特性。在考察了乳化剂、温度等因素对利普司他汀生产的影响后，发现前期降低温度有利于保持菌种后期生产能力。最终变温发酵利普司他汀的产量达1．32g／L，比28℃恒温发酵提高了62％。并使用丙酮萃取与超声破碎细胞、乙酸乙酯萃取利普司他汀的提取工艺，简化了匀浆过程，提取效率为甲醇提取的3倍。     

达托霉素发酵培养基的响应面法优化

采用Plackett-Bumaan设计、最陡爬坡试验与响应面设计相结合的方法优化达托霉素发酵培养基组成,利用Design Expert 7.0软件设计试验并分析数据.结果表明,培养基中的糊精、酵母粉、酪蛋白水解物是影响达托霉素产量的主要因素.优化后的培养基组成/g·L~(-1)为:糊精10.6,酵母粉1.6,酪蛋白水解物1.3,硫酸钾8,L-门冬氨酸1.5;pH 6.5.在此条件下,达托霉素产量为37.16 me,/L.进一步优化前体癸酸的添加量,最终达托霉素产量达46.54 mg/L.     

吸水链霉菌NND-52产尼日利亚菌素发酵条件的改进

通过正交实验和单因子实验对吸水链霉菌NND－52产尼日利亚菌素的发酵条件进行了研究。确定最佳培养基组分（％）为葡萄糖1．5、淀粉5、酵母膏0．5、NaCl0．2、黄豆粉0．3，含Na2MoO4 5mmol/L，装液量50ml/250ml,接种量10％，发酵时间96h，可使菌体在每毫升培养液中产尼日利亚菌素318μg，比原配方提高了150％。     

阿弗菌素链霉菌突变株AV-m-481发酵产物的研究

高产菌株Streptomyces avermitilis AV-h-169用亚硝基胍进行处理后得到了一不产阿弗菌素的突变株AV-m-481，从该突变株的发酵产物中分离纯化出化合物AV-L-1和AV-L-2。质谱和核磁共振谱等测定表明它们分别为阿弗菌素A1a和A2a的糖苷配基。     

达托霉素前体脱酰酶产生菌的筛选

筛选得到一株对达托霉素前体具有脱酰基转化作用的游动放线菌（Actinoplanes sp．HCCB10085），经试验得到其产生脱酰基酶的最佳培养条件为pH7．0、28℃培养60-90h；菌体对达托霉素前体的最佳转化条件为pH7．0、35℃。