高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(VEGFR1和VEGFR2)表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的关系。方法新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7d、14d和21d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似"新型"BPD的病理改变。75%氧暴露21d时,VEGF(10.9±2.7vs30.8±6.4)、VEGFR1(5.4±1.4vs15.6±3.4)和VEGFR2(11.3±2.6vs21.7±4.5)的蛋白表达均较对照组减少(P<0.05);VEGF(1.6vs3.3)、VEGFR1(0.4vs6.6)及VEGFR2(0.5vs4.9)的mRNA表达均较对照组减少(P<0.05)。结论在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。     

持续高氧暴露降低新生大鼠肺组织血管内皮生长因子的表达

目的：高氧肺损伤是导致支气管肺发育不良(BPD)的最常见原因。血管内皮生长因子(VEGF)在新生肺中具有促进内皮细胞增殖、分化、诱导血管发生的作用。本研究动态观察高氧暴露对新生鼠肺组织VEGF表达的影响,探讨BPD的发生机制。方法：新生Wistar大鼠出生后随机分为空气组和高氧组(均n=30)。高氧组在生后12h内开始,予以持续吸入95%氧气。分别于生后1、2、3、7、14、21d各处死5只大鼠,留取肺组织标本。苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF蛋白表达,原位杂交方法检测VEGFmRNA表达。结果以切片视野灰度值表示,值越高说明蛋白或mRNA表达越少。结果：新生鼠高氧暴露7d后肺泡间隔减少,肺微血管发育异常,间质纤维化,且病变随高氧暴露时间延长而加重。高氧组大鼠第3,7天时肺组织VEGF蛋白表达明显低于相应空气对照组(81.9±0.8vs80.8±1.0,82.8±1.2vs79.2±1.6,均P<0.01)。VEGFmRNA表达亦显著减少(89.5±1.1vs88.0±1.0,91.1±1.5vs87.7±1.7,均P<0.001)。随着暴露时间的延长,VEGF蛋白和mRNA进行性降低,在高氧暴露14、21d时几乎检测不到VEGF蛋白和mRNA的表达。结论：高氧暴露抑制新生鼠肺VEGF的表达,这可能与高氧诱导BPD的发生有关。     

高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体（VEGFR1和VEGFR2）表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的关系。方法:新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12 h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7 d、14 d和21 d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似“新型”BPD的病理改变。75％氧暴露21 d时,VEGF（10.9±2.7 vs 30.8±6.4）、VEGFR1（5.4±1.4 vs 15.6±3.4）和VEGFR2（11.3±2.6 vs 21.7±4.5）的蛋白表达均较对照组减少（P<0.05）;VEGF（1.6 vs 3.3）、VEGFR1（0.4 vs 6.6）及VEGFR2（0.5 vs 4.9）的mRNA表达均较对照组减少（P<0.05）。结论:在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。［中国当代儿科杂志,2009,11（11）：927-930］     

新生大鼠高氧肺损伤血管内皮生长因子蛋白及其mRNA表达变化研究

目的：血管内皮生长因子（VEGF）参与肺的发育和损伤修复,VEGF具有促进肺泡和肺血管增殖以及预防新生儿支气管肺发育不良（BPD）的作用。该研究的目的是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达的变化。方法：新生Sprague-Dawley大鼠48只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧实验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用免疫组化法和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测新生大鼠3 d,7 d,14 d肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达变化。结果：空气对照组新生大鼠生后随着肺发育,肺组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达逐渐增加。高氧实验组新生鼠吸入高氧3 d,肺VEGF蛋白表达出现降低,在7 d,14 d明显降低与对照组比较差异有显著性（VEGF 蛋白:12.67±3.82 vs 7.79±5.23; 15.10±8.91 vs 5.85±3.37, 均P<0.01）;高氧实验组VEGF mRNA表达在3 d,7 d,14 d均明显低于对照组（VEGF mRNA: 1.19±0.63 vs 0.78±0.22, 1.52±0.47 vs 0.53±0.18, 1.89±0.81 vs 0.48±0.12, 均P<0.01）。结论：VEGF能促进新生大鼠肺发育,VEGF蛋白及VEGF mRNA表达与新生大鼠肺发育有密切关系。高氧可抑制VEGF蛋白及VEGF mRNA在新生大鼠肺内的表达,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机制中起重要作用。     

脂肪型脂肪酸结合蛋白在早产大鼠高氧肺损伤时的表达

目的 观察脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在早产大鼠高氧肺损伤时肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)中的表达,探讨其与新型支气管肺发育不良(BPD)发病机制之间的关系.方法 早产大鼠生后6 h 内随机分为高氧组和对照组,对照组置于常压空气中,高氧组置于浓度为60% 的高氧舱中,两组均于出生后第3 天(P3)、第7 天(P7)和第14 天(P14)各随机取8 只大鼠,采用免疫组织化学方法和逆转录-聚合酶链反应技术检测不同时间两组肺组织FABP4 蛋白及mRNA 表达水平,应用ELISA 方法检测BALF中FABP4 的含量.结果 FABP4 主要在肺泡巨噬细胞、支气管上皮细胞和血管内皮细胞表达.两组FABP4 蛋白和mRNA 在肺组织中的表达以及两组BALF 中FABP4 的含量均随鼠龄递增呈逐渐增加的趋势,至P14 时最高.高氧组肺组织中FABP4 mRNA 的表达在P7、P14,FABP4 蛋白的表达在P3、P7 及P14 时均高于对照组(均P<0.05);高氧组BALF 中FABP4 的含量在P7、P14 时均高于对照组(均P<0.05).结论 高氧肺损伤时FABP4 表达升高,可能是引起肺微血管发育障碍及肺泡化进程受阻,进而导致新型BPD 发生的重要因素.     

高氧致新生大鼠支气管肺发育不良肺成肌纤维细胞分布的变化及意义

目的 观察高氧致新生大鼠支气管肺发育不良(BPD)肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及胶原的变化,探讨高氧致新生大鼠BPD的发生与成肌纤维细胞的内在联系.方法 将新生大鼠持续暴露在85%高氧环境中,在实验的1、3、7、14、21 d,取左肺组织固定、脱水、石蜡包埋、切片,用于肺组织病理变化观察及α-SMA表达的免疫组织化学检测;右肺-80℃冰冻,用于Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白和mRNA表达检测.结果 新生大鼠长期高氧暴露可致肺泡简单化,肺泡数目减少,终末气腔扩张,次级隔数目减少,肺泡间隔显著增厚,出现纤维化.高氧暴露14和21 d时,α-SMA在肺泡间隔和肺泡表面表达显著增强,呈条素状分布;但空气组仅在次级间隔的顶端呈点状分布.随高氧暴露时间延长,Col Ⅰ表达增加,并且高氧组肺组织α-SMA表达与Col Ⅰ mRNA表达呈明显正相关(r=0.59,P< 0.05).结论 新生大鼠高氧暴露导致肺损伤符合早产儿BPD的病理改变,成肌纤维细胞分布紊乱可能在BPD的发病过程中起重要作用.     

高氧对新生大鼠肺血管发育及肺组织血管生成素1表达的影响

目的 观察持续吸入85％氧气对新生大鼠肺血管发育和肺组织血管生成素1(Ang-1)表达的影响,探讨高氧肺损伤新生大鼠的肺血管发育情况及可能的发生机制.方法 将96只新生SD大鼠在生后6h内,随机分为高氧组和空气组,高氧组将大鼠置于自制密闭氧箱,FiO2=0.85.在实验3、7、14d每组各随机取16只处死,采集标本.采用HE染色进行肺组织形态学分析,放射状肺泡计数评价肺泡化程度,肺动脉钡剂造影及肺动脉密度检测评价肺血管的发育,免疫组织化学法检测肺组织Ang-1的表达,荧光定量PCR和Western blot技术检测肺组织Ang-1的mRNA和蛋白表达水平.结果 (1)新生大鼠高氧暴露14 d,肺组织的病理表现与早产儿支气管肺发育不良(BPD)的病理表现相似.(2)高氧组7 d RAC值显著低于空气组[(10.55±0.13):(11.74 ±0.19),P＜0.05],在14d时差异更显著[(12.47±0.05):( 15.03±0.16),P＜0.01].(3)肺动脉钡剂造影显示,高氧组14 d大鼠肺动脉主干变细,肺小动脉显影减少,肺动脉密度显著低于空气组[(3.55±0.09):(6.03±0.16),P＜0.05].(4)免疫组化染色显示,高氧组7d和14 d,肺组织Ang-1的表达均显著低于同时间点空气组[ (4.27±0.34):(3.10 ±0.29),P＜0.05,(5.65±0.49)∶(3.21±0.28),P＜0.01].(5)荧光定量PCR及Western blot结果显示,高氧组7d和14 d,Ang-1的mRNA水平显著低于空气组[(0.85±0.14)∶(0.44±0.21),P＜0.05,(0.87±0.24)∶(0.24±0.05),P＜0.01],Ang-1的蛋白水平也显著低于空气组[(0.88±0.31)∶(0.41 ±0.12),P＜0.05,(0.90 ±0.29):(0.21 ±0.06),P＜0.01].结论 持续吸入高浓度氧导致新生大鼠的肺血管发育障碍,Ang-1的表达下调可能参与了早产儿BPD血管发育受阻的发生机制.     

持续吸入高体积分数氧对新生大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅳ型胶原信使核糖核酸表达的动态影响

目的 探讨新生大鼠持续吸入高体积分数氧(高氧)后肺组织病理学变化,以及肺组织Ⅰ型和Ⅳ型胶原mRNg表达的动态改变和在高氧致慢性肺疾病(CLD)发生中的作用.方法 足月新生大鼠出生12 h内,依据吸入氧体积分数的不同随机分为高氧组和空气对照组.分别于实验1、3、7、14、21 d,从2组中抽取5只,水合氯醛麻醉后取肺组织制备石蜡切片;行HE染色镜下观察肺组织病理变化;应用原位杂交方法检测其肺组织Ⅰ型和Ⅳ型胶原mRNA的动态表达和定位.采用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 高氧组早期出现炎性反应,7 d出现肺泡发育阻滞,最终形成纤维化.原位杂交光镜下可见,Ⅰ型胶原在新生大鼠肺组织中主要表达于肺泡上皮细胞和血管内皮细胞;与对照组比较7 d时在高氧组Ⅰ型胶原mRNA表达显著降低(P<0.05),14 d时差异更为显著(P<0.01);Ⅳ型胶原在新生大鼠肺组织中主要表达在血管内皮细胞,各时间点上2组Ⅳ型胶原mRNA表达水平比较无明显差异(Pa>0.05).结论 持续吸入高氧可引起新生大鼠肺发育受阻和肺间质纤维化等,与CLD相似改变,而Ⅰ型和Ⅳ型胶原mRNA表达水平与其蛋白的沉积不平行,提示此2型胶原的调节可能不是以转录水平为主.     

高体积分数氧暴露对早产大鼠肺p53和细胞周期调节基因表达的影响

目的 观察体积分数为600 mL/L氧暴露对早产大鼠肺肿瘤抑制蛋白p53和肺细胞周期调节基因(p21waf/cipl)表达的影响,探讨其与新型支气管肺发育不良(BPD)发病机制的关系.方法 孕21 d早产大鼠出生6 h内随机分为高体积分数氧(高氧)组和对照组.对照组置于常压空气中,高氧组置于氧体积分数为600 mL/L的氧舱中,二组均于胚胎19 d(E19)及出生第1、3、5、7天(P1、P3、P5、P7)各随机取8只早产大鼠,采用RT-PCR技术检测其肺组织肺p53和p21waf/cipl基因表达水平.采用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 1.对照组胎鼠及早产大鼠肺组织p53 mRNA的表达自出生后随鼠龄增加逐渐下降,至P5最低;高氧组胎鼠及早产大鼠p53 mRNA的表达在E19～P7均较高于对照组,P5和P7时与对照组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05).2.对照组胎鼠及早产大鼠肺组织p21waf/cipl mRNA的表达水平在E19～P7随鼠龄增加而升高,高氧组胎鼠及早产大鼠肺组织p21waf/cipl mRNA的表达在E19～P7均高于对照组,P5时二组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 600 mL/L氧暴露可通过调控p53及p21waf/cipl途径抑制肺组织细胞增殖,进而导致BPD的发生.     

Bax/Bcl-2在高体积分数氧致新生大鼠慢性肺疾病肺组织及成纤维细胞中的动态变化

目的 制备高体积分数氧(高氧)诱导新生大鼠慢性肺疾病(CLD)模型,探讨持续吸入高氧对新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 足月新生大鼠出生12 h内分别持续吸入氧体积分数为900 mL·L-1的高氧(高氧组)和空气(空气组),于3 d、7 d和14 d随机处死动物后,肺组织取材同时进行肺成纤维细胞的原代培养,应用免疫组织化学半定量法检测其Bax及Bcl-2蛋白水平变化.结果 在肺组织中,高氧组Bcl-2蛋白的表达水平在7 d、14 d有所升高(P<0.001),3 d时表达无变化(P>0.05);而高氧组Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值在3 d、7 d和14 d均明显高于空气组,且具有时间敏感性(Pa<0.01).在肺成纤维细胞,高氧组3 d、7 d Bcl-2蛋白表达水平无变化(P>0.05),14 d时有所增高(P<0.001),但不如Bax蛋白增加明显;高氧组3 d、7 d和14 d肺成纤维细胞Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值均明显高于空气组(Pa<0.01).结论 高氧可促进新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax蛋白的表达,从而通过上调Bax/Bcl-2比值促进凋亡发生,参与CLD的发生发展过程.     

布地奈德对宫内感染致支气管肺发育不良新生大鼠肺部血管发育及血管内皮生长因子、核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3表达的影响

目的:探究布地奈德(BUD)对宫内感染致支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠肺部血管发育及血管内皮生长因子(VEGF)和核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法:将孕15 d的SD大鼠分为对照组和感染组[0.35 mg/(kg·d)脂多糖腹腔注射],并将各组所产的新生大鼠分为BUD组(0.5 mg B...     

吸入高浓度氧对大鼠肺泡发育过程促红细胞生成素受体的影响

目的 探讨大鼠肺泡发育阶段促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)的动态变化以及吸入高浓度氧对EPOR的影响.方法 将48只新生Wistar大鼠生后12 h内随机分为空气组和高氧组.高氧组将动物置于自制密闭氧箱中,持续输入氧气,FiO2=0.85±0.02.在实验3,7和14 d每组随机选取8只处死,采集标本.采用HE染色观察肺组织病理改变,放射状肺泡计数评价肺泡化程度,免疫组织化学法检测肺组织血小板内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)及EPOR表达,PT-PCR及Western blot法检测肺组织EPOR基因和蛋白表达.结果 高氧组3 d时肺毛细血管扩张、充血,7 d时肺泡体积增大、数量减少,14 d时肺泡数量及毛细血管进一步减少.空气组RAC值随日龄增长而增加,与空气组相比,高氧组7 d时RAC值降低[(6.85±104):(7.33±1.0),P＜0.01],差异在14 d更显著[(6.20±1.58):(9.07±0.69),P＜0.001].空气组PECAM-1表达随日龄增长逐渐增强,高氧组7 d和14 d PECAM-1表达较空气组明显减弱[(15.14±1.51):(31.47±2.43),(11.04±1.76):(41.41±3.83),P＜0.001].空气组EPOR染色在生后3 d最强,随日龄增长逐渐减弱,与空气组相比,高氧组各时点EPOR表达均明显减弱[(1.62±0.04):(1.82±0.06),P＜0.05;(0.48±0.01):(1.10±0.07),(0.39±0.04):(0.87±0.03),P＜0.001].空气组EPOR mRNA表达在生后3 d最强,高氧组各时点EPOR mRNA表达较空气组明显减弱[(0.87±0.07):(1.1±0.17),(0.18±0.07):(0.36±0.08),P＜0.01;(0.14±0.05):(0.36±0.09),P＜0.001].结论 EPOR可能在正常肺泡发育过程发挥调节作用,吸入高浓度氧导致的肺泡及血管发育阻滞可能与EPOR及PECAM-1蛋白表达减弱有关.

Abstract：

Objective Oxygen toxicity is thought to be a major contributing factor in the pathogenesis ofbronchopulmonary dysplasia (BPD). Animal experiments reveal that erythropoietin (EPO) may have protective effects against hyperoxic lung injury, but the mechanisms remain unknown.The aim of this study was to evaluate effects of hyperoxia on erythropoietin receptor expression in lung development of neonatal rats.Methods Several litters of Wistar pups were pooled together within 12 hours after birth and randomly divided into two groups (n = 24 in each ): air-exposed control group and hyperoxia-exposed group. In hyperoxia-exposed group, the rats were exposed to 85% oxygen. Pups ( n = 8 ) from each group were sacrificed on postnatal days 3, 7, and 14.The pulmonary histologcal and morphometric changes were observed after hematoxylin-eosin (HE) staining under light microscope. Radical alveolar counts ( RAC )were compared between the two groups to evaluate the differences of aveolarization. Expressions of platelet endothelial cell adhesion molecule-1 ( PECAM-1 ) and erythropoietin receptor (EPOR) in lung tissue were measured by immunohistochemistry.Expressions of EPOR mRNA and EPOR protein were measured by RTPCR and Western blotting. Results In hyperoxia-exposed group, there were a few inflammatory cells infiltration in interstitium on day 3 and inflammatory response worsened on day 7. Alveolar and capillary hypoplasia and interstitial fibrosis were evident on day 14.RAC increased in air-exposed control group along with the age in days. RAC decreased from day 7 in hyperoxia-exposed group compared with air-exposed control group [( 6.85 ± 1.04 ) vs.( 7.33 ± 1.0 ), P ＜ 0.01], which was more evident on day 14 [( 6.20 ±1.58 ) vs.(9.07 ± 0.69 ), P ＜ 0.001].Expression of PECAM-1 protein increased in air-exposed control group along with the age in days.But in hyperoxia-exposed group, it decreased on day 7 and 14 [( 15.14 ±1.51) vs.(31.47 ±2.43),(11.04 ± 1.76)vs.(41.41 ±3.83),P＜0.001]compared with air-exposed control group.Expression of EPOR on day 3 in air-exposed control group was the strongest and weakened gradually with the increase of postnatal days.Expression of EPOR in hyperoxia-exposed group decreased on day 3 and became more evident on day 7 and day 14 compared with air-exposed control group [( 1.62 ±0.04) vs.(1.82±0.06), P＜0.05;(0.48 ±0.01)vs.(1.10±0.07), (0.39±0.04) vs.(0.87±0.03 ) ,P ＜0.001].Expression of EPOR mRNA on day 3 in air-exposed control group was the strongest and was decreased significantly in hyperoxia-exposed group compared with air-exposed control group at all time points [(0.87±0.07)vs.(1.1±0.17),(0.18±0.07)vs.(0.36±0.08),P＜0.01;(0.14±0.05)vs.(0.36 ± 0.09 ), P ＜ 0.001]. Conclusions EPOR may participate in the modulation of normal lung development.Depressed expression of EPOR and PECAM-1 may be involved in the pathogenesis of alveolar and capillary hypoplasia induced by hyperoxia.     

高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠肺泡II型上皮细胞超微结构的改变

目的 探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,新生鼠肺组织通透性及肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)超微结构的动态变化.方法 新生大鼠320只,依据吸氧体积分数(FiO2)分组:实验组1(FiO2 800 mL·L-1)、实验组2(FiO2 600 mL·L-1)、实验组3(FiO2 400 mL·L-1)、空气对照组(FiO2 210 mL·L-1).每组分别于实验1 d、3 d、5 d、7 d、14 d取 8只鼠,计算其肺湿/干质量比值(W/D);另取8只新生鼠行支气管肺泡灌洗,检测其支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白水平的动态变化; 透射电镜及硝酸镧示踪技术观察其AECⅡ超微结构及细胞膜通透性改变.结果 各实验组5 d、7 d、14 d肺W/D比值明显高于空气对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05),高氧3 d后实验组1与实验组2、实验组3的BALF中蛋白水平与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05);各实验组 7 d 内随暴露时间延长呈上升趋势;BALF 中蛋白水平在实验组3、实验组2、实验组1也呈逐渐增高趋势,且与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05).实验组AECⅡ的超微结构在出生后不同时间可以出现明显改变,且对硝酸镧颗粒通透性明显增加.结论 高氧肺损伤早期存在肺泡上皮通透性增加导致的肺水肿改变;新生鼠随着高氧暴露浓度的增高和时间的延长,肺损伤加重.     

高体积分数氧致慢性肺疾病新生大鼠肺组织血小板源性生长因子的动态表达

目的 探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,新生大鼠肺组织内血小板源性生长因子(PDGF)的动态变化.方法 新生Wistar大鼠320只.依据吸氧体积分数(FiO2)分为实验1组(FiO2=800 mL·L-1)、实验2组(FiO2=600 mL·L-1)、实验3组(FiO2=400 mL·L-1)及空气对照组(FiO2=210 mL·L-1).实验第1、3、5、7、14天,无菌取其肺组织,采用免疫组织化学法检测各组肺组织PDGF-A、PDGF-B、PDGF受体(PDGFR)-α、PDGFR-β的表达,MetaMorph软件测定平均光密度值,以表示肺组织PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β蛋白的表达水平.应用SPSS 11.5软件进行统计学分析.结果实验1组及实验2组第1天肺组织PDGF-B表达均低于空气对照组(Pa<0.05 );实验1组第5、7天,实验2组及实验3组第7天肺组织PDGF-B表达均高于空气对照组(Pa<0 05 ).PDGFR-β高氧刺激后持续增高,3个实验组第1天、第3天时与空气对照组比较无显著差异,第5、7、14天均明显高于空气对照组(Pa＜0.05).3个实验组PDGF-A 、PDGFR-α与空气对照组比较差异无统计学意义.结论 吸入高氧使新生大鼠肺组织PDGF-B、PDGFR-β表达增加,是导致早期高氧肺损伤可能途径之一.     

高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠信号转导转录活化因子3表达及其对表面活性蛋白-B的影响

目的 探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,肺组织内信号转导转录活化因子3(STAT3)的动态变化规律,及其对表面活性蛋白-B(SP-B)的影响.方法 新生鼠160只,依据吸氧体积分数(FiO2)分为4组:实验1组(FiO2=800 mL·L-1)、实验2组(FiO2=600 mL·L-1)、实验3组(FiO2=400 mL·L-1)、空气对照组(FiO2=210 mL·L-1).每组分别于实验1 d、3 d、5 d、7 d、14 d,免疫组织化学检测STAT3水平,反转录-PCR检测SP-B水平.结果 高氧暴露使SP-B mRNA表达异常,实验1组1 d、3 d SP-B mRNA 水平与空气对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05),实验1组5 d、7 d、14 d SP-B mRNA水平与空气对照组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05),实验2组5 d时SP-B mRNA水平与空气对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验3组与空气对照组差异无统计学意义(P>0.05).实验各组肺组织STAT3蛋白的表达高氧刺激3 d明显增加,5 d、7 d差异更为显著(Pa<0.05).实验组SP-B mRNA表达与STAT3呈明显正相关(r=0.892,P<0.001).结论 高氧肺损伤的早期伴随有信号转导酪氨酸蛋白激酶STAT3通路的激活发挥其对肺组织的保护作用,SP-B合成、分泌信号可能是STAT3途径转导的.     

早产鼠高氧暴露后肺组织血管内皮生长因子和一氧化氮合酶的动态变化及相互关系

目的：最近研究表明,血管内皮生长因子（VEGF）及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)功能的缺失,在支气管肺发育不良（BPD）发病机制中发挥了重要的作用。该文通过动态观察持续中浓度高氧暴露（60％O2）对早产大鼠肺内VGEF蛋白及mRNA和eNOS蛋白及mRNA表达的影响,探讨BPD的发病机制。方法：将21 d 孕早产鼠随机分为高氧暴露组(简称高氧组) 和空气对照组(简称空气组) ,分别置于常压高氧仓中（60％O2）和正常空气中暴露。分别于生后1,4,7,11,14 d每组各处死6只大鼠,留取肺组织标本。苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF和eNOS蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应方法检测VEGF和eNOS mRNA表达。结果：早产鼠高氧暴露4 d后出现肺泡间隔减少,微血管发育异常,间质纤维化,且病变随着高氧暴露时间的延长而加重。高氧组大鼠第4,7天时肺组织VEGF蛋白表达明显低于相应空气对照组(P< 0. 05), VEGF mRNA表达亦显著减少(P< 0. 05)。随着暴露时间的延长,VEGF蛋白和mRNA进行性降低。高氧组大鼠在高氧暴露过程中肺组织eNOS蛋白和mRNA表达亦随着暴露时间的延长而降低。结论：高氧暴露导致早产鼠肺组织VEGF和eNOS表达持续性减少,微血管发育异常和肺泡化受阻。这些由高氧暴露诱导产生的BPD样损害,可能与VEGF和eNOS的表达下调有关,且二者之间存在着密切的联系。［中国当代儿科杂志,2007,9（5）：473-478］     

促红细胞生成素对高氧肺损伤炎症反应病理过程的影响

目的 氧化应激损伤是导致新生儿支气管肺发育不良的一个重要原因.促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)具有抗氧化、抗感染、抗凋亡及促进血管生成等多种作用.本研究旨在探讨EPO在新生鼠高氧肺损伤炎症反应病理过程中的作用机制.方法 将新生大鼠生后12 h内随机分组:Ⅰ.空气对照,Ⅱ.空气+重组人促红细胞生成素(human recombinant erythropoietin,rhEPO),Ⅲ.高氧对照,Ⅳ.高氧+小EP0.Ⅲ、Ⅳ组暴露高浓度氧中(FiO285%),Ⅱ、Ⅳ组于生后0 d和2 d给rhEPO 1200 U/kg背部皮下注射,Ⅰ、Ⅲ组给等量生理盐水注射.在生后第3,7和14天采集标本.采用血细胞分析仪检测血红蛋白、红细胞压积和血小板;生化法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)总蛋白及髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量;RT-PCR法检测巨噬细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、中性粒细胞趋化因子-1(cytokine-inducedneutrophil chemoattractant-1,CINC-1)mRNA表达.结果 Ⅲ组3 d肺组织可见炎症反应,7 d为著,14 d肺泡结构简化,间质呈不同程度纤维化.Ⅳ组7 d炎性渗出和浸润较Ⅲ组减轻,14 d肺泡发育改善,生存率提高,且未发生红细胞和血小板增多.Ⅳ组各时点BALF总蛋白及MPO含量较Ⅲ组明显降低[(0.41±0.04)g/L vs.(0.48+0.06)g/L,P<0.05;(0.53±0.06)g/L vs.(0.74±0.08)g/L,P<0.001;(0.49±0.05)g/L vg,(0.56±0.09)g/L,P<0.05],[(48.2±3.9)单位/L vs.(55.8±6.8)单位/L,P<0.05;(56.8±6.1)单位/L v8.(71.6±7.0)单位/L,P<0.001;(53.1±7.1)单位/Lvs.(61.4±6.3)单位/L,P<0.05].与I组相比,MCP-1 mRNA和CINC.I mRNA在Ⅲ组表达增强,7 d达峰值[(0.90±0.38)、得.(0.20±0.04),P<0.001;(1.15±0.20)、rs.(0.25±o.05),P<0.001],Ⅳ组MCP-1 mRNA和CINC-1 mRNA表达较Ⅲ组减弱[(0.22±0.04)vs.(0.29±0.05),P<0.01;(0.63±0.06)vs.(0.90±0.38)P<0.05;(0.29±0.04)vs.(0.44±0.05),P<0.001],[(0.30±0.06)vs.(0.48±0.06),P<0.01;(0.73±0.07)vs.(1.15±0.20),P<0.001;(0.44±0.07)vs.(0.54±0.09);P<0.01],二者变化与BALF MPO含量呈正相关(r=0.391,P<0.05;r=0.701,P<0.01;r=0.600,P<0.01;r=0.471,P<0.01;r=0.789,P<0.01;r=0.588,P<0.01).结论 rhEPO可减轻高氧肺损伤肺组织炎细胞浸润、微血管和内皮细胞损伤,提高动物生存率;rhEPO可抑制高氧肺损伤炎症反应过程MCP-1和CINC-1 mRNA表达,提示rhEPO抗炎作用机制与MCP-1和CINC-1 mRNA有关.