高氧暴露对早产儿血单个核细胞血红素加氧酶-1蛋白表达水平及活性的影响

目的观察高氧暴露早产儿血单个核细胞血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平及活性变化。方法选择2008年2月至2009年8月本科住院吸入高浓度氧的40例早产儿（高氧组）和吸入常压空气的40例早产儿（对照组）,用Western Blot法检测血中单个核细胞HO-1蛋白表达水平、血清胆红素水平和血浆一氧化碳血红蛋白（COHb）百分比,并进行比较分析。结果与对照组相比,高氧组HO-1蛋白表达明显增加[（1.78±0.25）比（1.12±0.31）,P〈0.01],胆红素生成量（nmol.mg-1.h-1）及血浆COHb含量（μmol/L）均显著增加[（76.25±11.33）比（53.47±8.73）,（6.73±0.42）比（2.47±0.34）,P均〈0.01]。结论高氧暴露可上调早产儿血单个核细胞HO-1的表达及活性。     

高氧暴露对早产儿血单个核细胞血红素加氧酶-1蛋白表达水平及活性的影响

目的观察高氧暴露早产儿血单个核细胞血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平及活性变化。方法选择2008年2月至2009年8月本科住院吸入高浓度氧的40例早产儿(高氧组)和吸入常压空气的40例早产儿(对照组),用Western Blot法检测血中单个核细胞HO-1蛋白表达水平、血清胆红素水平和血浆一氧化碳血红蛋白(COHb)百分比,并进行比较分析。结果与对照组相比,高氧组HO-1蛋白表达明显增加[(1.78±0.25)比(1.12±0.31),P<0.01],胆红素生成量(nmol.mg-1.h-1)及血浆COHb含量(μmol/L)均显著增加[(76.25±11.33)比(53.47±8.73),(6.73±0.42)比(2.47±0.34),P均<0.01]。结论高氧暴露可上调早产儿血单个核细胞HO-1的表达及活性。     

高体积分数氧暴露早产大鼠肺组织血红素加氧酶-1的表达及活性变化

目的 观察血红素加氧酶-1(HO-1)在高体积分数氧(高氧)暴露早产大鼠肺组织中的表达及活性变化,探讨HO-1在早产大鼠高氧肺损伤中的作用.方法 将3日龄早产SD大鼠28只随机分为高氧组、空气组(每组14只),于实验第3、7天分别用半定量反转录-聚合酶链反应法和免疫组织化学法检测各组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA表达水平和HO-1蛋白在肺组织的分布和表达水平,并测定HO-1的活性.采用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 实验第3天,空气组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA(0.17±0.08)、HO-1蛋白(7.23±4.63)均有微弱表达,HO-1活性为(4.32±1.57)nmol/(mg·h);高氧组早产大鼠肺组织HO-1mRNA(0.72±0.33)表达明显高于空气组(Pa<0.01),HO-1蛋白(18.54±6.55)仅在臣噬细胞表达弱阳性,HO-1活性明显增加(6.14±1.62)nmol/(mg·h),二者均明显高于空气组(Pa<0.05).实验第7天,各组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA均未见表达,高氧组早产大鼠肺组织HO-1蛋白表达及活性均显著高于空气组[(51.24±18.32)vs(4.11±1.82),(32.38±5.46)nmol/(mg·h)vs(5.75±1.87)nmol/(mg·h) Pa<0.01].结论 HO-1可能参与了早产大鼠高氧肺损伤的过程.     

高浓度氧对新生鼠肺血红素加氧酶-1蛋白表达的影响

目的　探讨高浓度氧对新生鼠肺损伤及肺血红素加氧酶 1(HO 1)蛋白表达的影响。方法　将生后 4～ 7d新生SD大鼠 5 7只随机分为 0、2 4、4 8、72h空气对照组和 2 4、4 8、72h高氧暴露组 ,分别置于空气中和常压高氧舱 (氧浓度 92 %～ 94 % )中 ,后断头处死后取肺组织 ,对肺组织切片在光镜、电镜下进行病理组织学观察 ,对肺组织湿 /干重比值进行比较 ,采用免疫组织化学分析对HO 1蛋白表达进行半定量及定位分析。结果　高氧组与空气对照组比较 ,肺组织有明显水肿、出血和炎症 ,电镜下观察病变主要在毛细血管内皮细胞 ;高氧 72h组肺组织湿 /干重比值 (7.97± 1.18)较 72h空气对照组 (6 .4 0± 0 .37)明显升高 (P <0 .0 5 ) ;高氧 72h组肺组织HO 1蛋白表达 (0 .5 0 4± 0 .0 6 2 )较 72h空气对照组 (0 .345± 0 .0 2 4 )明显升高 (P <0 .0 1) ;高氧暴露组HO 1蛋白呈强阳性表达 ,主要分布在支气管、肺泡上皮细胞和肺泡巨噬细胞。结论　高浓度氧可引起新生鼠肺损伤 ,且高浓度氧可引起新生鼠肺HO 1蛋白表达上调 ,证明HO 1参与新生鼠高氧肺损伤的病理生理过程     

高体积分数氧暴露下A549细胞中小窝蛋白-1与转化生长因子-β1的表达及其相互关系

目的 观察高体积分数氧(高氧)暴露后肺腺癌A549细胞中小窝蛋白-1(CAV-1)和转化生长因子(TGF)-β1的动态表达,探讨CAV-1和TGF-β1表达变化在高氧肺损伤中的作用.方法 复苏液氮罐中冻存的A549细胞系,体外传代培养,待其在37℃、50 mL/L二氧化碳(CO2)饱和湿度培养箱中生长至接近融合时,随机分为对照组和高氧组.每组18瓶A549细胞.高氧组换液后通入3 L/min的950 mL/L氧气和50 mL/LCO2高纯混合气,10 min后密闭培养.对照组仍置于50 mL/L CO2培养箱中.2组分别于12 h、24 h、48 h后在倒置相差显微镜下观察A549细胞形态并照相.采用免疫荧光双染检测CAV-1、TGF-β1表达.结果 对照组CAV-1高表达(44.25±3.23),TGF-β1低表达(10.18±2.74);高氧组随通氧时间延长,CVA-1表达逐渐减弱(12 h:35.25±1.88,24 h:20.75±1.68,48 h:9.86±2.80),TGF-β1表达逐渐增强(12 h:17.32±1.50,24 h:26.51±1.82,48 h:41.94 ±4.47).对照组及高氧组12 h、24h、48 h CAV-1的阳性表达与TGF-β1的阳性表达呈负相关(r=-0.91、-0.62,-0.53、-0.88,P均＜0.05).结论 CAV-1表达降低通过减弱对TGF-β1受体的抑制作用,激活TGF-β1信号通路,导致高氧肺损伤.     

诱导血红素加氧酶-1高表达对大鼠减体积肝移植生存的影响

目的为了明确血红素加氧酶-1的高表达对大鼠减体积肝移植生存的影响,进而探索出一条有效地防止小体积移植肝缺血再灌注损伤的方法。方法利用分子生物学方法构建携带有HO-1基因的重组腺病毒Ad5-HO-1,对供体进行预处理,并观察Ad5-HO-1对大鼠小体积移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。结果Ad5-HO-1组与对照组相比较ALT水平有显著降低(P＜0．05)；术后2 h内门静脉血流流量有明显增加(P＜0．05)；HO-1酶活性测定显示Ad5-HO-1组酶活性为(5．34±0．41)×10~(-3)mmol·mg~(-1)·mm~(-1),较对照组明显为高(P＜0．05)；RT-PCR和免疫组化检测HO-1、TNF-α、Bcl-2、Bax表达,证实Ad5-HO-1组中HO-1、Bcl-2的表达是增高的,而Bax、TNF-α表达是降低的(P＜0．05)；Ad5-HO-1组在1、7、21d的生存率分别为100%、85．7%、71．4%,而对照生理盐水组在1、7、21 d的生存率分别为66．7%、16．7%、16．7%(P＜0．05)。结论Ad5-HO-1的应用能够显著地增加术后2 h内门静脉血流,有利于受体术后肝功能的恢复,从而改善大鼠移植术后的生存结果。实验结果提示HO-1的高表达在防止和减轻小肝移植物缺血再灌注损伤的过程中扮演着重要的角色,进而为临床上防止小肝移植物缺血再灌注损伤提供了一条新的思路和方法。     

银杏叶制剂对高氧暴露早产鼠肺组织血红素加氧酶-1表达的影响

目的 探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在高氧暴露早产鼠肺组织中的表达及银杏叶制剂(舒血宁)对HO-1 mRNA及HO-1蛋白表达的影响,为舒血宁防治早产儿高氧肺损伤提供理论依据.方法 3日龄早产鼠随机分为高氧组、空气组和高氧 舒血宁组3组,于实验3 d及7 d时,分别用半定量反转录-聚合酶链反应法和免疫组织化学法检测各组早产鼠肺组织HO-1 mRNA的表达水平争HO-1蛋白质表达水平.结果 实验第3天,空气组HO-1 mRNA、HO-1蛋白均有微弱表达;与空气组相比,高氧组HO-1 mRNA表达明显高于空气组(P<0.01),HO-1蛋白仅在巨噬细胞表达弱阳性(P<0.05);与高氧组相比,舒血宁 高氧组HO-1 mRNA的表达明显下降(P<0.01),但仍然高于空气组(P<0.05),HO-1蛋白弱阳性表达(P>0.05).实验第7天,各组HO-1 mRNA均未见表达.空气组HO-1蛋白极微弱或无表达,高氧组HO-1蛋白在巨噬细胞呈强阳性表达,明显高于空气组(P<0.01);舒血宁 高氧组HO-1蛋白的表达较高氧组明显下降(P<0.01),但仍然高于空气组(P<0.01).结论 HO-1可能参与了早产鼠高氧肺损伤,舒血宁能够下调高氧暴露早产鼠肺组织中HO-1的表达水平.     

转化生长因子β1对高体积分数氧暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用（英文）

目的探讨转化生长因子（TGF-β1）对高体积分数氧（高氧）暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用。方法将80只早产新生SD大鼠随机分为空气组和高氧组,每组40只;每组又随机分为3、7、14、21d4个亚组。采用原位杂交法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达与分布;采用免疫组织化学法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1蛋白、Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达与分布;并用图像分析方法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值。结果高氧第3天,肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白呈现弱阳性表达,第7、14、21天呈强阳性表达,其表达量于第7天开始增高,第14天达高峰;肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白阳性表达的PU值在第7、14、21天均高于空气组（Pa〈0.01）。Ⅰ型胶原在第3、7天时呈弱阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量从第14天开始增加,第21天时达高峰;Ⅲ型胶原表达强度在第3天时呈弱阳性,第7天时开始增强呈中等阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量在第7天时开始增加,第14天时达高峰,表达量高于Ⅰ型胶原;肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值在第14、21天时均明显高于空气组（Pa〈0.01）。高氧组肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达均分布于支气管和血管周围结缔组织及肺间质中;在第14、21天高氧组肺组织TGF-β1蛋白表达与Ⅰ型胶原呈显著正相关（r=0.881,0.793 Pa〈0.01）,与Ⅲ型胶原亦呈显著正相关（r=0.866,0.891 Pa〈0.01）。结论TGF-β1过度表达而介导的细胞外基质（ECM）过度合成是肺纤维化发生的重要机制,在肺纤维化形成过程中TGF-β1对Ⅰ型、Ⅲ型胶原等ECM的沉积发挥重要的调控作用。     

高浓度氧对新生鼠肺血红素加氧酶1与一氧化碳的影响

2002年7月-2003年1月,我们利用新生鼠高氧肺损伤模型,观察高氧对新生鼠肺血红素加氧酶1(HO-1)及血浆、肺组织匀浆一氧化碳(CO)含量的影响,以了解HO-1／CO系统在此过程中的变化。     

血红素加氧酶-1抑制哮喘气道炎症的研究

目的探讨血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）在小鼠支气管哮喘模型中的抗炎作用。方法用卵清蛋白（OVA）致敏、激发小鼠建立哮喘动物模型,并在致敏、激发过程中分别经Heroin、SnPP处理。分别测定激发后各组动物血清OVA特异性IgE（OVA-SIgE）、支气管肺泡灌洗液（bronchial alveolar lavage fluid,BALF）中细胞总数和嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）,结合病理切片分析气道炎症状况。结果OVA组、Heine组、SnPP组血清OVA—SIgE和BALF中细胞总数及EOS数明显高于正常对照组,但Heine组IgE水平及BALF中细胞总数和EOS数明显低于OVA组;而OVA组和SnPP组间IgE水平及BALF中细胞总数和EOS数差异无显著性;病理切片显示OVA组、Heroin组、SnPP组气道组织均以嗜酸性粒细胞浸润为主,但Heroin组气道炎症仍明显轻于OVA组和SnPP组。结论用Heroin诱导HO-1高表达后血清OVA-SIgE明显下降,气道炎症减轻,提示HO-1在支气管哮喘中具有抗炎作用。     

血红素氧合酶-1在缺血再灌注大鼠肾脏的表达及意义

目的观察肾脏缺血及缺血再灌注(IR)大鼠诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达变化的规律。方法制作大鼠肾脏缺血及IR模型,不同时间摘取肾脏,免疫组织化学法检测HO-1表达变化。HE染色观察肾脏损伤程度。结果缺血30 min时HO-1明显升高(P<0.01)。IR后HO-1表达明显增强(P<0.01),且随时间呈一定变化规律。结论HO-1在缺血30 min及IR后表达增强,保护肾脏。     

足月小于胎龄儿脐血血红蛋白氧合酶-1测定的意义

目的 探讨血红蛋白氧合酶/一氧化碳(HO-CO)系统与足月小于胎龄儿(SGA)发病的关系及其机制.方法 2004年11月-2005年11月正常分娩的足月SGA(非匀称型SGA)50例.其中母亲无妊娠高血压综合征(PIH)为SGA 1组(30例),母亲患中重度PIH为SGA 2组(20例),健康足月适于胎龄儿(AGA)20例为对照(AGA组).新生儿娩出后立即采集脐动脉血标本,用双波长分光光度法测定血红蛋白氧合酶-1(HO-1)的活性,用Chalmers血红蛋白结合及连二亚硫酸钠还原法测定血浆碳氧血红蛋白(HbCO)质量分数.单因素方差分析进行多重比较,直线回归法进行相关分析.结果 SGA1组及SGA2组脐血HO-1活性、HbCO质量分数均显著低于AGA组(P<0.01).SGA1组与SGA2组脐血HO-1活性、HbCO水平比较无显著性差异(Pa>0.05).AGA组、SGA1组及SGA2组脐血HO-1活性与新生儿出生体质量均呈正相关(Pa<0.05).结论 SGA脐血HO-1活性显著低于ASA,AGA和SGA脐血HO-1活性水平与出生体质量均呈正相关,说明脐血HO-1活性与胎儿宫内发育及新生儿营养状况有关.     

缺氧缺血性脑病新生大鼠心肌血红蛋白加氧酶-1 mRNA表达与心肌细胞凋亡的关系

目的探讨HIE新生大鼠心肌血红蛋白加氧酶-1(HO-1)mRNA的表达及其与心肌细胞凋亡的关系。方法7日龄SD大鼠制备HIE经典模型。分为HIE组、HIE+Znpp组和对照组。采用原位杂交法观测其不同时间点各组HIE新生大鼠心肌细胞HO-1mRNA表达,采用图像分析半定量法检测其阳性强度,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测其凋亡心肌细胞。结果1.HIE组心肌细胞HO-1mRNA表达6h开始上调(P<0.05),12h达高峰,48h开始略有下降,72h后仍高于对照组(Pa<0.01);与对照组比较,HIE+Znpp组心肌细胞HO-1mRNA表达下调,48h开始升高,72h后略低于对照组(P<0.05)。2.HIE组心肌细胞凋亡6h开始升高,48h达高峰,72h后略降低;HIE+Znpp组心肌细胞凋亡6h开始升高,12h达高峰,24h后略降低,但仍高于对照组和HIE组(P<0.01,0.05)。结论HIE新生大鼠心肌HO-1mRNA表达增加,可能降低了心肌细胞凋亡,提示HO-1参与HIE时机体对心肌细胞保护机制之一。     

先天性心脏病合并肺动脉高压患儿手术前后血硫化氢及血红蛋白氧合酶-1变化的意义

目的探讨先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PH)患儿手术前后硫化氢(H2S)及血红蛋白氧合酶-1(HO-1)的变化及其临床意义。方法选取河北医科大学第四医院心脏外科收治的48例左向右分流的CHD患儿,均在复合麻醉中成功实施了根治手术。48例患儿行心脏多普勒术前测压,按照肺动脉收缩压高低(PASP)分为3组:无PH组(PASP<3.990kPa)15例,轻度PH组(PASP3.990～6.517kPa)15例,中重度PH组(PASP≥6.650kPa)18例。于术前、术后1h及术后24h采集各组患儿桡动脉血标本,用吸光度法测定血浆H2S水平,用双波长分光光度法测定血清HO-1活性。数据分析采用重复测量数据的方差分析、多因素方差分析、直线相关分析。结果各组患儿术后H2S水平呈上升趋势,术后24h与术前比较差异均有统计学意义(Pa<0.05)。术前、术后1h及术后24h,中重度PH组、轻度PH组血浆H2S水平均显著低于无PH组(Pa<0.05),中重度PH组血浆H2S水平均显著低于轻度PH组(Pa<0.05);术前、术后1h、术后24h,3组患儿血清HO-1活性比较差异无统计学意义;3组患儿血清HO-1活性组间...     

喘息性疾病婴幼儿外周血单个核细胞淋巴细胞功能相关抗原-1和巨噬细胞分化抗原-1的表达

目的探讨婴幼儿喘息性疾病患儿外周血单个核细胞(PBMC)表面淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)和巨噬细胞分化抗原-1(Mac-1)的表达及相关性,探讨喘息性疾病的免疫学发病机制,鉴别儿童喘息临床表型的炎性指标。方法随机选取在本院住院的3岁以下喘息患儿29例。男17例,女12例。从同期在本院住院的呼吸道感染但不伴有喘息的患儿中随机抽取同年龄患儿26例作为非喘息组,男15例,女11例。从同期在本院儿保门诊体检的健康儿童及外科非感染性疾病患儿中随机抽取同年龄患儿25例作为对照组。男15例,女10例。3组婴幼儿均在治疗前抽取静脉血2 mL,分离PBMC,采用流式细胞术检测PBMC中LFA-1、Mac-1的表达情况。结果喘息组和非喘息组LFA-1的表达[(47.46±13.94)%和(35.88±12.64)%]明显高于对照组[(26.62±10.41)%],喘息组和非喘息组Mac-1的表达[(7.43±3.42)%和(4.53±3.04)%]明显高于对照组[(2.92±1.80)%]。其中喘息组患儿LFA-1和Mac-1的表达高于非喘息组,差异均有统计学意义(Pa<0.01);相关性分析显示LFA-1和Mac-1在喘息组呈正相关(r=0.403,P<0.05)。结论 LFA-1、Mac-1在喘息性疾病发病机制中具有重要作用,检测LFA-1、Mac-1的表达可作为鉴别婴幼儿喘息临床表型的炎性指标。     

脑室周围白质软化早产儿血清半胱氨酸蛋白酶-1和白细胞介素-18水平的变化

目的 研究脑室周围白质软化(PVL)早产儿血清半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和IL-18水平的变化及二者的相关性,探讨PVL的发病机制及Caspase-1、IL-18的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测日龄48～72 h的13例PVL早产儿(PVL组)、17例脑室内出血(IVH)早产儿(IVH组)及20例健康对照早产儿(对照组)出生第3天血清Caspase-1和IL-18的水平.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 PVL组早产儿血清Caspase-1和IL-18均明显高于IVH组和对照组早产儿,两组比较差异均有统计学意义(Pa＜0.05);IVH组和对照组早产儿血清Caspase-1和IL-18比较差异无统计学意义(P＞0.05);PVL组早产儿血清Caspase-1和IL-18呈正相关(r=0.965,P=0.000).结论 Caspase-1和IL-18参与了早产儿PVL的发病机制,联合测定Caspase-1和IL-18可作为早期诊断早产儿PVL的方法之一.     

RetCam数字视网膜照像机检测早产儿视网膜病

目的探讨早产儿视网膜病变（ROP）的早期诊断方法。方法对2006年10～12月本院NICU126例住院的早产儿共252眼,在生后4周或矫正胎龄达32～34周时,采用RetCam数字视网膜照像机进行眼底数字照像。结果7眼出现ROP改变,发生率为2.7%;其中1期病变4眼,2期病变1眼,3期附加病变（＋plus病变）2眼,未发现4期和5期病变,无1例发生并发症。结论RetCam数字视网膜照像机可早期、快速、安全有效的诊断ROP,对ROP的早期诊断具有重要价值。