基于HPLC指纹图谱及网络药理学技术探究槐花散抗溃疡性结肠炎的作用机制北大核心CSCD

目的:利用网络药理学结合指纹图谱技术探讨槐花散抗溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)的作用机制及潜在质量标志物。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索各药味的活性成分,以UC为疾病背景构建网络图,预测槐花散抗UC药效作用靶点,采用UC动物模型对预测靶点进行实验验证;收集不同厂家共10批次槐花散测定指纹图谱,筛选槐花散潜在质量标志物,并利用分子对接对槐花散潜在质量标志物和预测靶点进行虚拟验证。结果:通过网络药理学预测得到25个槐花散的活性成分和105个共有靶点,通过分析筛选出槐花散共5个潜在药效靶点为白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、蛋白激酶(AKT1)、抑癌基因(TP53)。体内实验结果表明槐花散能明显改善UC小鼠的便血症状和疾病活动指数,增加UC小鼠的体质量,降低血清中促炎因子TNF-α、IL-6的含量;下调小鼠结肠组织中的Tnfa、Il1b和Akt1 mRNA的表达,上调Il6、Tp53 mRNA的表达。通过指纹图谱共获得8个共有峰,筛选并指认出5个潜在质量标志物,将其与上述靶点进行分子对接,发现槲皮苷、胡薄荷酮、新橙皮苷及柚皮苷与5个靶点的结合能均小于-4 kJ/mol。结论:槐花散调节IL-6、TNF-α、IL-1β、AKT1及TP53等靶点改善小鼠溃疡性结肠炎,可能与槐花散中质量标志物作用于上述靶点有关。     

肠愈宁对溃疡性结肠炎大鼠炎性因子及钙卫蛋白释放的影响

目的:研究肠愈宁颗粒对二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎的作用,并初步探讨其作用机制。方法:将雄性SD大鼠分成6组:正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(SASP)和肠愈宁颗粒低、中、高剂量组。以二硝基氯苯乙酸复合法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。评估疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)和病理组织学。ELISA方法测定血清IL-β、TNF-α、钙卫蛋白(Calproteein,CP),Western blot方法检测结肠黏膜CP的表达水平。结果:DAI结果提示造模成功,与正常组比较,模型组血清中IL-β、TNF-α、CP均明显升高,而CMDI指数、结肠黏膜CP均明显升高。肠愈宁颗粒各组DAI、CMDI、结肠组织中黏膜CP均降低,血清中IL-β、TNF-α、CP水平也明显降低。结论:肠愈宁颗粒能够有效缓解二硝基氯苯乙酸复合法诱导的大鼠溃疡性结肠炎,其作用机制可能与下调IL-β、TNF-α表达,减少CP水平有关。     

基于血清代谢组学探究色胺酮抗小鼠溃疡性结肠炎的作用机制

采用液相色谱-质谱(liquid chromatograph-mass spectrometer, LC-MS)联用的方法探究色胺酮对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)小鼠血清中潜在代谢生物标志物的影响，并分析其相关的代谢通路。随机将C57BL/6小鼠分为色胺酮组、柳氮磺胺吡啶组、对照组、模型组，采用自由饮用3%DSS 11 d的方式造模，边造模边给药，从第1天起观察小鼠体征，并进行疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分；实验结束后取结肠组织，采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察结肠组织的病理变化；酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测血清中白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素...     

小檗碱与6-姜烯酚配伍对溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症和菌群影响的实验研究

寒热并用法是溃疡性结肠炎临床治疗的常用治法,黄连-干姜是体现寒热并用法的经典药对,该研究以黄连的有效成分小檗碱和干姜的有效成分6-姜烯酚联合应用,探究其对溃疡性结肠炎小鼠肠道炎症和肠道菌群的影响,揭示寒热并用法治疗溃疡性结肠炎的作用和机制。采用葡聚糖硫酸钠自由饮用诱导小鼠溃疡性结肠炎模型。分别给予小檗碱(100 mg·kg^-1)、6-姜烯酚(100 mg·kg^-1)、小檗碱(50 mg·kg^-1)联合6-姜烯酚(50 mg·kg^-1)灌胃,每日1次,给药20 d后取小鼠血清、结肠组织、粪便,苏木素-伊红染色法观察结肠病理组织学变化,阿利新蓝和过碘酸雪夫染色观察结肠组织黏液层变化,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量,免疫组织化学法检测结肠组织巨噬细胞表面标记物F4/80、黏蛋白-2(mucin-2)、闭合蛋白-1(c...     

大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用北大核心CSCD

目的研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用。方法设正常组,溃疡性结肠炎模型组,美沙拉嗪组,大黄牡丹汤低、中、高剂量组,通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度、脾脏指数、结肠组织HE染色、结肠病理损伤评分、结肠髓过氧化物酶(MPO)活性、血清及结肠IL-1β含量观察大黄牡丹汤对UC小鼠的治疗效果。结果与正常组比较,模型组小鼠DAI评分显著升高,结肠明显缩短,结肠显著增厚,炎症性细胞浸润明显,多灶溃疡,隐窝减少,肠腺减少,病理组织学评分显著升高,脾脏指数显著上升,结肠MPO活性、血清及结肠IL-1β含量显著高于正常组,差异均有统计学意义。与模型组比较,大黄牡丹汤低、中、高剂量组均能明显降低UC小鼠DAI评分,改善小鼠的疾病状态。大黄牡丹汤中、高剂量组能还能防止结肠组织增厚,维持其结构的完整,降低其病理组织评分,抑制脾脏指数升高,降低结肠MPO活性及血清、结肠IL-1β含量,差异均有统计学意义。结论大黄牡丹汤对溃疡性结肠炎小鼠具有治疗作用。     

大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用

目的研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用。方法设正常组,溃疡性结肠炎模型组,美沙拉嗪组,大黄牡丹汤低、中、高剂量组,通过疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度、脾脏指数、结肠组织HE染色、结肠病理损伤评分、结肠髓过氧化物酶(MPO)活性、血清及结肠IL-1β含量观察大黄牡丹汤对UC小鼠的治疗效果。结果与正常组比较,模型组小鼠DAI评分显著升高,结肠明显缩短,结肠显著增厚,炎症性细胞浸润明显,多灶溃疡,隐窝减少,肠腺减少,病理组织学评分显著升高,脾脏指数显著上升,结肠MPO活性、血清及结肠IL-1β含量显著高于正常组,差异均有统计学意义。与模型组比较,大黄牡丹汤低、中、高剂量组均能明显降低UC小鼠DAI评分,改善小鼠的疾病状态。大黄牡丹汤中、高剂量组能还能防止结肠组织增厚,维持其结构的完整,降低其病理组织评分,抑制脾脏指数升高,降低结肠MPO活性及血清、结肠IL-1β含量,差异均有统计学意义。结论大黄牡丹汤对溃疡性结肠炎小鼠具有治疗作用。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎模型小鼠NLRP3/Caspase-1通路的影响

探讨黄芩汤(HQT)对硫酸葡聚糖钠盐(dextran sulfate, DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)模型小鼠NLRP3/Caspase-1信号通路的影响。将C57BL/6J小鼠随机分为空白组，模型组(DSS组),黄芩汤低(HQT-L组)、中(HQT-M组)、高(HQT-H组)剂量组，西药美沙拉嗪组(西药组),建立小鼠UC模型。造模成功后，HQT-L组、HQT-M组、HQT-H组和西药组分别给予低、中、高剂量的黄芩汤和美沙拉嗪混悬液灌胃，空白组和DSS组分别给予等体积的蒸馏水灌胃，给药10 d后，测定各组小鼠体质量、疾病活动指数(DAI)评分、结肠组织病理学评分，采用ELISA法测定血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量，实时荧光定量PCR(quantitative real-time, RT-qPCR)法测定结肠组织NLRP...     

清肠温中方对DSS诱导慢性溃疡性结肠炎模型小鼠Th1/Th2平衡的干预作用

目的研究清肠温中方对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导慢性溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠Th1/Th2平衡的干预作用。方法 90只雄性BALB/c小鼠随机分为6组,除空白组外其余均自由饮用3%DSS溶液7d,之后换蒸馏水饮用7、14d为1个周期,共3个周期复制模型。用蒸馏水、清肠温中方高、中、低剂量和美沙拉嗪缓释颗粒灌胃干预14d,记录疾病活动指数(DAI),酶联免疫吸附法检测血清白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),免疫组化染色检测结肠黏膜NF-κBp50表达。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分明显升高(P0.01),血清IL-1β、IL-6及TNF-α明显增多(P0.01),IL-4、IL-5明显减少(P0.01),结肠黏膜NF-κBp50表达明显增多(P0.01)。与模型组比较,清肠温中方各剂量组均能降低DAI评分(P0.05),减少血清IL-1β、IL-6及TNF-α(P0.05)、增加IL-4、IL-5(P0.05)含量,并减少结肠黏膜NF-κBp50表达(P0.05),尤其以清肠温中方中剂量组和美沙拉嗪组效果最明显。结论对于DSS诱导的慢性UC模型小鼠,清肠温中方可以减少Th1、增加Th2细胞,减少肠黏膜中的NF-κB表达,恢复Th1/Th2平衡从而起到治疗作用。     

芦丁对溃疡性结肠炎小鼠的干预作用及NLRP3炎症小体的影响

目的观察芦丁对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的干预作用。探讨其对NLRP3炎症小体信号分子活化的影响。方法将60只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为6组,每组10只。除空白组外,其余组均采用葡聚糖硫酸钠诱导建立溃疡性结肠炎模型,美沙拉嗪组同时给予美沙拉嗪缓释颗粒灌胃,芦丁高、中、低剂量组分别给予100 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、25 mg/(kg·d)芦丁溶液灌胃,空白组、模型组以等体积l%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,均连续5 d。灌胃结束后,比较各组疾病活动度(DAI)评分、组织学评分,采用酶联免疫吸附法测定小鼠血清和结肠组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,采用qRT-PCR法检测结肠组织中NLRP3、IL-1βmRNA表达量,采用Western blot法检测结肠组织中NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分、组织学评分,血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,芦丁高、中剂量组和美沙拉嗪组上述指标均明显降低(P均<0.05),且芦丁高剂量组血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显低于美沙拉嗪组(P均<0.05)。结论芦丁可明显改善溃疡性结肠炎小鼠临床症状,抑制黏膜炎症损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的活化有关。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术白术多糖干预溃疡性结肠炎的代谢组学研究

目的 研究白术Atractylodes macrocephala多糖对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠的影响,探讨白术多糖干预UC的代谢途径及可能的作用机制。方法 采用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）诱导小鼠UC模型,给予白术多糖或美沙拉嗪干预后,测定小鼠体质量、疾病活动指数（disease activity index,DAI）评分及结肠长度;采用ELISA检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MOP）活性;采用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化;采用超高效液相色谱-串联三重四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）检测小鼠血清内源性代谢物水平,并结合主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析对差异代谢物进行表征,筛选出潜在的差异代谢物;采用MetaboAnalyst 5.0网...     

愈肠栓对溃疡性结肠炎大鼠炎症因子的影响

目的探讨愈肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠炎症因子的影响。方法将实验大鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶栓组、愈肠栓组。治疗2周后,观察大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理改变及血清TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10含量变化。结果与正常对照组比较,模型组大鼠DAI评分、血清中TNF-α、IL-1β水平明显升高,IL-4、IL-10水平明显降低,差异有统计学意义(P 0.01);与模型组比较,柳氮磺吡啶栓组、愈肠栓组DAI评分、TNF-α、IL-1β明显降低,IL-4、及IL-10水平明显升高,差异有统计学意义(P 0.05或P 0.01);柳氮磺吡啶栓组与愈肠栓组比较差异无统计学意义。结论愈肠栓能有效改善TNBS诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠症状,其机制可能是通过降低血清炎症因子TNF-α、IL-1β含量,上调抑炎因子IL-4、IL-10的水平,从而达到缓解大鼠溃疡性结肠炎的作用。     

肠愈宁颗粒对溃疡性结肠炎大鼠部分免疫机制的影响

目的:研究不同剂量的肠愈宁颗粒对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-4(IL-4)表达的影响,阐述其抗UC的免疫机制。方法:48只雄性Wistar大鼠平均随机分成6组:空白对照组、模型组、肠愈宁高剂量组、肠愈宁中剂量组、肠愈宁低剂量组、美沙拉嗪对照组。应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复合灌肠法诱导UC大鼠模型,评估疾病活动指数(DAI),结肠黏膜损伤指数(CMDI)并进行组织损伤指数(TDI)评分,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠IL-1β、TNF-α、IL-4的变化。结果:注入5% TNBS 50 mg/kg＋50%乙醇0.25 mL连续1周可成功导致大鼠患上溃疡性结肠炎(UC),肠愈宁颗粒可对抗5% TNBS 50 mg/kg＋50%乙醇所致的大鼠UC,与模型组比较,加入肠愈宁高剂量组、肠愈宁中剂量组的DAI、CMDI和TDI评分均降低,IL-1β、TNF-α表达下调,IL-4表达上调。结论:肠愈宁颗粒抵抗溃疡性结肠炎(UC)的作用显著,其机制可能与下调促炎因子TNF-α以及白细胞介素IL-1β的表达,上调促炎因子IL-4的表达有关。     

基于代谢组学探讨升降散加减调控PKC信号通路截断溃疡性结肠炎的机制研究

目的:探讨升降散加减治疗溃疡性结肠炎大鼠的作用机制。方法:将60只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、美沙拉嗪肠溶片0.5 g/kg组、升降散加减0.75、1.5、3 g/kg组。除正常对照组外,其余各组均以2.5%葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium salt, DSS)溶液诱导溃疡性结肠炎大鼠模型建立。连续给药治疗10 d后,观察各组大鼠一般情况,评价疾病活动指数(DAI)评分;HE染色观察大鼠结肠组织病理学形态;ELISA法测定血清白细胞介素6(IL-6)、IL-17、生物活性因子(SP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;免疫组化法(IHC)检测大鼠结肠组织黏蛋白2(MUC2)的表达;利用液质联用技术分析大鼠血清差异性代谢物,借助MetaboAnalyst网站富集代谢通路;蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠结肠组织CXC趋化因子配体5(CXCL5)、趋化因子受体4(CXCR4)、整合素(Integrin-β3)、蛋白激酶C-α(PKC-α)蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠结肠长度明显缩短,DAI评分明显升高(P<0....     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外其余各组小鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,观察经药物处理后各组大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结果:泄浊解毒方可明显减少UC模型大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路有关。     

黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠肠道黏膜屏障的影响

目的:研究黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及对肠道黏膜屏障功能的影响。方法:Wistar大鼠灌肠三硝基苯磺酸(TNBS)制备溃疡性结肠炎模型,成模大鼠分为模型组、SASP(300 mg/kg)阳性对照组及黄芪多糖低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,另设正常对照组,连续灌胃给药10 d,观察黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠疾病活动指数(DAI)及结肠组织病理学的影响,采用ELISA法测定结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)、IL-1β、TNF-α水平以及血清中D-乳酸(D-LA)及二胺氧化酶(DAO)含量。结果:黄芪多糖可显著降低模型大鼠DAI及结肠组织中MPO、IL-1β和TNF-α水平(P0.05或P0.01),并能降低血清D-LA及DAO水平(P0.05或P0.01)。结论:黄芪多糖对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制与减少结肠组织炎症因子释放、改善肠道黏膜屏障功能有关。     

加味藿香正气软胶囊对DSS致小鼠结肠炎的作用及机制

目的:研究加味藿香正气软胶囊(JWHX)对葡聚糖硫酸钠(DSS)致小鼠结肠炎模型的抗炎机制。方法:将60只ICR雄性小鼠随机分为正常组、模型组、JWHX高、中、低剂量组(0.60,0.30,0.15 g·kg-1)。采用35 g·L-1DSS供小鼠自由饮用复制结肠炎模型,同时开始每天ig给药,连续7 d。每天进行疾病活动指数(DAI)评分,7 d后处死小鼠,对各组小鼠结肠进行组织病理学评分,检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)含量及白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)促炎性细胞因子。结果:与正常组比较,模型组结肠炎小鼠DAI评分,病理学评分,MPO,IL-6,TNF-α含量显著升高,小鼠结肠长度显著降低(P0.01);与模型组比较,JWHX高、中剂量组可显著降低DSS结肠炎小鼠的DAI评分和病理学评分,升高小鼠结肠长度,显著降低结肠中MPO,IL-6,TNF-α含量(P0.05,P0.01);JWHX低剂量组也能显著降低肠炎小鼠的DAI评分,升高小鼠结肠长度,显著降低结肠中MPO含量(P0.05)。结论:JWHX对DSS致小鼠结肠炎具有一定治疗作用,其机制与抑制IL-6,TNF-α促炎性细胞因子产生相关。     

化瘀通阳方对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-1β、IFN-γ表达的影响

目的研究化瘀通阳方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜损伤及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。方法从32只Wistar大鼠中随机选择8只作为空白组,余24只采用灌胃联合自由饮用5%葡聚糖硫酸钠溶液法复制溃疡性结肠炎模型。将造模成功的17只大鼠随机分为模型组5只、美沙拉嗪组6只及化瘀通阳方组6只,分别予生理盐水、美沙拉嗪灌肠液、化瘀通阳方药液灌肠10 d。观察各组大鼠一般活动状态,评估疾病活动指数(DAI)、结肠大体损伤指数(CMDI)、结肠组织学损伤指数(TDI),采用ELISA法检测血清中IL-1β和IFN-γ水平。结果与空白组比较,模型组大鼠DAI评分、CMDI评分、TDI评分及血清中IL-1β、IFN-γ水平均明显升高(P均0.05);与模型组比较,美沙拉嗪组、化瘀通阳方组DAI评分、CMDI评分、TDI评分及血清IL-1β、IFN-γ水平均明显降低(P均0.05);化瘀通阳方组上述各项指标与美沙拉嗪组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论化瘀通阳方能够抑制促炎性细胞因子IL-1β、IFN-γ的表达,减轻溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜损伤。     

基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究

目的基于粪便代谢组学技术考察生、酒黄芩对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠内源性代谢物的影响,并探讨黄芩酒炙"行上焦、清湿热"的作用机制。方法小鼠口咽吸入脂多糖建立ALI模型,通过脏器指数、肺组织病理及支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平,评价生、酒黄芩的疗效差异;采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOFMS)法检测内源性代谢物,运用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)等方法寻找差异性代谢物及代谢通路。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺指数、脾脏指数显著降低(P0.01),肺干湿质量比显著增加(P0.01);支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平显著升高(P0.01),IL-10水平显著降低(P0.01)。酒黄芩组的免疫调节及炎性反应抑制作用均显著优于生黄芩组(P0.01)。模型组小鼠粪便中氨基酸、脂质类代谢均发生明显改变,生黄芩通过影响D-谷氨酰胺与D-谷氨酸代谢通路、鞘脂类代谢通路抑制炎性反应,酒黄芩通过影响苯丙氨酸代谢通路抑制炎性反应。结论生、酒黄芩能够通过调节不同代谢通路抑制ALI小鼠肺部炎性反应,为阐明黄芩生熟异用的作用机制差异提供思路。     

化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠炎症免疫细胞因子的影响研究

目的研究化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)及血浆P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨该方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法取60只雄性Wistar大鼠,随机选取15只大鼠作为正常组,其余45只大鼠采用TNBS/无水乙醇法诱导溃疡性结肠炎模型。然后将造模成功大鼠随机分为模型组、美沙拉嗪组及化浊解毒方组,每组14只。正常组常规饲养,模型组予0.9%NaCl溶液4 mL/(kg·d)灌胃,美沙拉嗪组予美沙拉嗪混悬液0.3 g/(kg·d)灌胃,化浊解毒方组予化浊解毒方混悬液20 g/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续14 d。记录各组大鼠疾病活动指数(DAI)评分,观察结肠组织病理学变化,检测血清IL-1β及血浆VIP、SP含量。结果模型组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显高于正常组(P均0.05),血浆VIP含量明显低于正常组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显。美沙拉嗪组、化浊解毒方组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显低于模型组(P均0.05),血浆VIP含量均明显高于模型组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显减轻;且化浊解毒方组血浆VIP含量明显高于美沙拉嗪组(P0.05),DAI评分及血清IL-1β含量均明显低于美沙拉嗪组(P均0.05),结肠黏膜病理变化明显轻于美沙拉嗪组,但2组血浆SP含量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论化浊解毒方能够有效改善溃疡性结肠炎大鼠结肠病理损伤,其作用机制可能与平衡细胞因子,进而抑制炎症免疫损伤有关。     

基于高通量转录组测序研究三黄汤缓解白念珠菌定植下DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的作用机制

利用高通量转录组测序技术探讨三黄汤(Sanhuang Decoction,SHD)治疗白念珠菌(Candida albicans,Ca)定植小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合Ca灌胃方式构建Ca定植下DSS诱导的小鼠UC模型,并予以SHD灌肠治疗;观察小鼠一般状态、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度和结肠黏膜损伤指数(colon mucosa damage index,CMDI)变化;HE染色法进行组织病理学分析;平板培养法检测小鼠肠道Ca载荷;ELISA法检测小鼠血清抗酿酒酵母抗体(anti-saccharomces cerevisiae antibody,ASCA)和β-1,3-葡聚糖的含量,以及血清和肠组织TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平;高通量转录组测序技术分析对照组、模型组和三黄汤组的差异表达基因,并对差异表达基因进行GO和KEGG pathway富集分析;qRT-PCR和Western blot检测差异基因显著富集的NOD样信号通路相关基因NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β的表达水平。结果显示,SHD灌肠治疗可改善UC小鼠的一般状态,降低DAI评分;SHD能减少肠道Ca载荷,减轻肠道充血、糜烂和结肠缩短程度,并且降低血清β-1,3-葡聚糖含量,下调血清和肠道组织TNF-α、IL-1β和IL-6水平;SHD组vs模型组有383个差异表达基因,显著富集于免疫系统过程、细菌防御反应和固有免疫反应等生物学过程,KEGG pathway分析提示差异基因显著富集于NOD样受体信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用和视黄醇代谢等信号通路;SHD下调UC小鼠结肠组织NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平。以上结果表明,SHD可缓解Ca定植的小鼠UC,其作用机制可能与其对NOD样受体信号通路调控有关。