禽源H3N2流感病毒NA基因G170R突变对奥司他韦耐药性的分析

目的探讨H3N2小鼠适应株NA基因G170R突变,对奥司他韦是否具有耐药性。方法在小鼠鼻内接种病毒前后分别给小鼠灌胃奥司他韦,分为预防治疗组,治疗组,病毒感染对照组,空白对照组。观察小鼠体重变化情况及死亡情况,每三日各组取肺组织,测定肺组织病毒滴度。结果预防治疗组和治疗组的小鼠在鼻内接种病毒后体重都有所下降,但在感染后期小鼠体重都升高并且无死亡;病毒感染对照组小鼠在鼻内接种病毒后体重迅速下降,直至第8 d小鼠全部死亡。病毒感染对照组小鼠肺病毒滴度比预防治疗组和治疗组小鼠肺病毒滴度高,且到实验第8 d,病毒感染对照组小鼠全部死亡,而预防治疗组小鼠和治疗组小鼠肺病毒滴度都在检测值以下。结论 NA基因G170R突变的H3N2小鼠适应株对奥司他韦暂无耐药作用。     

磷酸奥司他韦治疗甲型H1N1流感临床研究

目的分析奥司他韦在临床治疗甲型H1NI流感患者过程中对病情变化及预后的影响。方法采用回顾性分析方法对我院257例甲型H1N1流感患者的临床资料。结果257例患者根据病情划分为普通型、重症型和危重型3组。三组患者年龄、发热时间和平均住院时间比较,差异有显著性（P〈0．001）,使用奥司他韦治疗的比例分别为20％、28％和81％。在发病48小时内开始奥司他韦治疗患者与发病48小时后开始治疗患者比较,发热持续时问和病毒核酸阳性持续时间比较差异有显著性（P〈0．05）。死亡患者与存活患者开始奥司他韦治疗时间比较明显延迟,两组比较差异有显著性（P〈0．001）。结论发病后48小时以后开始磷酸奥司他韦治疗可能导致发热等症状和病毒核酸阳性持续时间延长,并可能导致病死率增加。     

磷酸奥司他韦治疗流行性感冒的进展

流行性感冒 (以下简称流感 )是由一种正黏病毒漯科病毒引起的急性呼吸道疾病 ,该病毒有三种类型 ,Ａ型、Ｂ型和Ｃ型流感病毒。Ａ型和Ｂ型流感病毒可引起呼吸道急性发热性感染 ,特点为突然出现发热、不适、头痛、肌痛和咳嗽等症状。虽然这种感染一般属于自限性疾病 ,但在儿童、老年和免疫力低下者 ,可引起死亡。在美国 ,估计每年有 2 0 0 0 0人死于流感。近年来出现了一些针对流感的新药和疫苗 ,但死于流感的人数并无下降。 1994年由ＧｉｌｅａｄＳｃｉｅｎｃｅｓ和Ｈｏｆｆｍａｎｎ ＬａＲｏｃｈｅ共同研制出了用于治疗和预防流感的一种新药…     

磷酸奥司他韦治疗流行性感冒的多中心临床研究

目的 观察磷酸奥司他韦在自然获得流行性感冒（以下简称流感）受试者中的临床疗效,安全性及耐受性。方法 采用随机,双盲和安慰剂对照的多中心临床试验设计。共入组478例,入组条件为年龄≥18岁,≤65岁,发热≥37.8℃,至少有两个流感样症状;出现症状后还需眼过36h,合格的受试者随机接受磷酸奥司他韦75mg或安慰剂治疗,每日2次,共5d。结果 证实为流感患者（即ITTI总体）有273例,试验组134例,对照组139例。ITTI总体试验组疾病持续时间中位数为91.6h(95%可信区间为80.2-101.3h),对照组疾病持续时间中位数为95.0h(95%可信区间为84.5-105.3h),两组疾病缓解率差异有显著性（P=0.0196),共有459例可进行安全性分析,试验组和对照组不良反应发生率差异无显著性,不良反应主要为消化系统症状。结论 磷酸奥司他韦在流感发病后早期使用可以明显缩短疾病的持续时间,减轻症状的严重程度,其安全性和耐受性较好,适合在临床中推广使用。     

葛根汤联合奥司他韦治疗甲型H1N1流感患者的临床分析

目的 分析葛根汤联合奥司他韦治疗轻症甲型H1N1流感临床疗效及对炎症因子的影响。方法 选择2019年11月至2021年3月我院收治的52例甲型H1N1流感患者,随机分为对照组25例,观察组27例。对照组采用奥司他韦治疗,观察组采用葛根汤联合奥司他韦治疗。比较两组的疗效、中医证候评分、炎症相关因子水平、Th17细胞亚群变化情况。结果 观察组27例中,显效18例(69.23%),有效7例(25.93%),总有效率92.59%,较对照组高(P<0.05)。观察组TNF-α、CRP、IL-6、IFN-γ显著下降,中医证候评分优于对照组(P<0.05)。观察组淋巴细胞亚群分布CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺显著低于对照组(P<0.05)。治疗后观察组患者WBC数、EOS%低于对照组(P<0.05)。观察组IgA、IgG、IgM高于对照组(P<0.05)。结论 葛根汤联合奥司他韦治疗甲型H1N1流感的疗效较单独使用奥司他韦治疗优,能有效改善炎症反应和免疫功能,具有临床意义。     

帕拉米韦与奥司他韦对流感病毒肺炎患者的疗效及安全性分析

<正>流感病毒肺炎是由于感染流感病毒逐渐蔓延导致的肺部炎症,主要是经上呼吸道感染[1-2]。流感病毒感染仍然是全球卫生一个主要的问题,近年来新型流感病毒不断出现,由于缺乏免疫记忆,显著增加了住院率和病死率[3-4]。目前,临床对流感病毒肺炎主要采用神经氨酸酶抑制剂(nueraminidase inhibitors,NAIs)进行治疗,如帕拉米韦、奥司他韦[5-6]。由于该病病程较长,病毒变异速度快,长时间使用NAIs容易产生耐药性,甚至扩大病毒突变范围[7-8]。因此,在使用NAIs治疗时,缩减用药时间及剂量,快速缓解临床症状是NAIs的临床应用中亟待解决的问题。在已有的相关研究中,帕拉米韦可以减轻儿童流感病毒肺炎的症状持续时     

国产奥司他韦治疗流行性感冒的随机对照临床研究

目的 评价国产奥司他韦治疗流行性感冒(流感)的有效性与安全性.方法 采用随机单盲对照试验,国产组采用国产奥司他韦治疗,进口组采用进口奥司他韦治疗,用法均为75 mg/次,每日2次口服,疗程5 d.对两组治疗前、后的各项指标进行评价,以此判断疗效.两组基线和不良反应比较采用卡方检验,疗效差异性比较采用配对t检验.结果 共入选209例患者,其中国产组98例,进口组111例.两组在体温动态变化方面比较,差异无统计学意义(t=0.061,P>0.05).进口组症状评分在24～48 h内下降速度快于国产组,但至72 h时接近同一水平,两组比较差异无统计学意义(t=0.875,P>0.05).两组在不良反应方面比较,差异无统计学意义(X2=0.197,P>0.05).结论 国产奥司他韦治疗流感与进口奥司他韦同样安全、有效.     

磷酸奥司他韦治疗流行性感冒的临床疗效和安全性

目的 验证磷酸奥司他韦在自然获得流行性感冒(流感)患者中的临床疗效并观察其安全性和耐受性。方法 采用随机、双盲和安慰剂对照的临床试验设计。95例患者随机接受磷酸奥司他韦75mg或安慰剂治疗。结果 证实流感患者(即ITTI总体)60例，治疗组29例，对照组31例。ITTI总体治疗组疾病持续时间中位数为74．5h(95％可信区间为57．0—104．3h)，对照组疾病持续时间中位数为119．0h(95％可倍区间为90．4—138．8h)，两组疾病缓解率在统计学上差异有显著性(P＝0．0135)。ITTI总体治疗组症状总分下降值的曲线下面积中位数为1515．2，高于对照组的1233．8，但无统计学意义(P＝0．1276)。共91例可进行安全性分析，总结不良反应的发生率，治疗组和对照组无统计学差异。不良反应主要为消化系统症状。结论 磷酸奥司他韦在流感发病后早期使用，可以明显缩短疾病的持续时间、减轻症状的严重程度，而且其安全性和耐受性好。     

磷酸奥司他韦治疗高危人群流行性感冒患者多中心临床随机对照研究

目的　观察磷酸奥司他韦在患有慢性呼吸系统疾病和慢性心脏疾病的流行性感冒 (流感 )患者中的临床疗效及安全性。方法　采用随机、对照、开放性的多中心临床试验设计。患有慢性支气管炎、支气管哮喘、支气管扩张、阻塞性肺疾病等慢性呼吸系统疾病或慢性心脏疾病的人群 ,在流感流行季节内有发热≥ 37 8℃并至少有 2项流感样症状 ,在出现症状后 4 8h内 ,合格的受试者随机接受磷酸奥司他韦 75mg ,每天 2次 ,共 5d(试验组 )或只给予对症治疗 (对照组 )。结果　 10 8例受试者中被证实为流感患者 (即感染总体 ,ITTI)共 5 6例 ,其中 (试验组 ) 2 7例 ,对照组 2 9例。试验组和对照组流感症状平均缓解时间分别为 (110± 12 6 )h和 (174± 93)h ,差异有显著性 ,试验组比对照组缩短6 4h(36 7% ) ;症状总评分以曲线下面积 (AUC)表示 ,分别为 (817± 4 6 7)分和 (14 35± 6 4 7)分 ,两组差异有非常显著性 ,试验组比对照组减少 6 18分 (4 3 1% )。两组流感平均发热持续时间分别为 (5 7±4 5 )h和 (10 4± 77)h ,两组差异有显著性 (F =7 19,P =0 0 0 98) ,试验组比对照组平均发热持续时间缩短达 4 6 8h(4 5 0 % )。试验组恢复到感染流感前基础状态所需时间平均为 6d ,对照组平均为 11d。并发症的发生率两组分别为 1     

磷酸奥司他韦对上海及周边地区不同流行性感冒病毒亚型的体外抗病毒效果

目的 了解上海及周边地区近年来流行性感冒(流感)病毒流行株对磷酸奥司他韦的敏感度及是否存在耐药株.方法 从2004-2006年上海市、江苏省无锡市和浙江省德清县流感监测和暴发病例分离到的流感病毒中,随机抽取B型、H1亚型、H3亚型的部分流感病毒,用中性红吸收法在体外检测磷酸奥司他韦的抗病毒作用,以50%抑制浓度(IC50)表示药物的抗病毒效果.方差分析检验药物对各亚型流感株IC50的差异.结果 磷酸奥司他韦对研究使用的50株不同型和亚型流感病毒皆有抑制病毒感染细胞的效果,IC50均＜25 mg/L.药物对B亚型病毒的效果较差,IC50为19.97 mg/L(15.16～22.36 mg/L),高于A/H1N1亚型的8.15 mg/L(0.02～22.36 mg/L,P＜0.05)和A/H3N2亚型的10.92 mg/L(0.08～19.72 mg/L,P＞0.05);对于不同年份分离的流感病毒,药物效果有所变化.结论 磷酸奥司他韦对上海及周边地区的流感病毒具有较好的体外抗病毒效果,需要建立监测网络来监控药物的效果和病毒的耐药情况.     

福建省2009年甲型H1N1流感病毒NA基因特征及对达菲的耐药性

目的监测福建省甲型H1N1流感病毒NA基因的变化以及对达菲的耐药情况,为临床诊疗和疾病控制提供参考依据。方法从福建省流感监测网络中随机选取23株甲型H1N1流感病毒,经病毒核酸提取和一步法RT-PCR扩增,获得NA基因片段,双向测定核苷酸序列,分析NA基因序列和重要氨基酸位点特征。结果 23株甲型H1N1流感病毒NA片段基因与A/California/07/2009(H1N1)代表株的核苷酸序列进行比较,同源性高达98.1%以上;23株毒株NA蛋白第275位氨基酸均为组氨酸。结论随机选取的23株甲型H1N1流感病毒NA基因片段保持高度同源并且对达菲仍然敏感。随着国内外达菲耐药株的不断出现,应加强耐药性监测,为制定应对甲型H1N1流感流行措施提供参考。     

重组人干扰素α-2b雾化吸入联合奥司他韦治疗小儿病毒性肺炎临床分析

目的分析重组人干扰素α-2b雾化吸入联合奥司他韦治疗小儿病毒性肺炎的临床疗效。 方法选取2020年4月至2021年4月我院收治的64例小儿病毒性肺炎患者为对象,随机分为观察组33例和对照组31例。统计两组病毒性肺炎患儿的疗效、临床症状消失时间、治疗前后血清免疫球蛋白和补体水平与不良反应发生情况。 结果两组病毒性肺炎患儿经治疗后,总有效率无统计学差异(P>0.05);观察组的有效率高于对照组(P<0.05)。观察组患儿的咳嗽缓解、肺部啰音消失与体温复常时间短于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组血清IgA、IgG、IgM水平高于对照组(P<0.05),补体C3、补体C4水平均低于对照组(P<0.05)。 结论重组人干扰素α-2b雾化吸入联合奥司他韦治疗小儿病毒性肺炎的疗效好,联合治疗有利于促进临床症状好转,恢复患儿免疫功能。     

2018-2020年克拉玛依市甲型H3N2流感病毒分子特征分析北大核心CSCD

目的了解克拉玛依市甲型H3N2流感病毒HA和NA基因特征,为防控提供科学依据。方法收集2018-2020年克拉玛依市甲型H3N2流感毒株进行HA和NA基因序列测定,运用Mega软件与疫苗株进行序列比对和分析。结果 18株毒株HA基因与A/Hong Kong/4801/2014同源性高于A/Kansas/14/2017,NA基因与A/Hong Kong/4801/2014同源性低于A/Kansas/14/2017。相对疫苗株,克拉玛依市毒株已出现氨基酸同时在2个及以上抗原决定簇发生替换;HA蛋白均发生了糖基化位点的改变;未发现与耐药相关位点突变。结论 2019-2020年克拉玛依市毒株与当年度疫苗推荐株匹配度降低且HA已发生抗原漂移,可能导致本地区H3N2毒株流行,神经氨酸酶抑制剂类药物依旧能够有效治疗流感,应加强对流感病毒HA和NA基因进行监测。     

甲型流感病毒株H1N1(09pdm)的分离及HA和NA基因分析北大核心CSCD

目的对成都某部人感染甲型流感病毒进行分离鉴定和基因突变分析。方法采集甲型流感患者咽拭子标本,通过MDCK细胞分离病毒毒株;采用免疫荧光法鉴定其感染细胞能力,采用基因分型特异性引物鉴定病毒亚型,PCR扩增血凝素基因(HA)和神经氨酸酶基因(NA)后测序,与NCBI数据库在线比对并利用MEGA软件构建系统发育进化树,分析突变位点。结果从甲型流感患者咽拭子标本中分离出1株流感病毒,经型特异性引物PCR鉴定为H1N1(09pdm)亚型,该毒株在37℃时对细胞致病力较强。免疫荧光检测到分离毒株感染细胞内甲型流感病毒核蛋白(NP)高表达,甲型流感病毒NP蛋白在细胞核和细胞质中均有大量分布。利用反转录PCR和测序获得该毒株HA和NA全长基因序列。在线比对及系统发育树分析显示,该毒株HA和NA序列与2017-2018流感季其他国家流行株同源性均>99%。对HA氨基酸突变位点进行分析,其序列的155位点存在组氨酸-酪氨酸(H-Y)点突变,该点突变也发生Influenza A/Hawaii/24/2018(H1N1)(MH245873)、Influenza A/North Carolina/19/2018(H1N1)(MH245873)和In-fluenza A/Missouri/51/2017(H1N1)(MH083792)毒株上。NA氨基酸序列与近期流行的毒株均相同。结论本起流感病毒株H1N1(09pdm)的HA、NA基因序列与同期其他国家流行株高度相似,但在HA氨基酸序列的155位点存在一个组氨酸-酪氨酸的点突变,其意义尚不清楚。     

福建省127例新型甲型H1N1流感病例的临床特点分析

目的 研究福建省127例治愈出院的新型甲型H1N1流感(简称甲型流感)病例的临床特点及预后.方法 回顾总结福建省2009年5-7月临床及实验室确诊的127例甲型流感病例的临床资料,应用SPSS 11.5统计分析,计数资料采用描述性分析,计量资料采用独立样本非参数检验.结果 127例甲型流感病例中,男72例,女55例,均治愈.发病中位年龄为21岁(5个月至58岁),潜伏期1～12 d.年龄≤5岁病例的临床症状持续时间为(8.2±4.1)d,较>5岁病例的症状持续时间长[(5.4±3.0)d,z=3.182,P<0.01].本病临床症状主要为发热、咳嗽、咳痰及咽痛等流感样症状.中、高度发热组症状持续时间为(6.4±4.0)及(6.8±3.2)d,明显高于无发热组及低热组[(4.7±2.4)及(4.8±2.1)d,Hc=9.729,P<0.05].白细胞升高者症状持续时间为(8.5±4.2)d,明显高于白细胞低下及正常组[(6.3±4.7)及(5.4±2.8)d,Hc=4.729,P>0.05].淋巴细胞计数升高者症状持续时间为(6.8±3.3)d,明显长于正常组及淋巴细胞减少组[(5.2±3.2)及(5.4±3.4)d,Hc=10.105,P<0.05].6例X线胸片出现斑片状阴影,与X线胸片正常患者的症状持续时间比较无明显不同[(8.1±5.7)及(5.6±3.1)d,z=1.286,P>0.05].125例患者给予奥司他韦治疗,发病48 h内用药的患者症状持续时间为(4.7±2.2)d,较发病48 h后用药的患者症状持续时间[(7.4±4.1)d]明显缩短(z=4.907,P<0.01),治疗效果佳,并发症少,预后良好.结论 本组患者临床症状较轻,以上呼吸道感染症状为主,症状持续时间与年龄、发热程度及外周血白细胞计数密切相关,≤5岁、体温>38℃、血白细胞和淋巴细胞计数升高者症状持续时间长;早期应用奥司他韦抗病毒治疗有助于缩短病程;本病病程有自限性,未发生合并症者预后良好.     

2018-2020年山东省甲型H1N1流感病毒NA基因变异和耐药分析北大核心CSCD

目的监测山东省甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因变化及其对神经氨酸酶抑制剂(NAIs)的耐药情况。方法从山东省2018-2020流感监测年度中选取20株甲型H1N1流感病毒,提取病毒核酸后对NA基因进行测序,利用生物信息学软件分析NA基因上与耐药有关的氨基酸位点及其基因变异情况。利用荧光法对选取的流感病毒进行生物学耐药试验,检测病毒对奥司他韦和扎那米韦的敏感性。结果选取的20株甲型H1N1流感病毒中有1株奥司他韦耐药(IC50值为233.8nmol/L),其余19株流感病毒对奥司他韦均敏感,IC50平均数为0.34nmol/L(0.14~0.81 nmol/L)。20株甲型H1N1流感病毒均对扎那米韦敏感,对扎那米韦IC50平均数为0.31nmol/L(0.13~0.69nmol/L)。NA基因测序显示奥司他韦耐药株存在H275Y基因变异。山东省近两个监测年度甲型H1N1流感病毒同源性较高,在进化树上交叉分布,与疫苗株亲缘关系较近,且未出现处于NA蛋白抗原决定簇区域内的变异。结论山东地区甲型H1N1流感病毒对NAIs耐药比例较低,临床上可继续使用此类药物,并需加强耐药性监测。     

温州地区重症甲型H1N1流行性感冒的临床特征与治疗分析

目的 了解温州地区住院重症甲型H1N1流行性感冒(流感)的临床特征并探索临床有效的治疗方法.方法 分析住院的42例重症甲型H1N1流感病例临床资料,总结重症甲型H1N1流感的临床特点及发展规律.结果 42例重症甲型H1N1流感病例均以发热、咳嗽起病,39例有咳痰,其他依次为咽痛、畏寒等;WBC正常或降低,C反应蛋白升高30例,血细胞沉降率增快30例,40例患者出现肺部影像学改变.所有患者常规予奥司他韦抗病毒治疗,并及时予有效抗菌药物治疗及对症处理,均未使用糖皮质激素.对有基础疾病者给予相应的对症治疗.3例患者予抗真菌治疗,3例妊娠患者适时终止妊娠.结论 重症甲型H1N1流感病情进展快,迅速累及下呼吸道,应在出现发热症状后尽早诊断和治疗,预后良好.

Abstract：

Objective To investigate the clinical features and effective treatment of patients with severe type A H1N1 flu in Wenzhou. Methods The clinical data of 42 hospitalized patients with severe type A H1N1 flu were analyzed and the clinical features were summarized. Results A total of 42 patients with severe type A H1N1 flu all began with fever and cough. The symptoms of expectoration, pharyngalgia, chilly accounted for 92. 9%, 90. 5% and 42. 9%, respectively. The peripheral leucocyte counts were normal or reduced. C-reactive protein and erythrocyte sedimentation rate levels both increased in 30 patients (71.4%). About 95.2% (40/42) patients had changes of pulmonary imaging. All of the patients were treated with oseltamivir and effective antibiotic drugs as well as symptomatic management. No patients was treated with glucocorticoid. The patients with underlying diseases were given proper treatment. Three cases were treated with antifungal therapy and 3 pregnant patients were timely terminated of pregnancy. Conclusions Severe type A H1N1 flu progresses rapidly and the lower respiratory tract is involved soon after onset. Therefore, the patient should be diagnosed early and treated promptly after presenting fever, which will lead to good prognosis.     

陕西汉中盆地63例甲型H1N1流感病例流行病学和临床学分析

目的探讨甲型H1N1流感的流行病学和临床学特点。方法对我院收治确诊的63例甲型H1N1流感患者的流行病学资料,临床资料进行分析研究。结果发病年龄主要集中在6~22岁的少年儿童及青年学生中,占94%（59/63）。主要临床表现为发热、咳嗽、咳痰、咽痛等流感样症状,实验室检测,外周白细胞减少或正常者居多,淋巴细胞多升高。部分患者心肌酶、肝酶轻度升高,个别心律不齐,ST改变,热退后出现窦缓,有占19%的患者胸部X线有炎症改变。结论甲型H1N1流感传染性强,传播速度快,易引起暴发流行,临床症状较轻,在一般对症治疗同时给予抗病毒中药或奥司他韦治疗均能获得较好疗效。     

ANXA2敲除的A549细胞系的构建及其对H1N1和H9N2流感病毒复制的影响北大核心CSCD

目的旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建ANXA2敲除的A549细胞,并探索ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。方法本研究设计了3对靶向ANXA2基因外显子的特异性sgRNAs,分别将sgRNAs构建到LentiCRISPRv2载体上获得重组质粒,与辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒后感染A549细胞,通过嘌呤霉素压力及有限稀释法筛选ANXA2基因敲除的单克隆细胞株,用靶基因测序及Western-blot验证ANXA2的敲除效果,并通过CCK-8试验比较ANXA2敲除细胞和野生型A549细胞的细胞活力。再分别用人流感病毒WSN(H1N1)和禽流感病毒SD98(H9N2)感染ANXA2敲除和野生型A549细胞,经TCID_(50)检测ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。结果成功获得了ANXA2敲除的A549细胞系,且与野生型A549细胞相比,细胞活力无显著差异;ANXA2敲除后WSN(H1N1)和SD98(H9N2)流感病毒的病毒滴度均升高,其中ANXA2对SD98(H9N2)流感病毒的影响要大于WSN(H1N1)。结论本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了ANXA2敲除的A549细胞,并发现ANXA2敲除促进了流感病毒的复制,本研究为流感病毒复制和致病机制的研究奠定了基础。