左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖血脂的影响

目的 研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖、血脂的影响。方法 采用ig高脂乳剂、iv链脲佐菌素（STZ,38 mg/kg）和慢性应激联合的方法制备糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组：模型组,阳性药（二甲双胍0.18 g/kg+百忧解1.8 mg/kg）组,左归降糖解郁方高、中、低剂量（20.53、10.26、5.13 g/kg）组,同时以正常大鼠为对照组。各组造模同时ig给药,共4周;生化法检测各组大鼠血糖、糖化血红蛋白水平、胰岛素抵抗及血脂水平,ELISA法测定大鼠血浆皮质酮水平,HE染色观察大鼠肾上腺的病理改变。结果 与对照组比较,模型组大鼠血糖、糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）和血浆皮质酮水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平显著降低（P<0.05）,具有明显的胰岛素抵抗。给予左归降糖解郁方干预后,大鼠血糖、糖化血红蛋白、TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高,胰岛素抵抗程度减轻,血浆皮质酮水平明显降低（P<0.05、0.01）,肾上腺损伤程度减轻。结论 左归降糖解郁方可改善糖尿病并发抑郁症大鼠的血糖、血脂异常,该作用可能与其保护肾上腺,降低循环系统皮质酮水平有关。     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠学习记忆及海马超微结构的影响

目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠学习记忆和海马超微结构的影响。方法采用高脂灌胃、链脲佐菌素注射(38mg/kg)和慢性应激联合的方法建立糖尿病并发抑郁症动物模型,并随机分为5组:糖尿病并发抑郁症模型组,阳性药(二甲双胍0.18g/kg+氟西汀1.8mg/kg)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量(20.53 g/kg,10.26 g/kg,5.13g/kg)组,以正常组为对照。给药4周后,采用Morris水迷宫进行行为学评价,采用透射电镜观察海马细胞超微结构。结果Morris水迷宫实验,与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期(EL)明显延长,空间探索时间(SET)明显缩短(P0.05);与模型组比较,阳性药组和高剂量组大鼠EL明显缩短,SET明显延长(P0.05)。电镜下可见,正常组大鼠海马神经元细胞形态规则,染色质分布均匀,线粒体内部嵴清晰可见;模型组大鼠海马神经元胞体肿胀,内质网脱颗粒严重,线粒体内嵴消失;给予左归降糖解郁方高剂量后,海马神经元损伤程度减轻,部分胞内可见线粒体。结论左归降糖解郁方可明显改善模型大鼠的学习记忆功能,其可能通过保护海马神经元结构发挥治疗作用。     

左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下海马NVU结构蛋白的作用及机制研究

目的:从海马神经血管单元(neurovascular unit,NVU)结构蛋白探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)的作用机制.方法:采用海马神经元、星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞建立海马NVU体外共培养体系,采用葡萄糖联合皮质酮干预模拟DD环...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠前额叶皮层IR/IRS-1信号通路和能量代谢的影响

目的 观察左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠前额叶皮层胰岛素信号通路相关蛋白表达及能量代谢的影响.方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型.将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组,各组灌胃给予相应药物4周后,尾尖采血测量大鼠空腹血糖,旷场实验和强迫游泳实验评价大鼠抑郁样行...     

左归降糖解郁方调控经典Wnt信号改善糖尿病并发抑郁症海马神经干细胞增殖与分化研究

目的 研究左归降糖解郁方调控模拟糖尿病并发抑郁症脑环境下的体外海马神经干细胞增殖与分化作用及分子机制。方法 纯化和培养SD大鼠海马神经干细胞并通过标记巢蛋白（Nestin）进行荧光鉴定。取第3代海马神经干细胞进行实验,分为正常组、模型组、空白血清组、左归降糖解郁方含药血清组、左归降糖解郁方含药血清+海马无翅基因3a(recombinant wingless type MMTV integration site family member 3a,Wnt3a)信号抑制剂XAV-939组。在干细胞培养液中添加葡萄糖和皮质酮模拟糖尿病并发抑郁症脑环境进行造模,空白血清组和左归降糖解郁方含药血清组于造模同期分别给予不同血清。干预18 h后,采用WST-1检测干细胞活力,采用Brdu免疫荧光结合高内涵细胞成像技术评价干细胞的增殖能力,分别采用双皮质素（doublecortin,DCX）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、神经元核抗原（neuron specific nuclear protein,NeuN）免疫荧光评估干细胞的分化能力,采...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素抵抗的影响

目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素抵抗的调节作用。方法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为4组,模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g/kg+氟西汀1.8 mg/kg),左归降糖解郁方高、低剂量组(20.52、10.26g/kg),另设健康大鼠为对照组。各组大鼠ig给药28 d后,采用血糖仪及ELISA法检测空腹血糖及外周胰岛素抵抗程度。采用旷野实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为。采用免疫荧光法和Western blotting法检测大鼠海马胰岛素受体磷酸化蛋白(p-IR)、磷酸化的胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)的表达,采用Westernblotting法检测海马磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血糖显著升高并伴随明显的外周胰岛素抵抗,其在旷野实验中的活动次数显著降低、在强迫游泳实验中的不动时间显著延长;蛋白检测结果表明大鼠脑内p-IR、p-IRS-1、p-PI3K、p-Akt表达水平均显著降低。与模型组比较,左归降糖解郁方高剂量组大鼠血糖水平显著降低,外周胰岛素抵抗水平减轻,其在旷野实验中的活动次数显著增加、在强迫游泳实验中的不动时间显著缩短,而海马内p-IR、p-IRS-1、p-PI3K、p-Akt表达显著升高。结论左归降糖解郁方可有效调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马胰岛素信号通路,从而改善动物脑内的胰岛素抵抗状态。     

壮骨止痛解郁方对RAD模型大鼠行为学及FKN/CX3CR1信号通路的影响

目的:探讨壮骨止痛解郁方对类风湿性关节炎伴发抑郁症(RAD)模型大鼠行为学和趋化因子Fractalkine(FKN)及其受体CX3CR1的影响.方法:40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和中药组,除空白组外,其余各组采用Ⅱ型胶原蛋白-弗氏完全佐剂和慢性不可预知的应激加孤养建立RAD模型,应激造模的同时,西药组灌...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构AQP4、Cx43的影响

目的研究左归降糖解郁方(黄芪、贯叶连翘、姜黄、熟地黄、山茱萸等)对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构水通道蛋白AQP4和缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28 d慢性应激联合的方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组:模型组,阳性药(二甲双胍+盐酸氟西汀)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量组,以正常大鼠为空白组,灌胃给药4周。给药后,采用Morris水迷宫测试大鼠空间学习能力,HE染色法观察海马组织病理学,免疫组化法检测海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P0.01),海马细胞存在明显损伤,AQP4和Cx43表达下降,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,差异有显著统计学意义(P0.01),海马细胞形态趋于正常,且AQP4和Cx43表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。结论左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠的治疗作用可能与调控海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达有关。     

基于线粒体自噬介导的凋亡探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁证海马突触微环境损伤的保护作用

目的:基于线粒体自噬介导的凋亡探讨左归降糖解郁方(ZGF)对糖尿病并发抑郁症(DD)海马突触微环境损伤的保护作用.方法:建立DD大鼠动物模型及模拟DD环境的体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GluR2阻断剂(CNQX)组和ZGF组.采用免疫荧光法检测GluR2、Parkin、Cyt-C、SYN及PSD-95蛋白表达;...     

左归降糖解郁方调控Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路在糖尿病并发抑郁症海马NVU神经元凋亡中的保护作用

目的:探讨左归降糖解郁方调控Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路在糖尿病并发抑郁症(DD)海马神经血管单元(NVU)中神经元凋亡的保护作用及其机制。方法:原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元(Ne)、星形胶质细胞(As)与脑微血管内皮细胞(Bm),并对其进行免疫细胞化学染色鉴定;采用Transwell小室及高糖联合皮质酮干预构建DD海马NVU细胞模型;实验设正常对照组、模型对照组、10%空白血清对照组、mGluR_(2/3)激动剂5μmol/L组、PI3K阻断剂2μmol/L组、左归降糖解郁方32.8 g/kg 10%含药血清组。造模及给药18 h后,采用CCK8法检测NVU中海马神经元细胞存活力,采用ELISA法检测NVU中海马神经元细胞上清液谷氨酸(Glu)含量;采用免疫荧光联合高内涵细胞成像(HCA)分别检测NVU中AS细胞内代谢型谷氨酸受体2/3(mGluR_(2/3))蛋白表达水平和海马神经元细胞内的细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)蛋白表达水平;采用Tunel染色NVU中海马神经元细胞凋亡水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组海马神经元细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞上清液中Glu含量显著升高(P<0.01),AS细胞内mGluR_(2/3)蛋白表达显著上调(P<0.01),Ne细胞内ERK、Casepase-9蛋白表达明显上调、PI3K蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),海马神经元细胞凋亡显著增加(P<0.01);与模型对照组比较,左归降糖解郁方32.8 g/kg 10%含药血清组海马神经元细胞存活力显著增加(P<0.05),Glu含量显著降低(P<0.05),mGluR_(2/3)、ERK、Casepase-9蛋白表达显著下调,PI3K蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01),海马神经元细胞凋亡数量显著下降,且核固缩、染色质浓染等阳性特征明显减轻。结论:左归降糖解郁方可调控mGluR_(2/3)活化介导的Glu-mGluR_(2/3)-PI3K信号通路异常,这可能是其抑制糖尿病并发抑郁症海马神经元凋亡的重要机制。     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障紧密连接蛋白、IV型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马血脑屏障紧密连接蛋白(ZO-1)、IV型胶原蛋白(Co IV)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法采用ig高脂乳剂、尾iv链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)、28 d慢性应激联合的方法建立DD大鼠模型并随机分为5组:模型组,阳性药(盐酸二甲双胍0.18 g/kg+百忧解1.8 mg/kg)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量(32.82、16.41、8.20 g/kg)组,并以正常大鼠为对照组,每组10只。给药4周后,电镜下观察血脑屏障的形态变化,免疫组化法检测海马血脑屏障Co IV、ZO-1、α-SMA的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠ZO-1、α-SMA的表达下降,Co IV的表达升高,差异显著(P0.05);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠ZO-1、α-SMA的表达升高,Co IV的表达下降,差异显著(P0.05、0.01)。结论左归降糖解郁方可以保护DD大鼠血脑屏障的损伤,其保护机制可能与升高血脑屏障ZO-1和α-SMA的表达,降低Co IV的表达有关。     

左归降糖解郁方对自噬介导的糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经血管单元中神经元损伤的保护作用及其机制

目的探讨左归降糖解郁方(ZGF)对自噬介导的糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠海马神经血管单元(neurovascularunit,NVU)中神经元的保护作用及其机制。方法原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元、星形胶质细胞及脑微血管内皮细胞,构建海马NVU体外共培养体系,并进行免疫细胞化学染色鉴定。采用高糖(150mmol/L)联合皮质酮(200μmol/L)干预制备海马NVU细胞模型,实验设对照组、模型组、空白血清对照组和ZGF含药血清组。采用Furo-3/AM染色法检测海马NVU神经元细胞内钙水平,高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)检测海马NVU神经元细胞内自噬标志物自噬相关蛋白1(Beclin-1)、人微管相关蛋白轻链3II(LC3-II)及谷氨酸受体2(Glu R2)/Ca2+/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路关键蛋白的表达,TUNEL染色法观察各组海马神经元细胞凋亡。结果与对照组比较,模型组及空白血清对照组海马NVU神经元细胞内钙水平显著升高,自噬标志物Beclin-1、LC3-II蛋白表达水平显著升高,Glu R2、m TOR蛋白表达水平显著降低,AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)蛋白表达水平显著升高,且细胞凋亡明显增多;与模型组比较,ZGF含药血清组海马NVU神经元细胞内钙水平明显降低,自噬标志物Beclin-1、LC3-II蛋白表达水平降低,GluR2/Ca2+/mTOR信号通路中Glu R2、m TOR蛋白表达水平升高,AMPK蛋白表达水平降低,同时细胞凋亡显著减少。结论 ZGF对自噬介导的DD大鼠海马NVU神经元细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制与调控GluR2/Ca2+/mTOR信号通路及细胞凋亡有关。     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马Bcl-2,Bax,Caspase 8蛋白表达的影响

目的:探讨左归降糖解郁方(ZJJF)对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠海马B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)蛋白表达的影响。方法:采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38 mg·kg-1)与慢性应激联合的方法复制DD模型,并随机分为3组:模型组,阳性药(二甲双胍0.18 g·kg-1+氟西汀0.0018 g·kg-1)组,ZJJF(32.82 g·kg-1)组,ig给药4周后,采用旷场实验(OFT)实验,观察各组大鼠行为学改变;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测模型大鼠海马Bcl-2,Bax,Caspase 8蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠OFT实验中活动总数明显减少(P0.01);与模型组比较,阳性药和ZJJF(32.82 g·kg-1)组大鼠自主活动次数明显增多(P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠海马Bcl-2蛋白表达下降(P0.05),Bax,Caspase8蛋白表达显著升高(P0.01)。与模型组比较,阳性药组海马Bcl-2蛋白表达升高(P0.05),Bax,Caspase 8蛋白表达显著降低(P0.01)。与模型组比较,ZJJF(32.82 g·kg-1)组海马Bcl-2表达升高(P0.05),Bax,Caspase 8表达降低(P0.05,P0.01)。结论:ZJJF可改善糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁行为异常,该作用可能与抑制神经细胞凋亡,保护海马有关。     

基于自噬探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制

目的 从自噬角度探讨左归降糖通脉方(熟地黄、枸杞子、山茱萸、黄芪、黄连等)对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制。方法 将96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归降糖通脉方组(24 g·kg^-1)及二甲双胍+阿司匹林组(150 mg·kg^-1+15 mg·kg^-1),每组24只。除假手术组大鼠外,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续5 d。末次灌胃后采用线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型。术后进行神经功能评分;采用TTC染色法测定脑梗死率;检测大鼠血糖值及糖化血清蛋白含量;HE染色观察缺血半脑皮质区组织损伤;ELISA法检测缺血侧大脑皮质组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;Western Blot法检测皮质组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62蛋白表达情况;免疫荧光法检测皮质组织中LC3蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能损伤评分、脑梗死率、血糖水平、治疗前后的体质量...     

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马齿状回神经元树突及Wnt5a/RhoA信号通路的影响

目的 探讨左归降糖解郁方治疗糖尿病并发抑郁症的可能作用机制。方法 60只大鼠随机分为正常组、模型组、无翅型MMTV整合位点家族成员5a (Wnt5a)激动剂组、左归降糖解郁方组、左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组,每组12只。除正常组外,其余各组大鼠采用高脂饲料饲养、链脲佐菌素注射和慢性温和不可预知应激联用法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。造模成功后Wnt5a激动剂组大鼠给予双侧海马立体定位注射Wnt5a激动剂Foxy-5各5μl,连续7天;左归降糖解郁方组给予左归降糖解郁方20.52 g/(kg·d)灌胃;左归降糖解郁方+Wnt5a抑制剂组进行灌胃给药和双侧海马立体定位注射Wnt5a抑制剂Box5,给药剂量和注射方法同上。正常组和模型组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。各组灌胃均连续4周。干预结束后采用强迫游泳实验(不动时间)和旷场实验(活动次数)评价大鼠的抑郁样行为;检测大鼠的血糖和胰岛素含量,并计算胰岛素抵抗指数;采用高尔基染色观察大鼠海马齿状回神经元的树突形态;采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)注射及免疫荧光检测齿状回神经元增殖水平;采用RT-qPCR和Western ...     

左归降糖解郁方改善糖尿病并发抑郁症大鼠N-甲基D-天冬氨酸受体过激致海马突触损伤的作用机制

目的 研究左归降糖解郁方通过调节吲哚胺-2,3-双加氧酶（indoleamine 2,3-dioxygenasel,IDO）信号抑制糖尿病并发抑郁症大鼠海马N-甲基D-天冬氨酸受体（N-methyl D-aspartate receptor,NR）过激致海马突触损伤的作用机制。方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为空白组、模型组、IDO抑制剂（3 mg/kg）组、左归降糖解郁方（20.52 g/kg）组和阳性对照（二甲双胍0.18 g/kg＋氟西汀1.8 mg/kg）组。各组大鼠ig给药28 d后,采用旷场实验、强迫游泳实验和Morris水迷宫检测大鼠抑郁样行为和记忆认知功能;采用Western blotting和qRT-PCR检测海马IDO蛋白和基因表达;采用ELISA试剂盒检测血清和海马中γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）、CC族趋化因子配体2（CC chemokine ligand 2,CCL2）、色氨酸、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸（kynurenine acid,KA）、喹啉酸、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-6水平;采用免疫荧光法检测海马中离子钙接头蛋白-1（ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、突触素（synaptophysin,Syn）、突触后致密蛋白-95（post synaptic density protein-95,PSD-95）的表达;采用Western blotting检测海马中腺苷A1R受体（adenosine A1 receptor,A1R）、腺苷A2AR受体（adenosine A2A receptor,A2AR）、腺苷A3R受体（adenosine A3 receptor,A3R）、N-甲基D-天冬氨酸受体2A（N-methyl D-aspartate receptor 2A,NR2A）、N-甲基D-天冬氨酸受体2B（N-methyl D-aspartate receptor 2B,NR2B）和脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）蛋白表达;采用苏木素-伊红染色、Nissl染色和TUNEL法检测海马病理损伤及凋亡情况。结果 左归降糖解郁方能显著降低模型大鼠血糖水平（P<0.01）,并改善抑郁样行为,表现为旷场实验总距离和中心时间显著增加（P<0.01）、强迫游泳不动时间显著缩短（P<0.01）、Morris水迷宫实验定位巡航时间显著降低（P<0.05）和空间探索时间显著增加（P<0.01）。左归降糖解郁方组和IDO抑制剂均能通过显著下调IDO蛋白和基因表达（P<0.001）,并不同程度降低IFN-γ、CCL2、犬尿氨酸、喹啉酸水平（P<0.05、0.01）,逆转色氨酸-犬尿氨酸代谢紊乱;同时显著抑制Iba-1、GFAP表达（P<0.05、0.01）,并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平（P<0.05、0.01）,抑制体内炎症水平;进而降低A2AR、NR2A、NR2B蛋白表达（P<0.05、0.01）,增加A1R、A3R蛋白表达（P<0.05）,改善NR过度激活;最终提高Syn、PSD-95、BDNF表达（P<0.05）,显著改善海马病理损伤及降低神经元凋亡（P<0.05、0.01）,对海马突触损伤和神经元产生保护作用。结论 左归降糖解郁方通过抑制IDO水平,调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马色氨酸-犬尿氨酸代谢通路,从而改善NR过激致海马突触损伤,发挥抗抑郁作用。     

逍遥抗癌解郁方通过调控COX通路对乳腺癌并发抑郁模型小鼠的治疗作用及机制研究北大核心CSCD

研究逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁模型小鼠海马小胶质细胞和神经元损伤的干预作用及其机制。采用腋下接种4T1乳腺癌细胞联合皮下注射皮质酮(30 mg·kg^(-1))的方法构建乳腺癌并发抑郁小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性药组[卡培他滨(60 mg·kg^(-1))+氟西汀(19.5 mg·kg^(-1))],逍遥抗癌解郁方组(19.5 g·kg^(-1)),每组6只,另取6只正常小鼠作为正常组。各给药组灌胃相应药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每日1次,连续给药21 d。采用糖水消耗实验、旷场实验和新奇摄食实验评价小鼠抑郁行为;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和抑瘤率评价腋下肿瘤变化情况;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测小鼠海马白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、环氧酶-2(cyclooxyganese-2,COX-2)、前列腺素受体(glutamyl-prolyl-tRNA synthetase,EPRs)mRNA表达;免疫组化检测海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs蛋白的相对表达量,免疫荧光检测海马小胶质细胞活化标志分子CD11b的平均荧光强度;尼氏染色观察海马神经元形态变化;透射电镜观察海马神经元的超微形态变化。结果显示,与正常组比较,模型组小鼠糖水消耗、矿场总活动数均显著降低(P<0.05,P<0.01),新奇摄食实验首次摄食时间显著上升(P<0.01),抑郁样行为显著;海马中IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs表达显著升高(P<0.05,P<0.01),海马小胶质细胞活化,神经元明显损伤。与模型组相比,阳性药和逍遥抗癌解郁方给药后小鼠抑郁行为均明显改善;海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs含量均明显降低,海马小胶质细胞激活和神经元损伤情况得以缓解;阳性药抑瘤率为40.32%,逍遥抗癌解郁方抑瘤率为48.83%,肿瘤生长速度都慢于模型组。综上所述,逍遥抗癌解郁方可能通过COX信号通路的激活改善乳腺癌并发抑郁症模型小鼠海马小胶质细胞激活和神经元损伤。     

基于PERK/TXNIP/NLRP3通路探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠神经元细胞焦亡的影响

目的 基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路,探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死(diabetes mellitus complicated with cerebral infarction,DM-CI)大鼠神经元细胞焦亡的影响。方法 将95只大鼠随机分为假手术组,模型组,左归降糖通脉方低(12 g·kg^-1)、高剂量(24 g·kg^-1)组,阳性对照(吡格列酮二甲双胍片+阿司匹林肠溶片)组。除假手术组外,其余各组以高糖高脂饲料喂养4周后联合35 mg·kg^-11%链脲佐菌素(STZ)腹腔注射合并大脑中动脉闭塞(MCAO)术建立DM-CI大鼠模型。用蒸馏水,左归降糖通脉方低、高剂量,吡格列酮二甲双胍片和阿司匹林肠溶片进行相应干预,Zea-Longa评分法对大鼠进行神经功能缺损(NIHSS)评分,TTC染色法测量大鼠脑梗死体积,检测各组大鼠随机血糖和果糖胺水平,HE染色观察大鼠脑组织病理学变化,Western Blot法检测大鼠缺血侧脑皮质、海马区P...     

左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠SCFAs/GPR43/GLP-1/GLP-1R信号通路的影响

目的 基于短链脂肪酸（SCFAs）/G蛋白偶联受体43（GPR43）/胰高糖素样肽-1（GLP-1）/胰高糖素样肽-1受体（GLP-1R）信号通路探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死（DM-CI）大鼠的潜在作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归降糖通脉方低、高剂量组（12、24 g·kg^-1）和西药组（吡格列酮二甲双胍片140 mg·kg^-1+阿司匹林肠溶片27 mg·kg^-1）,除假手术组外,其余各组以高糖高脂饮食喂养4周后联合35 mg·kg^-1 1%链脲佐菌素腹腔注射合并大脑中动脉闭塞建立DM-CI大鼠模型。分别用蒸馏水、左归降糖通脉方低、高剂量、吡格列酮二甲双胍片和阿司匹林肠溶片进行相应干预,术后进行神经功能缺损（NIHSS）评分,TTC染色测量大鼠脑梗死体积,测量各组大鼠随机血糖浓度,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织病理学变化,气相色谱法检测盲肠内容物SCFAs含量,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清GLP-1含量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠回肠组织中GPR43和缺血侧脑组织中GLP-1R的蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠NIHSS评分、随机血糖、脑梗死体积显著升高（P<0.01）,SCFAs、GLP-1含量和GPR43、GLP-1R蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,左归降糖通脉方高剂量组和西药组大鼠NIHSS评分、随机血糖、脑梗死体积明显降低（P<0.05,P<0.01）,SCFAs、GLP-1含量和GPR43、GLP-1R蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。结论 左归降糖通脉方可改善DM-CI大鼠糖代谢紊乱、减轻神经功能损伤,其机制可能与左归降糖通脉方增加SCFAs含量,上调GPR43/GLP-1/GLP-1R信号通路的表达有关。