野生型Rb基因转移预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的：探讨人野生型Ｒｂ基因转移对预防血管成形术后再狭窄的作用，方法；通过逆转录病毒载体介导，将野生型Ｒｂ基因的转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，２１天后观察其对新生内膜形成的影响，并检测Ｒｂ蛋白表达水平，结果：成功地构建和包装了人野生型Ｒｂ基因的重组逆转录病毒载体，并在体外细胞中成功表达；     

野生型p53基因转移预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的探讨逆转录病毒载体介导的人野生型ｐ５３基因转移对预防血管成形术后再狭窄的作用。方法构建野生型ｐ５３基因逆转录病毒载体，通过逆转录病毒载体介导，将野生型ｐ５３基因转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，２１ｄ后观察其对新生内膜形成的影响，并检测ｐ５３蛋白表达水平。结果构建和包装了人野生型ｐ５３基因的重组逆转录病毒载体，并在体外细胞中表达；用逆转录病毒载体转导野生型ｐ５３基因至大鼠球囊损伤的颈动脉，免疫组化检测表明转导血管局部表达人野生型ｐ５３蛋白，且与对照组相比，损伤血管新生内膜／中层面积比降低了４４％。结论人野生型ｐ５３基因治疗对血管成形术后再狭窄有一定的预防作用     

HSV-tk基因对实验性血管成形术后再狭窄的抑制作用

为探讨转染单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ ｔｋ）基因联合ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ）治疗方案用于治疗冠状动脉成形术后再狭窄的可行性,构建了携带ＨＳＶ ｔｋ基因的复制缺陷型逆转录病毒,利用该病毒将ＨＳＶ ｔｋ基因转染至体外培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）和大鼠腹主动脉再狭窄模型的损伤动脉中,并均给予ＧＣＶ,分别观察上述处理对ＶＳＭＣ的增殖和新生内膜的形成是否有抑制作用。结果：该方案使培养的ＶＳＭＣ增殖受抑制,抑制程度对ＧＣＶ有剂量依赖关系;既往在恶性肿瘤中发现的旁观者效应,在培养的ＶＳＭＣ中也存在。同时,该方案使大鼠腹主动脉再狭窄模型的新生内膜面积减少。但单纯转染ＨＳＶ ｔｋ基因或单纯应用ＧＣＶ无论在体外还是在体内均无上述抑制作用。提示本基因治疗方案对人类冠脉成形术后再狭窄有治疗价值。     

转导血管内皮生长因子预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)预防血管成形术后再狭窄。方法建立动脉粥样硬化兔模型,利用球囊在该模型腹主动脉导入pcDNA3.0/hVEGF165(n=10),对照组导入空载体(n=10)。采用RT-PCR法检测外源VEGF基因的表达。术后2、4周观察转导外源基因对血管内皮修复的影响。术后1、2、4周行MRI检查,观察左肾动脉开口处上段被扩张腹主动脉的管腔面积变化。结果利用球囊导管能成功转导pcDNA3.0/hVEGF165,治疗组和对照组完成内皮修复的时间分别为2周和4周,术后2周治疗组和对照组的管腔面积分别为(7.95±1.42)mm2和(6.74±1.01)mm2,术后4周分别为(7.40±2.29)mm2和(2.21±1.44)mm2。结论在动脉粥样硬化兔模型局部血管利用球囊导管能成功地转导VEGF基因,有效促进局部血管内皮细胞的生长,取得抑制局部血管管腔狭窄的作用,这对于防止血管介入术后再狭窄发生具有十分重要的意义。     

预防经皮冠脉腔内成形术后再狭窄的研究进展

经皮冠脉腔内成形术(PTCA),是在X线电视导向下采用导管技木对冠太动脉狭窄或闭塞性病变进行扩张或再通的治疗方法.随着实施PTCA操作有的技术日益熟练,急性心肌梗死已经成为PTCA的主要适应症.但是,PICA后再狭窄是临床上的最大问题.从目前的研究情况来看,主要采用基因疗法、单克隆抗体、抗病毒及药物治疗等方法预防.     

重组组织因子途经抑制物(rTFPI)预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的研究重组组织因子途经抑制物对大鼠颈总动脉血管成形术后再狭窄的影响。方法健康雄性SD大鼠48只随机分成2组,重组组织因子途径抑制物组(rTFPI组)24只,生理盐水组24只。所有大鼠均行左颈总动脉球囊损伤术,将生理盐水0.10ml和rTFPI 50ug在体内分别导入到损伤血管段。并于7天内取不同时间点观察实验血管段血栓形成情况;于4周后测定横切面管腔面积、内膜面积、中膜面积和内/中膜面积(每份标本非连续切片3张,数值计算均值)。采用组织学病理学方法观察局部血管段病理变化,利用计算机图像分析处理,观察rTFPI对损伤动脉节段新生内膜的影响。结果与对照组相比,rTFPI在球囊损伤早期可抑制血栓形成;4周后实验血管段进行组织学检查结果显示rTFPI导入组横切管腔面积显著大于对照组(P<0.01);平均新生内膜面积、新生内膜与中膜面积比和对照组相比显著减少(P<0.05)。结论rTFPI能有效抑制球囊损伤后血栓形成及血管内膜的增生,可防治血管性成形术后再狭窄。     

血管内皮生长因子基因支架预防球囊扩张术后再狭窄的实验研究

近年研究表明,内膜增厚致再狭窄的始动因素是内皮细胞的损伤。我们利用血管内皮生长因子(VEGF)可以促进损伤内膜内皮化这一特性,将携带VEGF基因的多聚赖氨酸涂层支架置人球囊扩张术后的动脉粥样硬化兔腹主动脉,旨在评估在质粒介导下,由该涂层支架向血管内局部转基因的可行性及VEGF修复内膜、抑制再狭窄的效果。     

FasL配体基因治疗血管损伤后再狭窄的研究进展

血管损伤反应是参与动脉粥样硬化和血管再狭窄形成的共同机制 ,在动物血管再狭窄模型中 ,经历了 4个相互交错的阶段[1] ,即炎性细胞浸润 ,血栓形成 ,血管平滑肌细胞增生 ,最后是基质形成。ＰＴＣＡ术后再狭窄率高达 30 %～ 50 % [2 ,3] ,血管平滑肌细胞 (ＶａｓｌｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＣｅｌｌＶＳＭＣ)增生是主要的病理变化[4 ] ,而细胞凋亡与细胞增生存在密切关系 ,且参与了再狭窄的形成过程[5] 。促细胞凋亡基因Ｆａｓ配体 (ＦａｓｌｉｇａｎｄＦａｓＬ)导入ＶＳＭＣ ,能诱导ＶＳＭＣ细胞凋亡 ,抑制ＶＳＭＣ增生 ,在动物模型…     

反义人IGF-Ⅰ基因转移预防血管损伤后新生内膜增殖的实验研究

目的：观察人反义IGF－Ⅰ基因转移对抑制血管平滑肌细胞增殖的效果。方法：将反义IGF-Ⅰ基因转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，21天后观察其对新生内膜形成的影响。结果：与对照组相比，损伤血管新生内膜／中层面积比降低了41％（P＜0．001）。结论：反义人IGF-Ⅰ基因治疗可能对血管成形术后再狭窄有一定的预防作用。     

P53、Rb、IGF-I、AT1B基因转移对血管新生内膜增殖的影响

目的观察和比较人野生型ｐ５３基因、Ｒｂ基因、反义ＩＣＦ－Ｉ基因与大鼠反义ＡＴ１Ｎ基因对大鼠颈动脉损伤后新生 内膜增殖的影响。方法通过病毒载体介导,将上述４种基因分别转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中,２１ｄ后 观察并比较其对新生内膜形成的影响。结果与对照组相比,ｐ５３基因、Ｒｂ基因治疗组及反义ＩＧＦ－Ｉ基因治疗组的动脉 血管新生内膜／中层面积比均显著降低（ｐ＜０．０１）;与ＡｄＶβ ｇａｌ组相比,反义ＡｄＶＡＴ１Ｂ基因组的动脉血管新生内膜／中 层面积比显著降低（Ｐ＜０．０１）．而ｐ５３基因治疗组、Ｒｂ基因治疗组、反义ＩＧＦ－Ｉ基因组及反义ＡｄＶＡＴ１Ｂ基因组之间无显 著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论上述４种基因对血管成形术后再狭窄可能均有一定的预防作用。     

hVEGF基因防治血管成形术后再狭窄

目的 :观察人血管内皮生长因子 (h VEGF)基因对血管成形术后再狭窄的防治作用。 方法 :建立兔颈总动脉球囊损伤模型 ,以先期构建的真核表达质粒 pc DNA3/ h V EGF1 6 5 (5 0 0 μg,n=12 )和真核载体 pc DN A3(5 0 0 μg,n=12 )分别于血管腔内给药 ,给药后 2周、4周先行颈总动脉造影 ,再取材分别行 H- E、VB染色及 Northern blot分析。结果 :给药后 2周、4周颈总动脉造影示治疗组直径狭窄较对照组明显减少 ;病理检测示 2周、4周治疗组管腔狭窄率较对照组显著减轻 [(9.5 8± 1.35 ) % vs(31.72± 1.72 ) % ;(18.0 9± 2 .93) % vs (44 .0 5± 3.2 8) % ,P<0 .0 1];Northern blot分析显示 2周、4周治疗组特异性条带显色较对照组明显增强。 结论 :pc DNA3/ h VEGF1 6 5 裸质粒 DNA血管腔内给药能转染平滑肌细胞并持续表达至少 4周 ,促进了内皮细胞再生 ,减轻了血管成形术后再狭窄程度。     

Experimental study of adenovirus vector mediated-h VEGF<Subscript>165</Subscript> gene on prevention of restenosis after angioplasty

Summary This study evaluated the effects of adenovirus vector mediated human vascular endothelial growth factor-165 (hVEGF₁₆₅) gene on prevention of restenosis after angioplasty. Rabbit models of bilateral carotid artery injury were established by balloon denudation. The recombinant adenoviruses containing hVEGF₁₆₅ cDNA was directly injected into left side of the injured carotid arteries. On day 3 and week 3 after transfection the expression of VEGF was observed by RT-PCR and immunohistochemistry. The thrombokinesis, reendothelialization (rET) and intimal hyperplasia in carotid arteries were evaluated by computerized image analysis system 3 weeks after gene transfer. The changes in the VEGF gene-treated side were compared with the control side. Our results showed that 3 days and 3 weeks after hVEGF₁₆₅ gene transfer the VEGF mRNA and antigen expression were detectedin vivo. 3 weeks after the transfer, the carotid artery rET was markedly better in the VEGF gene-treated group compared with the control. The thrombokinesis, intima area/media area (I/M), maximal intimal and medial thicknesses (IT_max and MT_max) demonstrated a statistically significant decrease in arteries treated with VEGF gene as compared with the control group. It is concluded that VEGF gene transfer could be achieved by intra-arterial injection of recombinant adenoviruses. It might accelerate the restoration of endothelial integrity, inhibit thrombokinesis and attenuate intimal hyperplasia in the injured arteries after VEGF gene transfer. This procedure could be useful in preventing restenosis after angioplasty. Liu Qigong, male, born in 1968, Associate Professor This project was supported by a grant from Wuhan Chenguang Program (No. 20015005048)     

The mechanical study of vascular endothelial growth factor on the prevention of restenosis after angioplasty

Restenosis following percutaneous transluminalcoronary angioplasty ( PTCA) is one of the majorre-search subjects of coronary heart disease( CHD) .The mechanism is quite complicated and not yetclear,buttheimpairmentofendothelium isknown asthe primary evocative factor of the progress ofrestenosis.It is supposed to prevent the restenosisfollowing PTCA by accelerating restoration of en-dothelial integrity and function.In the experimentalstudies,it was proved that exogenic vascular en-dothelial…     

野生型p53基因抑制人结肠癌细胞的体内抑瘤效应观察

目的研究人野生型p53基因对人结肠癌SW1116细胞生长的影响。方法采用电穿孔法将正向携带有野生型p53基因cDNA的重组反转录病毒质粒导入有p53基因突变的人结肠腺癌SW1116细胞,筛选带外源p53基因的G418抗药性SW1116细胞克隆,对其进行生长速度、软琼脂集落形成及裸鼠成瘤等方面的检测,分析其生物学特性变化。结果导入人野生型p53基因使人结肠腺癌SW1116细胞的生长速度明显减慢(P<0.05或0.01)、软琼脂集落数量明显较对照组减少(P<0.05或0.01),移植瘤体积较对照组明显小(P<0.05)。结论人野生型p53基因对人结肠腺癌SW1116细胞有明确的抑瘤效应。     

The effect of magnetic stent on coronary restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty in dogs

探讨磁化支架对经皮经腔冠状埃及成形术 (PTCA)后冠状动脉再狭窄的防治作用。方法　 2 0只健康杂种犬 ,超大球囊反复扩张损伤靶血管 (前降支或旋支中段 )制备PTCA术后冠状动脉狭窄模型(>5 0 % ) ,后随机分成对照组和实验组各 10只。对照组靶血管置入普通Palmaz支架 ,实验组靶血管置入磁化Palmaz支架。手术前后不用抗血小板药和抗凝药 ,术后 6个月冠状动脉造影 ,并处死犬切取靶血管 3cm进行组织病理学检查。结果　冠状动脉造影冠状动脉再狭窄率对照组 30 % ,实验组 0 ;组织病理学检查靶血管平均内膜厚度 (对照组 2 .98± 0 .5 6mm) ,(实验组 1.13± 0 .4 1mm)有显著差异 ,P <0 .0 5。结论　磁化支架对犬PTCA术后冠状动脉再狭窄可能具有防治作用。     

hs-CRP和IL-6动态变化与脑动脉狭窄支架成形术后再狭窄的相关性研究

目的：探讨血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）和IL-6的动态变化与脑动脉狭窄支架成形术后再狭窄的相关性。方法回顾分析2011年3月至2013年3月在河南省南阳市中心医院行脑动脉狭窄支架成形术的患者65例,观察其术前、术后不同时间点hs-CRP和IL-6水平变化,并分析其与血管再狭窄的相关性。结果（1）脑动脉狭窄程度与患者血清hs-CRP和IL-6水平呈正相关（P＜0．05）。（2）术后各时间点患者hs-CRP和IL-6水平明显升高,并于术后12 h达到最高值后逐渐下降,而且再狭窄患者手术7 d后hs-CRP和IL-6水平均显著高于无再狭窄患者,差异均有统计学意义（P＜0．05）。（3）术后6个月与术前比较,无再狭窄患者血清hs-CRP和IL-6水平下降明显,但再狭窄患者的差异无统计学意义（P＞0．05）;有无再狭窄患者之间△hs-CRP和△IL-6比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论血清hs-CRP和IL-6可能在支架成形术后脑动脉再狭窄的过程中起着重要作用,监测血清hs-CRP和IL-6的动态变化对评估血管再狭窄具有一定价值。     

人野生型p53肿瘤抑制基因在烟草中的遗传转化

目的:构建人野生型p53肿瘤抑制基因的植物表达载体,并建立p53转基因烟草植株.方法:将人野生型p53肿瘤抑制基因编码区克隆于pUC19,pBI426和pCAMBIA2301载体,构建含人野生型p53基因的植物表达载体pCAM-BIA2301/p53,p53基因由2×CaMV 35S启动子控制表达.利用叶盘共培养法经根瘤农杆菌EHA105介导转化烟草,获得转基因烟草植株;用组织化学法,PCR、Southern杂交检测转基因烟草植株.结果:经组织化学法,PCR,Southern杂交检测表明人野生型p53基因已整合到转基因烟草植株的基因组中,并获得了的转p53基因烟草植株.结论:成功建立了含人野生型p53基因的转基因烟草植株,为进一步检测p53基因的生物活性和开辟生产药用蛋白的新途径奠定了基础.     

Experimental Study of Salvia Miltiorrhiza on the Prevention of Restenosis after Angioplasty

Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　Ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　ａｆｔｅｒ　ＡｎｇｉｏｐｌａｓｔｙＺＨＯＵＸｉａｏ－ｍｉｎｇ，ＬＵＺａｉ－ｙｉｎｇａｎｄＷＡＮＧＤａｏ...