核因子-κB在四逆汤预处理诱导大鼠心肌延迟预适应中的作用

目的:探讨四逆汤能否诱导心肌延迟预适应及其可能机制。方法:SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组、四逆汤预处理组。延迟缺血预处理组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血5min,再灌5min,反复循环3次,24h后缺血1h,再灌1h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5g·kg^-1·d^-1)连续3d,末次灌药24h后缺血1h,再灌1h。以心肌梗死面积为评价指标并测定心肌中超氧化物歧化酶的活性、丙二醛的含量,通过RT PCR检测MnSODmRNA及Cu ZnSODmRNA的表达并利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌NFκB亚单位P65的表达。结果:延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组心肌梗死面积明显小于缺血再灌注组,MDA的含量低于缺血再灌注组,SOD活性和MnSODmRNA的表达高于缺血再灌注组,NFκB发生核转位且蛋白表达显著高于缺血再灌注组。缺血再灌注组、延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组的Cu ZnSODmRNA表达均下降,3组之间无差异。结论:四逆汤能诱导心肌延迟预适应,其机制可能与NFκB的激活相关。     

四逆汤诱导延迟预适应抗心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的机制探讨

目的:探讨四逆汤预处理后诱导的心肌延迟预适应能否抑制心肌缺血再灌注(M I/R)后心肌细胞凋亡的发生及其可能机制。方法:SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组。缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,再灌1 h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 m l.kg-1.d-1)连续3天,末次灌药24 h后心肌缺血1 h,再灌1 h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,RT-PCR法检测bc l-xl mRNA/bc l-xs mRNA的表达情况并进行线粒体内凋亡诱导因子(AIF)的W estern b lotting分析。结果:四逆汤预处理24 h后可以减少M I/R后心肌细胞凋亡率,升高bc l-xlmRNA/bc l-xs mRNA表达的比值,减少AIF自线粒体的释放。结论:四逆汤诱导的延迟预适应可以减少M I/R造成的细胞凋亡,机制与其保护线粒体有关。     

四逆汤预处理对大鼠心缺血再灌注后心功能的延迟保护作用

目的:探讨四逆汤诱导的心肌延迟预适应对心缺血再灌注(MI/R)后心功能的影响及其可能机制。方法:缺血再灌注采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1h,再灌1h。四逆汤预处理灌胃(5g/kg·d)连续3天,末次灌药24小时后缺血1h,再灌1h。以大鼠左心功能为评价指标,通过RTPCR检测热休克蛋白70(HSP70)mRNA的表达情况,利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌HSP70的表达。结果:四逆汤预处理组与缺血再灌注组相比可以显著改善心功能,上调HSP70基因的表达及蛋白合成。结论:四逆汤预处理对MI/R后心功能的损害具有延迟保护效应,其机制与四逆汤诱导HSP70的表达密切相关。     

大鼠心肌缺血预适应延迟保护模型的制备

目的通过改进大鼠心肌缺血预适应延迟保护模型制备方法,提高造模成功率。方法选取SPF级健康成年Wistar雄性大鼠30只,体重（220±20）g,随机分为假手术组（S）、心肌缺血预适应组（IP）、缺血再灌注组（IR）,每组10只。假手术组只穿线不结扎;IP组模型建立：首先结扎冠状动脉左前降支5min,再灌注5min,重复3次,24h后缺血30min,再灌注2h;IR组模型建立：结扎冠状动脉左前降支30min,再灌注2h。整个实验过程在人工机械通气下完成,全程心电图监测,计算心肌梗死范围及检测心肌酶。结果 S组手术前后心电图无明显变化;IR组心电图心律失常频发,心肌缺血范围明显,心肌酶较S组显著升高;IP组较IR组心律失常减少,心肌缺血范围缩小,心肌酶降低。结论此造模方法能够成功制备大鼠缺血预适应延迟保护模型及缺血再灌注模型,可降低大鼠死亡率,提高造模成功率,可靠性强,操作简便,重复性强,结果稳定。     

当归四逆汤对心肌缺血大鼠血清一氧化氮及心肌一氧化氮合酶活性表达的影响

目的观察当归四逆汤对实验性心肌缺血模型大鼠血清一氧化氮(NO)及心肌一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响,为临床应用本方防治冠心病提供实验依据。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、当归四逆汤低剂量组[5 g生药/(kg·d)]、当归四逆汤高剂量组[10 g生药/(kg·d)]和复方丹参滴丸组[0.081 g/(kg·d)],每组10只。各给药组均按30 m L/kg灌胃给予相应药物,空白组和模型组灌胃同体积蒸馏水,1次/d,连续5 d。末次灌胃后1 h,除空白组腹腔注射生理盐水外,其余组均腹腔注射垂体后叶素30 IU/kg。注射后1 h处死大鼠,测定各组血清一氧化氮(NO)水平,并取心尖部心肌组织采用免疫组化法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。结果模型组血清NO水平明显低于空白组(P0.05),各给药组血清NO水平显著高于模型组(P均0.05),当归四逆汤低剂量组和高剂量组比较差异无统计学意义(P0.05)。光镜下显示,模型组eNOS活性弱于空白组,而各给药组eNOS活性均强于模型组。结论当归四逆汤可提高心肌缺血模型大鼠心肌组织eNOS活性,促进内源性NO生成和释放,从而发挥抗垂体后叶素所致大鼠心肌缺血作用。     

茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌保护机制的研究

目的研究茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌抑制的保护作用机制。方法取SPF级SD雄性大鼠100只,随机分成5组:假手术组、脓毒症组,茯苓四逆汤低剂、中、高剂量组(1.3 g/d、2.6 g/d、3.9 g/d)。假手术组、脓毒症组给予等容量0.9%氯化钠注射液,茯苓四逆汤各剂量组给予相应药物,均为灌胃给药;盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型,假手术组仅是暴露盲肠,造模后6 h开始给药,每日剂量分2次给药,直至造模后第3日,记录其生存状态,并在术前、术后24 h、48 h、72 h 3个时间点各选5只大鼠尾静脉取血并处死,取心肌组织后超低温保存备用,测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)水平。结果脓毒症组及中药各剂量组的大鼠TNF-α、IL-6、H-FABP明显升高,与假手术组差异有统计学意义(P <0.01);与脓毒症组同时间点比较,中药各剂量组的大鼠TNF-α、IL-6水平明显下降(P <0.01),H-FABP水平也明显下降(P <0.05);而中药各剂量组同时间比较发现,剂量越高,其TNF-α、IL-6水平下降越明显(P <0.01或P <0.05);不同剂量治疗组中比较发现,随着时间的延长,剂量越高的茯苓四逆汤对于改善H-FABP水平越好(P <0.05)。结论茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌抑制具有良好保护作用,其机制可能与减少炎症释放有关。     

参元丹对大鼠心肌缺血预适应心肌梗死面积及一氧化氮合酶、蛋白激酶C的影响

目的通过检测大鼠缺血心肌梗死面积的大小、血清一氧化氮合酶(NOS)变化、蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨参元丹的药理性预适应作用及其机制。方法选取清洁级健康成年Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重(274±42)g,鼠龄4月左右,随机分为6组,分别为对照组、再灌注组、假性缺血预处理组、缺血预处理组、药物预处理+缺血预适应组、药物预处理组,每组10只。分别造模、取血、取心肌组织。将心肌组织浸入10%甲醛溶液中固定,脱水,封蜡,切片,染色。应用HE染色方法对组织切片进行染色,4倍镜下采用彩色病理图像分析系统分析心肌梗死面积。将所取血液离心后取血清,用紫外分光光度法检测血清总NOS的活力和分NOS的活力。应用蛋白激酶C(PKC)免疫组化试剂盒对组织切片进行处理,20倍镜下观察PKC表达情况。结果参元丹能减少大鼠的心肌梗死面积,并与缺血预适应有协同作用,能够加强彼此的抗心肌缺血的能力。各组间血清NOS的变化差异无统计学意义(P0.05)。缺血预处理组、药物预处理+缺血预适应组和药物预处理组的PKC有明显表达,其余各组没有表达。结论参元丹能够减少心肌梗死的面积,具有药理性预适应样心肌保护作用,其作用机制可能与PKC介导有关。     

NO介导的油茶皂苷对在体大鼠产生的药理性预适应保护作用

目的:研究油茶皂苷(ＳＱＳ)预适应保护作用及ＮＯ的关系.方法:以ＩＳＯ诱发大鼠心肌缺血损伤为模型,使用特异性ＮＯ合成抑制剂(Ｍethylene blue(MET)测定大鼠ＥＣＧ及ＣＰＫ活性,ＦＦＡ和腺苷含量,结果:预适应ivSQS能有效地保护ＩＳＯ所致大鼠心肌损伤,先ivＭＥＴ 后再给预ＳＱＳ,则ＳＱＳ对心肌损伤的保护作用明显减弱,结论:ＳＱＳ对ＩＳＯ所致心肌缺血大鼠可产生药理性预适就应保护作用,该作用用ＮＯ所介导.     

四逆汤预防性给药抗心肌细胞凋亡的作用机制探讨

目的：探讨四逆汤预防性给药24 h后能否抑制心肌缺血再灌注（MI/R）后心肌细胞凋亡的发生及其可能涉及的线粒体机制。方法： SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组。缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎，缺血1 h，再灌1 h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 g·kg^-1·d^-1)连续3 d，末次灌药24 h后心肌缺血1 h，再灌1 h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率，进行细胞色素C及抗凋亡蛋白bcl-xl的Western blotting分析并检测caspase-3的活性。结果：四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率，减少细胞色素C自线粒体的释放，上调bcl-xl蛋白的表达，抑制caspase-3的活化。结论：四逆汤预防性给药24 h后可以减少MI/R造成的细胞凋亡，其机制可能与抑制细胞凋亡的线粒体信号转导通路有关。     

四逆汤对血管性痴呆大鼠学习记忆力的影响

目的:探讨四逆汤(SND)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力的影响及作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、VD模型组和SND组,ip硝普钠后反复夹闭及再通双侧颈总动脉复制VD大鼠模型,SND组给予四逆汤(3.5 g·kg-1)ig28 d。Y型电迷宫和水迷宫检测大鼠学习记忆能力,测定脑组织中一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠错误反应次数明显增多,全天总反应时间明显延长(P<0.05),逃避潜伏期和总路程明显延长(P<0.05),脑组织NOS及NO含量升高(P<0.05),GSH-Px活性下降(P<0.05)。与VD模型组比较,SND能提高脑组织GSH-Px活性(P<0.01),降低NOS及NO含量(P<0.01),大鼠错误反应次数明显减少,全天总反应时间明显缩短(P<0.05),潜伏期和总路程均缩短(P<0.01)。结论:SND可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与增强抗氧化能力有关。     

增液汤和四逆汤抗心室重构的比较研究

目的探讨寒性方增液汤和热性方四逆汤对实验性心室重构的影响.方法采用皮下注射异丙肾上腺素及腹主动脉不完全结扎法分别制备小鼠和大鼠心室重构模型、观察增液汤和四逆汤对心脏指数、血压、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、醛固酮(ALD)、内皮素(ET)、羟脯氨酸(Hyp)的影响.结果与正常对照组或假手术组比较,模型组心脏指数显著增加,血压升高,心肌组织AngⅡ、ET、HyP含量明显增加,血清ALD含量明显增加;增液汤能明显减少心脏指数,降低血压,减少AngⅡ、ET、Hyp、ALD含量;四逆汤除了对心肌组织ET含量有一定的降低作用外,对其他指标作用不明显.结论寒性方增液汤抗心室重构作用显著,其作用机制与降低血压、抑制神经内分泌因子有关.热性方四逆汤无明显抗心室重构作用.     

Cardioprotective effect of sasanquasaponin preconditioning via bradykinin‐NO pathway in isolated rat heart

Sasanquasaponin (SQS) is an effective component of Camellia oleifera Abel. This study was designed to investigate the cardioprotective effect of SQS against ischemia‐reperfusion (I/R) injury and the possible mechanism in isolated rat hearts. These hearts were pretreated by SQS only or SQS and HOE140 in different groups, and then subjected to I/R injury. Hemodynamic parameters, oxidative injury, and NO level were measured. The results showed that SQS preconditioning could decrease the incidences of arrhythmias and improve the heart functions. In addition, SQS preconditioning could protect isolated I/R injured heart against lipid peroxidation, as evidenced by increases in SOD and GSH‐Px activity, and by decreases in contents of MDA, ROS generation. However, HOE140 treatment reversed all these indexes. NO production was significantly decreased after a treatment with HOE140. So we can propose that SQS preconditioning could induce the cardioprotective effects and the possible mechanism was that the activation of bradykinin‐NO system by SQS preconditioning had an inhibition effect on ROS generation in isolated heart. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

四逆加人参汤联合常规治疗对心力衰竭患者的临床疗效

目的研究四逆加人参汤联合常规治疗对心力衰竭患者的临床疗效。方法 100例患者随机分为对照组和观察组,每组50例,对照组给予常规治疗(地高辛、氢氯噻嗪、呋塞米、螺内酯),观察组在对照组基础上加用四逆加人参汤,疗程30 d。检测心力衰竭疗效、中医证候疗效、NT-proBNP、AngⅡ、hs-CRP、H-FABP、心功能指标(LVEF、LVEDD、LVESD)变化。结果观察组心力衰竭、中医证候总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组NT-proBNP、AngⅡ、hs-CRP、H-FABP、LVEDD、LVESD低于对照组(P<0.05),LVEF更高(P<0.05)。2组均无严重不良反应。结论四逆加人参汤联合常规治疗可改善心力衰竭患者心功能,降低NT-proBNP、AngⅡ、hs-CRP、H-FABP水平,安全性较高。     

当归四逆汤辅助治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的效果及其机制研究

目的探索当归四逆汤辅助治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的疗效及其作用机制。方法选取2017年3月—2018年3月陕西中医药大学附属医院治疗的冠心病心绞痛患者60例,将患者随机分为对照组和实验组,每组30例。对照组采用常规西药治疗,实验组除了进行常规西药治疗外,同时给予当归四逆汤进行辅助治疗4周。比较2组的临床疗效,治疗前后动态心电图缺血性ST—T改变时间、血脂水平以及心脏功能指标的差异。结果实验组患者的心绞痛症状疗效治疗总有效率为86.7%(26/30),对照组总有效率为70.0%(21/30),实验组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后2组缺血性ST—T改变时间均较治疗前明显缩短(P均<0.05),且治疗后实验组患者的缺血性ST-T改变的时间明显短于对照组(P<0.05);治疗后2组的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平相对于本组治疗前明显降低(P均<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均比本组治疗前明显升高(P均<0.05),且治疗后实验组患者血清中TC、TG、LDL-C水平明显低于对照组(P均<0.05),HDL-C水平明显高于对照组(P<0.05)。2组治疗后心排血量(CO)、室间隔厚度(IVST)、左室射血分数(LVEF)和左室舒张末期内径(LVEDD)均较治疗前明显改善(P均<0.05),且实验组各指标改善情况明显优于对照组(P<0.05)。结论当归四逆汤辅助治疗冠心病的疗效良好,其机制可能是通过调节血脂代谢,改善血液循环和心脏功能来实现的。     

四逆汤加味对心绞痛型冠心病心肌收缩力影响的临床研究

[目的]观察四逆汤加味对心绞痛型冠心病心肌收缩力的影响。[方法]将102例患者随机分为治疗组和对照组，各51例。治疗组给予四逆汤加味，对照组给予硝苯地平缓释片、消心痛、肠溶阿司匹林等。记录两组治疗前后症状及指标变化。[结果]治疗组的心功能指标在治疗前后有显著改善，且其中心搏出量(SV)、射血分数(EF)与对照组治疗后比较有显著性差异。治疗组降低血浆总胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)作用明显优于对照组，而心绞痛症状有效率，心电图改善有效率，两组比较无显著性差异。[结论]四逆汤加味对改善心功能，调节血脂代谢有明显治疗作用，有助于提高远期疗效。     

不同折算剂量四逆汤对放血致低血压状态大鼠的升压作用

目的采用动物实验方法对《伤寒杂病论》中四逆汤进行习惯认为的“1两=3g”,和预期研究的目标折算标准、即推定的“1两=13.8g”,进行不同折算剂量的药效学比较研究。方法采用多导生理仪观察放血致低血压状态大鼠血压、心率改变及不同折算剂量四逆汤的影响,并与正常对照组比较。结果放、止血后模型组、各给药组大鼠血压下降;给药后2h,四逆汤给药组放血致低血压状态大鼠血压升高,大剂量组较小剂量组升压效果明显;放、止血后模型组、各给药组心率减慢;给药后2h,四逆汤大剂量对于放血致低血压状态大鼠有明显的加强心肌收缩,提高心率作用。结论与按照习惯认为的“1两=3g”折算的四逆汤小剂量组比较,按照“1两=13.8g”折算的四逆汤大剂量能够升高放血致低血压大鼠血压,提高心率,作用明显。     

四逆汤加减治疗阳虚型原发性高血压病的临床研究

目的:评价四逆汤加减治疗阳虚型原发性高血压病的临床疗效。方法:依据诊断标准筛选阳虚型高血压患者120例,随机分为四逆汤治疗组(以下称治疗组)和西药对照组(以下称对照组),观察两组患者中医证候疗效以及中药降压疗效。结果:(1)四逆汤加减治疗阳虚型原发性高血压病,症状积分疗效总有效率高于对照组(P<0.05),且可以明显改善中医证候(P<0.05),尤其是头痛、眩晕、耳鸣、畏寒肢冷、喜热饮、气短、神疲乏力、腰膝酸冷、面色苍白、夜尿频(P<0.05或P<0.01);(2)四逆汤加减治疗阳虚型原发性高血压病,可以明显降低患者的血压值(P<0.05),降压疗效优于对照组(P<0.05)。结论:四逆汤加减联合西药标准治疗较单用西药标准治疗对阳虚型高血压患者有更好的降压疗效,更能改善临床症状。     

探讨四逆汤抗急性失血性休克的氧自由基、一氧化氮机制

目的：从整体初步探讨四逆汤(附子，干姜，炙甘草)抗失血性休克的氧自由基、一氧化氮机制。方法：复制急性失血性休克大鼠模型，分为假手术对照组；休克模型组；休克 生理盐水复苏组；休克 四逆汤复苏组。监测各组血压变化。测定休克前、休克lh、复苏后lh、复苏后3h血浆中的SOD(超氧化物歧化酶)活性、MDA(丙二醛)的含量，各组观察结束后血浆乳酸、NO(一氧化氮)含量。结果：四逆汤组与生理盐水相比较，复苏3h后，血中SOD活性明显升高(P＜0．01)，MDA明显降低(P＜0．01)，乳酸含量也显著下降(P＜0．01)、血中NO含量则明显升高(P＜0．01)，平均动脉血压也明显高于生理盐水组。结论：四逆汤通过清除氧自由基，减少体内乳酸的堆积，升高NO，改善机体微循环，维持机体复苏后的血压，理论了减轻了由于休克后缺血缺氧、体内乳酸的堆积、微循环功能障碍造成的不可逆性的休克。