异种脱钙骨基质,骨基质胶的制备

为了提高异种骨移植的成骨率，开展异种脱钙骨基质（ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄｘｅｎｏｇｅｎｅｉｃｂｏｎｅｍａｔｒｉｘ，ＸＤＢＭ）或者异种骨基质胶（ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄｘｅｎｏｇｅｎｅｉｃｂｏｎｅｍａｔｒｉｘｇｅｌａｔｉｎ，ＸＢＭＧ）加释放系统（ｄ...     

复方骨基质胶修复骨缺损实验研究

目的：骨基质胶（ＢＭＧ）的诱导成骨作用已明确，本实验的目的在于进一步探讨其他具有成骨作用的物质对其诱导成骨作用的影响。方法：采用ＢＭＧ加微量元素、丹参的复方制剂与单一制剂对骨缺损修复的Ｘ线片、光镜及电镜的组织学对比观察。结果：该复方制剂能使骨痂出现及骨性连接时间较单独使用ＢＭＧ提前２～４周，且前者成骨效果明显优于后者。结论：复方ＢＭＧ成骨作用增强可能不仅仅是单一制剂成骨作用的叠加，而是协同作用的结果，即微量元素及丹参可以增强ＢＭＧ的成骨活性，但有待于进一步研究证实。本实验结果提示，对临床骨折、骨缺损及骨不连病人，联合应用多种对骨生长有促进作用的制剂会取得更满意的效果     

生物陶瓷／微孔钛混合烧结种植体复合骨形成蛋白的实验研究

采用热等压技术将Ｔｃ４、ＨＡ、ＢＧＣ以３０∶３５∶３５比例混合烧结成生物活性微孔钛种植体。孔内复合ｂＢＭＰ移植成年狗颌骨与股骨中，经ＬＭ、ＳＥＭ、ＦＭ、ＥＤＸＡ等检测．ＢＭＰ组１周界面出现大量松骨细胞及骨基质沉积，成骨细胞活跃。生物力学测试：２周２．３６２ＭＰａ，对照组４周才达２．２１４ＭＰａ。种植体综合３种材料的优点，克服各自不足，不但可进行切削性加工，制成形态各异植入体。而且还可行颌骨缺损修复。与骨组织通过３相（Ｔｉｏ、ＨＡ、ＢＧＣ）形成化学结合及物理、机械嵌合。ＢＭＰ的加入使界面成骨活动提前启动和加强，但ＢＭＰ并未改变种植体内在成分和骨性融合机制。     

局部注射DBM,BMG修复骨缺损的实验研究

实验选用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠尺骨中段截骨造成骨缺损模型，骨缺损长度平均６．１ｍｍ。８１只大白鼠随机分为３组，每组２７只。术后２周各组分别于骨缺损部位注射脱钙骨基质（ＤＢＭ）、骨基质胶（ＢＭＧ）及明胶各５０ｍｇ的生理盐水混悬液。结果表明：ＤＢＭ、ＢＭＧ组注射２周，Ｘ线照片示骨缺损开始修复，ＢＭＧ组１２周完全修复，ＤＢＭ组１６周完全修复。新骨形成较其它报道略为提早。本实验未见免疫排斥反应。     

正加速度对大鼠肾功能和组织结构的影响

目的观察加速度（＋ＧＺ）作用后血清中尿素氮（ＢＵＮ）、肌酐（Ｃｒ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、β２－微球蛋白（β２－Ｍ）和Ｃａ２＋浓度及肾脏病理改变。方法４８只雄性大鼠随机分为４组，每组１２只。地面未受附加＋ＧＺ暴露为Ａ组，受＋１ＧＺ为Ｂ组，＋１０ＧＺ为Ｃ组和Ｄ组。Ｂ组与Ｃ组在第３次加速度作用（每次３ｍｉｎ，间隔４０ｍｉｎ，共３次）后１０ｍｉｎ处死。Ｄ组在２４ｈ后处死，测上述指标。结果以Ｂ组为对照组，Ｃ组ＢＵＮ有显著增高（Ｐ＜０．０１）。Ｄ组Ｃａ２＋、β２－Ｍ有明显升高（Ｐ＜０．０５）。ＢＵＮ是恢复至正常最快的肾功能指标。受＋１０ＧＺ重复作用后，光镜下见肾脏血管呈收缩改变，电镜下见肾小球及肾小管的细胞、线粒体有病理改变。结论＋１０ＧＺ的重复暴露对大鼠肾脏功能和结构都有损害。     

HLA配型相合母子间移植1例

本文报告了１例母子间外周血干细胞移植病例。供受者ＨＬＡ表型完全相合．但供者ＣＭＶ—ＩｇＧ（＋）,ＩｇＭ（＋）。预处理为全身照射（ＴＢＩ）加环磷酰胺（ＣＹ）方案,环孢素Ａ（ＣＳＡ）加甲氨喋呤（ＭＴＸ）方案预防ＧＶＨＤ。输入ＭＮＣ ３．３×１０３／ｋｇ,ＣＤ３４＋ＣＤ３８—１１．８×１０６／ｋｇ。ＷＢＣ下降到最低点（０．１×１０９／Ｌ）为移植后第７天,血小板下降到最低点（７×１０９／Ｌ）为第８天。ＷＢＣ超过１．０×１０９／Ｌ为第１９天,血小板达到２０×１０９／Ｌ上下为第２５天。移植后第３０天、５８天两次行细胞遗传学检查,结果均为４６（Ｘ,Ｘ）。移植后产生了ＩＶ度ａＧＶＨＤ和ＣＭＶ间质性肺炎,经积极治疗后均得到控制。移植后已近２年,现血象基本正常,有局限性ｃＧＶＨＤ表现。仍在服用环胞素Ａ胶囊中。本文对二代间移植的相关问题进行了讨论。     

脱蛋白骨、骨形态发生蛋白和肿瘤坏死因子重组合的人工骨实验研究

在５０只兔的１００个颅骨缺损动物模型中分别植入：（１）牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ），牛脱蛋白骨（ｂＤＰＢ）和人重组肿瘤坏死因子α（ｒｈＴＮＦα）；（２）ｂＢＭＰ和ｂＤＰＢ；（３）ｒｈＴＮＦα和ｂＤＰＢ；（４）ｂＤＰＢ。植入后第１、２、４、６、８周行组织学检查及Ｘ线摄片；植入后第１０天、４２天行３５Ｓ和４５Ｃａ液闪计数以及灰重测定。结果显示：三种材料复合物较两种材料复合物成骨更好，而后者又较单一的ｂＤＰＢ成骨好（Ｐ＜０．０１）。全部移植材料均与受体有极好的生物相容性。ＴＮＦα可促进新生血管形成，并能减轻免疫反应及在低浓度情况下有刺激成骨作用。我们认为：载体、骨诱导因子和生长因子的组合是构成具有生物活性人工骨的理想模式，而ＢＭＰ、ＤＰＢ和ＴＮＦα是一种新的有价值的骨移植材料。     

带血管骨膜和同种脱钙骨基质联合移植与自体骨移植修复骨缺损 …

目的 了解带血管骨膜（ＶＰ）和同种脱钙骨基质（ＤＢＭ）联合移植替代自体骨移植修复大段骨缺损的可能性。方法 以兔桡骨中央２５ｍｍ的大段骨缺损为模型，通过Ｘ线观察、Ｘ线平片骨缺损修复Ｌａｎｅ评分、组织学观察、骨组织形态计量分析和生物力学测试，比较术后４，８，１６周时ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植与自体骨移植修复骨缺损的效果。结果 术后４周ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植及自体骨移植均已较好地完成了缺损的修复，而前者的Ｌａｎ     

牛磺酸对大鼠急性运动后自由基代谢、膜流动性及钙转运变化的影响

５０只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠（８０ １００ｇ）,随机分为对照组（Ｇ１）,急性运动组（Ｇ２）,急性运动＋牛磺酸组（Ｇ３）,力竭运动组（Ｇ４）,力竭运动＋牛磺酸组（Ｇ５）。牛磺酸补充方式为每日灌服１次（５００ｍｇ／ｋｇ）。喂养２周后,进行负重游泳,测定血液、线粒体和肌浆网各生化指标变化。结果显示“牛磺酸有增加大鼠游泳力竭时间的趋势（０．０５＜Ｐ＜０．１０）;运动后即刻,Ｇ３组ＢＵＮ明显低于Ｇ２组（ｐ＜０．０５）;Ｇ３组ＲＢＣ、血浆及心肌线粒体ＭＤＡ含量明显低于Ｇ２组（Ｐ＜０．０５）;Ｇ３组ＲＢＣ及心肌线粒体ＧＳＨ＿Ｐｘ活力明显高于Ｇ２组（Ｐ＜０．０５）;Ｇ３组心肌线粒体膜荧光偏振度Ｐ明显低于Ｇ２组（Ｐ＜０．０５）。Ｇ３组ＳＲＣａ２＋ ＡＴＰａｓｅ活性和摄钙率明显高于Ｇ２组（Ｐ＜０．０５）。力竭后２４小时,Ｇ５组ＲＢＣ、血浆及心肌线粒体ＭＤＡ含量明显低于Ｇ４组（Ｐ＜０．０５）。以上结果表明,牛磺酸可以通过抗自由基损伤,稳定生物膜和调节钙转运等途径对抗运动性疲劳。     

骨髓细胞经酸性成纤维细胞生长因子孵育后程序移植的实验研究

目的　充分利用酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ） 促进造血重建的作用,以进一步完善程序移植新方法。方法　以昆明种小鼠急性放射病为模型,进行了骨髓细胞（ＢＭＣ） 经自牛脑中制备的ａＦＧＦ孵育后程序移植对造血重建、急性移植物抗宿生病（ＧＶＨＤ） 的研究。结果　ａＦＧＦ 孵育后程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ ,存活率达４０％ ,比单纯一次移植ＢＭＣ１ ×１０７ 组高（３０％ ）,但不如单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 组（６０％ ）;另一方面,外周血白细胞、骨髓有核细胞计数、ＣＦＵＥ、ＣＦＵＧＭ、ＣＦＵＳ比一次骨髓移植１×１０７ 组和单纯骨髓程序移植ＢＭＣ４ ×１０６ 回升快,而ＣＦＵＦ回升无差别;ＧＶＨＤ较一次骨髓移植１ ×１０７ 组轻,较骨髓程序移植４ ×１０６ 重。结论　引起ＧＶＨＤ 的主要原因是异基因Ｔ淋巴细胞,通过ａＦＧＦ孵育后程序移植可以更充分地发挥其促进造血重建的作用,而减轻ＧＶＨＤ。     

天然珊瑚和同种异体脱钙骨基质作为骨组织工程支架的组织相容性研究

目的：评价天然滨珊瑚(NC)和同种异体脱钙骨(DBM)的组织相容性，探讨其作为骨组织工程支架的可行性。方法：将NC和DBM直接植入动物体内，术后1、2、6周取材，通过大体观察和组织学检查观察生物材料在体内组织反应。结果：两种材料均未引起明显的炎症和排斥反应，对实验动物无不良影响。同时发现DBM组诱导出少量骨组织，NC组未见新生骨。结论：NC和DBM具有良好的组织相容性，DBM还具有鲁诱导性，两种材料可能都是比较理想的骨组织工程支架材料。     

骨髓基质成骨细胞-松质骨基质复合人工骨肌袋移植的成骨作用

成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后 ,经混匀、接种、固化形成骨髓基质成骨细胞 藻酸盐 松质骨基质复合人工骨 ,并植回取材兔肌袋内 ,对照组分别植入藻酸盐 松质骨基质复合物和松质骨基质。植入 4、8周取材 ,行X线摄片、组织学检查 ,观察骨形成情况。结果显示 ,骨髓基质成骨细胞 松质骨基质复合人工骨肌袋内成骨效果明显优于藻酸盐 松质骨基质复合物组和松质骨基质组。复合人工骨标本兼有膜内成骨和软骨成骨 ,以膜内成骨为主 ;对照组仅见少量软骨成骨。提示 ,采用组织工程方法形成的复合人工骨肌袋内成骨作用明显 ,用该方法所形成的组织工程骨展现出良好的应用前景。     

带血管骨膜和同种脱钙骨基质联合移植与自体骨移植修复骨缺损的比较研究

目的了解带血管骨膜（ＶＰ）和同种脱钙骨基质（ＤＢＭ）联合移植替代自体骨移植修复大段骨缺损的可能性。方法以兔桡骨中央２５ｍｍ的大段骨缺损为模型，通过Ｘ线观察、Ｘ线平片骨缺损修复Ｌａｎｅ评分、组织学观察、骨组织形态计量分析和生物力学测试，比较术后４，８，１６周时ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植与自体骨移植修复骨缺损的效果。结果术后４周ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植及自体骨移植均已较好地完成了缺损的修复，而前者的Ｌａｎｅ评分、皮质骨密度、力学抗扭刚度均显著高于后者（Ｐ＜０．０５）。但术后８，１６周时两者之间已无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植早期修复兔桡骨大段骨缺损的效果好于自体骨移植。后期两种方法修复效果基本一致。ＶＰ＋ＤＢＭ联合移植后，两者之间建立了相互协同、相互促进的关系。     

天然珊瑚和同种异体脱钙骨基质作为骨组织工程支架的细胞相容性研究

目的 :评价天然滨珊瑚 (NC)和同种异体脱钙骨 (DBM)的细胞相容性 ,探讨其作为骨髓基质细胞的支架载体构建骨组织工程的可行性。方法 :应用体外复合骨髓基质细胞培养法 ,通过倒置显微镜和MTT比色法 ,并对测量结果进行统计学分析 ,研究生物材料对骨髓基质细胞的形态、增殖的影响。结果 :两种材料对骨髓基质细胞形态均未见不良影响 ;NC在各培养时间对骨髓细胞增殖没有明显影响 (P >0 .0 5) ,DBM对骨髓细胞增殖均起促进作用 (P <0 .0 1)。结论 :两种材料均具有良好的细胞相容性 ,可以作为骨髓基质细胞的载体和骨组织工程支架     

Density of organic matrix of native mineralized bone measured by water- and fat-suppressed proton projection MRI.

Water- and fat-suppressed projection MR imaging (WASPI) utilizes the large difference between the proton T(2) (*)s of the solid organic matrix and the fluid constituents of bone to suppress the fluid signals while preserving solid matrix signals. The solid constituents include collagen and some molecularly immobile water and exhibit very short T(2) (*). The fluid constituents include mobile water and fat, with long T(2) (*). In WASPI, chemical shift selective low-power pi/2 pulses excite mobile water and fat magnetization which is subsequently dephased by gradient pulses, while the magnetization of collagen and immobile water remains mostly in the z-direction. Additional selective pi pulses in alternate scans further cancel the residual water and fat magnetization. Following water and fat suppression, the matrix signal is excited by a short hard pulse and the free induction decay acquired in the presence of a gradient in a 3D projection method. WASPI was implemented on a 4.7 T MR imaging system and tested on phantoms and bone specimens, enabling excellent visualization of bone matrix. The bone matrix signal per unit volume of bovine trabecular specimens was measured by this MR technique and compared with that determined by chemical analysis. This method could be used in combination with bone mineral density measurement by solid state (31)P projection MRI to determine the degree of bone mineralization.     

bBMP对体外培养人胎儿关节软骨细胞分化的促进作用

为了解运动创伤中肌肉、肌腱、关节囊中异位化骨的机制及软骨细胞在此过程中所起的作用，本研究用牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）诱导体外不传代培养的胎儿关节软骨细胞，发现：在ｂＢＭＰ的诱导下，不传代培养的软骨细胞逐渐变为成骨细胞样形态，它们表达的碱性磷酸酶明显增加，细胞周围的钙沉积和基质沉积也明显增加。在ｂＢＭＰ的诱导下，关节软骨细胞开始表达具有成骨细胞特异性和骨基质特异性的骨钙素。这些结果表明，在ｂＢＭＰ的诱导下，胎儿关节软骨细胞已开始表达成骨细胞表型，并向成骨细胞样细胞方向分化。本研究提示，在异位化骨和各种软骨内化骨过程中，软骨细胞可能具有较活跃的参与骨形成的作用，可能不像以前所假设的那样仅分化为肥大软骨细胞，然后变性，最终坏死。     

Relative accretion of 99mTc-polyphosphate by forming and resorbing bone systems in rats: its significance in the pathologic basis of bone scanning.

The relative roles of osteogenesis andd osteolysis in the production of positive radionuclide images of skeletal lesions were investigated. The uptake of 99mTc-polyphosphate (Tc-PP) by each process was measured in an animal model that permitted bone formation and resorption to be studied independently. Ten rats received intramuscular implants of bone-forming demineralized matrix (DM) and resorbing devitalized bone (DV). Radiographs and Tc-PP scintiscans were made each week thereafter. At 6-10 weeks, the implants and normal bone samples were removed, counted for 99mTc, and examined histologically. The uptake of Tc-PP BY DM implants was first detected on images made 3 weeks after implanatation, and by DV implants, 1-2 weeks later. Serial radiography showed progressive calcification of DM an resorption of DV implants. Microscopic examinations of undecalcified sections, stained with a modified Goldner preparation, revealed vital-bone formation in the DM implants and osteoclastic resorption in the DV. Activity counts per gram of DM and DV implants were, respectively, 200% and 90% that of normal bone. Since only the bone-forming system (DM) accumulated Tc-PP at greater than normal concentrations, this study indicates that positive bone images of osteolytic lesions solely reflect compensatory osteogenic responses.     

以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料修复犬桡骨骨缺损的实验研究

目的 了解以纤维蛋白胶(FS)为载体的注射型骨修复材料对犬桡骨节段性缺损的修复作用.方法 18只成年健康家犬随机均分为实验组b(FS bFGF bBMP)、实验组r(FS bFGF rhBMP-2)和对照组(FS),制成右侧桡骨中上段2.0cm骨缺损实验模型,然后严密缝合皮下组织及皮肤,将实验材料经伤口周围正常皮肤注射到骨缺损处,于术后4、8、12、16、20、24周进行放射学检查,术后24周进行组织学和骨密度检查,研究其成骨效应.结果 实验组b和实验组r骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组(P＜0.01),骨缺损得到了成功修复.结论 以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力,对犬的骨缺损有良好的修复作用.     

优化配方的CPC/DBM/rhBMP-2复合材料在体内的超微结构和组织学特征

目的探讨磷酸钙骨水泥(CPC)/脱钙骨基质颗粒(DBM)/重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)复合材料在骨内的超微结构和组织学特征,评价该材料的成骨性能。方法预制兔DBM,按0.2的DBM质量比制作CPC/DBM/rhBMP-2复合材料。将复合材料(A组,n=12)、CPC(B组,n=10)、医用骨水泥(C组,n=7)分别植入兔股骨髁部骨缺损,在植入后第6、12、24周取材进行组织学和扫描电镜观察。结果术后第6周,A组中复合材料-骨界面模糊,宿骨发出纤维连续通过界面,编织骨样结构开始向材料内部长入。第12周,A组中血管和成骨细胞在复合材料内部生长,产生新骨。第24周,A组中骨缺损已修复,形成骨性连接,材料大部分被新骨替代。B组术后第6周CPC-骨界限清晰,未见新骨向材料内部长入,第24周骨缺损部位仍为CPC填充,材料内部未见新骨出现。C组材料直至第24周尚未与宿骨形成任何连接。A组材料在成骨细胞活性、血管化程度和新骨生长速度方面均优于B组。结论将DBM质量比为0.2的复合材料植入骨缺损内可以促进细胞、血管、新骨的长入,且易降解及被自体骨替代。     

脱钙骨基质治疗长骨骨折延迟愈合及骨不连的远期临床观察

目的 探讨脱钙骨基质治疗长骨骨折延迟愈合和骨不连的远期疗效。方法 从1984年至1994年用脱钙骨基质治疗长骨骨延迟愈合、骨不连共96例，其中采用手术植入治疗骨不连38例，经皮注射治疗骨折延迟愈合37例及骨不连21例。结果 96例患者均获随访，随访时间4-16年，平均7．5年。脱钙骨注射治疗骨折延迟愈合的37例中，骨折愈合35例，2例胚骨骨折未愈合，愈合率94．6％；脱钙骨注射治疗骨折骨不连21例中，骨折愈合17例，4例未发生愈合，其中胫骨3例、肱骨1例，愈合率81．0％，愈合时间3-8个月，平均4．5个月。脱钙骨基质移植治疗骨不连38例中，36例愈合，2例胫骨下1／3骨折未发生愈合，愈合率94．7％。结论 脱钙骨基质无论是采用注射移植还是手术方法移植，都能取得较好的效果，甚至达到自体骨移植的疗效。同时，脱钙骨基质的制备经过脱水、脱脂、脱钙、照射消毒等处理，比其他骨移植安全，免疫性小，可以长期保存，便于平时和战时应用。