P物质与香草酸瞬时受体亚型1在慢性非细菌性前列腺炎大鼠神经痛中的作用研究

目的:探讨慢性非细菌性前列腺炎(CNP)疼痛的可能机制。方法:自身免疫法建立CNP大鼠模型;Von Frey丝检测机械刺激缩足阈(PWT);进行前列腺病理学检查和免疫组化检测前列腺与脊髓L5~S2节段P物质(SP)、香草酸瞬时受体亚型1(TRPV1)表达变化和相关性。结果:造模后大鼠PWT[(48.83±11.55)g]下降,与对照组[(67.98±5.44)g]相比差异有统计学意义(P0.05)。前列腺呈现显著炎症反应,病变范围、间质淋巴细胞浸润都较对照组反应程度有所加重,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,模型组前列腺与脊髓背角L5~S2中SP、TRPV1阳性表达均上调,差异有统计学意义(P0.05)。前列腺与脊髓中SP蛋白表达无相关关系(r=0.099,P=0.338);TRPV1蛋白表达亦无相关关系(r=0.000,P=0.5)。结论:SP、TRPV1可能通过脊髓L5~S2节段的表达上调参与了CNP大鼠疼痛的形成和维持。     

胶质细胞活化对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)大鼠脊髓背角P物质的影响

目的探讨胶质细胞活化对慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes,CP/CPPS）大鼠脊髓背角P物质的影响。方法完全福氏佐剂和3%角叉菜胶前列腺内注射造成CP/CPPS模型,脊髓插管给药胶质细胞活化抑制剂Propentofylline干扰CP/CPPS模型大鼠,免疫组织化学方法观察正常组、疼痛模型组、药物干扰组脊髓节段（L6和S1）背角的胶质细胞的活化和P物质的定性定位,并用放射免疫的方法观察三组脊髓背角P物质的变化。结果脊髓背角胶质细胞活化阳性细胞数疼痛组明显增加,药物干扰组明显减少;P物质主要表达于脊髓背角且疼痛模型组明显增多,药物干扰组明显减少。结论胶质细胞活化是CP/CPPS大鼠脊髓背角P物质变化的重要原因,胶质细胞活化抑制剂的应用将是治疗CP/CPPS的新亮点。     

大鼠慢性前列腺炎模型中TRPA1及相关炎症因子的表达

目的:探讨模拟慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)动物模型疼痛产生的分子机制。方法:取SD大鼠36只,随机分为实验组和对照组,每组18只。实验组向前列腺双腹侧叶注射50μl 3%无菌λ-角叉菜胶制作大鼠无菌性前列腺炎症性疼痛模型,对照组注射等量无菌生理盐水。两组分别于造模后1周、2周和4周3个时间节点,每个节点6只大鼠,解剖获取大鼠前列腺组织、L6~S1段背根神经节(DRG)及脊髓,采用免疫组化联合Western印迹法检测神经生长因子(NGF)、瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)及降钙素基因相关肽(CGRP)在不同组织内的表达情况。结果:慢性前列腺炎症性疼痛大鼠前列腺组织中NGF、CGRP、TRPA1蛋白的表达均高于对照组(P<0.05),且随造模时间的延长各蛋白表达逐渐减弱,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。在大鼠L6~S1段DRG及脊髓内,造模后1周,实验组NGF、CGRP及TRPA1表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),造模后2周及4周,各蛋白表达呈持续高水平状态,与造模后1周大鼠比较差异无统计意义(P>0.05),但各实验组大鼠与对照组蛋白表达比较差异均有统计学意义(P<0.05),两时间点上两组蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:前列腺内注射λ-角叉菜胶方法制作的大鼠前列腺炎症性疼痛模型,可在分子水平模拟CP/CPPS的产生机制;TRPA1在CP/CPPS患者疼痛产生上可能发挥中继通道的作用。     

P物质及其神经激肽-1受体在慢性非细菌性前列腺炎大鼠L5~S2脊段的表达

目的:研究慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型不同造模时段L5~S2脊髓背角P物质(SP)及其神经激肽-1受体(NK-1R)的表达。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机分成对照组、模型组(45 d组、60 d组和90 d组),每组10只。另取30只大鼠提取前列腺组织蛋白,模型组腹腔注射0.5 ml百白破疫苗,同时皮内多点注射1 ml前列腺蛋白提取液和弗式完全佐剂(1∶1)混合液造模,对照组注射同体积生理盐水。分别于造模后第45、60、90天测量大鼠抬腿反应阈值(PWT),ELISA法测定前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量,光镜和电镜观察前列腺组织形态学变化,免疫组化检测L5~S2脊髓中SP和NK-1R的表达。结果:模型组大鼠疼痛敏感性增强,PWT 45 d组、60 d组、90 d组分别为(48.72±6.56)g、(42.16±4.3)g、(25.18±5.37)g,显著低于对照组的(73.65±6.68)g。与对照组比较,各模型组大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量均显著增加(P均0.05),并且90 d组增加更显著(P均0.05)。免疫组化结果显示,SP和NK-1R主要表达于脊髓背角,呈棕黄色索状分布,其他部位不着色或呈淡黄色;SP和NK-1R的表达量各模型组显著高于对照组(P均0.05),同时90 d组也显著高于其他3组(P均0.05)。光镜下,对照组前列腺组织未见炎细胞浸润,随着造模时间的延长,前列腺组织出现明显水肿,淋巴细胞增加显著;透射电镜也显示模型组大鼠前列腺组织呈现明显的炎性改变,9 0d组管周间质水肿更加明显,管周细胞与上皮基底间隙增宽,成纤维细胞及周围胶原原纤维数量增多。结论:CNP大鼠L5~S2脊髓背角SP合成增多,受体上调。     

IL-6在慢性前列腺炎患者精浆中的表达及其临床意义

目的探讨慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合症(CP/CPPS)患者精浆中IL-6的表达及临床意义。方法采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)对52例炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢA型)、38例非炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢB型)患者及36例健康志愿者精浆中IL-6含量进行测定分析,并将ⅢA、ⅢB型IL-6的表达与其NIH-CPSI评分进行相关性分析。结果 CP/CPPS患者ⅢA[(27.46±5.29)ng/mL]、ⅢB型[(9.83±2.09)ng/mL]精浆中IL-6含量均明显高于健康对照组[(4.94±1.55)ng/mL](P0.01)。在CP/CPPSⅢA、CP/CPPSⅢB型患者精浆中IL-6的含量有明显差异(P0.01)。CP/CPPS患者ⅢA型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.590,P0.01),与疼痛评分呈正相关(r=0.436,P0.01),与排尿评分呈正相关(r=0.557,P0.01),与生活质量评分正相关(r=0.321,P0.01)。CP/CPPS患者ⅢB型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.404,P0.05),与疼痛评分呈正相关(r=0.597,P0.01),与排尿评分无相关性(r=-0.262,P=0.226),与生活质量评分无相关性(r=0.290,P=0.179)。结论精浆中IL-6含量可能作为CP/CPPS分型诊断指标,精浆中IL-6含量有望作为评价CP/CPPS病情程度的分子生物学指标。     

慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征患者前列腺液中IFN-γ、TGF-β_1的检测

目的:探讨干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β1(TGF-β1)在慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CP/CPPS)患者前列腺液中的临床意义。方法:采用双抗体夹心法对20例炎症性慢性骨盆疼痛综合征(ⅢA)、20例非炎症性慢性骨盆疼痛综合征(ⅢB)、10例健康对照者前列腺按摩液(EPS)中IFN-γ、TGF-β1含量进行测定。并与患者的美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)进行相关性研究。结果:IFN-γ、TGF-β1在ⅢA[(14.92±7.85)、(8 477.50±4 612.45)ng/L]和ⅢB[(13.74±5.96)、(7 946.50±5 044.06)ng/L]患者EPS中水平均明显高于健康对照组[(7.47±1.49)、(2 462.50±985.31)ng/L](P<0.05和P<0.001)。但在ⅢA和ⅢB之间差异无显著性(P>0.05)。EPS中IFN-γ、TGF-β1的水平与慢性前列腺炎症状指数无相关性(r=0.02,P=0.86;r=0.31,P=0.76)。结论:前列腺液中细胞因子IFNγ-、TGF-β1在CP/CPPS的病理学改变中可能起重要作用,可作为CP/CPPS的诊断依据之一。     

星形胶质细胞活化对慢性前列腺炎大鼠模型脊髓背角P物质的影响

目的:探讨星形胶质细胞活化对慢性前列腺炎模型大鼠脊髓背角P物质的影响。方法:SD雄性大鼠60只随机分为正常组(n=20)、疼痛组(n=20)、干扰组(n=20),完全福氏佐剂和3%角叉菜胶前列腺内注射造成慢性前列腺炎疼痛模型,脊髓插管给药胶质细胞活化抑制剂干扰慢性前列腺炎疼痛模型大鼠,免疫荧光法观察正常组、疼痛组、干扰组脊髓节段(L6和S1)背角星形胶质细胞的活化和P物质的分布,并用放射免疫法观察3组脊髓背角P物质的变化。结果:与正常组比较,脊髓背角星形胶质细胞活化阳性细胞数疼痛组明显增加(P<0.01),而干扰组较疼痛组明显减少(P<0.01),P物质主要表达于脊髓背角且疼痛组明显增多(P<0.01),干扰组明显减少(P<0.01)。结论:星形胶质细胞活化是慢性前列腺炎疼痛大鼠脊髓背角P物质变化的重要原因之一。     

慢性前列腺炎大鼠行为学及L5～S2脊段P物质和神经激肽-1受体表达的研究

目的:研究慢性前列腺炎(CP)大鼠模型行为学表现及其L5～S2脊段P物质(SP)和神经激肽-1受体(NK-1R)的表达。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机分成对照组、45 d模型组、60 d模型组和90 d模型组,每组10只。采用开野试验和糖水消耗试验观察各组大鼠的行为学表现,测量各组大鼠前列腺指数,ELISA法测定大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10含量,光镜观察前列腺组织形态学变化,免疫组化检测L5～S2脊髓SP及NK-1R的表达。结果:与对照组相比,45、60 d模型组大鼠水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗量呈下降趋势,但无显著性差异;而90 d模型组显著下降(P0.05)。与对照组相比,45、60、90 d模型组大鼠前列腺指数显著下降(P均0.05);与45 d和60 d模型组相比,90 d模型组前列腺指数显著下降(P均0.05)。光镜观察,对照组前列腺组织未见炎细胞浸润,随着造模时间的延长,前列腺组织出现明显水肿,淋巴细胞增加显著。与对照组比较,45、60、90 d模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10水平显著增加(P均0.05)。免疫组化结果显示,SP和NK-1R主要表达于脊髓背角,各模型组SP和NK-1R的表达水平显著高于对照组(P均0.05)。与45 d和60 d模型组相比,90 d模型组SP和NK-1R的表达水平显著升高(P均0.05)。结论:CP模型大鼠出现抑郁行为学表现,血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10水平显著升高,L5～S2脊髓背角SP及NK-1R表达上调,且不同时段变化趋势一致,提示不同时段CP模型大鼠的行为学表现与L5～S2脊段SP及其受体表达水平存在相关性。     

前列腺液16s rDNA表达与慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征疗效的关系

目的:探讨前列腺液16s rDNA的表达与慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CP/CPPS,Ⅲ型前列腺炎)疗效的关系。方法:选择符合美国国立卫生研究院(NIH)诊断标准的CP/CPPS患者70例,其中Ⅲ_A型36例,Ⅲ_B型34例。门诊行前列腺液常规镜检和细菌、支原体,衣原体病原学检查,并对前列腺液中的16s rDNA进行PCR检测,参考病原学结果实施抗生素为主的综合治疗。以慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)为疗效指标进行治疗前后疗效比较。结果:CP/CPPS抗生素治疗组中,16s rDNA阳性者治疗显效率(81.4%)明显高于16s rDNA阴性者(63%)(P<0.01)。16s rDNA阴性的Ⅲ_A组总显效率较Ⅲ_B组低(P<0.05),而16s rDNA阳性的两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:前列腺液16s rDNA的表达与CP/CPPS的疗效有相关性,16s rDNA的表达对前列腺炎的分型可能有一定参考意义。     

Stargazin在切口痛大鼠脊髓背角GluR1-AMPA受体胞浆至胞膜转运中的作用

目的 评价Stargazin在切口痛大鼠脊髓背角含谷氨酸受体1亚基的使君子酸(GluR1-AMPA)受体胞浆至胞膜转运中的作用.方法 成年雄性清洁级SD大鼠45只,体重280 ～ 300 g,6～8周龄,采用随机数字表法,将其分为5组:正常对照组(C组)、假手术组(S组)、切口痛+生理盐水组(P组)、切口痛+ Stargazin小干扰RNA(siRNA)组(I组)和切口痛+Stargazin无意义siRNA组(N组).P组、I组和N组分别鞘内注射生理盐水10μl、20 μmol/L siRNA、20μmol/L无意义siRNA 10μl,2次/d,连续3d,4d后制备右足底切口痛模型.切口痛术后3h时测定大鼠累计痛评分(CPS)和机械缩足阈(PWT).然后处死大鼠,取L3-6节段脊髓背角,采用Westem blot法检测胞浆和胞膜GluR1和GluR2亚基表达,采用免疫共沉淀技术检测脊髓背角Stargazin与GluR1或GluR2亚基的共表达.结果 与C组比较,P组和N组CPS评分升高,PWT降低,脊髓背角胞浆GluR1表达下调,脊髓背角胞膜GluR1表达上调,I组CPS评分升高(P＜0.05或0.01);与P组比较,I组CPS评分降低,PWT升高,脊髓背角胞浆GluR1表达上调,脊髓背角胞膜GluR1表达下调,脊髓背角Stargazin和Stargazin与GluR1共表达下调(P＜ 0.05或0.01).结论 Stargazin介导了切口痛大鼠GluR1-AMPA受体从胞浆至胞膜转运.