健脾养血祛风法对小鼠皮肤屏障功能影响的实验研究

目的:观察健脾养血祛风法对皮肤机械屏障功能障碍小鼠动物模型的影响。方法:1.小鼠表皮神经酰胺含量的测定;2.小鼠皮肤屏障功能障碍瘙痒模型的研究;3.健脾养血祛风法对大黄致小鼠脾虚皮肤屏障功能障碍的影响。结果:大黄模型组小鼠皮肤屏障功能障碍时表皮神经酰胺含量降低,瘙痒次数增加,表皮厚度明显增厚。结论:健脾养血祛风法可以减轻大黄法所致脾虚血燥小鼠瘙痒程度,提高神经酰胺含量健脾养血祛风法能改善大黄法所致小鼠脾虚血燥证的皮肤机械屏障功能障碍     

参苓白术散对皮肤机械屏障功能障碍小鼠皮肤水分的影响

目的通过观察参苓白术散对皮肤机械屏障功能障碍模型小鼠皮肤水分的影响,探讨其对皮肤机械屏障功能的修复作用。方法将50只健康ICR小鼠,随机分为5组,每组10只,即正常组,模型组,参苓白术散高、中、低剂量组。参苓白术散各组从第1 d起,分别给予参苓白术散(40 g·kg~(-1)、20 g·kg~(-1)、10 g·kg~(-1))灌胃;其余各组灌胃给予蒸馏水。1次/d,连续13d。模型组,参苓白术散高、中、低剂量组从第9d起,采用胶带剥离法复制小鼠皮肤屏障功能障碍模型,2次/d,连续5d。分别于造模前1 d、造模第1 d及造模第5 d测定皮肤经皮水丢失值(transepidermal water loss,TEWL)及皮肤水合度。结果造模前1 d,各组小鼠皮肤TEWL值及皮肤水合度均无明显变化(P0.05);造模第1d,模型组小鼠皮肤TEWL明显升高(P0.001),皮肤水合度明显下降(P0.001);造模第5d,参苓白术散给药组小鼠皮肤TEWL值显著低于模型组(P0.01,P0.001),参苓白术散给药组小鼠皮肤水合度显著高于模型组(P0.01,P0.001)。结论参苓白术散具有保水作用进而促进皮肤机械屏障功能修复。     

参苓白术散对皮肤机械屏障功能障碍小鼠神经酰胺再利用途径相关酶β-GCase及ASM表达的影响

目的:探讨参苓白术散对小鼠皮肤机械屏障功能修复作用及对神经酰胺再利用途径相关酶β-葡糖脑苷脂酶(β-glucocerebrosidase,β-GCase)和酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)表达的影响。方法:50只SPF级ICR小鼠随机分为正常组、模型组、参苓白术散低、中、高(10,20,40 g·kg-1)组。采用胶带剥离法制备皮肤机械屏障功能障碍小鼠模型。参苓白术散低、中、高剂量组于造模前8 d给予相应剂量参苓白术散水煎液灌胃;其余各组灌胃给予蒸馏水,每天1次,连续13 d。皮肤检测仪测量皮肤皮肤经皮水分丢失(TEWL)值、皮肤水合度及皮肤pH;通过苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠皮肤病理组织形态学变化;免疫组化法检测β-GCase,ASM的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分析检测β-GCase,ASM mRNA的表达。结果:造模5 d后,与正常组比较,模型组小鼠皮肤TEWL及pH显著升高,皮肤水合度显著下降(P0.01);β-GCase蛋白及mRNA的表达明显降低(P0.05);与模型组比较,参苓白术散各剂量组均能降低皮肤TEWL值及pH(P0.01),升高皮肤水合度(P0.01),对皮肤病理组织形态学改变有不同程度的改善;同时参苓白术散中剂量组可上调β-GCase蛋白及mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:参苓白术散具有修复皮肤机械屏障功能的作用,其机制可能与上调β-GCase的表达从而增加神经酰胺的含量有关。     

止痛消炎膏对慢性湿疹模型小鼠皮损及TEWL、SCH、湿度的影响

目的 探究止痛消炎膏对慢性湿疹模型小鼠皮损及经表皮水分丢失(TEWL)、角质层含水量(SCH)、湿度的影响。方法 40只Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、实验组和对照组，每组10只，采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导慢性湿疹模型，给药后通过EASI评分、HE染色观察小鼠皮肤外观及组织病理变化；利用GPSkin Barrier检测仪，检测干预0周、1周、2周TEWL、SCH、湿度等相关皮肤屏障功能指标的变化。结果 干预2周后，实验组、对照组较模型组皮损症状减轻，镜下表皮增生、水肿、炎性细胞浸润情况有所缓解，且实验组的改善明显优于对照组；EASI评分及相关皮肤屏障功能指标结果显示：实验组和对照组的EASI评分、TEWL均显著低于模型组(P<0.05),SCH、皮肤湿度均显著高于模型组(P<0.05),实验组各项指标的改善均优于对照组(P<0.05)。结论 止痛消炎膏对慢性湿疹小鼠模型具有一定的治疗作用，不仅能改善皮损，降低EASI评分，还能有效减少TEWL,增加SCH和湿度，修复皮肤屏障功能。     

小鼠皮肤机械屏障功能障碍瘙痒模型的研究

目的:建立皮肤机械屏障功能障碍瘙痒模型。方法:用丙酮、乙醚混合液外擦,破坏小鼠皮肤角质层;以瘙痒行为、皮肤神经酰胺含量及角质层厚度及组织病理学改变为指标,观察造模3、5、7d后的的变化情况,以确定模型是否成功及造模的最佳时间和瘙痒行为的观察时间。结果:造模小鼠在3d、5d、7d4个时间段的瘙痒次数均高于空白组,以3d组增加最明显,而皮肤神经酰胺含量、角质层厚度及组织病理学观察以造模5d组改变最为明显。结论:用乙醚、丙酮混合液外擦可以造模皮肤机械屏障功能障碍瘙痒的模型,造模最佳时间为5 d,小鼠瘙痒行为的观察时间为30min。     

消风散对湿热蕴肤型表皮通透屏障功能障碍调控机制研究

目的:通过建立"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹表皮通透屏障功能障碍豚鼠模型,开展消风散对豚鼠模型皮肤角质层含水量(WCSC)、经表皮水分流失量(TEWL)、血清IgE、IL-4、IL-17浓度和皮肤、肠AQP3表达的影响实验,研究消风散调控"湿热蕴肤型"表皮通透屏障功能障碍的作用机制。方法:24只豚鼠随机抽取6只为空白对照组,其余采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导建立豚鼠"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹样病变模型,随机分为模型对照组、阳性药物对照组(氯雷他定片)和消风散组开展对照实验。观察豚鼠皮损情况,皮肤角质层含水量(WCSC),经表皮水分流失量(TEWL)及血清IgE、IL-4、IL-17浓度和皮肤、肠AQP3表达情况。结果:与模型对照组比较,消风散组皮损评分显著降低(P0.01),皮肤角质层含水量(WCSC)明显升高(P0.01),经表皮水分流失量(TEWL)显著降低(P0.01),血清IgE、IL-17浓度显著降低(P0.01),IL-14浓度显著升高(P0.01),皮肤、肠组织中AQP3的相对表达量显著升高(P0.01)。结论:在"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹动物实验中,消风散方证相应,通过调节表皮通透屏障功能水分和免疫功能,抑制促炎因子,提高AQP3在角质形成细胞中的表达而修复表皮屏障功能,改善皮毛微环境状态。     

参苓白术散对皮肤机械屏障功能障碍小鼠皮肤ABCA12表达的影响

目的:通过小鼠皮肤机械屏障功能障碍模型,探讨参苓白术散对小鼠皮肤ABCA12表达及皮肤屏障功能的影响。方法:取健康小鼠50只随机分为5组:正常组、模型组、参苓白术散40、20、10g/kg组,给药组从第1天起分别灌胃给予不同剂量参苓白术散水煎液,其余各组灌胃给予蒸馏水,1次/天,连续13天。除正常组外,其余各组从第9天起,采用胶带剥离法复制皮肤机械屏障模型,连续5天。检测皮肤屏障功能指标经皮水分丢失值及皮肤水合度;免疫组化法检测ABCA12蛋白的表达,荧光定量PCR法检测其mRNA的表达情况。结果:参苓白术散各组小鼠皮肤TEWL值显著低于模型组,参苓白术散40、20g/kg组皮肤水合度显著高于模型组;参苓白术散各组ABCA12蛋白表达显著升高,20g/kg组ABCA12 mRNA表达显著升高。结论:参苓白术散可促进小鼠皮肤机械屏障功能的修复,可能与上调皮肤ABCA12的表达相关。     

苦柏颗粒冷敷对面部激素依赖性皮炎患者IL-4、IgE和皮肤屏障功能的影响

目的:分析苦柏颗粒冷敷对面部糖皮质激素依赖性皮炎(FCAD)患者皮肤屏障功能、免疫球蛋白E(IgE)及白介素-4(IL-4)的影响。方法:选取106例FCAD患者,随机分为对照组给予常规西医治疗,观察组给予苦柏颗粒冷敷治疗,两组各53例。治疗后1个月,评估两组患者临床疗效;比较两组患者治疗前后皮肤屏障功能指标、血清IgE和IL-4水平的差异。结果:两组患者治疗总有效率的比较,并无明显差异(P>0.05);但观察组治愈率较对照组明显升高(P<0.05)。相比治疗前,两组患者治疗后1个月面部皮肤油脂含量均明显升高,红斑总量均明显减少,经皮肤水分丢失(TEWL)值均明显下降(P<0.05);相比对照组,治疗后1个月观察组面部皮肤油脂含量明显升高,红斑总量明显减少,TEWL值明显下降(P<0.05)。相比治疗前,两组患者治疗后1个月血清IgE和IL-4的水平均明显下降,且观察组治疗后IgE和IL-4的水平较对照组明显下降(P<0.05)。结论:苦柏颗粒冷敷可有效调节FCAD患者皮肤屏障功能,改善体内IgE和IL-4的水平,临床治愈率较高。     

菟丝子对亚急性衰老模型小鼠皮肤中相关指标的影响

目的:观察菟丝子对亚急性衰老模型小鼠皮肤中相关指标的影响,揭示菟丝子延缓衰老的作用机制。方法:采用醇水双重提取法制备菟丝子提取物,采用D-半乳糖颈背部皮下注射复制小鼠亚急性衰老模型,给药组小鼠灌胃给予不同剂量药物,试验结束时检测小鼠皮肤匀浆中相关指标及观察形态学变化。结果:高、中剂量菟丝子能够显著提高衰老模型小鼠皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)活性和羟脯氨酸(Hyp)、皮肤水分(water)的含量(P<0.01或P<0.05),降低丙二醛(MDA)、脂褐质(Lf)含量(P<0.01或P<0.05)。衰老皮肤的形态学得到改善。结论:菟丝子能够有效延缓模型小鼠的皮肤老化,结合有关研究说明菟丝子能从多层面起到延缓衰老作用。     

抗硬化复方对硬皮病小鼠模型影响的研究

目的探讨抗硬化复方与青霉胺对硬皮病小鼠模型的影响。方法 C_3H 雌性小鼠52只,皮下注射博莱霉素造模分组给药。以 HE、Masson 染色法观察硬皮病小鼠皮肤厚度及真皮纤维化程度,测定其皮肤羟脯氨酸含量进行皮肤胶原分析,对各组的测定值进行分析比较。结果与模型组比较,中药组、西药组和中西药结合组小鼠皮肤厚度明显变薄(P<0.01),胶原含量有不同程度减少,尤其中西药结合组显著减少(P<0.01)。早予中药组不仅皮肤厚度、胶原含量显著低于模型组(P<0.01),且较 PBS 对照组无明显差异(P>0.05)。结论抗硬化复方药物能明显抑制硬皮病小鼠皮肤胶原纤维增生,减少胶原等细胞外基质的沉积,越早应用,效果越好,中西药联合应用效果更佳。     

基于“气血两清”理论探讨浮萍-紫草对银屑病模型小鼠皮肤屏障功能的影响

【目的】 探讨浮萍-紫草药对对银屑病模型小鼠皮肤屏障功能的影响。【方法】 将120只BALB/c小鼠随机分为12组，即空白组，模型组，阳性对照组，浮萍低、中、高浓度组，紫草低、中、高浓度组，浮萍-紫草低、中、高浓度组。除空白组外，其余11组小鼠均采用背部涂抹咪喹莫特乳膏法建立银屑病模型，造模和给药同时进行。除空白组及模型组每日灌胃生理盐水外，阳性对照组灌胃阿维A的蒸馏水混悬液；浮萍低、中、高浓度组分别灌胃20、40、80 mg/kg木犀草素的蒸馏水混悬液；紫草低、中、高浓度组分别灌胃20、40、80 mg/kg紫草素的蒸馏水混悬液；浮萍-紫草低、中、高浓度组分别灌胃20、40、80 mg/kg木犀草素与紫草素的蒸馏水混悬液。1次/d，连续7 d。观察银屑病面积及严重指数（PASI）评分、经表皮水分丢失（TEWL）、角质层含水量（SCH）、皮肤湿度。【结果】 干预后，各中药组和阳性对照组的PASI评分、TEWL均显著低于模型组，SCH、皮肤湿度均显著高于模型组（P＜0.05），且各中药组上述指标的改善均优于阳性对照组，其中，浮萍-紫草组疗效更优。【结论】 中药浮萍、紫草分别或联合均能改善银屑病模型小鼠的皮损，对银屑病的皮肤屏障功能有修复作用，且药对的改善作用更加显著。     

复方榴莲皮软膏对120例特应性皮炎皮肤屏障功能修复的临床研究

目的:观察复方榴莲皮软膏药对特应性皮炎皮肤屏障功能修复的临床效果。方法:采用随机抽取门诊患者120例,分为治疗组及对照组。治疗组外擦复方榴莲皮软膏,每天2次;对照组外擦0.1%糠酸莫米松乳膏,每天2次。结果:治疗2周时两组患者腘窝、面颊部及肘窝部靶皮损角质层含水量角、皮肤PH值、皮肤失水量TEWL均比治疗前好转,且差异均有统计学意义(P0.01),且组间差异有统计学意义(P0.05),治疗4周时,两组皮损角质层含水量角、皮肤PH值、皮肤失水量TEWL均比治疗前显著好转,组间差异有统计学意义(P0.01)。结论:复方榴莲皮软膏药治疗特应性皮炎安全有效,对皮肤屏障功能修复有良好疗效,明显优于对照组。     

茶树提取物经皮给药对衰老小鼠皮肤的影响

目的研究茶树提取物对衰老小鼠皮肤的影响。方法采用1%D-半乳糖颈背部皮下注射联合中波紫外线(UVB)照射建立小鼠衰老模型,给药组茶树提取物(TTE)经皮给药30 d,观察小鼠皮肤、HE染色观察皮肤厚度和结构、Masson三色染色观察胶原纤维形态、测定皮肤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp),测定皮肤含水量。结果对比于正常组,模型小鼠皮肤粗糙,皮肤变薄,胶原排列无序,SOD、Hyp含有量和皮肤含水率下降,MDA含有量上升。TTE给药后,小鼠皮肤变光滑,表皮与真皮厚度增加,胶原纤维增长增粗,排列整齐,SOD、Hyp含有量和皮肤含水量上升,MDA含有量下降,其中TTE高剂量组小鼠皮肤的各参数差异均有统计学意义(P0.01)。结论茶树提取物对小鼠皮肤具有抗衰老作用。     

绞股蓝提取液对光老化模型小鼠皮肤组织中SOD活性MDA和HYP含量影响的实验研究

目的:研究内服绞股蓝对紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化模型的影响。方法:昆明无毛小鼠随机分成5组,正常组(A)、模型对照灌胃组(B)、低剂量灌胃组(C)、中剂量灌胃组(E)、高剂量灌胃组(F)。模拟UV长期照射,造成皮肤光老化模型。给药组照射同时灌胃绞股蓝提取液。采用病理组织切片制片技术,HE染色以40倍光镜观察真皮结构改变,并以生化分析方法测定SOD活性,HYP及MDA含量。结果:绞股蓝C、D、E组对SOD活性均有提高作用(P<0.05)。D、E组可提高羟脯氨酸含量,降低MDA含量。结论:绞股蓝提取液具有拮抗紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化的作用。     

Q-1064激光联合逍遥丸治疗肝脾不和型黄褐斑的疗效研究

目的:观察Q-1064激光联合逍遥丸治疗肝脾不和型黄褐斑的疗效及其皮肤屏障功能、黑素含量的变化。方法:将患者66例随机分为两组。治疗组33例,予大光斑低能量Q-1064激光治疗,同时口服逍遥丸。对照组33例,口服维生素C片、维生素E胶丸。疗程均为6个月。观察治疗前后黄褐斑皮疹的变化及皮疹区的经表皮水分流失值(TEWL)、角质层含水量、皮脂含量、黑素含量的变化。结果:治疗组总有效率为90.90%,对照组总有效率为48.48%,两者差异有统计学意义(P0.05)。两组治疗前后TEWL、角质层含水量、皮脂含量差异无统计学意义(P0.05)。治疗组治疗前黑素含量为(63.76±1.82)U.C,治疗后黑素含量为(23.21±2.60)U.C,两者差异有统计学意义(P0.05)。对照组治疗前后黑素含量差异无统计学意义(P0.05)。结论:本研究提示Q-1064激光联合逍遥丸治疗肝脾不和型黄褐斑具有较好的临床疗效,治疗后黑素含量明显减少,且疗程完成后对皮肤屏障功能无损害。     

马齿苋提取液通过IL-4途径对急性湿疹大鼠皮肤屏障功能和免疫反应的调控作用

目的通过白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)对皮肤屏障功能和免疫反应的调控探讨马齿苋提取液治疗急性湿疹的可能机制。方法 SD大鼠30只,分层随机分为3组,正常组、模型组和马齿苋组,各组10只。除正常组外其余各组采用二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB)建立急性湿疹模型。造模成功后,模型组和马齿苋组分别外敷1ml无菌蒸馏水和马齿苋提取液,正常组不做任何处理。用药后,采用皮肤表皮水分丧失测定仪测定各实验组大鼠经皮水分丢失量(transepidermal water loss,TEWL);ELISA技术检测大鼠血清中总免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的含量;免疫组化法(SP法)染色IL-4和蛋白酶激活受体2(protease activated receptor-2,PAR-2)并采用病理图像分析系统半定量检测其含量。结果与正常组比,模型组大鼠IgE、IL-4、PAR-2和TEWL显著增加(P0.01);与模型组比,马齿苋组大鼠IgE、IL-4、PAR-2和TEWL显著降低(P0.05)。结论马齿苋提取液可通过抑制IL-4的分泌,降低IgE的释放,调节免疫反应,同时抑制PAR-2的表达,降低TEWL,恢复皮肤屏障功能,达到治疗急性湿疹的作用。     

核桃青皮流浸膏对银屑病小鼠皮肤屏障功能的影响及机制研究

目的探讨核桃青皮流浸膏对咪喹莫特乳膏致银屑病小鼠皮肤屏障功能的影响及机制。方法制备不同浓度的核桃青皮流浸膏,采用咪喹莫特乳膏制作银屑病模型,给药后通过PASI评分、HE染色观察各组小鼠皮肤变化及组织结构变化,利用RT-PCR检测各组小鼠皮肤组织中水通道蛋白-3(aquaporin3,AQP3)、神经酰胺(ceramide,Cer),丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-14(Caspase14)四种相关保湿因子表达的改变。结果给予不同浓度核桃青皮流浸膏的实验组较模型组皮损部位红肿程度轻、鳞屑面积小,皮肤光滑,增厚程度轻,镜下表皮增生情况有缓解,尤其高剂量组较假手术组无显著性差异(P>0.01);中、高剂量组AQP3、Cer、FLG、Caspase14表达分别与模型组比较均具有显著性差异(P<0.01),高剂量与阳性药组相比,四种物质的表达均不具有显著性差异(P>0.01)。结论核桃青皮流浸膏对咪喹莫特乳膏致银屑病小鼠模型病理的变化有改善作用,其增强皮损组织中AQP3、Cer、FLG、Caspase14四种相关保湿因子的表达是改善皮肤损伤的可能机制之一,治疗作用与给药量成线性关系,且高浓度效果不劣于卡泊三醇组。     

黄芪提取液对光老化无毛小鼠皮肤组织HYP MDA含量及SOD活力的影响

目的:实验旨在研究黄芪提取液是否具有抗皮肤光老化的作用及其机理。材料与方法:将昆明种无毛小鼠随机分成5组,除正常对照组外,模拟UV长期照射,造成皮肤光老化模型,给药组照射同时分别灌胃高、中、低剂量的黄芪提取液,模型组灌胃等剂量生理盐水。对其皮肤组织HYP含量、MDA含量、SOD活力进行测定,以40倍光镜观察真皮结构改变,结果:模型组无毛小鼠皮肤组织SOD活性明显降低,羟脯氨酸含量显著减少,MDA含量明显增加(P<0.05),病理切片呈现光老化状态。模型 黄芪高剂量组的皮肤羟脯氨酸及MDA含量与正常组无显著性差异。与模型组比较,模型 黄芪高剂量组对SOD活性有提高作用(P<0.05),模型 黄芪中剂量、模型 黄芪低剂量组可提高羟脯氨酸含量,降低MDA含量,并呈剂量依赖(分别是P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪提取液对紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化具有保护作用。其机制可能是一方面黄芪本身具有清除自由基的作用;另一方面黄芪可以通过提高SOD活力来达到抗氧化的目的。     

归素膏对衰老小鼠皮肤SOD活性及MDA含量影响的实验研究

目的:观察归素膏对衰老小鼠皮肤超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量的影响。方法:实验以自然衰老模型小鼠为研究对象,采用背部外搽给药方式,通过硫代巴比妥酸荧光比色法和黄嘌呤氧化酶法检测小鼠皮肤MDA含量和SOD活性。结果:空白对照组、当归组和染料木素组相比较,归素膏可显著提高衰老小鼠皮肤SOD活性,降低衰老小鼠皮肤MDA含量。结论:归素膏能够提高衰老小鼠皮肤SOD活性、降低皮肤中MDA含量,进而延缓机体皮肤衰老。     

补肝散对亚急性衰老模型小鼠SOD及MDA的影响

目的:观察补肝散对D—半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠的心肝脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量的影响。方法:48只小鼠分为6组,除正常对照组外,其余5组用5%D-gal100mg/kg注射于小鼠颈背部皮下,建立小鼠衰老模型。于造模第43天停止造模用药,正常对照组、自然恢复组用同体积蒸馏水灌胃。补肝散3个给药组分别按12.9g/(kg.d)、25.7g/(kg.d)、51.4g/(kg.d)给药(容积为0.54ml),连续灌胃2周。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠心肝脑组织MDA含量明显增加,SOD活力下降,与模型组相比,3个给药组小鼠心肝脑MDA含量明显减少(P<0.05)、SOD活力增强(P<0.05)。结论:补肝散能拮抗自由基损伤,减少D-gal衰老模型小鼠心肝脑组织MDA含量,增强其心肝脑组织SOD活力。