JAK2/STAT3信号通路在大脑缺血缺氧后小胶质细胞活化中的作用

缺血缺氧脑病(Hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是导致新生儿死亡和婴幼儿神经发育障碍的主要原因,部分患儿有不同程度的神经系统后遗症,如脑瘫、认知和运动功能发育障碍。缺血缺氧可激活JAK2/STAT3信号通路,进而导致小胶质细胞异常活化,引发神经炎症反应;通过下调JAK2/STAT3信号通路可抑制小胶质细胞异常活化,改善神经系统炎性损伤。当前缺血缺氧脑病的治疗方法有限,因此研究小胶质细胞活化的调控机制对于缺血缺氧脑病的治疗具有重要临床价值。本文对JAK2/STAT3信号通路在小胶质细胞活化中的作用及二者相互关系的研究进展作一综述,以期为缺血缺氧脑病的治疗提供新的研究思路。     

骨痨愈康丸通过JAK3/STAT3信号通路对佐剂性关节炎大鼠炎症反应的影响

目的 基于JAK3/STAT3信号通路探讨骨痨愈康丸对类风湿关节炎模型大鼠的影响机制。方法 将60只Wistar大鼠,随机分为正常对照(Control)组、模型(CIA)组、骨痨愈康丸(GL)组、骨痨愈康丸+JAK受体酪氨酸激酶抑制剂AG490(GL+AG490)组、JAK受体酪氨酸激酶抑制剂AG490(AG490)组,除正常对照组外,其余四组均建立胶原诱导性类风湿关节炎(CIA)大鼠模型。通过ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平,运用免疫组化法与实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测踝关节软骨和滑膜组织中JAK3、STAT3蛋白及mRNA的表达情况。结果 与Control组比较,CIA、GL、GL+AG490、AG490组大鼠踝关节肿胀明显,伴关节畸形、大鼠活动明显减少、跛行、毛色暗淡无光泽、体重减轻;模型大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平显著升高;JAK3、STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与CIA组相比,各治疗组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平降低;JAK3、STAT3蛋白及mRNA表达下调(P...     

Effect of the JAK2/STAT3 signaling pathway on epithelial mesenchymal transition of the peritoneum in uremic peritoneal dialysis rats

Objective To investigate whether the JAK2/STAT3 signaling pathway is involved in the epithelial-mesenchymal transition (EMT) of peritoneal mesothelial cells in uremic peritoneal dialysis (PD) rats. Methods A total of 48 male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly separated into six groups: normal control group (NC group, n=8), sham group (n=8), uremic group (n=8), PD group (n=8), S3I-201 control group (n=8) and S3I-201 group (n=8). Uremic model generated by 5/6 nephrectomy surgery in rats was established. The rats of PD group, S3I-201 control group and S3I-201 group received daily infusion of 4.25% glucose-based peritoneal dialysate fluid (3 ml/100 g) from PD catheters for 28 days. Rats of S3I-201 group were injected with STAT3 inhibitor S3I-201 (2.5 mg/kg) solution from the catheters every other day; the same dose of the solvent of S3I-201 was simultaneously given to S3I-201 control group rats. After PD for 28 days, peritoneal function, pathologic changes, and microvessel density (MVD) were evaluated. Creatinine, urea nitrogen and interleukin-6 (IL-6) concentration in blood and dialysate, and protein and mRNA levels of phospho-JAK2 (p-JAK2), phospho-STAT3 (p-STAT3), E-cadherin, alpha-smooth muscle actin (α-SMA) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in peritoneum were determined. Results Uremia and peritoneal dialysate could aggravate the peritoneal function and elevate peritoneal thickness and MVD. They could also increased the concentration of IL-6 in blood and dialysate and the expression levels of α-SMA, VEGF, p-JAK2 and p-STAT3 in peritoneum, while lowering E-cadherin expression in peritoneum. These manifestations were even more remarkable in PD group compared to those in uremic group. There was no statistical difference between the S3I-201 control group and the PD group as regards all the index (all P＞0.05). Compared with the S3I-201 control group, the rats treated with S3I-201 showed better peritoneal function. S3I-201 could reduce peritoneal thickness (P＜0.05), MVD (P＜0.05), the concentration of IL-6 in blood and dialysate, the mRNA and protein expression of α-SMA, VEGF, p-JAK2 and p-STAT3 (all P＜0.05), while enhance the mRNA and protein expression of E-cadherin (all P＜0.05). Conclusions After STAT3 is inhibited, the peritoneal thickness, MVD and IL-6 concentration in PD rats are decreased, and EMT is also inhibited, while peritoneal function is improved. The JAK2/STAT3 signaling pathway may thus be involved in the process of EMT of peritoneum in uremic peritoneal dialysis rats by regulating the expression of IL-6.     

高糖环境LIF介导STAT3/SOCS3信号通路参与成骨细胞分化机制研究

目的研究高糖环境下白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)介导STAT3/SOCS3信号通路对成骨细胞分化的影响及其作用机制。方法利用ELISA检测2型糖尿病患者血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)家族中LIF及炎性因子的水平;通过RT-PCR、Western blot检测体外高糖环境下成骨分化标志物ALP、RUNX2、OCN、OPN以及细胞因子信号抑制因子3(suppressors of cytokine signaling,SOCS3)的m RNA和蛋白表达情况。结果 2型糖尿病患者血清炎性因子和LIF的水平明显升高。高糖或LIF显著降低了成骨分化标志物ALP、RUNX2、OCN和OPN的m RNA和蛋白水平,同时上调了SOCS 3和PSTAT3的表达。加入50 nmol/L或100 nmol/L STAT 3抑制剂JSI-124可改善成骨分化标志物的表达下调。结论 LIF通过介导STAT3/SOCS3信号通路参与高糖诱导下的成骨细胞分化。本研究为高糖导致的成骨障碍奠定了分子生物学理论基础并对靶点药物的研发提供了实验依据。     

JAK2/STAT3信号通路在肝细胞性肝癌中表达及意义

目的:探讨JAK2/STAT3信号通路在人肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达以及其意义。方法:用免疫组化法和Western blot法检测75例HCC组织及其相应的癌旁组织JAK2与STAT3蛋白的表达,分析两者与HCC患者病理特征及预后的关系。结果:JAK2与STAT3蛋白在HCC组织中的阳性表达率及表达量均高于相应的癌旁组织(62.7%vs.5.3%,69.3%vs.9.3%;均P0.05);JAK2与STAT3蛋白在HCC组织中的表达呈明显正相关(r=0.383,P0.01)。JAK2和STAT3蛋白的表达与肝硬化、门静脉癌栓、肿瘤分化程度、临床分期明显有关(均P0.05)。生存分析显示,JAK2与STAT3蛋白高表达患者的生存率及生存期均明显低于各自的低表达患者(χ2=13.591;χ2=6.842,均P0.05);Cox比例风险回归模型分析表明,JAK2与STAT3蛋白以及门静脉癌栓、肿瘤分化程度、临床分期均为影响HCC预后的独立危险因素(均P0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路在HCC组织中活性增高,且其活性高低与HCC患者预后密切相关。     

藕节对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK2/STAT3及凋亡因子表达的影响

也页目的：探讨藕节对糖尿病肾病大鼠肾组织p-JAK2、p-STAT3及凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法：健康雄性SD大鼠60只,随机选取10只为正常组（ N组）,其余采用单次腹腔注射链尿佐菌素（ STZ,45 mg/kg）制作DN模型,造模成功后随机分为糖尿病肾病组（DN）、藕节小剂量组（RL,1.5 g·kg-1·d-1）、中剂量组（RM,3.0 g·kg-1·d-1）、大剂量组（RH,6.0 g·kg-1·d-1）及氯沙坦钾组（LP,30 mg·kg-1·d-1）,均采用灌胃给药,N组和DN组给予等量蒸馏水。12周后检测大鼠生化指标;HE、Masson染色及电镜观察肾脏病理改变;免疫组化法测定p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2及Bax在肾组织表达情况;原位末端标记法（ TUNEL）检测肾组织细胞凋亡情况。结果：实验12周末,与N组比较,DN组大鼠肾小球肥大、系膜基质增多、细胞凋亡明显,BUN、Scr、24 h尿蛋白定量明显升高（P〈0.05）,肾组织Bax、p-JAK2、p-STAT3表达明显上调,Bcl-2表达下调（P〈0.05）;与DN组比较,藕节中、高剂量组肾脏病理改变减轻、细胞凋亡减少,24 h尿蛋白定量较DN组明显降低（P〈0.05）,但降尿蛋白作用弱于氯沙坦钾组,同时肾组织Bax、p-JAK2、p-STAT3表达下调,Bcl-2表达上调（P〈0.05）。结论：藕节可能通过上调Bcl-2在肾组织的表达,下调Bax、p-JAK2、p-STAT3的表达,从而减少尿蛋白,延缓DN进展。     

Anxa2在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用机制及对STAT3信号通路的影响研究

目的探讨膜联蛋白A2(Anxa2)在乳腺癌细胞侵袭转移中的作用机制及对转导因子和转录活化因子(STAT3)信号通路的影响。方法乳腺癌细胞株MCF-7作为研究对象,分为对照组和转染组。对照组细胞中加入细胞培养基进行培养;转染组细胞分为两组,均常规构建Anxa2野生型表达载体,一组为未转染组;另一组将其转染到Anxa2降表达的细胞进行拯救,并完成细胞转染,设为转染组;采用细胞划痕试验和Transwell小室完成两组细胞划痕试验、侵袭和迁移试验;采用实时荧光PCR技术测定两组细胞STAT3信号通路水平。采用SPSS18.0软件处理,STAT3信号通路水平、细胞划痕试验采用(±s)表示,三组数据比较采用F检验,P<0.05差异有统计学意义。结果转染组细胞24 h Anxa2降表达后细胞划痕距离大于未转染组与对照组(P<0.05),未转染组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);转染组细胞培养后迁移、侵袭能力均低于对照组与未转染组(P<0.05);转染组STAT3 mRNA水平明显低于对照组与未转染组(P<0.05)。结论Anxa2降表达在乳腺癌细胞中能抑制细胞的侵袭与转移,可能与抑制STAT3信号通路有关,可能成为乳腺癌治疗提供新的靶点。     

由IL-10/JAK2/STAT3通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎软骨损伤的研究

目的 由白细胞介素(IL)-10/Janus激酶(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)软骨损伤的影响及机制。方法 将新西兰雄兔分为空白组、KOA模型组、养血柔筋方组(50 mg/kg)、塞来昔布组(24 mg/kg)、JAK2激活剂组(50 mg/kg养血柔筋方+0.11 mg/kg AG490),每组6只。通过木瓜蛋白酶诱导KOA兔模型,造模成功后给予相应治疗。运用HE染色观察软骨组织病理变化,Mankin评分进行定量评分;透射电镜观察软骨组织的超微结构;ELISA测量血清IL-1β、IL-6含量;免疫组织化学检测软骨组织基质金属蛋白酶13(MMP13)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、Ⅱ型胶原蛋白(COl-Ⅱ)蛋白表达;Western Blot检测软骨组织IL-10/JAK2/STAT3通路蛋白表达。结果 与空白组比较,KOA模型组中软骨组织病变严重,Mankin评分、IL-1β和IL-6含量、MMP13、p-JAK2和p-STAT3蛋白...     

JAK2信号通路介导人恶性黑素瘤A375细胞的自噬和凋亡机制研究

目的:探讨JAK2/STAT3信号通路介导人恶性黑素瘤A375细胞的自噬和凋亡活性,为黑素瘤的发生机制和潜在干预靶点提供理论依据。方法:人恶性黑素瘤A375细胞经复苏和传代后随机分为对照组和JAK2抑制剂干预组,比较两组细胞培养12h、24h、48h和72h的增殖率(采用MTT定量法)及凋亡率(采用流式细胞术),培养72h的细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、LC3B和p-STAT3蛋白相对表达量(采用Western blot法),检测IL-6和TNF-α水平(采用ELISA法),检测Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相对表达量[采用反转录PCR(RT-PCR)法]。结果:两组培养12h、24h、48h和72h的细胞增殖率比较,干预组各时间点均明显小于对照组,而凋亡率明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组培养72h的细胞p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量、IL-6和TNF-α水平明显低于对照组,但LC3B蛋白、Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路异常激活可能是人黑素瘤A375细胞恶性增殖的重要通路之一,靶向干预JAK2/STAT3信号通路可以促进细胞自噬和凋亡活性上调,有望成为临床干预的重要靶点。     

骨量减少或骨质疏松症合并2型糖尿病患者血清视黄醇结合蛋白4水平与骨密度的联系

目的探讨50岁以上2型糖尿病患者伴有骨量减少或骨质疏松症血清视黄醇结合蛋白4 (retinol binding protein 4,RBP4)、骨密度(bone mineral density,BMD)与其他相关骨代谢指标之间的关系。方法 2016年4月至2017年8月在我院就诊的2型糖尿病患者(n=204例)入选本研究。采用双能X线骨密度仪测量BMD,分为正常骨密度组(110例)、骨量减少组(69例)和骨质疏松组(25例)。同时确定血清RBP4和其他生物标志物。结果与正常骨密度组相比,骨量减少和骨质疏松组患者血清RBP4、体重、钙和体质量指数(bone mass index,BMI)均与BMD呈正相关。相比之下,年龄、糖尿病病程和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)与所有测试部位的BMD呈负相关。在未调整的分析中,年龄、性别、糖尿病持续时间、ALP与股骨颈、髋部和腰椎BMD呈负相关,而体重、BMI和RBP4与所有部位的BMD呈正相关。在多元回归分析中,根据年龄、体重、BMI和其他骨骼相关因素进行校正,结果显示,在所有部位,血清RBP4与BMD之间呈逐级递增关系。结论与2型糖尿病患者的正常骨密度组相比,调整其他因素后,在骨量减少和骨质疏松症组中患者血清RBP4与所有部位的骨密度均呈正相关。     

MOB1蛋白通过调控AKT/Cyclin D1信号通路促进肝癌细胞增殖

目的探讨MOB1蛋白在肝癌中的作用及其调控机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析MOB1在肝癌中的表达水平及其与患者生存期的关系。利用Western blotting验证MOB1蛋白在肝癌组织样本中的表达情况。用siRNA敲低MOB1表达,慢病毒构建MOB1稳定过表达细胞系,CCK-8法检测MOB1蛋白对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测MOB1蛋白对肝癌细胞周期的影响。Western blotting检测关键信号通路蛋白水平的表达。结果通过TCGA数据库分析,同源基因MOB1a和MOB1b在肝癌样本集中存在显著高表达,且肿瘤样本高表达MOB1a和MOB1b基因与患者的生存期缩短显著相关。在临床样本分析中,MOB1在86.7%的肝细胞癌患者肿瘤组织中显著高表达。MOB1过表达后Huh7和HepG2细胞的增殖速度显著上升,G₂/M期细胞比例显著上升。反之,MOB1敲低后,Huh7和HepG2细胞的增殖速率显著下降,G₂/M期细胞比例显著下降。进一步研究发现,MOB1蛋白过表达不影响经典的Hippo-YAP信号通路,但能促进AKT蛋白...     

Growth hormone synergizes with BMP9 in osteogenic differentiation by activating the JAK/STAT/IGF1 pathway in murine multilineage cells

Growth hormone (GH) is usually released by somatotrophs in the anterior pituitary in response to the GH-releasing hormone and plays an important role in skeleton development and postnatal growth. However, it is unclear if extrapituitary GH exerts any effect on murine multilineage cells (MMCs). MMCs are multipotent progenitors that give rise to several lineages, including bone, cartilage, and fat. We have identified bone morphogenic protein 9 (BMP9) as one of the most osteogenic BMPs in MMCs by regulating a distinct set of downstream mediators. In this study, we find that GH is one of the most significantly upregulated genes by BMP9 in mouse MMCs through expression-profiling analysis. We confirm that GH is a direct early target of and upregulated by BMP9 signaling. Exogenous GH synergizes with BMP9 on inducing early and late osteogenic markers in MMCs. Furthermore, BMP9 and GH costimulation leads to a significant expansion of growth plate in cultured limb explants. Although GH alone does not induce de novo bone formation in an ectopic bone formation model, BMP9 and GH costimulated MMCs form more mature bone, which can be inhibited by silencing GH expression. The synergistic osteogenic activity between BMP9 and GH can be significantly blunted by JAK/STAT inhibitors, leading to a decrease in GH-regulated insulin-like growth factor 1 (IGF1) expression in MMCs. Our results strongly suggest that BMP9 may effectively regulate extrapituitary GH expression in MMCs. Thus, it is conceivable that the BMP9-GH-IGF axis may be exploited as an innovative strategy to enhance osteogenesis in regenerative medicine.     

舒芬太尼后处理对犬心肌缺血/再灌注Bcl-2、Bax的影响及其与JAK2-STAT3信号通路的关系

目的 研究舒芬太尼后处理对心肌缺血/再灌注损伤(ischemiia/reperfusion injury,I/RI)细胞凋亡的影响以及与信号通路JAK2-STAT3的关系.方法 健康杂种家犬24只,体重10 kg～15 kg,按随机数字表法分为4组(每组6只):假手术组(Sham组,只穿线,不结扎),心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组,舒芬太尼后处理组(SPO组,于再灌注前5min静脉注射舒芬太尼0.6 μg/kg),舒芬太尼后处理+AG490组(SPO+AG490组,于再灌注前5 min静脉注射l mg/kg AG490,特异性的JAK2抑制剂),除Sham组外,所有犬心脏都经历30 min缺血和120 min再灌注.再灌注120 min时,取各组缺血区心肌组织,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)法测定心肌细胞的凋亡情况,免疫组化法测定各组Bcl-2、Bax以及磷酸化STAT3 (p-ATAT3)蛋白的表达,并计算Bcl-2和Bax表达的比值(Bcl-2/Bax).结果 再灌注120 min时,可在I/R组缺血区心肌组织中检测到大量凋亡心肌细胞(63.9±4.0)％,而舒芬太尼后处理显著降低心肌细胞凋亡指数(30.7±1.5)％;与Sham组比较,I/R组、SPO组和SPO+AG490组Bcl-2与Bax表达上调,I/R组Bcl-2/Bax比值降低,SPO组Bcl-2/Bax比值升高;舒芬太尼后处理使p-STAT3表达明显增加,特异性的阻断剂AG490抑制了舒芬太尼后处理对心肌I/RI凋亡的作用,即抑制p-STAT3表达的增加. 结论 舒芬太尼后处理对心肌I/RI细胞凋亡有一定的抑制作用,通过激活JAK2-STAT3信号转导通路上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白来发挥作用.     

人工虎骨粉对去卵巢大鼠骨组织中Sirt1/Runx2信号通路的影响

目的探讨人工虎骨粉对去卵巢大鼠骨组织中Sirt1/Runx2信号通路的影响。方法选取40只成年雌性SD大鼠,建立去卵巢大鼠模型,切除卵巢2周后分成人工虎骨粉组与去卵巢组,人工虎骨粉组给予灌胃人工虎骨粉0. 24 g/(kg·d),去卵巢组给予灌胃等效剂量的生理盐水。另取20只成年雌性SD大鼠作为假手术组,仅切除卵巢周围脂肪组织,不切除双侧卵巢,切除卵巢周围脂肪组织2周后给予灌胃等效剂量的生理盐水。连续给药12周后,进行股骨骨密度、骨代谢、骨生物力学、股骨组织学与Western Blot检测。结果与假手术组比较,去卵巢组股骨骨密度、最大载荷、断裂载荷、最大应力、弹性模量及股骨组织Sirt1、Runx2、Foxo1、Foxo3a蛋白表达降低,骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶、血钙、血磷及碱性磷酸酶浓度升高,股骨组织呈现骨质疏松病理改变;与去卵巢组比较,人工虎骨粉组股骨密度、最大载荷、断裂载荷、最大应力、弹性模量及股骨组织Sirt1、Runx2、Foxo1、Foxo3a蛋白表达升高,骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶、血钙、血磷及碱性磷酸酶浓度均降低,骨质疏松病理改变显著改善。结论人工虎骨粉可能通过调节Sirt1/Runx2信号通路来发挥抗骨质疏松作用。     

Anosmin-1蛋白通过成纤维生长因子1型受体激活ERK1/2信号通路增强嗅鞘细胞的迁移

目的探究Anosmin-1蛋白对嗅鞘细胞迁移的影响及对成纤维生长因子(FGF)1型受体和ERK1/2信号通路的影响。方法选择SPF级成年雌性SD大鼠40只,7～10周龄,体重250～300 g。提取大鼠嗅球的嗅鞘细胞并纯化,纯化后细胞培养7 d后,采用随机数字表法将所有细胞平均分为四组:对照组(C组),FGF 1型受体激动剂(FGF2)组(F组),Anosmin-1蛋白组(A组)和Anosmin-1蛋白+FGF 1型受体抑制剂(Su5402)组(S组)。C组为空白对照组,培养液中不加任何药物处理;F组为阳性对照组,于培养液中加入FGF2 25 ng/ml; A组于培养液中加入Anosmin-1蛋白2 nmol/L;S组于培养液中加入Anosmin-1蛋白2 nmol/L和Su5402 30μmol/L。四组细胞处理24 h后,采用Transwell法检测嗅鞘细胞迁移能力,Western blot法检测嗅鞘细胞磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白和神经型钙粘连蛋白(N-cadherin)含量,免疫荧光染色法检测N-cadherin荧光强度。结果纯化后的嗅鞘细胞占总细胞的85.6%。与C组比较,F组和A组迁移至下室的嗅鞘细胞明显增多(P0.05),p-ERK1/2蛋白、N-cadherin含量明显升高(P0.05)。与A组比较,S组迁移至下室的嗅鞘细胞明显减少(P0.05),p-ERK1/2蛋白、N-cadherin含量明显降低(P0.05)。S组和C组间、F组和A组间迁移至下室的嗅鞘细胞数量、p-ERK1/2蛋白、N-cadherin含量差异无统计学意义。四组p-AKT蛋白含量差异无统计学意义。结论 Anosmin-1蛋白通过FGF 1型受体激活ERK1/2信号通路,从而上调N-cadherin,增强嗅鞘细胞的迁移能力。     

内皮素和超敏C反应蛋白与2型糖尿病患者不同程度蛋白尿的关系

目的探讨血浆内皮素（ET）和血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）与2型糖尿病患者不同程度蛋白尿的关系。方法选择2006年8月至2009年5月在我院住院的无肾脏并发症的2型糖尿病患者40例为D组,有肾脏并发症的2型糖尿病患者63例为N组,将N组患者按照尿白蛋白排泄率（UAER）分为以下3组：间断白蛋白尿组（NI组,n=21）：UAER〈20μg／min;微量白蛋白尿组（N2组,n=20）：UAER20-200μg／min;临床白蛋白尿组（N3组,n=22）：UAER〉200μg／min。选择同期健康体检者40名为对照组（C组）。采用酶链免疫吸附（ELISA）法测定各组血浆ET和血清hs-CRP水平。并对各组血浆ET及血清hs-CRP水平进行相关性分析。结果与C组相比,D组血浆ET和血清hs-CRP均升高（P〈0．05）;N组血浆ET和血清hs-CRP比较,N2组较N1组升高,N3组较N2组升高（P〈0．01）。C、D和N1组血浆ET和血清hs-CI心水平无相关性（r分别为0．117、0．208和0．361,P〉0．05）;N2、N3组血浆ET和血清hs-CRP水平呈正相关（r分别为0．505和0．587,P〈0．05或P〈0．01）。结论ET和hrCRP可能参与糖尿病肾脏病的发生和发展,其可作为判断预后、指导治疗的重要参考指标。     

Low-intensity pulsed ultrasound in combination with SonoVue induces cytotoxicity of human renal glomerular endothelial cells via repression of the ERK1/2 signaling pathway

Objectives: Low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) and SonoVue have been used widely for diagnosis and therapeutic treatment. The effects of LIPUS and SonoVue on the microvascular system and underlying molecular mechanisms have not been established.

Methods: Cultured human renal glomerular endothelial cells (HRGECs) were treated with 5-min ultrasonic irradiation, 20% SonoVue or the combination of both treatments. Cell proliferation, viablity, and apoptosis were measured by MTT assay, Trypan blue exclusion assay and flow cytometry, respectively. Activation of extracellular regulated protein kinases (ERK) were examined by Western blot.

Results: We found that LIPUS and SonoVue alone do not induce cytotoxicity of HRGECs; however, the combination of the two treatments reduces cell proliferation and increases cell death. In addition, the combination of LIPUS and SonoVue suppressed the activation of ERK 1/2 in HRGRCs. With pretreatment of the inhibitor of ERK1/2 signaling, PD98059, LIPUS, and SonoVue does not induce additional cell death and inhibition of proliferation.

Conclusions: LIPUS combined with SonoVue induces cytotoxicity of HRGECs via repression of the ERK1/2 signaling pathway.     

糖尿病肾脏疾病患者血清三叶因子水平变化的临床意义

目的 探讨糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）患者血清三叶因子（trefoil factor 3,TFF3）水平的变化及其临床意义.方法 依据24 h尿白蛋白排泄率（urine albumin excretion rate,UAER）将123例2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者分为3组：单纯糖尿病组（SDM组,UAER＜30 mg/24 h）42例;早期糖尿病肾脏疾病组（EDKD组,UAER 30～300 mg/24 h）46例;临床糖尿病肾脏疾病组（CDKD 组,UAER＞300 mg/24 h）35例.另选择健康体检者20名为对照组.用酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测所有研究对象血清TFF3表达水平,并对相关临床资料进行统计学分析.结果 CDKD组的血清TFF3水平[（71.33±9.48）ng/ml]明显高于其他3组,EDKD组患者血清TFF3水平[（49.31±8.93）ng/ml]显著高于SDM组[（32.65±7.27）ng/ml],而对照组血清TFF3水平最低[（17.65±6.27）ng/ml],各组间比较有统计学差异（P＜0.01）.Pearson相关分析显示,T2DM患者血清TFF3水平与UAER呈正相关（r＝0.897,P＜0.05）.结论 血清TFF3表达水平与DKD的发生、发展呈正相关,可作为预测及判断DKD严重程度的重要指标之一.