天麻芎苓止眩片对自发性高血压大鼠ACE2/Ang（1-7）/Mas轴的影响

目的?探讨天麻芎苓止眩片（TXZT）对自发性高血压大鼠（SHR）血管紧张素转换酶（ACE）2/血管紧张素（Ang，1-7）/Mas轴的调控作用，探讨其防治高血压病的作用机制。方法?50只SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、TXZT高、中、低剂量组，另取10只WKY大鼠作为正常组，厄贝沙坦组给予厄贝沙坦27 mg/kg灌胃；TXZT高、中、低剂量组分别给予TXZT 2.0 、1.0、0.5 g/kg 灌胃；模型组和正常组分别给予等量蒸馏水灌胃。各组均连续给药4周。测量干预前后大鼠收缩压；ELISA法检测血清中肾素（REN）、醛固酮（ALD）、AngⅡ、ACE2、Ang （1-7）的含量变化；免疫组化法检测主动脉AngⅡ、ACE2蛋白表达；Western Blot法检测主动脉ACE2、Mas蛋白表达；RT-PCR法检测主动脉ACE2、Mas mRNA表达。结果?与正常组比较，模型组各时间收缩压升高，血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达升高，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2、Mas蛋白及mRNA表达降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，干预后各组各时间收缩压降低，主动脉ACE2 mRNA表达增加（P<0.05）；厄贝沙坦组大鼠血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT高剂量组大鼠血清REN、ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2蛋白、Mas mRNA表达升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT中剂量组血清ALD、AngⅡ水平、主动脉AngⅡ表达降低，血清ACE2、Ang（1-7）水平、主动脉ACE2、Mas蛋白、Mas mRNA表达升高（P<0.05，P<0.01）；TXZT低剂量组大鼠血清AngⅡ水平降低（P<0.05）。与厄贝沙坦组比较，TXZT高剂量组给药后第2、4周、TXZT中剂量组给药后各时间、TXZT低剂量组给药后第2、3、4周收缩压升高（P<0.05，P<0.01）。结论?TXZT有明显、持续、稳定的降压作用，调节ACE2/Ang（1-7）/Mas受体轴抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）系统活性可能是其降压效应的重要机制之一。     

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠ACE-AngⅡ-AT1R及ACE2-Ang(1-7)-MASR轴“调控-拮抗”作用的影响

目的:研究复肾功方对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭(CRF)大鼠血管紧张素转化酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)轴与血管紧张素转化酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体[ACE2-Ang(1-7)-MASR]轴的"调控-拮抗"作用,探讨其延缓CRF进展的作用机制。方法:将65只雄性SD大鼠随机分为正常组10只、造模组55只,正常组常规饲养,造模组进行为期28 d的0.25 g·kg^-1d-1腺嘌呤混悬液灌胃。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为模型组,贝那普利组(0.01 g·kg^-1·d^-1),复肾功方低、中、高剂量(4,8,16 g·kg^-1·d^-1)组,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,持续28 d。实验结束后,测量各组大鼠尾静脉舒张压(SBP),收缩压(DBP),并收集24 h尿液以测定24 h尿蛋白(24 h U-pro);测定血清中肌酐(SCr),尿素氮(BUN)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织形态;马松(Masson)染色观察肾间质纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清和肾组织匀浆中AngⅡ,Ang(1-7)及血清中胱抑素C(CysC)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中ACE,ACE2,AT1R,MASR蛋白表达水平;免疫组化标记肾组织中ACE,ACE2蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SCr,BUN,CysC明显上升(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量明显增加,Ang(1-7)含量明显减少(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量明显升高(P<0.05),ACE2,MASR蛋白表达量明显降低(P<0.05);与模型组、贝那普利组比较,经复肾功方干预治疗后,大鼠血清SCr,BUN,CysC含量明显下降(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量显著减少,Ang(1-7)含量明显增加(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量显著降低,ACE2,MASR蛋白表达量明显升高(P<0.05),其中复肾功方高剂量效果最佳,复肾功方高、中、低剂量的效果呈剂量相关性。结论:复肾功方可改善腺嘌呤所致CRF大鼠肾功能和肾脏的病理学改变,其机制可能与通过抑制ACE-AngⅡ-AT1R轴,同时促进ACE2-Ang(1-7)-MASR轴来延缓CRF的进展有关。     

电针人中穴对脑梗死大鼠ACE-AngⅡ/ACE2-Ang（1-7）轴相关因子表达的干预效应研究

目的 观察脑梗死大鼠血管紧张素转化酶（ACE）-血管紧张素（Ang）Ⅱ/ACE2-Ang（1-7）轴通路的变化规律以及电针干预效应,从血管舒缩的角度探讨针刺治疗脑梗死的作用机制。方法 将126只大鼠随机分为空白组、模型组、电针组。模型组和电针组按术后1、3、6、9、12、18、24 h,3、7、12 d各分为10个时相组,造模后电针组每日针刺人中穴。各组大鼠进行神经功能缺损,脑梗死面积以及免疫组化的检测。结果 1）针刺后各组大脑中动脉闭塞（MCAO）模型大鼠神经功能缺损评分（NSS）随缺血时间延长逐渐下降,各时相评分均显著高于空白组（P < 0.01）;电针组各时相评分低于模型组,两组在3、7、12 d差异有统计学意义（P < 0.01）。2）绿化三苯四氮唑（TTC）染色结果模型组与空白组比较差异有统计学意义（P < 0.05,P < 0.01）,各时相电针组明显小于同时相模型组（P < 0.05,P < 0.01）。3）免疫组化结果：模型组ACE表达在术后上调至18 h回落,1 h~7 d显著高于空白组（P < 0.01）;电针组除6 h外表达均低于模型组,9、18、24 h有统计学差异（P < 0.05,P < 0.01）。模型组AngII表达在术后上调至24 h回落,在3~9 h和18 h~7 d高于空白组（P < 0.05,P < 0.01）;电针组1 h~3 d均低于模型组,3、6、18 h~3 d差异有统计学意义（P < 0.05,P < 0.01）。模型组血管紧张素受体AT1表达在术后9 h上调至24 h回落,其中3 h、9 h~24 h有统计学差异（P < 0.05,P < 0.01）;电针组自9 h后均低于模型组,12、18、24 h差异有统计学意义（P < 0.05）。电针组ACE2表达在术后3 h上调至18 h后下调,1 h到12 d高于空白组,1、9到3 d有统计学差异（P < 0.05）;电针组24 h~3 d时相与模型组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。模型组Ang（1-7）表达自9 h上调至12 h后下调,除1、6 h时相外,均显著高于空白组（P < 0.05,P < 0.01）。电针组从3 h开始上调至24 h后下调,24 h到7 d高于模型组差异有统计学意义（P < 0.01）。模型组血管内皮细胞表达的Ang（1-7）的特异性受体（MAS）表达自12 h上调至3 d后下调,3、6、12 h~12 d时相均高于空白组,12 h~7 d差异有统计学意义（P < 0.05,P < 0.01）;电针组自9 h后表达高于模型组,其中3、24 h,3、7 d差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 电针干预能显著改善MCAO大鼠的神经功能症状,减少脑缺血体积,改善脑血流量,下调ACE、AngII、ATl的表达情况,上调Ang（1-7）、ACE2、MAS的表达情况,改善脑梗死的预后。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾皮质血管紧张素转化酶2-血管紧张素（1-7）-Mas轴的影响

目的观察化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾皮质血管紧张素转化酶2-血管紧张素（1-7）-Mas［ACE2-Ang-（1-7）-Mas］轴的影响。方法将89只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组（C组,22只）、高糖高脂对照组（H组,10只）和1%链尿佐菌素（streptozotocin, STZ）注射组（57只）。STZ注射组以高糖高脂饲料联合腹腔注射STZ制备糖尿病模型（50只）,再分为模型组（M组,24只）、厄贝沙坦组（I组,13只）和化瘀通络中药组（Z组,13只）。I组和Z组大鼠分别给予厄贝沙坦和化瘀通络中药混悬液灌胃,共16周,其余各组给予等体积饮用水。检测各组大鼠4个时间点的血糖和24 h尿蛋白定量,分别采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）、免疫组化法、蛋白印迹（Western blot）方法检测不同时间点各组肾皮质ACE2、Mas蛋白的表达变化,第16周末对各组肾皮质2种蛋白表达进行定量分析。结果与C组比较,H、M组血糖均升高,且M组高于H组（P〈0.01）。不同时间点24 h尿蛋白与C组比较,M组升高,且M组高于H组（P〈0.05）。与M组比较,I组8周末和Z组8、16周末均降低（P〈0.05）,且第16周末Z组优于I组 （P〈0.05）。与C、H两组比较,M组第16周末肾皮质ACE2 mRNA的表达降低（P〈0.01）;与M组比较,Z组表达升高（P〈0.01）。与C组比较,M组第16周末Mas mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0.05）;与H组比较,M组表达降低（P〈0.05）;与M组比较,Z组表达升高（P〈0.05）,且高于I组（P〈0.05）。M组ACE2、Mas蛋白表达的定量随时间呈递减趋势。第16周末ACE2、Mas蛋白的表达定量,与C组比较,M组两者表达均降低（P〈0.05）;与M组比较,Z组ACE2的表达和I、Z两组Mas的表达均升高 （P〈0.05）。结论化瘀通络中药可能通过上调ACE2、Mas mRNA及其蛋白的表达,促进ACE2-Ang-（1-7）-Mas轴发挥作用,降低尿蛋白,对糖尿病肾病大鼠起到肾保护的作用。     

加味柴胡疏肝散及其拆方对心肌缺血合并抑郁症大鼠ACE2-Ang(Ⅰ-Ⅶ)-MasR轴的影响

目的:通过观察加味柴胡疏肝散及其拆方对高血脂状态心肌缺血合并抑郁症大鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)-血管紧张素(Ⅰ-Ⅶ)[Ang(Ⅰ-Ⅶ)]-线粒体组装受体(MasR)轴的影响,探讨其防治心肌缺血合并抑郁症的可能作用机制.方法:108只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,加味柴胡疏肝散组(11.7 g·kg-1),拆...     

血管紧张素-（1-7）对大鼠血脂的影响

目的 建立动脉粥样硬化大鼠模型,在体观察血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7）]对大鼠血脂的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、Ang-（1-7）组、Ang-（1-7）＋A-779组,各组饲喂28 d后气栓处死,抽血化验各组血脂结果.结果 与高脂组相比,Ang-（1-7）组三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）显著降低（P〈0.05）,高密度脂蛋白（HDL-C）显著升高（P〈0.05）;加入A-779组与Ang-（1-7）组相比,三酰甘油、总胆固醇、LDL-C显著升高（P〈0.05）,HDL-C显著降低（P〈0.05）.结论 Ang-（1-7）通过其特异性受体降低LDL-C水平,升高HDL-C水平,拮抗动脉粥样硬化的发展.     

芪参颗粒调控ACE2-Ang(1-7)-Mas轴改善大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及机制探讨

目的 探讨芪参颗粒对大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及相关机制。方法 通过结扎大鼠左冠脉前降支建立模型,随机分为模型组、芪参颗粒组和福辛普利组,以假手术组作为对照。术后干预12周,超声检测大鼠心脏射血分数(ejection fraction, EF),ELISA法检测N端脑利钠肽前体(n-terminal brain natriuretic peptide precursor,NT-pro BNP)、血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ和Ang (1-7)浓度,测定大鼠抓力值和腓肠肌重量,苏木素伊红(htoxylin eosin, HE)观察心脏和腓肠肌形态,Western blot检测血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2、(mas receptor,MasR)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHc)蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心脏EF值下降,NT-pro BNP和AngⅡ的浓度升高,Ang(1-7)含量降低,HE染色显示心肌组织排列不规则,大鼠的抓力值和腓肠肌重量都降低,腓肠肌肌纤维...     

黄芪多糖对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴及胰岛素抵抗的影响

目的探讨黄芪多糖对非酒精性脂肪性肝炎大鼠ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴及胰岛素抵抗的影响。方法 40只大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪多糖组(400 mg/kg)、吡格列酮组(20 mg/kg),每组10只,高脂饲料建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型。给药4周后,测定体质量、肝湿重、血脂、肝功能、血清Ang(1-7)水平,观察肝脏组织病理学变化,RT-PCR、Western blot检测肝组织ACE2、Mas、IRS-1水平。结果与模型组比较,黄芪多糖组肝指数及ALT、AST、TG、TC、MDA水平显著降低(P0.01),Ang-(1-7)、SOD水平,Mas、ACE2、IRS-1 mRNA及蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01),肝脂肪变性、炎症反应明显减轻。结论黄芪多糖可有效缓解非酒精性脂肪性肝炎大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与上调ACE2-[Ang-(1-7)]-Mas轴基因表达、改善胰岛素敏感性有关。     

电针预处理对脂多糖诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织中血管紧张素转化酶2、血管紧张素（1-7）的影响

目的:观察电针“足三里”预处理对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠炎性反应、血管紧张素转化酶2(ACE2)及血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]的影响,探讨电针对脓毒症ALI的预防作用和可能机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,每组10只。采用腹腔注射LPS(5 mg/kg)复制脓毒症ALI大鼠模型。电针组予双侧“足三里”穴电针预处理,每日1次,每次30 min,连续1周后造模。造模3 h后采用小动物呼吸功能检测仪检测大鼠肺功能;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中Ang(1-7)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;计算肺湿/干重比(W/D);HE染色法观察大鼠肺组织病理变化;Western blot法、实时荧光定量PCR法检测肺组织中ACE2、线粒体组装受体(MasR)蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织可见明显肺间质水肿、肺泡间隔增厚;用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1)、第0.3秒用力呼气量(FEV0.3)、FEV0.1占FVC之比(FEV0.1/...     

丹参多酚酸盐联合甲钴胺对2型糖尿病伴心肌病患者血清中ACE2和Ang-(1-7)含量的影响

目的:观察丹参多酚酸盐联合甲钴胺治疗对糖尿病性心肌病患者血清中血管紧张素转化酶2(ACE2)和血管紧张素1-7(Ang-(1-7))含量的影响。方法:将80例糖尿病性心肌病患者随机分为对照组和观察组,每组40例。两组患者均给予甲钴胺等常规药物治疗,观察组加用丹参多酚酸盐治疗。比较两组临床疗效,同时检测患者血清Ang II、ACE2、Ang-(1-7)水平,氧化应激指标MDA和SOD,血糖指标FBG、PBG和Hb A1c,心功能参数EF、PE、PA和E/A等指标变化情况,记录不良反应。结果:观察组治疗总有效率为87.50%,明显高于对照组的65.00%;治疗后,观察组较对照组Ang II水平明显降低,ACE2、Ang(1-7)水平明显升高;治疗后,观察组较对照组SOD水平明显升高,MDA水平均明显降低;治疗后,观察组较对照组FBG、PBG、Hb A1c水平均明显降低;治疗后,观察组较对照组EF、PE、PA、E/A均明显改善;两组不良反应发生率均不明显,对比无差异。结论:丹参多酚酸盐可能通过升高血清ACE2、Ang-(1-7)水平,而发挥抗氧化应激,抗炎症、调节血糖平衡等心功能保护作用,联合甲钴胺治疗糖尿病心肌病,可明显改善患者心功能,提高治疗效果。     

中药复方补肾益心片对高血压大鼠血压、勃起功能及ACE2-Ang(1-7)-MAS轴的干预作用

目的观察补肾益心片对高血压大鼠(SHR)血压的影响和对其勃起功能、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)及Ang(1-7)的作用。方法将原发性高血压雄性大鼠分为3组,补肾益心片组、缬沙坦组、模型对照组。治疗4周后,检测血浆和腹主动脉组织内NOS、NO浓度以及血浆Ang(1-7)浓度。用尾动脉测压仪测量大鼠尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)记录其阴茎勃起次数以检测大鼠的勃起功能。结果补肾益心片及缬沙坦均可提高腹主动脉组织内NO含量,提高血浆Ang(1-7)含量,但差异无统计学意义(P>0.05)。补肾益心片组、缬沙坦组治疗后血压都明显降低,与治疗前比较差异有统计学意义。治疗后补肾益心片组、缬沙坦组勃起次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论补肾益心片可以降低SHR的收缩压。补肾益心片补肾益心片可以改善SHR的勃起功能。补肾益心片可增加SHR腹主动脉NO含量及血浆Ang(1-7)含量。     

Mechanism of the Reversal Effect of Acupuncture on the Fall of Blood Pressure Induced by Angiotensin-（1-7） in the Caudal Ventrolateral Medulla of Rats

目的：研究电针逆转血管紧张素-（17）[Ang-（1—7）]在大鼠延髓尾端腹外侧区（CVLM）引起血压降低的作用机制。方法：采用中枢核团微量注射和微透析，以及高效液相色谱（HPLC）荧光检测等技术观察Ang（17）及其选择性受体拮抗剂（D-Ala7）-Ang-（1—7）（Ang-779）在大鼠CVLM引起血压改变时氨基酸类神经递质释放的变化以及电针对血压和氨基酸类递质释放的影响。结果：在CVLM微量注射Ang（1—7）可引起血压降低，同时伴该区内兴奋性氨基酸谷氨酸（Glu）释放增多和抑制性氨基酸牛磺酸（Trau）释放减少；相反，在CVLM微量注射Ang779则可引起血压升高，同时伴Glu释放减少和Tau释放增多。在相当于人”足三里”穴位电针20min，可分别抑制在CVLM微量注射Ang—（1-7）或Ang779所引起的血压降低或升高，同时也能部分抵消注射Ang-（17）或Ang779所引起的Glu、Tau释放的改变。结论：电针逆转Ang（1-7）或Ang-779在CVLM引起的降压或升压作用可能与Glu、Tau释放量的改变有关。     

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨补中益气汤干预NOD.H-2h4小鼠AIT细胞焦亡的机制

目的 基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎（AIT）小鼠细胞焦亡的作用机制。方法 60只NOD.H-2^h4小鼠分为正常组、模型组、补中益气汤低、中、高剂量（4.10、8.19、16.38 g·kg^-1）组和硒酵母片（0.26 mg·kg^-1）组,每组10只。除正常组外,其余各组均给予0.05% 碘化钠（NaI）灌胃8周造模,继续给药干预8周。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）、甲状腺球蛋白抗体（TgAb）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠甲状腺组织病理学改变;免疫组化法检测甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测甲状腺组织中细胞焦亡相关蛋白水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠血清TPO-Ab、TgAb水平显著升高（P<0.01）,甲状腺滤泡或增大呈立方状,或破坏萎缩,滤泡周围可见大量淋巴细胞浸润;与模型组比较,给药组TPO-Ab、TgAb水平显著降低（P<0.01）,滤泡形态结构有所改善,淋巴细胞浸润程度有所减轻,其中补中益气汤中剂量组降低和改善效果最为明显。与正常组比较,模型组小鼠甲状腺组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白阳性产物和mRNA表达显著增加（P<0.01）,NLRP3、剪切的（cleaved） Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,给药组NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白阳性产物和mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,其中补中益气汤中剂量组降低效果最为明显,给药组NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 补中益气汤可改善AIT,其机制可能是通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡实现的。