流感快速检测的临床研究

目的 探讨GICA法在快速诊断流感病毒感染中的可靠性及了解流感病毒感染在急性呼吸道疾病中的分布情况.方法 应用GICA法和标准免疫荧光法检测呼吸科住院患者鼻咽部分泌物中的流感病毒A、B抗原,部分阳性标本进行病毒分离培养.结果 GICA法检出Flu A、B抗原单一和混合阳性患者21人,26例次,免疫荧光法检出30例次,两种方法检测结果差异无统计学意义,检测阳性标本中lO份行病毒培养,结果6例阳性.上感、肺炎组及老年患者Flu病毒检出率高.Flu感染后全身中毒症状明显.结论 普通病房有流感的散发病例,老年患者症状不典型,均应引起重视,GI-CA诊断试纸条是快速检测Flu的简捷的好方法.     

发热与不发热呼吸道疾病成人患者流感的检测

目的应用快速筛查法对发热及不发热的成人呼吸道疾病患者的甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)进行检测并结果分析,以了解流感病毒的流行及分布情况,为流感的防治奠定基础。方法对860例不发热呼吸道疾病成人患者和发热门诊407例发热成人患者鼻咽分泌物样本进行Flu A和Flu B的快速筛查检测,并对检测结果进行统计学分析。结果不发热病人Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,发热病人Flu A检出率为32.9%,Flu B检出率为5.2%。发热病人的Flu A检出率明显高于不发热病人(P<0.01),而Flu B检出率二者则没有显著差异(P>0.05)。结论 Flu A和Flu B是呼吸道感染的重要病原体,并且能够共同流行,发热是其感染的重要症状之一,应用流感快速筛查的方法能够为临床提供一定的早期诊断依据。     

过敏性紫癜与呼吸道病毒的关系：病因学的探索

目的探讨呼吸道病毒感染在过敏性紫癜发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法观察40例过敏性紫癜血浆中呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒IgM抗体,直接免疫荧光法观察该40例血液中单个核细胞及肾组织中呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A、流感病毒B、副流感病毒1、2、3抗原,分别比较A组（外周血病毒抗原检测阳性）与B组（外周血病毒抗原检测阴性）,A1组（外周血病毒抗原检测阳性,肾组织中病毒抗原检测阳性）与A2组（外周血病毒抗原检测阳性,肾组织中病毒抗原检测阴性）的临床及病理特征。结果①过敏性紫癜组副流感病毒的检出率（12/40,30%）高于呼吸道感染组（1/42,2.4%）,差异有统计学意义（χ2=11.715,P〈0.05）,呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒的检出率两组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。②肾组织,呼吸道病毒抗原13例阳性（13/40,32.5%）,其中副流感病毒12例（12/13）（副流感病毒Ⅱ10例,副流感病毒Ⅲ2例）,1例为呼吸道合胞病毒。抗原在肾小管的荧光强度及密度明显高于肾小球。结论呼吸道病毒,特别是副流感病毒感染可能与过敏性紫癜发病有关。     

A型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法的建立和临床应用

[摘要] 目的 制备和鉴定A型流感病毒核衣壳蛋白单克隆抗体,建立A型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法,用于A型流感病毒感染的实验室早期诊断。方 法 利用杆状病毒系统表达A型流感病毒核衣壳蛋白,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定,用双抗体夹心ELISA捕获法建立检测A型流感病毒核衣壳蛋白的方法。 结果 获得8株、共识别4个A型流感病毒核衣壳蛋白不同抗原位点的单克隆抗体,选择以单抗2B8A11作为捕获抗体,以C16A15作为检测抗体为最佳抗体对,建立双抗体夹心ELISA捕获法。检测流感患者的当日采集和冻存的呼吸道标本,与病毒分离培养方法的符合率分别为100%和42.9%;与B型流感病毒和其他呼吸道病毒无交叉反应。检测流感患者当日采集的呼吸道标本敏感性高于德国Serion试剂盒（P＜0.001）,与RT-PCR方法比较差异无显著性（P=0.5）。结论 成功建立了灵敏度高、特异性强的A型流感病毒核衣壳蛋白抗原的ELISA捕获法,为A型流感病毒感染的实验室早期诊断提供技术方法。     

应重视呼吸道病毒感染的防治研究工作

前年冬季我们联合兰大一院、兰大二院3所兰州地区三甲医院呼吸科，对年龄在16岁以上467例成人急性呼吸道感染的患者，进行了病毒学检测，采集血清标本用间接酶联免疫吸附实验（ELISA），就流感病毒A（Flu A）、流感病毒B（Flu B）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIV）进行了血清中病毒特异性IgM抗体检测，结果有174例（174／46737．3％）被检出1种或1种以上病毒IgM抗体阳性，     

呼吸道病毒感染与小儿支气管哮喘急性发作的关系

目的：观察呼吸道病毒感染与小儿支气管哮喘（bronchial asthma,BA）急性发作的关系。方法：采用ELISA方法测定了102例急性发作小儿BA的流感病毒A、流感病毒B、呼吸道合胞病毒、腺病毒以及副流感病毒感染情况。结果：102例患儿中,62例为轻～中度BA发作,40例为重度BA发作,其中99例患儿血清标本合格。64例检出病毒,其中27例被检测出一种病毒阳性,42例两种以上病毒阳性。急性发作BA患儿合并呼吸道病毒感染者多于未合并呼吸道病毒感染者（P〈0.05）,合并两种以上呼吸道病毒感染者多于合并单一呼吸道病毒感染者（P〈0.05）。合并呼吸道合胞病毒、流感病毒A及流感病毒B感染的患儿多于合并腺病毒和副流感病毒感染者（P〈0.05）。重度急性发作BA的患儿合并呼吸道病毒感染者多于轻～中度BA发作者（P〈0.05）.结论：呼吸道病毒感染是患儿BA急性发作的诱发因素之一,明确是否合并呼吸道病毒感染对治疗患儿BA急性发作有重要价值。     

三种呼吸道病原体快速筛查的临床研究

目的为了解三种病原体的分布情况和推广呼吸道常见病原体的快速筛查方法提供科学的依据。方法对2009年8月~2010年5月收治的860例呼吸道疾病患者的鼻咽分泌物样本,应用快速筛查方法对甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（Flu B）、肺炎支原体（MP）三种呼吸道感染常见病原体进行检测,对其中70例进行Flu A血清学检测,并对检测结果进行分析。结果 860例样本快速检测中,Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,MP检出率为10.1%,70例样本中,快速检测Flu A方法与血清学检测方法总体一致率达94.3%,两种检测结果一致性较高（Kap-pa=0.767）,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Flu A、Flu B和MP是呼吸道感染的重要病原体,应用快速筛查方法能够为临床提供早期诊断和正确治疗的依据。     

成人与儿童三种呼吸道病原体的检测比较

目的：应用快速筛查方法对成人和儿童呼吸道疾病患者的甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)、肺炎支原体(MP)进行检测并结果比较,以了解三种病原体在不同人群中的流行及分布情况。方法：对2011年9月~2012年2月间呼吸科408例呼吸道疾病成人患者和儿科279例呼吸道疾病儿童患者鼻咽分泌物样本,进行Flu A、Flu B、MP的快速筛查检测,并对检测结果进行统计分析。结果：成人患者Flu A检出率为2.5%,Flu B为0.2%,MP为6.4%；儿童患者Flu A检出率为8.2%,Flu B为2.9%,MP为17.6%。儿童患者的三种病原体检出率均明显高于成人患者(P<0.01)。结论：Flu A、FluB、MP是呼吸道感染的重要病原体,儿童是易感人群,检测数据对探讨本地区三种病原体的流行及分布情况等有着重要的意义。     

成人急性下呼吸道感染患者病毒病原学研究

目的了解成人下呼吸道感染住院患者呼吸道病毒病原学构成。方法深圳福田医院2007年10月至2008年10月临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)、急性支气管炎(AB)、慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的住院患者为观察组,采集鼻咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒。同时采用间接免疫荧光法检测多种病毒血清特异性IgM抗体。同期健康体检者106例作为对照组。结果对照组106例仅4例阳性。观察组192例患者鼻咽拭子中80例检出99株病毒,患者阳性率41.6%,病毒检出率51.5%。检出病毒以流感病毒A型(FluA)、鼻病毒(RhV)、副流感病毒1型(PIV1)为主,三者占检出病毒株的81.8%(81/99)。血清学检测发现61例73种(型)病毒阳性,患者阳性率31.7%,病毒阳性率38.0%,以FluA、PIV1和呼吸道合胞病毒(RSV)检出为主。两种标本综合结果 192例患者中共91例110株(型)阳性,患者阳性率47.3%,病毒阳性率57.2%。结论成人下呼吸道感染患者中病毒感染具有较高比例,以FluA、RhV、PIV1为主。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重老年住院患者呼吸道病毒感染82例分析

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）老年住院患者呼吸道病毒感染情况。方法:采用酶联免疫吸附法对82例AECOPD患者血清标本进行病毒IgM特异性抗体进行检测。结果:45例患者病毒检测阳性,单一病毒感染27例,混合病毒感染18例。流感病毒B（IFV-B）最为多见,其次为流感病毒A（IFV-A）;IFV-B和IFV-A IgM抗体阳性率在60～69岁年龄组高于≥80岁龄组（P<0.05）;呼吸道合胞病毒、腺病毒和副流感病毒IgM抗体阳性率在各年龄组间的差异均无统计学意义（P>0.05）;5种病毒的性别分布及月份分布差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:AECOPD与呼吸道病毒感染密切相关,尤其是流感病毒,在流行季节应积极预防。     

成人急性下呼吸道感染中病毒感染情况分析

目的探讨成人急性下呼吸道感染中病毒感染的病原学特征及流行病学特点。方法采集2011年7月～2012年6月202例急性下呼吸道感染患者的咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的8种（14个亚型）呼吸道病毒。结果202例患者检出44株病毒,阳性率21．8％,其中检出病毒流感A型26例,流感病毒B型8例．人冠状病毒5例,呼吸道合胞病毒3例,鼻病毒2例。病毒感染者中临床诊断急性气管一支气管炎18例。社区获得性肺炎12例,慢性阻塞性肺疾病急性加重期5例,支气管哮喘急性发作5例。结论哈尔滨地区下呼吸道病毒感染以流感A型（H3）、流感B型及人冠状病毒感染为主,2～4月发病率高。     

儿童社区获得性肺炎病毒病原学及临床流行病学分析

目的了解本地区儿童社区获得性肺炎（CAP）感染病毒病原学构成及其临床流行病学特征。方法对临床确诊为CAP住院患儿273例,采集患儿血清,用酶联免疫吸附测定法进行病毒IgM检测,包括呼吸道合胞病毒（RSV）,腺病毒（ADV）,流感病毒（IFV）A、B型,副流感病毒（PIV）Ⅰ-Ⅲ型,人偏肺病毒（hMPV）。结果273例患儿中有92例病毒检测阳性,总阳性率33．70％,检出率高的前3种病毒依次为RSV、hMPV和PIV。呼吸道病毒阳性检出率以3个月～2岁组为最高,主集中于冬春季节。毛细支气管炎病毒阳性检出率高达61．22％,RSV为其常见感染病毒（51．09％）。结论银川地区儿童CAP病毒感染主集中于冬春季节,多见2岁以下小儿,其中RSV和hMPV两种病毒最为常见,毛细支气管炎的主病原仍然是RSV。     

小儿肺炎的病毒性病原学研究

目的:探讨小儿肺炎的病毒性病原学特点.方法:应用直接免疫荧光法,连续3年对13 642例住院肺炎患儿呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒(RSV),副流感病毒(PIV) 1、2、3型,流感病毒(IV)A型、B型和腺病毒(ADV)抗原进行检测.结果:病毒性肺炎占34.3%,其中RSV占25.8%,PIV4.7%,IV A 2.4%,IV B 0.2%,ADV 1.3%.RSV在≤1岁组检出率 33.1%,>1～3岁组19.7%,>3岁组5.1%(趋势χ2=763.4,P<0.001).ADV肺炎,>1～3岁组与>3岁组分别为2.3%及2.5%,均高于≤1岁组的0.7%(P<0.01).>1～3岁组IV A检出率3.4%,高于≤1岁组(χ2=18.2,P<0.01).>1～3岁组PIV 1肺炎占1.2%,较其它年龄组高(P<0.05).PIV 3,≤1岁组检出率 4.7%,>1～3岁组3.2%,>3岁组1.4%(趋势χ2=52.4,P<0.01).RSV感染率11月开始明显增高,持续到次年的3～4月份,但每年仍有差别.肺炎中RSV月感染率最高62.8%,IV A达15.7%.结论:小儿肺炎的病毒性病原,感染率高低依次为RSV、PIV、IV和ADV.RSV、PIV 3,年龄越大检出率越低.≤1岁婴儿ADV感染较少.幼儿较婴儿易致IV A感染.RSV流行见于冬春季,但存在变化.     

河池市2010～2012年散发流感样病例监测分析

目的 了解河池市人群散发流感样病例流感病毒感染状况、毒株型别及流行特征.方法 2010～ 2012年对就诊的散发流感样病例进行调查和采集咽拭子标本,采用实时荧光定量RT-PCR对标本进行流感病毒核酸检测.结果 2010～2012年共调查流感样病1 115例,流感病毒感染166例,平均感染率为14.89％(9.98％～25.58％),病毒毒株为季节性甲型H3亚型、乙型和甲型H1N1亚型.流感病毒感染率高峰分别为1～3月和6～7月.男女性别感染率差异无统计学意义(P＞0.25);15岁以下人群感染率较低(P＜0.05),与流感疫苗接种率较高有关;流感病毒感染病例中,以干部职员、学生和农民为多.结论 河池市人群流感病毒感染呈现两个高峰,应采取包括流感疫苗预防接种在内的有效防控工作.     

2009—2012年石嘴山市流行性感冒监测结果分析

目的分析2009—2012年石嘴山市流行性感冒监测结果,了解其流行趋势及病毒优势株的变化,为防控提供科学依据。方法通过流行性感冒监测信息系统计算哨点医院流感样病例就诊比例,并采集病例标本进行病原学检测,通过疾病监测信息报告管理系统统计流感病例报告例数进行综合分析。结果石嘴山市流行性感冒毒株以A型为主,A（H1N1）亚型和A（H3N2）亚型同时存在,交替成为优势株,B型隔年出现,与A型共存。结论应加强流感监测,分析流行性感冒病毒优势毒株,以便预防控制流感的流行。     

蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证模型小鼠免疫损伤的影响

目的:通过模拟岭南湿热复合因素造模实现流感病毒性肺炎湿热证模型的构建,并观察蒿芩清胆汤对模型小鼠T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子水平的影响。方法:将4周龄BALB/c小鼠按体质量随机分为正常对照组(A)、单纯病毒感染组(B)、湿热证模型组(C)、蒿芩清胆汤组(D)和阳性药物组(E)。A、B两组均给予普通饲料喂养14 d,B组于第11天滴鼻感染病毒1次。C、D、E组均给予高脂饲料喂养14d,同时连续10 d气候箱暴露,6 h/d,第11天滴鼻感染病毒1次,感染病毒后不再置入气候箱。D、E组分别于病毒感染后2 h开始灌胃给药,每日1次,连续4 d。D组每日灌胃蒿芩清胆汤水煎浓缩液0.4 ml;E组按70 mg.kg-1.d-1剂量灌胃给予利巴韦林溶液0.4 ml;其余各组均同时以灌胃等量生理盐水。连续干预14 d后,处死小鼠眼球取血,检测各组小鼠T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子的水平。结果:①与A组相比,B、C组CD3+CD4+T淋巴细胞水平明显降低(P<0.05),CD3+CD8+T淋巴细胞水平明显升高(P<0.05),CD3+CD4+/CD3+CD8+值显著降低(P<0.05);与C组相比,E组CD3+CD8+T淋巴细胞水平明显降低(P<0.01),D、E组CD3+CD4+/CD3+CD8+值明显升高(P<0.05或P<0.01)。②与A组相比,B、C组血清IFN-γ水平明显升高(P<0.01),IFN-γ/IL-4值亦明显升高(P<0.05);与C组相比,E组IFN-γ/IL-4值明显降低(P<0.05)。结论:蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证模型小鼠具有多靶点的免疫炎症调节作用。     

广东省中山市急性发热呼吸道症候群病毒病原学研究

目的 获得中山市急性发热呼吸道症候群病毒病原谱,为疾病防控及临床诊疗提供科学依据。方法 2017年12月至2018年11月,选择中山市4家医疗机构作为哨点监测医院,在门诊开展季节性流感等发热呼吸道症候群监测。采用多重RT-PCR方法检测8 种呼吸道感染病毒。结果 累计检测样本1 011份,368份（36.4%）检出病毒阳性。不同病毒检出阳性率依次为：流感病毒（Flu）14.0%,腺病毒（AdV）6.3%,鼻病毒（hRV）5.9%,呼吸道合胞病毒（RSV）4.9%,冠状病毒（hCoV）3.1%,副流感病毒（PIV）2.4%,人偏肺病毒（HMPV）2.0%和博卡病毒（hBoV）1.2%。与16岁及以上人群相比,16岁以下人群病毒检出率更高（27.3% VS 44.7%,χ²=32.867, P<0.001),病毒感染种类更加多样化。5岁及以下婴幼儿8种病毒均有检出,其中呼吸道合胞病毒（9.2%,37/404）、腺病毒（9.7%,39/404）检出率最高。6~15岁人群,流感病毒检出率(29.8%)最高。除副流感病毒和博卡病毒外,其余病毒不同月份检出率存在差异。结论 流感病毒、腺病毒、鼻病毒和呼吸道合胞病毒是中山市发热呼吸道症候群的主要病原体;年龄组越小,病毒多样性越明显;不同病原体其感染季节不尽相同,但多数病原体以冬季流行感染为主。     

急性呼吸道感染门诊患者的临床特征和病毒谱分析

目的分析急性呼吸道感染门诊患者的临床特征和病毒谱,为患者的临床治疗提供依据。方法收集2015年1月~2016年12月具有急性呼吸道感染症状的门诊患者的临床资料,并采集患者的咽拭子样本。应用多重PCR方法检测15种呼吸道病毒,并利用实时荧光RT-PCR技术鉴别甲型流感病毒的3种常见亚型。结果 465例门诊患者中,呼吸道病毒阳性137例,检出率为29.5%(137/465),其中单一病毒感染94.2%(129/137),病毒共感染5.8%(8/137);单一病毒感染中,以流感病毒为主,其次为肠道;病毒共检出中以鼻病毒和季节性H3N2流感病毒共检出为主。临床特征显示,病毒阳性患者的部分临床症状比病毒阴性患者重,更容易出现高热、咽喉痛、乏力、鼻涕、痰液及呼吸急促等症状,且肺部异常多见。不同年龄段患者的感染率存在一定的差异,5岁患儿最高(50.0%),其次为≥60岁的老年人(38.6%)。结论呼吸道病毒是导致门诊患者发生急性呼吸道感染的常见原因,特别是婴幼儿和老年人,因此,加强呼吸道病毒的检测将有助于急性呼吸道感染患者的防治。     

甘肃省2009—2012年流感病毒流行特征分析

目的对2009—2012年甘肃省流感监测结果进行分析,为甘肃省的流感防控工作提供科学依据。方法采集全省19家国家级哨点医院门诊流感样病例的咽拭子和各地医疗机构送检流感样暴发疫情咽拭子。采样对象为发病3d之内未使用抗病毒类药物的流感样病例,采集咽拭子,以荧光PCR方法检测病毒核酸,用MDCK进行病毒分离培养。所获得数据采用Excel和SAS软件进行处理,不同样本类型的阳性率的比较使用χ2检验。结果对36 894份流感样病例咽拭子进行核酸检测,检测出流感病毒核酸阳性8 059份,检出率为21.84%,其中4 354份甲型H1N1,1 566份季节性H3N2,92份季节性H1N1,1 656份乙型,391份甲型未分型。按年度分析,2009—2012年流感病毒检出率依次为32.81%、14.10%、7.83%和19.67%;按月分析,在10~12月份甲型流感病毒阳性率及构成比均高于其他月份,阳性率平均为31.33%,构成比为97.61%;2~4月份乙型流感病毒阳性率及构成比分别为16.51%和81.10%。按年龄组分析,<5,5~,15~,25~和≥60岁组病毒核酸检出率分别是13.87%、28.36%、32.33%、16.83%和17.22%,除25~岁组与<60岁组的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),其他各年龄组阳性率差异有统计学意义(χ2=26.88~908.11,P<0.01)。对7 073份标本进行病毒分离,分离到病毒1 149株。结论甘肃省2009年以甲型H1N1流感流行为主;2010—2011年流感活动很弱,仅为散发;2012年春季以乙型流感为主,11月开始以甲型H1N1流感及季节性H3N2流感为主。流感流行每年均有一个高峰,病毒型别表现为交替流行的规律,甲型流感是冬季儿童常见的传染病。