补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠造血祖细胞增殖分化及其机制的影响

目的：探讨补肾益髓生血法再障大鼠含药血清对大鼠骨髓造血祖细胞增殖分化及其机制的影响。方法：60Co-γ射线联合环磷酰胺建立再障大鼠模型,以正常对照组、模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组复方中药灌胃大鼠,制备其含药血清培养正常大鼠骨髓细胞,培养体系中含药血清比例为20豫,进行骨髓造血祖细胞集落形成单位（CFU）计数;收集集落细胞,RT-PCR 检测红系GATA-1 mRNA及粒系PU.1 mRNA表达。结果：与正常对照组相比,模型组骨髓有核细胞显著减少（P<0.01）,造血祖细胞红系集落形成单位（CFU-E）、红系爆式集落形成单位（BFU-E）和粒单核系造血祖细胞集落（CFU-GM）数目均明显降低（P<0.01）,GATA-1、PU.1 mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组相比,各个治疗组大鼠骨髓有核细胞升高,造血祖细胞CFU-E、BFU-E 和CFU-GM 数目显著增加（P<0.01）;滋肾生血组CFU-E、BFU-E明显优于益髓生血组（P<0.01）;滋肾生血组CFU-GM优于益髓生血组、温肾生血组。各治疗组GATA-1、PU.1 mRNA表达明显高于模型组（P<0.01）;滋肾生血组GATA-1 mRNA表达明显高于益髓生血组、温肾生血组（P<0.05）;滋肾生血组PU.1 mRNA表达高于益髓生血组、温肾生血组。结论：补肾益髓生血法可能通过增加GATA-1、PU.1 mRNA表达而促进骨髓造血祖细胞增殖分化,其中滋肾生血法优于益髓生血法和温肾生血法。     

方参鹿颗粒含药血清对较低危骨髓增生异常综合征p38MAPK磷酸化的抑制作用

目的 观察复方参鹿颗粒（CSG）含药血清对较低危骨髓增生异常综合征（lower-risk MDS）骨髓单个核细胞（BMMNC）p38MAPK磷酸化、CD34+细胞凋亡和正常造血干/祖细胞集落（CFU-HSPC）形成的影响。方法 16只清洁级Wistar大鼠,随机分为空白血清组、CSG组,每组8只,制备空白血清和CSG含药血清。体外骨髓细胞培养分为空白血清组、CSG组、SB203580组和SB202474组。分离lower-risk MDS患者BMMNC,与10%各组血清或p38抑制剂共培养,Annexin V/PI双染流式细胞术检测CD34+细胞凋亡率, Western Blot检测p38、p-p38蛋白表达。MACS分离骨髓CD34+细胞,用半固体甲基纤维素与10%各组血清或p38抑制剂共培养,观察CFU-HSPC形成,FISH检测集落中异常克隆细胞群体的比例。结果 与空白血清和SB202474组比较,CSG、SB203580组的凋亡率、p-p38蛋白表达减少 （P<0.05）;CFU-HSPC形成数增加（P<0.01）;形成的集落中异常克隆细胞比例降低（P<0.05）。CSG和SB203580组的p-p38蛋白表达和异常克隆细胞比例呈正相关（P<0.01）。结论 CSG含药血清能改善lower-risk MDS骨髓无效造血,其机制可能与抑制p38蛋白磷酸化,减少骨髓CD34+细胞凋亡,并恢复骨髓正常造血细胞的优势生长有关。     

益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞周期的影响

目的:观察补肾生血药益髓生血颗粒对骨髓细胞周期的影响,探讨其可能的造血调控机制。方法:将78只雄性昆明种小鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、G-CSF组(C组)、益髓生血颗粒高剂量组(D组)、益髓生血颗粒中剂量组(E组)、益髓生血颗粒低剂量组(F组),每组13只。采用60Co-γ射线全身一次性照射造成小鼠骨髓急性损伤模型。造模前,先预防给药2 d,D-F组分别按12,6,3 g.kg-1.d-1灌胃益髓生血颗粒,A～C组给予等量蒸馏水。造模第2天,C组按30μg.kg-1.d-1皮下注射G-CSF注射液,其余各组给药方法同预防给药,连续14 d。收集各组小鼠骨髓有核细胞,采用流式细胞仪检测骨髓细胞周期的分布情况。结果:与正常组相比,模型组G0/G1期细胞比例为(67.6±7.1)%,明显降低;S期细胞比例为(25.3±5.7)%,G2/M期细胞比例为(7.1±1.8)%,均明显增加(均P<0.001);细胞增殖指数为(32.4±7.1)%,明显升高(P<0.001)。与模型组相比,益髓生血颗粒高剂量组G0/G1期细胞比例为(62.2±3.6)%,明显降低(P<0.05);细胞增殖指数为(37.8±3.6)%,明显升高(P<0.05);益髓生血颗粒各剂量组处于S期的细胞比例分别为(29.1±2.7)%,(29.2±4.8)%,(29.5±3.9)%,均明显升高(均P<0.05)。结论:补肾生血药益髓生血颗粒可通过促进骨髓细胞由G0/G1期进入S期而明显促进细胞增殖。     

康复新液与顺铂、伊立替康联用对大肠癌HCT116荷瘤小鼠肿瘤生长和造血系统的影响

目的：考察康复新液与顺铂、伊立替康等用人结肠癌细胞HCT116荷瘤小鼠的联合用药效果。方法：SPF级C57BL/6小鼠110只,分别腹水接种HCT116制备种鼠模型,6-7天后,分离肿瘤组织制备HCT116荷瘤小鼠模型90只,随机分为模型组、康复新液组、顺铂组、康复新液联合顺铂组、伊立替康组、康复新液联合伊立替康组共6组,按实验方案给药16天,期间每3天测定一次动物体质量,16天后荷瘤小鼠摘眼球取血,测定血常规,处死后剥离肿瘤组织,测定肿瘤体积,计算小鼠FBW/IBW比值,分取骨髓,测定骨髓DNA含量,观察造血祖细胞集落,流式细胞仪检测骨髓细胞CD34⁺抗原的表达。结果：与模型组相比,各给药组瘤重均显著减轻（P<0.05）,康复新液及联合用药组动物PLT、RBC、HGB水平均显著升高（P<0.05,P<0.01）,顺铂组、伊立替康组小鼠血常规各项水平和骨髓DNA含量、造血祖细胞集落数量以及骨髓细胞CD34⁺抗原表达率均显著下降（P<0.05,P<0.01）;与顺铂组、伊立替康组相比,与康复新液联合使用可明显抑制化疗药物导致的体质量下降（P<0.05）,升高实验动物血常规水平（P<0.05,P<0.01）,提升小鼠骨髓DNA含量、造血祖细胞集落数量以及骨髓细胞CD34⁺抗原表达率（P<0.05,P<0.01）。结论：康复新液具有明显抑制HCT116荷瘤小鼠肿瘤生长的作用,且与顺铂、伊立替康联合应用,可有效改善后二者引起的骨髓抑制作用,康复新液联合一线抗肿瘤药物的应用前景广阔。     

肉苁蓉多糖对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究

目的：观察肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法：采用Co^60照射和注射环磷酰胺复合制备贫血小鼠模型。应用流式细胞术（FCM）检测肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期的影响,采用造血祖细胞培养术观察三系造血祖细胞集落数。结果：低剂量和高剂量肉苁蓉多糖能明显促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,G2/M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。给药组CFU-E,BFU-E,CFU-MeG与贫血对照组集落数有显著差异。结论：肉苁蓉多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞细胞周期的转化,促进骨髓造血功能的恢复,并促进红系巨核系造血。     

制何首乌对大鼠造血祖细胞增殖及骨髓细胞黏附分子表达的影响

目的探讨制何首乌含药血清对造血祖细胞CFU-GM增殖的影响及制首乌对贫血大鼠骨髓细胞黏附分子表达的影响。方法制备制何首乌大鼠含药血清,体外半固体培养骨髓CFU-GM细胞;建立大鼠血虚动物模型,用流式细胞仪检测给药后大鼠骨髓单个核细胞CD44、CD54的表达水平。结果含药血清组大鼠骨髓CFU-GM集落数明显增多,与空白血清组比较差异显著(P<0.05);给药组CD44的表达与模型组无明显差异(P>0.05),但给药组CD54的表达显著低于模型组(P<0.05),且接近正常。结论制何首乌能促进造血祖细胞CFU-GM的增殖,并可改善贫血大鼠骨髓细胞黏附分于CD54的表达水平。     

生血丸对骨髓抑制小鼠造血功能的调控作用

目的观察生血丸对60Co合并环磷酰胺致骨髓抑制小鼠造血功能的影响,探讨该方促进全血细胞上调的作用机制。方法通过全自动血细胞分析仪检测外周血象;流式细胞术检测骨髓细胞细胞周期;ELISA(酶联免疫吸附法)检测骨髓基质中红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)、粒细胞生长因子(G-CSF)的量。结果 生血丸能明显改善骨髓抑制小鼠外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、血小板计数(PLT)、骨髓有核细胞(BMC)的量(P0.05),生血丸组升红细胞疗效更为突出(P0.05);生血丸组能解除G0/G1期细胞阻滞,促进G0/G1期细胞进入增殖周期;生血丸能有效平衡微环境中TPO的量;能改善EPO的表达;对骨髓抑制小鼠骨髓细胞上清中G-CSF有明显的正调控作用。结论生血丸能提高骨髓抑制小鼠外周血血细胞和骨髓有核细胞计数;可促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞从G0/G1期进入增殖周期;并能有效调节骨髓微环境中TPO、EPO和G-CSF的表达,从而促进骨髓抑制小鼠的造血功能。     

归脾丸对苯中毒小鼠骨髓细胞周期的影响

目的 观察归脾丸对苯中毒小鼠骨髓细胞周期的影响,并探讨其造血调控作用的可能机制。方法 72只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组以及归脾丸大、中、小剂量组,每组12只。将小鼠置于人工模拟高苯浓度环境每天8 h,连续14天,复制苯中毒模型。造模后,归脾丸大、中、小剂量组分别给予归脾丸溶液8、4、2 mg/（kg·d）灌胃;西药组给予利血生1.5 mg/（kg·d）和鲨肝醇5 mg/（kg·d）混悬液灌胃;正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,均每天1次,连续3周。应用流式细胞仪检测小鼠骨髓有核细胞计数及骨髓细胞周期。结果 与正常对照组比较,模型组骨髓有核细胞计数明显减少（P<0.05）;与模型组比较,归脾丸大、小剂量组及西药组骨髓有核细胞计数均明显增加（P<0.01）。与正常对照组比较,模型组S期细胞比例和细胞增殖指数（proliferation index, PI）增加,G0/G1期细胞比例下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,归脾丸大剂量组G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例和PI增加,归脾丸中剂量组S期细胞比例下降,差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。与西药组比较,归脾丸大剂量组在G2/M期细胞比例和PI增加而在G0/G1期细胞比例下降,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 归脾丸可能通过调节苯中毒小鼠骨髓细胞周期的G1或G2期检查点,而使细胞进入细胞增殖周期,加速骨髓G0/G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2/M期细胞的转化,促进骨髓造血细胞增殖,提高外周血象,促进骨髓造血功能的恢复。     

食道通结方对食管癌细胞株TE-1增殖和凋亡的影响

目的观察具有理气化痰功效的食道通结方对食管癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法利用SD大鼠制备食道通结方含药血清,以食管癌TE-1细胞株为观察对象,用MTT法筛选合适的含药血清浓度;再用含药血清、顺铂和含药血清+顺铂分别作用于TE-1细胞株。采用MTT检测各组肿瘤细胞的生长情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡情况,Western印迹法检测各组凋亡相关蛋白(p-Akt、Akt、P53、Bcl-2、Bax、Caspase3)的表达。结果①确定20%的含药血清为最佳含药血清浓度。②含药血清组、顺铂组和含药血清+顺铂组细胞增殖抑制率均随干预时间的延长(0 h,12 h,24 h,48 h)而增加,48 h时的细胞增殖抑制率最高,分别为30.9%、35.4%和50.6%,组间差异有统计学意义(P0.01)。③与对照组比较,顺铂组和含药血清+顺铂组G1期细胞比例增高(P0.01),含药血清组和含药血清+顺铂组G2期细胞比例降低(P0.05);含药血清+顺铂组G1期细胞比例高于顺铂组和含药血清组,差异有统计学意义(P0.01)。④12 h、24 h组内比较,各组细胞凋亡指数差异均有统计学意义(P0.01);与对照组各观察时点比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组细胞凋亡指数均明显增加(P0.01);顺铂组、含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数均高于含药血清组(P0.01),含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数高于顺铂组(P0.01)。⑤与对照组比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组中p-Akt、Bcl-2表达明显下降(P0.01),P53、Bax、Caspase3表达显著增加(P0.01)。结论食道通结方含药血清对食管癌TE-1细胞株的增殖和生长有一定的抑制作用,能够促进细胞凋亡,与顺铂联合后具有较为明显的协同作用。     

苏木含药血清对人肺癌PG细胞增殖周期影响的对比研究

目的探讨苏木含药血清对人肺癌PG细胞株的周期阻滞作用及其分子机制。方法将肺癌PG细胞分为空白组、苏木组、苏木加顺铂组、顺铂组4组,分别用20%空白血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂、20%空白血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂培养PG细胞,采用光镜和激光共聚焦显微镜观察各组PG细胞学形态,流式细胞仪检测细胞周期,PCR法检测Rb1、P16 mRNA的表达。结果光镜和激光共聚焦显微镜下苏木组PG细胞的凋亡程度明显,但低于顺铂组和苏木加顺铂组。与空白组比较,苏木组PG细胞的G0/G1和S期比例增加（P〈0.05）,G2/M期降低（P〈0.01）;顺铂组和苏木加顺铂组的S和G2/M期比例增加（P〈0.05, P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。与苏木组比较,顺铂组和苏木加顺铂组的S期和G2/M期比例增加（P〈0.05,P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。苏木加顺铂组PG细胞的各期与顺铂组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。与空白组比较,苏木组P16、Rb1 mRNA表达增加,顺铂组和苏木加顺铂组亦增加且优于苏木组（P〈0.05）;与顺铂组比较,苏木加顺铂组P16、Rb1 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论苏木含药血清通过上调P16、Rb1 mRNA转录水平引起PG细胞 G0/G1、S期阻滞,从而诱导细胞凋亡,这与顺铂通过cyclinB1使细胞停滞在G2/M、S期不同。     

自体红骨髓修复骨缺损的实验研究

目的：探讨自体红骨髓的成骨能力；方法：在成年兔双侧桡骨干中段骨缺损处分别植入无菌生理盐水和自体红骨髓；通过Ｘ线片及组织形态学方法，观察自体红骨髓的成骨过程及修复骨缺损的能力；结果：术后４及８周Ｘ线片结果提示：实验组新骨形成量高于对照组；结论：自体红骨髓有一定修复骨缺损的能力，可加速骨缺损的愈合     

补康灵对环磷酰胺模型小鼠造血和免疫功能的影响

目的:观察补康灵对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫功能的影响。方法:建立环磷酰胺致小鼠骨髓抑制模型,通过检测白细胞、红细胞、血小板计数、CD4+/CD8+、IL-2、胸腺指数和脾脏指数,探讨补康灵对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫功能的影响。结果:补康灵可明显升高模型小鼠的白细胞、红细胞、血小板计数、CD4+/CD8+、IL-2、胸腺指数、脾脏指数,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:补康灵对环磷酰胺致小鼠造血功能低下有显著的促进恢复作用,并能增强免疫功能。     

综合教学模式在本科中医护理课程教学中的应用研究

目的：观察咖啡酸片对非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者的临床疗效,并探讨其对NSAA患者骨髓血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法：选择NSAA患者60例随机分为对照组和治疗组,对照组用西药常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用咖啡酸片治疗。并设20例健康人作正常对照。观察各组临床疗效,并分别于治疗前后采用原位杂交方法检测NSAA患者骨髓小粒中血管内皮生长因子（VEGF）表达情况。结果：治疗后咖啡酸组疗效与对照组有显著性差异（P〈0．05）。骨髓小粒中VEGF的表达：治疗前两组间无明显差异,但均较健康组明显降低,治疗后两组均较治疗前明显增高,且治疗组VEGF表达明显高于对照组。结论：在常规治疗的基础加用咖啡酸片,不仅提高NSAA患者的疗效,且能明显升高骨髓VEGF的表达水平。     

穴位药物注射治疗放化疗所致骨髓抑制114例

目的 探讨足三里注射地塞米松和利多卡因治疗放化疗所致骨髓抑制的疗效.方法 回顾性分析了2008～2011 年因骨髓抑制而采用足三里注射地塞米松和利多卡因的妇科恶性肿瘤患者114 例.结果 骨髓Ⅱ度抑制的患者采用足三里注射地塞米松和利多卡因有效率为89.85%,骨髓Ⅲ度抑制的患者有效率为62.22%.结论 足三里注射地塞米松和利多卡因对大部分放化疗所致的骨髓抑制有效,简单经济,有一定的实用价值.     

升髓合剂防治化疗后骨髓抑制的临床研究

目的:观察患者临床症状、客观检测指标及用药期间是否出现不良反应等,评价升髓合剂对多西他赛联合顺铂方案(Docetaxel Combined with Cis-platinum,DP)化疗所致骨髓抑制的有效性及安全性。方法:将50例符合标准的恶性肿瘤患者随机分为两组,治疗组和对照组各25例。对照组:DP方案化疗同时加服地榆升白片,治疗组:在DP方案化疗基础上加用升髓合剂。2个周期后观察患者化疗后第3、7、14 d外周血细胞变化及骨髓抑制情况,化疗后中医临床症状评分及疗效以及体力状况评分(Karnofsky,KPS)、体质量变化及其不良反应。结果:①两组化疗完成率观察组明显高于对照组(P<0.05);②观察组血常规中白细胞、中性粒细胞、血小板计数治疗后1周与治疗前比较无统计学意义,(P>0.05),而对照组白细胞、中性粒细胞、血小板计数下降显著,与治疗前差异有统计学意义,(P<0.05);两组相比,化疗后1周观察组血常规白细胞、中性粒细胞、血小板水平明显高于对照组,差距有统计学意义(P<0.05);③化疗后2周观察组白细胞计数升高明显高于对照组,两组差异有显著性(P<0.05);④化疗后中医证候改善方面,观察组症状改善显著(P<0.05)。对照组症状上改善不明显(P>0.05),两组在总体症状改善率方面相比较有显著性差异,治疗组明显优于对照组(P<0.05);⑤治疗组KPS评分明显优于对照组(P<0.05);⑥治疗组不良反应的发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:升髓合剂对于多西他赛联合顺铂化疗方案引起的骨髓抑制等不良反应具有防治作用。     

复方皂矾丸与放化疗同步用药的临床研究

目的:研究复方皂矾丸与化疗、放疗同步应用,对恶性肿瘤患者的骨髓保护作用。方法:化疗治疗组包括57例恶性肿瘤患者,化疗前1周起,服用复方皂矾丸,直至化疗结束后1周。化疗对照组28例,不服用复方皂矾丸。从治疗前开始监测病人的血常规,直至治疗开始后4周。放疗治疗组有43例恶性肿瘤患者,服用复方皂矾丸;对照组25例,不服用复方皂矾丸,血象监测方法与化疗组相同。结果:服用复方皂矾丸的治疗组的白细胞平均数显著高于对照组,治疗组放化疔后白细胞低于正常的例数明显少于对照组,4周内化疗治疗组和放疗治疗组白细胞正常率明显高于对照组。结论:复方皂矾丸与化疗、放疗同步应用,能够保护恶性肿瘤患者的骨髓免受化疗、放疗的损伤,提高患者对放化疗的耐受性。     

生血增白汤在小鼠骨髓移植后造血重建中的作用

目的 探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞间黏附分子(ICAM-1)、干细胞因子(SCF)表达水平的影响.方法 将实验动物采用随机数字表法分为5组各30只:正常组,未做任何处理;对照组、G-CSF组、生血组、生血+G-CSF组,建立小鼠骨髓移植模型,生血组及生血+G-CSF组胃饲生血增白汤浓缩煎剂.骨髓移植后的第9...     

从《黄帝内经》阴阳变易角度谈骨质疏松症与骨髓间充质干细胞分化的相关性

《黄帝内经》中的阴阳变易思维源于《周易》,即反映宇宙万事万物发生、发展、运动和变化的古代哲学思想。阴阳学说是构建中医学的哲学基础,阴阳变易是《黄帝内经》变易思想的核心。从中医学阴阳变易思维角度认识探讨骨质疏松症与骨髓间充质干细胞(BMSCs)多向分化的特性与辨识方式,构建中医学整体观念与微观分子生物学的桥梁,是BMSCs"微观辨证"的新机制。文章从骨组织与骨髓脂肪组织的阴阳对立平衡关系、成骨细胞与成脂细胞同源互制、Notch信号通路对BMSCs分化的影响等方面来阐述骨质疏松症与BMSCs向成骨与成脂分化的阴阳属性及其现代生物学内涵,进而剖析骨稳态及其生理功能和病理改变,可为未来研究骨骼系统整体功能的稳定有序启发新思路,为临床治疗多种骨性病症提供新的方法。     

针灸治疗肿瘤化疗后骨髓抑制的最新研究进展

在肿瘤放化疗过程中,大多数患者会出现骨髓抑制。骨髓抑制会导致一系列病理改变,临床上常表现为严重的出血和感染,是阻碍肿瘤治疗的原因之一。已有研究表明针灸对化疗后骨髓抑制有较好的治疗作用。现通过综述针灸治疗肿瘤化疗后骨髓抑制相关的研究结果,从骨髓细胞、造血微环境及信号通路3个方面分析针灸治疗骨髓抑制的作用机制,以期为临床提供参考。     

化瘀破癥胶囊对荷瘤小鼠化疗所致骨髓抑制的保护作用研究

目的探讨化瘀破癥胶囊对肿瘤化疗所致骨髓抑制的保护作用。方法以小鼠移植性Lew is肺癌为模型,分别观察化瘀破癥胶囊对环磷酰胺(Cy)所致荷瘤鼠外周血象、骨髓有核细胞数下降的变化。结果化瘀破癥胶囊能显著增加Cy所致荷瘤鼠外周血下降的白细胞数(P<0.01),以及下降的骨髓有核细胞数(P<0.01)。结论化瘀破癥胶囊对动物移植性肿瘤化疗所致骨髓抑制有保护作用。