雷丸蛋白酶的发酵、提取及对猪囊尾蚴体外活性作用的初步研究

目的：探索雷丸菌发酵产物中是否含有和天然雷丸中相同分子量的而且具有体外杀灭猪囊尾蚴活性的雷丸蛋白酶。方法：对雷丸菌发酵所产生的蛋白酶进行提取、检测和体外杀灭猪囊尾蚴的实验，并和天然雷丸蛋白酶进行比较。结果：从雷丸菌发酵产物中分离出来的雷丸蛋白酶经测定，分子量为１６８００，等电点为４．４，末端氨基酸为缬氨酸，具有水解蛋白的活力及体外杀灭猪囊尾蚴的活性。结论：采用雷丸菌发酵方法所获得的雷丸蛋白酶与天然雷丸蛋白酶之间没有明显差别。     

囊立消对体外猪囊尾蚴抑制作用的实验研究

目的:观察中药囊立消在体外对猪囊尾蚴的抑制作用。方法:通过猪胆汁体外培养法观察不同剂量囊立消对猪囊尾蚴的杀灭效果。结果:囊立消在体外对猪囊尾蚴具有明显杀灭作用。     

灭囊灵对体外猪囊尾蚴的抑制作用和毒理学研究

目的 :观察中药灭囊灵在体外对猪囊尾蚴的抑制作用和本药的毒理试验结果。方法 :用猪胆汁体外培养法观察不同剂量灭囊灵对猪囊尾蚴的杀灭效果 ,小白鼠急性和大白鼠长期毒性试验采用常规灌胃方法。结果 :灭囊灵醇提物在体外对猪囊尾蚴具有明显的杀灭作用 ,16 7%浓度杀灭率达 10 0 % ,其ED50 为 5 18% ,LD50 大于小鼠灌胃 8g kg ,为临床人用量的 5 0倍以上。长期毒性试验证明 ,对大鼠无毒副作用 ,其最大用量为人体用量的 4 0倍以上。结论 :灭囊灵在体外对猪囊尾蚴具有明显的杀灭作用 ,急性和长期毒性试验证明本品安全无毒     

雷丸蛋白酶提纯及其化学成分的研究

作者对雷丸菌成分进行了研究,从中提纯了一种蛋白酶。经测定雷丸蛋白酶为一条多肽链的糖蛋白,总糖含量约为16.7%,蛋白酶分子量约为16,800,末端氨基酸为缬氨酸.氨基酸组成分析表明它含有较多的酸性氨基酸和蛋氨酸。     

中药全蝎醇提取物体外抑制猪囊尾蚴活性的作用

将全蝎醇提取物置于15%猪胆汁常水溶液中在37℃进行体外培养,并以化学药物丙硫咪唑作对照,首次证实了全蝎体外具有显著的杀灭猪囊尾蚴的作用,其不同的加工品和药用部位的灭囊活性无显著差异。     

有必要改变雷丸的药用剂型

雷丸，多孔菌科植物雷丸菌Omphalialapidesc－ensSchoret的菌核。杀虫消积，用于绦虫、钩虫、蛔虫等多种肠道寄生虫病等。成分为蛋白酶（雷丸素）不耐热，遇热后药效部分丧失或全部丧失；60℃加热0．5h大部份消失，1h后全部消失。因为加热使蛋白分解，酶失去活性而无治疗效果。同时，《药典》和其他医药教材及专著、临床药用均忽视了一点：雷丸素（雷丸蛋白酶）溶于水，不溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂，在碱性溶液中作用最强（pH8），在肠道弱碱性溶液中有较强的分解蛋白质的作用。在酸性溶液中则失效至无效。因此，拟对雷丸入药剂型实…     

溶囊素治疗脑囊虫病30例疗效观察

溶囊素系由雷丸提取制成的无菌水溶液，内含对虫体蛋白质具有选择性溶解的蛋白酶，对囊虫等寄生虫有较强的杀灭作用。该药简便快速、疗效可靠，无不良反应。     

壁虎/蝉拟青霉发酵菌质粗提物抗肿瘤研究

目的:探索中药壁虎经蝉拟青霉发酵后菌质粗提物中蛋白质及体外抗肿瘤活性的变化。方法:分别用冻融、超声、Tris-HCl提取壁虎和壁虎/蝉拟青霉菌质抗肿瘤活性成分,通过蛋白质浓度检测、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析壁虎发酵前后蛋白含量与分子量的变化;MTT检测壁虎发酵前后抗HepG2肿瘤细胞活性的变化及不同提取方式抗肿瘤活性的差异。结果:壁虎发酵后菌质3种提取方式所得蛋白质含量均减少约30%,分子量10 kDa的蛋白电泳条带均消失;体外抗HepG2肿瘤细胞增殖活性增加,且超声提取物诱导HepG2肿瘤细胞凋亡的IC_(50)值为10.769 mg·mL~(-1),比发酵前降低了约50%。结论:蝉拟青霉的生长代谢分解了壁虎中的部分蛋白,且壁虎经蝉拟青霉发酵后抗HepG2细胞增殖活性增强。     

消痰杀虫熄风活血法治疗癫痫型脑囊虫病的临床疗效及治疗机理研究

目的:观察消痰杀虫、熄风活血中药治疗癫痫型脑囊虫病的临床疗效及作用机理.方法:临床采用随机、平行、对照方法观察中药组、西药组和中西医结合组的治疗结果;中药杀灭体外培养的猪囊尾蚴采用猪胆汁培养基方法;中药抗癫痫作用采用小鼠电惊厥模型、回苏灵致惊厥和士的宁致惊厥模型.结果:中药组195例治愈率72.3%,阿苯达唑组97例治愈率50.5%,中西医结合组93例治愈率87.1%(P＜0.01),三组副作用发生率以中药组为最低.11.1%以上浓度的灭囊灵醇提取物对体外培养的猪囊尾蚴有显著的杀灭作用,其ED50为5.18%.灭囊灵高低剂量组对三种小鼠癫痫模型均有明显的抗癫痫作用.结论:消痰杀虫、熄风活血法是治疗癫痫型脑囊虫病的理想治疗法则,中药治疗脑囊虫病的机理与直接杀伤猪囊尾蚴、降低颅内压和抗癫痫等作用有关.     

海洋细菌细胞毒代谢产物的分离及其结构解析

目的 从海洋微生物的代谢产物中分离细胞毒化合物.寻找具有药用潜力的天然产物。方法 通过细胞毒筛选模型,从海绵共栖细菌中分离活性细菌,经过发酵培养,对其代谢产物进行活性跟踪式分离纯化,细胞毒活性化合物利用MS和一维、二维NMR技术进行解析。结果 获得2株具有细胞毒活性的细菌,分别为杀鱼假单孢菌Pseudoalteromonas piscicida和巨大芽孢杆菌Bactllus megaterium。从杀鱼假单孢菌的代谢产物中分离得到一个细胞毒化合物norharman,对肿瘤细胞HeLa和BGC-823的IC50达到5μg／mL和4.1 μg／mL。结论 首次从海洋细菌中分离得到细胞毒化合物norharman。     

灭囊灵对体外猪囊尾蚴作用的电镜观察

目的：观察灭囊灵在体外对猪囊尾蚴的治疗作用，方法：用扫描电镜和透射电镜观察灭囊灵醇提物、吡喹酮和现硫咪唑体外作用于猪囊尾蚴后的病变。结果扫描电镜下见灭囊灵和吡喹酮组头节均未翻出，囊壁萎缩，皮层外质膜受损，微毛细胞不清或脱落，表面布满颗粒状物；丙硫咪唑组４６．７％已脱囊，顶突头钩发育正常，４个吸血表面凹陷，颈部糜烂，体节正常沟条消失。透射电镜下见灭囊灵和吡喹酮组虫体皮层、基底膜、肌层和实质层均明显受     

槟榔与白胡椒对猪囊尾蚴形态学改变的影响

目的　观察研究中药槟榔、白胡椒对体外培养的猪囊尾蚴形态学改变的影响。方法　取经槟榔、白胡椒药液作用不同时间的囊尾蚴进行大体形态及扫描电镜观察。结果　经槟榔、白胡椒分别作用 3 0min ,1h后所有虫体蠕动均停止。槟榔、白胡椒对囊尾蚴分别作用 2 0min ,40min ,虫体表面开始出现部分剥蚀区 ,且随时间延长 ,其剥蚀区增大。结论　两种药物作用于囊尾蚴的效果均好 ,可以作为人或猪囊虫病的治疗药物     

Effect of alcohol-extract from scorpion on checking externally active cysticerus cellulosae]

Putting the alcohol-extract from scorpion in the ordinary aqueous solution of 15% pork bile and having it cultured at the temperature of 37 degrees C have proved for the first time that in contrast with the chemical albendazole, Scorpion has a conspicuous effect on the external killing of the cysticercus cellulosae, The action of killing cysticercus cellulosae has almost nothing to do with the difference of processed products or of the parts used in medicine.     

药用真菌雷丸菌丝冻干粉对小鼠的毒性实验研究

目的：研究雷丸菌丝冻干粉的急性毒性作用。方法：通过深层液体发酵获取雷丸菌丝并进行真空冷冻干燥,以高、中、低3个剂量组对ICR小鼠进行灌胃,采用一次性给药方式给药,连续观察14天。实验结束后取血清,测ALT和AST,取肝、心、脾、肺、肾5脏器进行石蜡病理切片检查。结果：各实验组均未见小鼠死亡,但用药组小鼠表现行为异常。病理切片显示,与对照组相比,用药组小鼠脾脏有极轻微病变,但未见细胞坏死;其余脏器未见异常。AST和ALT分析显示,各处理组间未见显著性差异。结论：雷丸菌丝冻干粉对小鼠有极轻微毒性,仍需进一步研究以确定毒性的原因。     

中国被毛孢发酵物对睡眠剥夺亚健康大鼠的影响

目的:观察中国被毛孢发酵物对亚健康大鼠血生化等指标的改善作用。方法:连续96h的快速动眼相睡眠剥夺(REMSD)造成亚健康大鼠模型,灌胃给予中国被毛孢发酵物后观察亚健康大鼠的体重、脏器指数、血pH值、血氧分压(PaO₂)、氧饱和度(SO₂%)、肝肾功能、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等指标。结果:中国被毛孢发酵物能不同程度的改善睡眠剥夺大鼠亚健康体征,增加大鼠体重,调节血液酸碱度,提高血氧分压和饱和度,改善肝肾功能和自由基代谢异常等;结论:中国被毛孢发酵物具有较好的改善亚健康状态。     

Labdanes and isopimaranes from Platycladus orientalis and their effects on erythrocyte membrane and on Plasmodium falciparum growth in the erythrocyte host cells

Six labdanes (1-6) and four isopimaranes (7-10), including three new natural products (7, 9, and 10), were isolated from Platycladus orientalis, and their structures determined using 1D and 2D NMR methods, ion-cyclotron resonance HRMS, and optical rotation data. Relative configurations of all chiral centers in the isopimaranes were determined using NOESY experiments at 600 and 800 MHz. Specific optical rotation data were used to correlate absolute configurations. Compounds 1-9 and aframodial (11) were tested for their in vitro antiplasmodial activity and for their ability to induce changes of erythrocyte shape in order to obtain data about possible correlation between the two effects. All compounds tested exhibited weak (IC(50) > 25 microM) in vitro antiplasmodial effects against Plasmodium falciparum strain 3D7. At the same time, the compounds caused echinocytic or stomatocytic changes of the erythrocyte membrane curvature, indicative of their incorporation into the lipid bilayer, in the concentration region where the antiplasmodial activity was observed. The antiplasmodial effect of these compounds thus appears to be an indirect effect on the erythrocyte host cell. Weak or moderate antiplasmodial activity observed with many other apolar natural products, in particular those with amphiphilic structures, is also likely to be an indirect effect.     

六神曲的发酵菌种分离及纯种发酵考察

目的:筛选优势菌种,探索纯种发酵对六神曲发酵炮制品质量的影响.方法:采用微生物菌种分离方法,从实验室自制和同仁堂购买的六神曲中筛选菌种,采用部分霉菌进行六神曲纯种发酵后淀粉酶及蛋白酶活力测定.淀粉酶活力测定依据碘-淀粉比色法,蛋白酶活力测定采用Folin试剂法.结果:筛选出12株霉菌,黄曲霉能显著提高六神曲淀粉酶和蛋白酶的活力,自制六神曲中分离的杂色曲霉产蛋白酶活力最高,其次为同仁堂分离的肉色曲霉和伞枝犁头霉,其余各组产蛋白酶活力明显低于传统自然发酵组.结论:六神曲原材料中不含淀粉酶、蛋白酶,纯种发酵能稳定提高六神曲发酵炮制品的质量.     

何首乌、制何首乌及何首乌发酵炮制品致泻作用与抗氧化活性的比较研究

目的：比较何首乌生品、传统炮制品及发酵炮制品的抗氧化活性及致泻副作用的差异,评价发酵法在何首乌炮制中的应用。方法：利用铁离子还原抗氧化法（FRAP法）评价何首乌生品与不同炮制品的抗氧化活性。利用小鼠粪便色点法及炭末推进法评价何首乌生品与不同炮制品的泻下副作用。结果：各种炮制方法均可显著降低何首乌的致泻副作用。其中用Rhizopussp．发酵的何首乌（FB）可显著降低何首乌致稀便的次数及时间,传统法炮制的何首乌及用Rhizopusoryzae发酵的何首乌（FA）可显著减弱小鼠肠道运动。同时,在50％和95％乙醇提取物组,发酵品FA和FB的抗氧化活性都强于传统方法炮制的何首乌。经传统方法炮制后何首乌中二苯乙烯苷含量降低,但发酵炮制品FA中二苯乙烯苷的含量无明显变化,传统方法炮制品及发酵炮制品FA中大黄素及大黄素甲醚含量均增加。结论：何首乌的传统炮制法及发酵炮制法在降低何首乌致泻副作用的同时也会不同程度地减弱其抗氧化活性。其中,利用米根霉Rhizopusoryzae发酵得到的何首乌可在降低致泻副作用的同时最大程度地保留何首乌的抗氧化活性,该发酵法可能成为何首乌炮制方法中新的研究方向。     

松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响

目的观察松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响及发酵茯苓菌丝与天然茯苓多糖含量的差别。方法加松根液与不加松根液发酵培养茯苓菌丝,将两者在菌丝产量、水溶性多糖含量方面进行比较;并将发酵菌丝与天然茯苓进行水溶性多糖含量比较。结果加松根液发酵培养的茯苓菌丝产量有提高,但水溶性多糖含量下降;发酵菌丝较天然茯苓水溶性多糖含量显著提高。结论松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响不同;发酵茯苓菌丝多糖含量高于天然茯苓。