聚乙烯亚胺-胆固醇结合脂质微泡介导的基因转染系统

本文研究了聚乙烯亚胺-胆固醇阳离子聚合物(PEI-Chol)基因载体的性能及其结合中性脂质、聚乙二醇修饰脂质微泡介导的基因传递系统(微泡/PEI-Chol/DNA)的体外细胞基因转染效率。采用胆固醇甲酰氯与聚乙烯亚胺(Mw1800)通过酰胺化制得PEI-Chol,并运用IR、1H NMR和MADI-TOF-MS(基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱)对其结构和分子量进行测定,平均相对分子质量约为2000。采用反相挥发法制备DPPC、DSPE-PEG2000和全氟丙烷构建的粒径为2～8μm的脂质微泡,并运用自组装技术将PEI-Chol/DNA复合物与微泡融合,构建微泡/PEI-Chol/DNA(bubble/PEI-Chol/DNA)基因转染系统;以pEGFP-Cl(enhanced green fluorescent protein,增强型绿色荧光蛋白)为报告基因,用凝胶滞留试验考察PEI-Chol的DNA压缩能力,同时在A549和MCF-7两种细胞中比较以PEI-Chol为核心构建的各种载体系统的细胞毒性、抗血清沉淀作用以及细胞转染效率。结果发现,当N/P比值为4以上时,PEI-Chol能有效压缩DNA;...     

sRAGE对脂多糖介导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)对脂多糖(LPS)介导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法向小鼠气管内滴注LPS建立ALI模型,造模后1h sRAGE组腹腔注射100μg sRAGE,于24 h留取标本,检测各组动物支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及中性粒细胞数量、蛋白浓度和肿瘤坏死因子(TNF)α-水平,并对肺组织进行病理学观察。结果LPS滴注24 h后,BALF中白细胞总数和中性粒细胞数量显著增加,蛋白含量升高,TNFα-释放增多,肺组织出现典型的ALI病理损害,sRAGE干预显著降低了BALF中白细胞及中性粒细胞数量、蛋白含量和TNFα-水平,减轻了LPS引起的肺组织病理改变。结论应用sRAGE阻止RAGE信号通过抑制LPS引起的肺内中性粒细胞聚集、肺毛细血管渗出、炎症因子TNFα-释放,对ALI发挥保护作用。     

甘氨酸对油酸致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨甘氨酸对油酸致小鼠急性肺损伤的保护作用．方法 健康昆明小鼠随机分为急性肺损伤(ALI)组、甘氨酸(Gly)组和对照组。1h后测定各组动物血气分析,肺系数,血浆IL-10浓度和光镜观察肺病理改变。结果 甘氨酸可显著抑制油酸致小鼠急性肺损伤时的肺系数增加,升高动脉血氧分压和血浆IL-10浓度,明显减轻肺组织学病变。结论 甘氨酸对油酸引起的急性肺损伤有防治作用。     

脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用比较

目的研究两种脂质载体——脂质体和脂质微泡对细胞膜的声孔作用。方法应用体外培养的乳腺癌细胞SK-BR-3，考察脂质体和脂质微泡在低频超声条件下，对SK-BR-3细胞膜的声孔作用，应用原子力显微镜观察超声后即刻和24 h的SK-BR-3细胞表面变化。结果超声可使细胞丧失贴壁性能，形态变圆，脂质微泡的加入明显增强这种作用。原子力显微镜观察表明，对照组(正常细胞单纯超声照射)细胞膜表面孔道暂时增大，部分细胞膜表面孔道直径大于1 μm。2%和5%脂质体+超声照射组和对照组无明显差别。脂质微泡+超声照射组对细胞膜结构有明显影响，2%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜表面孔道直径在1～3 μm，24 h内可以恢复。5%脂质微泡+超声照射组产生的细胞膜孔道直径2～4 μm，24 h内不能完全恢复。结论2%脂质微泡可以产生较强的声孔作用，使细胞膜上出现可逆性孔道，有利于药物或基因递送到细胞内。     

白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法以小鼠气道滴注LPS制备急性肺损伤模型,检测气道吸气阻力(Ri)、气道呼气阻力(Re)和动态肺顺应性(Cdyn)的变化,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,检测肺湿/干比值和毛细血管通透性,观察组织病理学变化。结果白藜芦醇能明显抑制Ri、Re增长和Cdyn降低,降低BALF中IL-1βI、L-6、TNF-α的含量,降低肺湿/干比值和渗透性,减轻肺组织病理学的损伤。结论白藜芦醇对LPS诱导的ALI具有保护作用,作用机制可能与抑制炎症因子的合成与释放有关。     

谷氨酰胺对急性肺损伤的保护作用及机制

谷氨酰胺被称为"非必需氨基酸",但是在应激和危重状态下,则成为必需氨基酸。谷氨酰胺除做为主要氮源物质外,还对多种组织器官具有保护作用,因此引起人们越来越多的关注,对谷氨酰胺的研究不断深入。本文从谷氨酰胺的生理功能、药理作用、对肺脏的保护作用及其在临床应用中的前景等方面进行综述。     

脂质微泡造影剂的制备

目的 考察以大豆磷脂及胆固醇作为膜材料,用薄膜-水化法制备脂质微泡的最佳工艺条件,并通过对脂质微泡粒径分布的考察筛选最佳处方工艺.方法 以大豆磷脂、胆固醇为成膜材料,六氟化硫(SF6)气体为核心物质,采用薄膜-水化法制备脂质微泡;以D0.9为指标,D0.9越小,说明符合要求的微泡越多;采用控制变量法考察不同投料比、超声功率与时间、PEG分子量对微泡粒径分布的影响.结果 通过对粒径分布的测定及比较,确定了制备六氟化硫脂质微泡的最佳工艺,并考察了在该工艺条件下制备出微泡的其他理化性质.结论 所制备的六氟化硫脂质微泡的形态规则、大小均匀、Zeta电位、包封气体量及半衰期均符合要求.     

甘氨酸对腹腔感染小鼠急性肺损伤的作用

目的 :探讨甘氨酸对腹腔感染小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 :2 4只昆明小鼠随机分为 3组 ,每组 8只 :假手术组 ;盲肠结扎穿孔急性肺损伤组 ;甘氨酸保护组 (1.0 g/ kg)。 2 4h后测定各组动物肺系数 ,血清 TNF浓度和肺组织中丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶 (MPO)及还原型谷胱甘肽 (GSH)水平 ,光镜观察肺病理改变。结果 :甘氨酸可显著抑制腹腔感染小鼠急性肺损伤时的 MDA、MPO、TNF升高 ,降低肺系数 ,减轻肺组织学病变 ,但对肺 GSH无提高作用。结论 :甘氨酸对严重腹腔感染引起的急性肺损伤有防治作用。     

内皮细胞靶向性氟尿嘧啶脂质微泡的制备及稳定性研究

目的:制备载氟尿嘧啶(5-Fu)的新型内皮细胞靶向脂质微泡(5-Fu-LF9-MBs),对其合成、制备及体外稳定性进行研究,探索其作为一种新型内皮细胞靶向药物载体的可行性.方法:合成以Dll4-Notch通路特异性相关的结构域的活性片段LF9,进一步包载抗癌药5-Fu,制得载药脂质微泡5-Fu-LF9-MBs.以粒径、...     

藻酸双酯钠对急性肺损伤模型小鼠的保护作用研究

目的:研究藻酸双酯钠(PSS)对急性肺损伤模型小鼠的保护作用。方法:将小鼠随机分为对照组、PSS(10mg/kg)组、模型(脂多糖10mg/kg)组、治疗(脂多糖10mg/kg+PSS10mg/kg)组,每组10只。尾静脉注射相应药物8h后,处死,光镜下观察肺组织形态学变化,测定肺组织湿干质量比值(W/D)和肺组织中细胞间黏附因子1(ICAM-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度,免疫组化法测定肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65的活性。结果:对照组和PSS组小鼠肺组织结构完整,无肺组织病理损伤变化。与对照组比较,模型组和治疗组小鼠肺组织有明显病理学损伤,肺水肿严重,肺组织中ICAM-1、TNF-α浓度和NF-κBp65活性明显增加(P<0.05),PSS组小鼠上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,治疗组小鼠上述指标均明显改善(P<0.05)。结论:PSS能明显改善脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κBp65活性有关。     

Protective effect of taraxasterol on acute lung injury induced by lipopolysaccharide in mice

Taraxasterol, a pentacyclic-triterpene isolated from Taraxacum officinale, has been reported to have potent anti-inflammatory properties. However, the effect of taraxasterol on lipopolysaccharide (LPS)-induced mice acute lung injury has not been investigated. The aims of this study were to investigate whether taraxasterol could ameliorate the inflammation response in LPS-induced acute lung injury and to clarify the possible mechanism. Male BALB/c mice were pretreated with taraxasterol 1 h before intranasal instillation of LPS. 7 h after LPS administration, the myeloperoxidase (MPO) in lung tissues, lung wet/dry ratio and inflammatory cells in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were detected. The levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), interleukin-1β (IL-1β) in the BALF were measured by ELISA. The extent of phosphorylation of IκB-α, p65 NF-κB, p46–p54 JNK, p42–p44 ERK, and p38 were determined by western blotting. The results showed that taraxasterol attenuated the infiltration of inflammatory cells, the activity of myeloperoxidase (MPO), lung wet/dry ratio, and the expression of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-1β (IL-1β) in a dose-dependent manner. Additionally, western blotting results showed that taraxasterol inhibited the phosphorylation of IκB-α, p65 NF-κB, p46–p54 JNK, p42–p44 ERK, and p38 caused by LPS. Our data suggest that anti-inflammatory effects of taraxasterol against the LPS-induced ALI may be due to its ability of inhibition of the NF-κB and MAPK signaling pathways.     

Protective effect of catalpol on lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice

Catalpol, an iridiod glucoside isolated from Rehmannia glutinosa, has been reported to have anti-inflammatory properties. Although anti-inflammatory activity of catalpol already reported, its involvement in lung protection has not been reported. Thus, we investigated the role of catalpol on lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury in this study. Mice acute lung injury model was induced by intranasal instillation of LPS. Catalpol was administrated 1 h prior to or after LPS exposure. The severity of pulmonary injury was evaluated 12 h after LPS administration. The results showed that catalpol inhibited lung W/D ratio, myeloperoxidase activity of lung samples, the amounts of inflammatory cells and TNF-α, IL-6, IL-4 and IL-1β in BALF induced by LPS. The production of IL-10 in BALF was up-regulated by catalpol. In vitro, catalpol inhibited TNF-α, IL-6, IL-4 and IL-1β production and up-regulated IL-10 expression in LPS-stimulated alveolar macrophages. Moreover, western blot analysis showed that the activation of NF-κB and MAPK signaling pathways was inhibited by catalpol. Furthermore, catalpol was found to inhibit TLR4 expression induced by LPS. In conclusion, catalpol potently protected against LPS-induced ALI. The protective effect may attribute to the inhibition of TLR4-mediated NF-κB and MAPK signaling pathways.     

甘草酸单铵对脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

采用脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)气道滴入诱导小鼠急性肺损伤(acute lung injury，ALI)模型，研究甘草酸单铵(monoammonium glycyrrhizinate，MAG)对ALI的防治作用及其机制。雄性ICR小鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、MAG 3、10 及30 mg·kg^-1组、LPS组、地塞米松(dexamethasone，DXM) 5 mg·kg^-1组。MAG各组气道滴入LPS前1 h及滴入后3 h各给药1次，DXM组气道滴入LPS前1 h给药1次。LPS气道滴入后6 h处死动物，测定各组的肺湿重/干重比、肺通透性、肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)含量、ELISA法检测肺组织匀浆TNF-α、IL-10含量，常规细胞形态学检测中性粒细胞在支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中的比例和肺组织病理改变。结果表明，MAG剂量依赖性减轻气道内滴入LPS诱导的小鼠ALI程度，降低肺湿重/干重比及肺组织伊文斯蓝的渗出，降低BALF中白细胞总数和中性粒细胞数比例，抑制组织MPO的释放，降低肺组织匀浆TNF-α的含量，增加肺组织IL-10的释放。以上结果提示，MAG可能通过调节TNF-α/IL-10的平衡而有效保护脂多糖诱导的急性肺损伤。     

蛹虫草提取物对内毒素引起小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 :观察蛹虫草提取物对内毒素引起小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 :建立内毒素急性损伤小鼠肺病理模型 ,造模 4和 8h后 ,用蛹虫草提取物治疗 ,造模 2 4h后 ,对血细胞和肺灌洗液中细胞进行计数并测定肺灌洗液中蛋白酶的活性和蛋白的含量。结果 :蛹虫草提取物对血液成分没有明显影响 ,但可以使肺灌洗液中白细胞、粒细胞的含量有所降低 ,而淋巴细胞和单核细胞的数量有所增加 ,蛋白酶活性降低。结论 :蛹虫草提取物可调节机体组织的免疫功能 ,可以缓解由于内毒素或类似物质造成的肺部炎症 ,具有一定的肺保护作用。     

屈头鸡果对内毒素致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 研究屈头鸡果在内毒素致小鼠急性肺损伤中的作用及其机制.方法 将40只SPF级雄性BALB/c小鼠分为正常组、对照组、模型组和实验组,每组各10只.经鼻滴入20 mg·kg-1脂多糖构建内毒素致小鼠急性肺损伤模型,其中对照组和实验组分别灌胃屈头鸡果2.16 g·kg-1,正常组和模型组灌胃等量生理盐水.观察各组小鼠...     

王不留行黄酮苷对脓毒症小鼠急性肺损伤保护作用及机制研究

目的 基于网络药理学和动物实验探究王不留行黄酮苷（VAC）对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用机制。方法 通过 Swiss Target Prediction数据库收集 VAC的潜在作用靶点;利用 GeneCards数据库检索肺脓毒症相关的疾病靶点;运用Draw Venn Diagram 软件构建 VAC 和疾病的共同靶点;利用 STRING 11.5数据库和 Cytoscape 3.10.0软件构建共同靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;利用 Metascape 数据库进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。采用 ip 给予脂多糖（LPS）构建脓毒症模型,造模同时给予 VAC（1、5 mg·kg^-1）或地塞米松干预,取各组小鼠肺组织及血清,苏木精-伊红（HE）、Masson 及 TUNEL 染色观察肺组织形态变化、纤维化及细胞凋亡情况,ELISA 法和实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）法分别检测血清和肺组织中炎症因子水平,免疫组织化学法和 Western blotting法检测肺组织炎症通路相关蛋白表达。结果 VAC和肺脓毒症共同靶点有44个;GO富集分析涉及生物过程（BP）823个条目、细胞组分（CC）52个条目和分子功能（MF）49个条目;KEGG分析筛选出癌症通路、PI3K-Akt、JAK-STAT信号通路等 20 条信号通路。验证实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠肺组织损伤且纤维化严重,肺脏指数显著增加（P＜0.05）,血清及肺组织中相关炎症因子表达升高（P＜0.01、0.001）。与模型组相比,VAC及地塞米松组肺组织病理形态得到改善,纤维化程度减轻,肺脏指数显著降低（P＜0.05）,血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）水平、肺组织炎症蛋白表达量及细胞凋亡数量降低,PI3K、Akt蛋白表达升高（P＜0.05、0.01、0.001）。动物实验结果与网络药理学结果一致。结论 VAC 对脓毒症小鼠急性肺损伤具有一定的保护作用,其机制可能与调控 PI3K-Akt、NLRP3/TNF-α等通路抑制炎症的发展有关,为VAC抗炎作用机制的深入研究提供了依据。     

蛇床子素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的探讨蛇床子素(Osthole,Ost)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤的作用及其机制。方法 45只雄性C57小鼠随机分为3组:正常对照组(对照组),LPS组,Ost+LPS组(Ost组),每组15只。各组小鼠于腹腔注射LPS或生理盐水(50 mg/kg)6 h后,测定PaO2、PaCO2、pH,IL-6、IL-1β、TNF-α表达,JAK2、STAT3、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量,观察肺组织病理变化和湿干比(W/D)。结果与LPS组比较,Ost组PaCO2、W/D,IL-6、IL-1β和TNF-α表达,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量和肺组织病理改变均明显降低,但PaO2和pH增高,而JAK2和STAT3表达无明显变化。结论 Ost预处理可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活而减轻LPS诱导的急性肺损伤。     

基于cGAS-STING通路探讨知母皂苷元对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤保护作用

目的 研究知母皂苷元对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 将昆明小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（0.5 mg/kg）组、知母皂苷元（50、100、200 mg/kg）组。知母皂苷元50、100、200 mg/kg组小鼠ig相应剂量知母皂苷元溶液,地塞米松组小鼠ip地塞米松磷酸钠注射液,对照组和模型组小鼠ig等体积生理盐水,1次/d,连续7 d。末次给药1 h后,其余各组小鼠除对照组外均ip 10 mg/kg LPS溶液复制小鼠急性肺损伤模型。6 h后取各组小鼠左肺组织,计算肺湿/干质量比（W/D）;采用苏木精-伊红（HE）染色法观察肺组织病理形态学变化;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平;采用Western blotting法检测肺组织中鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）、干扰素基因刺激因子（STING）的蛋白表达。结果 与模型组相比,知母皂苷元组小鼠左肺W/D值、血清中IL-6和TNF-α水平、肺组织中cGAS和STING的蛋白表达均显著降低（P<0.05）,肺组织病理学损伤均有所改善。结论 知母皂苷元可能通过抑制cGAS-STING通路,减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌,从而保护LPS诱导的急性肺损伤。