乌贼墨对H22癌细胞内Ca^2＋,ATP浓义及线粒体Ca^2＋／Mg^2＋—ATP酶？…

利用荧光探针和荧光素,研究了乌贼黑对Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋、ＡＴＰ浓度及线粒体Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋浓度降低了２．３和３．７倍,线粒体Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性降低了２８％和５８％,ＡＴＰ浓度升高了７７％和８３％．     

慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ca2+浓度及Ca2+-ATP酶活性的影响

目的：观察慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法：用０．１５％醋酸铅饲养大鼠建立慢性染铅动物模型,参照Ｄｉｌｄｙ法和徐友涵法测定海马神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。结果发现：细胞内Ｃａ２＋浓度,染铅组（２０３．８３±３０．５０）ｎｍｏｌ／Ｌ,对照组（９７．６２±１９．８３）ｎｍｏｌ／Ｌ,ｔ＝８．３１Ｐ＜０．００５;Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性,染铅组（３２６．４２±４０．０６）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１,对照组（２５３．０７±２５．４０）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１,ｔ＝３．５４,Ｐ＜０．０１。结论：慢性染铅可使大鼠海马区神经细胞内Ｃａ２＋浓度升高,Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性增强     

氯丙烯对神经细胞胞浆膜和线粒体膜 Ca~(2 )-ATP 酶,Na~ ,K~ -ATP 酶活性的影响

氯丙烯对神经细胞胞浆膜和线粒体膜Ｃａ２＋┐ＡＴＰ酶，Ｎａ＋，Ｋ＋┐ＡＴＰ酶活性的影响张磊谢克勤高树君孙克任（山东医科大学毒理学研究室，济南２５００１２）用鸡胚脑神经细胞研究１－烯丙基氯－３对细胞胞浆膜和线粒体膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶，Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ...     

牛磺酸对缺血大鼠心肌腺苷三磷酸酶的影响

目的观测牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）对心肌缺血损伤时心肌肌膜和线粒体ＡＴＰ酶活性的影响。方法以异丙肾上腺素（Ｉｓｏ，５ｍｇ·ｋｇ－１）诱导心肌缺血损伤模型，用定磷法分别测定Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。结果与对照组比较，缺血组心肌肌膜和线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性均降低，在注射ＩＳＰ前３０ｍｉｎ腹腔注射Ｔａｕ（２００ｍｇ·ｋｇ－１），则上述酶活性未见显著性变化。结论Ｔａｕ具有拮抗缺血大鼠心肌肌膜及线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性降低的细胞保护作用     

普萘洛尔和苄普地尔消除左甲状腺素诱发的大鼠心脏肥厚和线粒体Ca~（2＋）Mg~（2＋）－ATP酶活力升高

普萘洛尔和苄普地尔消除左甲状腺素诱发的大鼠心脏肥厚和线粒体Ｃａ２＋Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活力升高陈丁丁，戴德哉，陆坚，张新奎（中国药科大学药理研究室，南京２１０００９，中国关键词普萘洛尔；苄普地尔；左甲状腺素；心脏线粒体；Ｃａ２＋Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶；心脏...     

The Effects of Etimicin and Gentamicin on Renal Endoplasmic Reticulum ~(45)Ca~(2 )-Uptake and Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase Activity

目的：研究爱大霉素和庆大霉素对大鼠肾皮质内质网４５Ｃａ２＋摄取以及对内质网膜上Ｃａ２＋Ｍｇ２＋ＡＴＰａｓｅ活性的影响。方法：４５Ｃａ２＋示踪技术和孔雀蓝分光光度法。结果：爱大霉素和庆大霉素在大于或等于３．４×１０４ｍｏｌ·Ｌ１时，能抑制内质网４５Ｃａ２＋摄取（抑制率分别大于或等于１７．４％和２５．５％）；在３．４×１０２ｍｏｌ·Ｌ１时，对内质网膜上Ｃａ２＋Ｍｇ２＋ＡＴＰａｓｅ活性有抑制作用（抑制率分别为２４．１７％和２９．１９％）。结论：爱大霉素和庆大霉素在较高浓度时可使胞浆钙升高，这可能与其产生肾毒性有关     

Verapamil和Mn~（2＋）对缺氧及缺氧复氧心肌细胞内pH的影响

采用荧光探针ＢＣＥＣＦ／ＡＭ结合计算机图像处理技术测定不同时间的缺氧和缺氧复氧单心肌细胞内ｐＨ的变化以及Ｃａ２＋通道阻滞剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换抑制剂Ｍｎ２＋对其的影响。结果显示随着缺氧时间的延长，细胞内ｐＨ也逐渐降低。复氧开始４０ｍｉｎ内，细胞内ｐＨ并未恢复正常。Ｖｅｒａｐａｍｉｌ能减轻缺氧细胞内酸化程度并使其接近正常水平（Ｐ＞０．０５），却未能减轻缺氧复氧细胞内的酸化。无论是缺氧或缺氧复氧心肌细胞，Ｍｎ２＋均未能减轻细胞内的酸化程度。本实验结果提示缺氧和缺氧复氧时细胞内酸化途径并非完全一致。ＶｅｒａＰａｍｉｌ抑制缺氧细胞内ｐＨ下降是其保护缺氧心肌作用的机制之一。     

Verapamil和Mn~（2＋）对缺氧和复氧心肌细胞内Na~＋浓度的影响

采用荧光探针ＳＢＦＩ／ＡＭ结合计算机图像处理技术测定缺氧和复氧时单心肌细胞内Ｎａ＋的变化及钙通道阻滞剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换抑制剂Ｍｎ２＋对其的影响。结果表明随缺氧和复氧时间的延长细胞内Ｎａ＋均增加。Ｖｅｒａｐａｍｉｌ对缺氧或复氧细胞内Ｎａ＋无影响（Ｐ＞０．０５），Ｍｎ２＋能使复氧细胞内Ｎａ＋含量增加（Ｐ＜０．０１）。本文推断Ｖｅｒａｐａｍｉｌ不是通过降低细胞内Ｎａ＋浓度而发挥保护心肌作用，特异性强的Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换抑制剂会使复氧心肌细胞内Ｎａ＋含量增加而削弱其保护作用。     

三氟拉嗪对大鼠脑突触体内Ca2＋水平和Ca2＋，Mg2＋─ATP酶活性的作用

用Ｑｕｉｎ２法测得大鼠脑突触体内静息游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）为８５±１３μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ．三氟拉嗪（ＴＦＰ）１，５和１０μｍｏｌ·Ｌ－１对静息突触体［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，但能以剂量依赖方式增高６５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所致突触体［Ｃａ２＋］ｉ升高，从１９２±５８μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ分别达到２３３±６３，４３１±９９和６６１±１７３μｍｏｌ·ｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎ．ＴＦＰ５，１０和５０μｍｏｌ·Ｌ－１分别使突触体Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性降低３１％，４１％和４５％；使Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性降低３０％，３６％和３９％，提示ＴＦＰ可能是通过抑制钙调素，进而抑制Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性，使突触体［Ｃａ２＋］ｉ升高，促进神经末梢释放递质     

间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na~＋，K~＋－ATP酶，Ca~

间硝苯地平（ｍ－Ｎｉｆ，ｉｇ２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ１持续给药９周）可显著降低老龄肾性高血压大鼠（ＲＶＨＲ）血压和左室重量（Ｐ＜０．０１），增高心、脑微粒体Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性（Ｐ＜０．０１），降低Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性，体外量效关系研究发现，ｍ－Ｎｉｆ在较高剂量（１０～１０００μｍｏｌ·Ｌ－１）时可增高ＲＶＨＲ心脑微粒体Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性，且随剂量增加而增高。上述结果表明，ｍ－Ｎｉｆ可改善老龄ＲＶＨＲ心脑微粒体Ｎａ＋，Ｋ＋泵和Ｃａ２＋泵功能。     

甲状旁腺素对人成骨肉瘤细胞株SaOS-2内cAMP,IP3,Ca~(2+)的作用研究

目的通过研究ｈＰＴＨ（１～３４）对人成骨肉瘤细胞株ＳａＯＳ－２胞浆内ｃＡＭＰ、ＩＰ３、Ｃａ２＋的影响，来阐明ＰＴＨ与其膜上特异受体结合后的胞浆内主要信息传递途径。方法利用蛋白竞争结合法测定胞浆内ｃＡＭＰ，以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为荧光指示剂，激光共聚焦显微系统显示ＳａＯＳ－２内［Ｃａ２＋］ｉ的变化，离子交换层析法测定ｈＰＴＨ（１～３４）作用下胞浆内ＩＰ３的改变。结果ｈＰＴＨ（１～３４）可使ＳａＯＳ－２胞浆内ｃＡＭＰ明显升高且与其浓度呈正相关，其最佳作用时间为１０ｍｉｎ。ｈＰＴＨ（１～３４）能迅速提高ＳａＯＳ－２内［Ｃａ２＋］ｉ，而且作用３０ｓ时ＳａＯＳ－２胞浆内ＩＰ３升高即达最高峰，未发现百日咳毒素对此现象有抑制作用。结论ｃＡＭＰ及ＩＰ３／Ｃａ２＋两条信息途径均参与ｈＰＴＨ（１～３４）对成骨细胞的调节作用     

氯丙烯对神经细胞内Ca~(2 ),游离钙调蛋白,环腺苷酸含量和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

用培养的鸡胚脑神经细胞研究了１．０２和２．０４ｍｍｏｌ·Ｌ－１氯丙烯作用２４ｈ后细胞内Ｃａ２＋，游离钙调蛋白（ＣａＭ）和环腺苷酸（ｃＡＭＰ）含量及钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ）活性的改变．结果显示，随着氯丙烯浓度的增加，细胞内Ｃａ２＋分别增加了４．２和６．２倍，ｃＡＭＰ含量增加了２２％和３９％，Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ活性增加了２．８和５．０倍（Ｐ＜０．０１）；而游离ＣａＭ含量则分别减少了５５％和６９％（Ｐ＜０．０１）．结果提示氯丙烯引起病理性神经轴浆内微管和神经微丝堆积与细胞内Ｃａ２＋增加有关．这可能由于细胞内Ｃａ２＋增加，激活ＣａＭ，继而激活Ｃａ２＋／ＣａＭ－ＰＫⅡ，催化微管相关蛋白２和ｔａｕ－蛋白磷酸化，抑制微管组装，使解聚的微管堆积在轴浆内．     

维拉帕米对大鼠脑突触体内Ca^2＋和Ca^（2＋）Mg^（2＋）—ATP酶的影响

维拉帕米１０，５０和１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１能增加高Ｋ＾＋和去甲肾上腺素所致大鼠脑突触体内激离Ｃａ＾２＋的浓度，但使静息状态突触体内游离Ｃａ＾２＋浓度下降。Ｖｅｒ还抑制突触体Ｃａ＾（２＋）Ｍｇ＾（２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果提示：与静息状态不同，在神经末梢受到刺激时，Ｖｅｒ可能是通过抑制ＣａＭ，进而抑制Ｃａ＾（２＋）Ｍｇ＾（２＋）－ＡＴＰ酶活性，使胞浆内游离Ｃａ＾（２＋）升高，引起递质释放量增加。     

海马内钙离子水平对小鼠记忆巩固的影响

采用一次性被动回避反应模型，观察了海马（双侧）定位注射ＣａＣｌ２（２．９μｇ·只－１）和ＥＧＴＡ（１ｎｇ·只－１）对记忆巩固过程的影响。电击（０．３ｍＡ，５ｓ）后立即注射上述化合物，２４ｈ后检测，并运用Ｃａ２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞内钙离子的荧光探针，采用精密的ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统，检测了分离的单个神经细胞内游离钙及其变化。结果表明，与生理盐水对照组相比，海马内注射ＣａＣｌ２或ＥＧＴＡ都使小鼠的步入潜伏期缩短，说明记忆保持下降。以３Ｈ－亮氨酸为标记物进行的高体实验表明：ＣａＣｌ２或ＥＧＴＡ都使３Ｈ－亮氨酸参入海马突触体蛋白质的总量降低，但从ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳条带来看，受这两种化合物影响的突触体蛋白质分子量范围不完全一致。提示海马内游离Ｃａ２＋水平过高或过低都能损害记忆巩固过程，其作用机理与Ｃａ２＋影响突触体蛋白质合成有关。     

奈特液对H_（22）肝癌腹水瘤细胞Ca~（2＋）含量的影响

奈特液对Ｈ_（２２）肝癌腹水瘤细胞Ｃａ~（２＋）含量的影响张磊，谢克勤，孙克任山东医科大学毒理研究室（济南２５００１２）本研究采用钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－２ＡＭ定量测试法，检得小鼠Ｈ２２型腹水瘤细胞静息胞浆内游离钙浓度为２０６．５６±５．５５ｎｍｏｌ。以...     

普萘洛尔和苄普地尔消除左甲状腺素诱发的大鼠心脏肥厚和线粒…

目的：研究普萘洛尔和苄普地尔对左甲状腺素诱发的大鼠心脏肥厚及其线粒体Ｃａ＾２＋Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活力升高的影响。 方法：ｉｐ左甲状腺素１ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｄ＾－１×１０ｄ，诱发大鼠心脏肥厚，然后ｉｇ普萘洛尔或苄普地尔１０ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｄ＾－１×３ｄ治疗Ｃａ＾２＋Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活力及其酶动力学参数测定。 结果：肥厚左室线粒体Ｃａ＾２＋Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活力和Ｖｍａｘ分别为２５±４和３５     

粉防己碱对缺血顿抑大鼠心肌功能和ATP酶活力的影响

目的：观察粉防己碱（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）对缺血顿抑心肌的保护作用并分析与心肌ＡＴＰ酶活力的关系。方法：离体大鼠工作心脏，全心缺血３０ｍｉｎ再灌４０ｍｉｎ，无机磷显色法分析ＡＴＰ酶活力。结果：顿抑心肌收缩舒张功能均明显降低，再灌期末ＬＶＳＰ×ＨＲ仅恢复５２％±８％，ＬＶＥＤＰ抬高２９８％±６４％，ＣＯ仅恢复４０％±８％，心肌细胞膜和线粒体Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活力均下降，Ｔｅｔ（３０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ，３ｄ，１０μｍｏｌ·Ｌ－１灌流缺血全程）可使ＬＶＳＰ×ＨＲ恢复８５％±１２％，ＬＶＥＤＰ仅抬高１６６％±４４％，ＣＯ恢复７５％±１１％，心肌细胞膜及线粒体Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活力增高。结论：Ｔｅｔ对心肌缺血后顿抑损伤有一定保护作用，这一作用与维护顿抑期心肌细胞ＡＴＰ酶活力有关。     

兴奋毒性对海马脑片Ca~(2 )/CaM PK Ⅱ活性的影响

用离体孵育的大鼠海马脑片模型，研究兴奋毒性与Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫＩＩ活性的关系。结果表明，外源性谷氨酸或ＮＭＤＡ均可抑制Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫＩＩ的活性，此活性的抑制可被ＭＫ８０１完全拮抗，而ＤＮＱＸ却无明显拮抗作用；无胞外Ｃａ２＋时，谷氨酸导致的酶活性抑制程度不如有胞外Ｃａ２＋时显著；无胞外Ｍｇ２＋时，谷氨酸导致的酶活性抑制程度比有胞外Ｍｇ２＋时显著。结果提示兴奋毒性对Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫＩＩ活性的抑制与ＮＭＤＡ受体介导的兴奋毒性有关     

Mobilization of intracellular Ca~(2 ) modulates activation of Na~ /H~ exchange in thrombin-stimulated platelets

目的：研究凝血酶诱导的血小板活化中细胞内钙动员和Ｎａ＋／Ｈ＋交换的关系．方法：Ｆｕｒａ２负载测［Ｃａ２＋］ｉ和ＢＣＥＣＦ负载测ｐＨｉ．结果：凝血酶０１ＩＵ·Ｌ－１引起［Ｃａ２＋］ｉ和ｐＨｉ增加，［Ｃａ２＋］ｉ增加先于ｐＨｉ增加．在无钠溶液中，Ｎａ＋／Ｈ＋交换被抑制而［Ｃａ２＋］ｉ增加不受影响；用尼日利亚菌素（１ｍｇ·Ｌ－１）使胞内酸化可抑制［Ｃａ２＋］ｉ增加．用依他酸（ＥＧＴＡ）阻断外钙内流，胞浆碱化不受影响．伊屋诺霉素加ＥＧＴＡ耗竭胞内钙池时，胞浆硷化效应被取消，且静息ｐＨｉ更低，加入１ｍｍｏｌ·Ｌ－１外钙重新充填钙池，胞浆碱化效应又被恢复．结论：细胞内钙动员调控Ｎａ＋／Ｈ＋交换，后者需［Ｃａ２＋］ｉ增加达一定有效浓度．     

柴胡皂甙和甘草甜素抑制Na＋，K＋－ATP酶活性的构效关系

研究在离体条件下各种单体柴胡皂甙和甘草甜素抑制Ｎａ＋，Ｋ＋ＡＴＰ酶活性的构效关系。实验结果表明，各种柴胡皂甙抑制Ｎａ＋，Ｋ＋ＡＴＰ酶活性的作用强度依次为：ｂ１＞ｄ＞ｂ２＞ｂ４＞ａ＞ｂ３＞ｅ＞ｃ。柴胡皂甙化学结构中的Ｃ２３ＯＨ，Ｃ１６ＯＨ及Ｃ１１和Ｃ１３的共轭双烯可能对其抑制活性起重要作用。甘草甜素（ＧＬ），甘草次酸（ＧＡ）和生胃酮（１８β甘草次酸半琥珀酸双钠盐，ＣＸ）抑制Ｎａ＋，Ｋ＋ＡＴＰ酶活性的作用强度依次为ＧＡ≥ＣＸ＞ＧＬ。研究还证明，柴胡皂甙ｄ对Ｎａ＋，Ｋ＋ＡＴＰ酶的抑制为非竟争性抑制