丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注后凋亡诱导因子的影响

目的 研究丹红注射液对脑缺血再灌注后凋亡诱导因子(AIF)表达及神经元凋亡的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为3组,假手术组、局灶性脑缺血再灌注组(对照组)、丹红注射液治疗组(治疗组),改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,各组分别于1 d、3 d、5 d取脑组织,测定AIF及神经元凋亡的变化.结果 治疗组大鼠脑组织AIF及神经元凋亡在造模后的1 d、3d、5 d均明显低于对照组(P<0.05).结论 丹红注射液可通过抑制AIF的表达,减少神经元的凋亡,对大鼠脑缺血再灌注具有脑保护作用.     

丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的观察丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注（I/R）后大脑皮质缺血灶周围区Caspase-3、Survivin的时相表达及对神经细胞凋亡的影响。方法将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹红注射液治疗组（治疗组）时检测,应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型。假手术组于术后,模型组、治疗组于缺血2 h后再灌注6 h2、4 h、48 h、72 h时检测,应用免疫组化技术和原位末端标记法（TUNEL）检测不同时相各组缺血灶周围脑区Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达。结果大鼠I/R后在缺血灶周围区各个时间点均可见到Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达,治疗组与模型组比较,两组Caspase-3、Survivin和TUNEL阳性细胞的表达趋势基本一致,Caspase-3和TUNEL阳性细胞的表达高峰在I/R后24 h,Sur-vivin的表达高峰在I/R后48 h。治疗组各时间点Caspase-3和TUNEL阳性细胞的光密度值较模型组明显降低（P〈0.05）,Sur-vivin的光密度值较模型组明显升高（P〈0.05）。结论丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与丹红注射液促进Survivin的表达,抑制Caspase-3表达,减轻迟发性神经元的凋亡有关。     

依达拉奉对创伤性脑水肿大鼠AQP4表达的影响

目的 探讨依达拉奉对创伤性脑水肿大鼠AQP4表达的影响。方法采用Wistar大鼠建立颅脑创伤模型,分成治疗组和模型组,并用假手术处理大鼠作为对照组。治疗组腹腔注射依达拉奉3mg／kg,每12h注射一次;模型组给予相同体积的生理盐水。分别于给药后6h、12h、1d,3d、5d处死各组大鼠,取出脑组织,测定脑含水量及AQP4mRNA表达水平。结果与模型组相比,12h后各个时间点治疗组脑组织含水量明显低于模型组（P均〈0．05）;模型组脑组织AQP4mRNA表达在3d达高峰,然后维持高水平表达,明显高于对照组（P〈0．05）;治疗组在6hAQP4mRNA表达水平最高,然后持续回落,5d时与对照组表达水平接近。结论依达拉奉可明显抑制脑水肿引发的AQP4表达上调,减轻脑水肿形成。     

丹红注射液对大鼠局灶脑缺血后一氧化氮合酶的影响

目的 研究倍通注射液（丹红注射液）对大鼠局灶脑缺血后一氧化氮合酶（NOS）的变化。方法 将SD大鼠随机分为3组，假手术组、局灶脑缺血再灌注对照组（对照组）、倍通注射液治疗组（治疗组），建立大鼠自体血栓局灶脑缺血模型，各组分别于1d、3d、5d取大鼠脑组织，测定NOS及诱导型（iNOS）的活性。结果 治疗组大鼠脑组织总NOS和iNOS活性在造模后的各时间点（1d、3d、5d）均明显低于对照组（P〈0，05）。结论 倍通注射液可通过抑制总NOS和iNOS活性，减少NO释放，对大鼠局灶脑缺血脑细胞起到保护作用。     

地塞米松对脑出血大鼠模型脑组织AQP4表达的影响及意义

目的观察地塞米松对脑出血（ICH）大鼠模型脑组织水通道蛋白4（AQP4）表达的影响及意义。方法32只大鼠脑尾状核部位立体定向注入胶原酶建立ICH模型,随机分为观察1、2、3组和对照组各8只后单笼饲养,观察1、2、3组分别腹腔注射地塞米松1、15、30mg/kg,均为2次/d,连续3d;对照组常规饲养。检测各组脑含水量、血脑屏障通透性及脑组织AQP4蛋白及mRNA表达。结果用药3d后观察1～3组血脑屏障通透性、AQP4蛋白及AQP4 mRNA含量均低于对照组（P均〈0.05）,且AQP4蛋白及其mRNA表达与地塞米松呈剂量依赖性关系;观察1组脑含水量较对照组降低（P〈0.05）。结论地塞米松能降低ICH模型大鼠脑组织AQP4表达,此可能为其早期小量使用减轻脑水肿的机制之一。     

丹红注射液对大鼠慢性应激反应中心肌酶和HSP70表达的影响

目的 通过心肌酶和热休克蛋白(HSP)70的表达来观察慢性应激反应中丹红注射液对大鼠心肌的保护作用。方法 将健康成年SD大鼠55只随机分为空白对照组、丹红对照组、慢性应激组和慢性应激丹红组。空白对照组不进行慢性应激处理,也不注射丹红注射液;丹红对照组不进行慢性应激处理,仅每日经腹腔注射丹红注射液10 ml/kg;慢性应激组按照慢性应激反应模型进行处理;慢性应激丹红组在按照慢性应激反应模型进行处理的同时每日经腹腔注射丹红注射液10 ml/kg。待慢性应激持续到设定时间时（3周）,剖杀4组大鼠,① 观察各组大鼠心肌酶的变化。②同时采用免疫组织化学法检测各组大鼠心肌组织中HSP70的表达情况。结果 ①与空白对照组比较,丹红对照组、慢性应激组和慢性应激丹红组大鼠乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶同工酶 （CK-MB）显著升高（P<0.01）。慢性应激组LDH和CK-MB较丹红对照组显著升高（P<0.05）,慢性应激丹红组LDH和CK-MB较慢性应激组显著降低（P<0.05）;而丹红对照组和慢性应激丹红组之间无显著性差异。②丹红对照组、慢性应激组和慢性应激丹红组心肌组织HSP70表达均强于空白对照组。丹红对照组和慢性应激组之间HSP70表达无显著性差异。慢性应激丹红组心肌组织HSP70表达强于丹红对照组或慢性应激组。结论 丹红注射液的使用可有效抑制慢性应激大鼠LDH、CK-MB的升高,还可增高慢性应激大鼠心肌组织中HSP70的表达。     

AQP4、AQP9在便秘小鼠结肠黏膜中的表达

目的检测便秘模型小鼠升、降结肠黏膜水通道蛋白4、9(AQP4、AQP9)mRNA表达情况,探讨AQP4、AQP9与便秘之间的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测便秘组及对照组小鼠升、降结肠黏膜细胞AQP4 mRNA、AQP9 mRNA表达。结果对照组及便秘组小鼠升、降结肠均有AQP4 mRNA、AQP9 mRNA表达;便秘组升结肠中AQP4 mRNA表达量高于对照组,两组升结肠中AQP9 mRNA表达差异不显著;便秘组降结肠中AQP9 mRNA表达低于对照组,AQP4 mRNA表达高于对照组。结论便秘患者结肠AQP4 mRNA表达上调,AQP9 mRNA表达下调,AQP4、AQP9含量的增减会影响肠道水分的吸收与分泌,可能与便秘的发生、发展有一定的关系。     

脑挫裂伤后脑组织中AQP4的表达变化及意义

目的观察人脑创伤后挫裂伤脑组织中水通道蛋白4（AQP4）的表达变化,探讨其与脑水肿变化的关系。方法对20例颅脑损伤患者,于伤后2 h～5 d手术时取挫裂伤脑组织和非功能区正常脑叶（脑减压）组织（3例,为正常对照）,采用免疫组化法检测所有标本中AQP4,同时观察血脑屏障（BBB）指数及脑水肿的变化。结果颅脑损伤后2 h～5 d,脑挫裂伤区域脑水肿进行性加重,AQP4表达进行性升高,伤后24～72 h达高峰,二者呈正相关（P〈0.05）;正常脑叶组织中AQP4表达较挫裂伤区各时点均低（P均〈0.05）;伤后2～24 h AQP4表达与BBB指数呈正相关（P〈0.05）,余时点无相关性。结论颅脑外伤后脑挫裂伤组织AQP4表达上调,AQP4可能参与其脑水肿的形成过程。     

氯离子通道阻断剂对大鼠离体海马神经元凋亡的影响

目的 通过观察氯离子(Cl-)通道阻断剂对一氧化氮(NO)供体3-吗啉斯德酮胺(SIN-1)诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的效应,探讨Cl-通道在缺血性脑损伤中的作用.方法 离体培养12 d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、SIN-1处理组、SIN-1处理后和Cl-通道阻断剂组,对各组神经元分别在相应的时间点进行Hoechst荧光染色观察凋亡细胞数和MTT实验定量检测神经元的存活率.结果 SIN-1能明显诱导神经元凋亡(P<0.05),SITS和DIDS呈剂量依赖性地抑制NO诱导的神经元损伤,提高神经元的存活率,与SIN-1组相比差异显著(P<0.05).结论 Cl-通道阻断剂对NO诱导的大鼠海马神经元凋亡有一定的保护作用.     

丹红注射液治疗大鼠急性脑梗死的实验研究

目的 观察丹红注射液对大鼠局灶脑缺血模型的治疗作用。方法 采用自体血栓大脑中动脉闭塞模型，观察假手术组、局灶脑缺血组（对照组）、局灶脑缺血丹红注射液治疗组（治疗组）神经功能评分、脑梗死范围、脑含水量、病理学改变等指标的变化。结果 造模3d后治疗组脑含水量和神经系统评分明显优于对照组（P〈0．05）；大鼠脑梗死体积于造模第5天治疗组明显小于对照组（P〈0．05）；病理组织学观察也可见治疗组组织损伤减轻。结论 丹红注射液对局灶脑缺血有明显的治疗作用。     

参麦注射液对大鼠神经元内质网应激诱导凋亡的影响

目的 探讨参麦注射液对大鼠皮层神经元内质网应激诱导凋亡的保护作用.方法 体外培养SD乳鼠皮层神经元细胞,免疫组织化学、免疫荧光染色鉴定神经元纯度,流式细胞术AnnexinV、PI双标检测凋亡率及活性caspase-3、-9表达,Western印迹免疫分析GRP78、细胞色素C蛋白、Bcl-2蛋白表达,Fura-2/AM法荧光分光光度计检测细胞内钙浓度([Ca~(2+)]i).结果 SD乳鼠皮层神经元可纯化体外培养,2 μmol/L毒胡萝卜素作用神经元24、48 h细胞凋亡率分别是17.88%、21.38%,参麦治疗组分别是7.42%、8.16%,两组差异显著(P<0.05).胡萝卜素诱导神经元糖调节蛋白GRP78表达上调,活化caspase-3、-9,使细胞色素C蛋白表达增加,Bcl-2表达减少.参麦注射液促进细胞Bcl-2表达,抑制细胞色素C释放,减少活性caspase-3、-9含量,降低[Ca~(2+)]i浓度.结论 参麦注射液能抑制体外培养神经元内质网应激所致的凋亡可能与其降低[Ca~(2+)]i浓度有关.     

丹红注射液对急性脑梗死患者C反应蛋白的影响及疗效

目的研究丹红注射液对急性脑梗死患者神经功能及C反应蛋白(CRP)的影响。方法将我院临床确诊为急性脑梗死的住院患者80例随机分为两组各40例。对照组给予抗血小板聚集、调控血压血糖、降脂、营养神经等治疗,治疗组在对照组基础上加用丹红注射液40ml加入0.9%氯化钠溶液500 ml缓慢静脉滴注,1次/d,疗程为15d。观察治疗前后两组神经功能缺损评分,并测定治疗前后血清CRP水平。结果治疗组总有效率92.5%,对照组总有效率80.0%,两组总有效率比较差异有统计学意义(P0.05),治疗组疗效明显优于对照组,血清CRP水平治疗组明显低于对照组。结论丹红注射液治疗能改善急性脑梗死患者的神经功能,对急性脑梗死继发炎症反应有抑制作用。     

丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的探讨丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法采用结扎冠状动脉制备大鼠心肌缺血损伤模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹参注射液阳性对照组(10g/kg)、丹红注射液各剂量组(10、20、30g/kg)。除假手术组和模型组给予同体积生理盐水外,各组动物在术后12,23h分别尾静脉注射给药1次。术后24h,测定心肌梗死范围,检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及心肌组织MDA、SOD含量,并记录心电图ST段。结果丹红注射液(20,30g/kg)剂量组能明显减少心肌缺血损伤大鼠心肌梗死面积,分别为(23.26±5.95)%、(20.54±9.78)%,而模型组为(36.79±8.01)%;模型组心电图出现S-T段明显抬高(0.48±0.05)mV,而丹红注射液各剂量组能明显降低S-T段抬高(0.29±0.04),(0.22±0.04),(0.17±0.03)mV(均P0.01)。另外,丹红注射液能降低血清CK、LDH、AST活性、血清及心肌组织MDA含量,增加血清及心肌组织SOD活性。结论丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后Nogo-A表达和神经元凋亡

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注后轴突生长抑制因子Nogo-A表达和神经细胞凋亡。方法：36只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和缺血1h再灌注2h、6h、12h、1d,2d、3d、7d、14d组,每组4只。应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,分别用TUNEL法和免疫组织化学法观察神经细胞凋亡和Nogo-A表达。结果：假手术组海马、皮质和纹状体区可见少量凋亡神经细胞。再灌注2h凋亡细胞逐渐增多,3～7h达高峰,随后下降。Nogo-A表达于再灌注2h开始明显增加,并一直保持在较高水平。结论：脑缺血再灌注后Nogo-A表达增高,细胞凋亡也增加。     

颈动脉狭窄对大鼠认知功能及海马神经元凋亡的影响

目的探讨颈动脉狭窄大鼠认知功能改变与海马神经元凋亡及BCL-2、BAX蛋白表达的关系。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、狭窄2、4、8周组,每组9只大鼠。制备颈动脉狭窄模型后,各组采用Morris水迷宫检测记忆能力,TUNEL法观察海马神经元凋亡,免疫组化检测BCL-2、BAX蛋白表达。结果①狭窄组各时相点与假手术组比较,平均逃避潜伏期延长,平台象限游泳距离百分比降低,差异有统计学意义,P〈0．01。随狭窄时间的延长,平均逃避潜伏期逐渐增加,平台象限游泳距离百分比逐渐降低。②各狭窄组大鼠的凋亡神经元比例高于假手术组,随狭窄时间的延长,凋亡神经元的比例逐渐升高,差异均有统计学意义。③BCL-2蛋白在狭窄2周组达高峰,狭窄4周和狭窄8周组逐渐减弱,均高于假手术组,差异有统计学意义。④BAX蛋白表达在2周时表达增强,8周时达高峰,均高于假手术组,差异有统计学意义。结论颈动脉狭窄大鼠海马神经细胞BCL-2／BAX蛋白比例失衡引起海马神经细胞凋亡,可能是大鼠颈动脉狭窄后出现认知功能障碍的机制之一。     

片仔癀对局灶性脑梗死大鼠水通道蛋白4(AQP4)表达的影响

目的探讨片仔癀对局灶性脑梗死大鼠大脑皮层水通道蛋白4(AQP4)表达的影响及其分子作用机制。方法制备MCAO大鼠模型,将SD大鼠随机分为7组:假手术组,模型组,片仔癀大、中、小剂量组,尼莫地平组和脑得生组。造模前给药3d,造模后给药至第7天取材,采用免疫组织化学法观察各组大鼠大脑皮层AQP4的表达情况。结果与假手术组相比,各造模组AQP4的表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组AQP4的表达均显著下降(P<0.05);与尼莫地平组和脑得生组相比,片仔癀各剂量组AQP4的表达水平有所下降(P<0.05)。结论片仔癀可减少局灶性脑梗死大鼠大脑皮层AQP4的表达,减轻脑水肿,从而起到脑保护的作用。     

腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜AQP4、AQP8相关性表达

目的检测正常人、腹泻型肠易激综合征(IBS)患者升、降结肠黏膜水通道蛋白(AQP)4与AQP8的表达情况,探讨AQP4、AQP8的表达与腹泻型IBS的相关性。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法。结果AQP4在正常人、腹泻型IBS患者升结肠和降结肠所有标本的荧光生长曲线呈阴性,而AQP8的荧光生长曲线呈阳性。正常人和腹泻型IBS患者升结肠组织黏膜AQP8mRNA表达均显著高于降结肠(P=0.032,P=0.028);且无论在升结肠还是降结肠组织黏膜,腹泻型IBS患者AQP8 mNRA表达均显著低于正常人(P=0.030,P=0.012)。结论人体结肠组织中AQP4极少表达或无表达。生理状态下AQP8可能与结肠水吸收相关,腹泻型IBS的发生可能与AQP8的表达减少有一定相关性。     

丹红注射液对新鲜骨折愈合的影响

目的观察丹红注射液对骨折愈合过程干预的临床效果。方法将120例新鲜骨折患者随机分为治疗组60例,静脉注射丹红注射液40ml,2次／d。对照组60例,不用同类药物。手术30d后每两周行X摄片一次观察骨折愈合情况,观察局部疼痛及肿胀改善情况,在用药前及用药4周后测量ALP。结果两组临床疗效间差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组临床愈合时间平均（39．0±7．1）d;对照组临床愈合时间平均（52．0±6．9）d。两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组疼痛疗效：显效48例,有效9例,无效3例,总有效率95％;对照组显效8例,有效35例,无效17例,总有效率71％。两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论丹红注射液有明显的促进骨折愈合作用。缩短骨折愈合时间,减轻骨折后的局部疼痛和肿胀时间短,效果好。     

丹红注射液对老年不稳定型心绞痛的疗效及hs-CRP的影响

目的 观察丹红注射液老年不稳定型心绞痛患者HB-CRP的影响.方法 将62例患者随机分为治疗组和对照组,两组均予常规治疗,治疗组加用丹红注射液入液静脉滴注.结果 治疗组hs-CRP下降显著高于对照组.结论 丹红注射液治疗老年不稳定型心绞痛疗效肯定,且有抗炎症的作用.     

AQP4与PKC在大鼠CIR后脑水肿模型中的变化及作用

目的通过研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后水通道蛋白4（AQP4）、蛋白激酶C（PKC）表达水平的变化,来探讨两者与脑水肿之间的关系。方法通过线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血（MCAO）再灌注模型,动物随机分为正常对照组（Norm）、假手术组（Sham）、缺血再灌注组（CIR）。参照Garcia JH法进行神经功能缺损评分、用Elliot法检测脑组织含水量、免疫组化法检测AQP4及PKC的表达。结果 CIR后6h即有神经功能缺损,脑含水量在CIR12h明显升高,1~3d时达到高峰;AQP4表达在早期水平降低,从12h逐渐升高,至CIR 24h明显升高,3d达高峰;PKC在CIR后6h开始持续性升高,至第5d仍保持较高水平。结论早期的细胞源性脑水肿可能和PKC的升高有关,后期的血管源性脑水肿可能和AQP4的升高相关。