猪苓多糖硫酸酯的制备及活性测定

目的:制备猪苓多糖硫酸酯,同时测定其活性.方法:采用醇沉分级、大孔吸附树脂、聚酰胺树脂和脱蛋白法从中药猪苓中提取分离得到猪苓多糖,硫磺酸-吡啶法进行硫酸酯化,经Sephadex G-75、透析得到硫酸化猪苓多糖,并体外观察硫酸酯化多糖对羟基自由基清除作用.结果:猪苓多糖硫酸酯化前后均有清除Fenton反应由Fe2+-H2O2体系产生的羟自由基,硫酸酯化猪苓多糖对羟自由基的清除能力增强,并呈明显量效关系.结论:制备猪苓多糖硫酸酯的方法准确可靠,为猪苓多糖的进一步开发利用提供实验依据.     

硫酸酯化多糖的研究进展

 多糖作为广谱免疫促进剂用来治疗肿瘤、肝炎等免疫疾病早已被大家所接受，近10年来发现多糖 的衍生物特別是硫酸酯化多糖可以作为抗艾滋病的葯物。这种多糖衍生物有的作为病毒的反相转录酶抑制 剂;有的作为蛋白质激酶C的抑制剂。本文简述了它的作用机制，天然多糖硫酸酯的分离純化，以及衍生物 的制备方法及其鉴別。     

硫酸酯化当归多糖抗肿瘤实验研究

目的研究硫酸酯化当归多糖(SPAS)的抗肿瘤作用。方法以S180小鼠模型研究SPAS的体内抗肿瘤作用,及对脾脏、胸腺指数的影响。结果 SPAS对S180小鼠的肿瘤生长有抑制作用,40,80,160 mg.kg-1.d-1剂量组抑瘤率分别达到27.89%,34.69%,39.45%。160 mg.kg-1.d-1剂量组明显增加脾脏指数达到(6.51±0.51)mg.g-1;80,160 mg.kg-1.d-1剂量组明显增加胸腺指数分别达到(2.82±0.12),(3.44±0.26)mg.g-1。结论 SPAS在体内具有显著抗肿瘤活性。     

多糖的硫酸酯化研究探要

多糖是一类非特异性免疫增强化合物 ,能提高机体的免疫功能 ,增强抗病能力 ,有防老、防衰、防癌、抗癌、抗肝炎等作用 ,受到人们的普遍重视 ,得到了相应的研究和开发。含硫多糖 ,如硫酸软骨素、肝素等还有抗凝血、抗病毒等其它生理功能。通过化学改造能使这些多糖硫酸酯化合物的毒性更低 ,活性更高。 2 0世纪 6 0年代以来陆续发现 ,一些半合成硫酸化多糖 ,如香菇多糖、右旋糖酐、牛膝多糖的硫酸化衍生物 ,是多种胞膜病毒的强大抑制剂 ,尤其是具有抗HIV -1的活性 ,还有葡聚糖经硫酸化也得到与肝素相同的抗凝血活性结果 ,引起更广泛的重视。…     

硫酸酯化防风多糖的制备及其抗氧化作用研究

目的 对防风多糖(SPS)进行硫酸酯化修饰,并研究其抗氧化活性.方法 用三氧化硫-吡啶法对防风多糖进行硫酸酯化修饰得到硫酸酯化防风多糖(S-SPS),利用紫外、红外分析手段对S-SPS进行鉴定,通过气相色谱方法研究其单糖组成,并在体外化学模拟条件下,研究SPS和S-SPS的总还原能力以及对超氧阴离子(O2-)、羟基自由基(·OH)的清除作用.结果 SPS和S-SPS均由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳精组成,S-SPS的抗氧化活性明显好于SPS.结论 硫酸酯化可以改善防风多糖的水溶性,提高其抗氧化活性,是防风多糖分子修饰的一种好方法.     

正交试验法研究猪苓多糖提取工艺

目的：优选猪苓多糖的最佳提取工艺。方法：采用正交试验法，以煎煮液中水溶性多糖的含量为考察指标，对影响猪苓多糖的提取工艺因素进行了研究，用苯酚－硫酸法对煎煮液中的猪苓多糖进行含量测定；结果：优选出猪苓多糖的最佳提取工艺，重复试验结果满意。结论：猪苓多糖的最佳提取工艺为：用10倍量水，煎煮1．5h，煎煮4次。     

正交试验法研究猪苓多糖提取工艺

目的　优选猪苓多糖的最佳提取工艺。方法　采用正交试验法 ,以煎煮液中水溶性多糖的含量为考察指标 ,对影响猪苓多糖的提取工艺因素进行了研究 ,用苯酚 -硫酸法对煎煮液中的猪苓多糖进行含量测定 ;结果　优选出猪苓多糖的最佳提取工艺 ,重复试验结果满意。结论　猪苓多糖的最佳提取工艺为 :用 10倍量水 ,煎煮 1.5 h,煎煮 4次     

猪苓多糖及其注射剂的含量测定研究

利用比色法对猪苓多糖及其注射剂进行含量测定的研究，其最大吸收波长为625nm，线性范围16－80μg，相关系数0．9994，原料和注射剂的平均回收率分别为103．1％和103．4％，变异系数分别为2．7％和1．6％。本法操作简便，精密度高。     

假单胞杆菌、灵芝等几种菌的发酵液对猪苓菌生长的影响

 目的：证明在猪苓菌发酵过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液对猪苓多糖产生是否具有促进作用。方法：采用平板培养法、发酵培养法。平板培养法直接测定生长量；发酵培养所得的发酵液采用3，5-二硝基水杨酸法测定多糖含量。结果：在猪苓菌发酵培养过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液可使猪苓菌球数量增多、重量大、多糖含量高。以假单胞杆菌发酵液的处理效果最佳；在平板培养时，培养25d菌落直径达72．25mm，在发酵培养过程中，在最佳产糖期发酵液中粗多糖含量达7．800mg·ml^－1，而对照分别为48．63mm和5．200mg·ml^－1。结论：在猪苓菌丝体培养过程中加入假单胞杆菌、灵芝、金针菇等几种菌的发酵液均对其菌丝的生长及发酵过程中多糖的产生具有促进作用。     

猪苓菌酯酶同工酶及过氧化物同工酶的研究

 目的：研究不同来源猪苓菌株的酯酶同工酶及过氧化物同工酶图谱的变化规律。方法：采用聚丙烯酰胺圆盘电泳法。结果：同一猪苓菌株在不同培养天数同工酶谱带及活性不相同,但是具有一定数量迁移率（Rf）相同的谱带贯穿于整个培养时间,不同菌株之间具有特征性谱带。结论：同工酶谱带的多少及活性与菌丝的生长速度即代谢的强弱成正相关。     

猪苓多糖长循环脂质体的制备

目的 研究猪苓多糖长循环脂质体的制备方法，并对其质量进行控制。方法 用氯仿注入合并硫酸铵梯度法制备猪苓多糖长循环脂质体，并采用紫外-Sephadex法测定脂质体中猪苓多糖的含量和包封率。结果 猪苓多糖长循环脂质体平均粒径为100nm，药物包封率为55．3％。结论 用氯仿注入合并硫酸铵梯度法可制得包封率高、粒径小的猪苓多糖长循环脂质体。紫外-Sephadex法测定该脂质体的包封率准确性高、重现性好、简便易行。     

环境因子对猪苓菌丝体生长发育的影响

 目的 为系统地探讨不同环境因素对猪苓菌丝生长发育的影响,对pH,温度,不同光照条件等环境因素影响猪苓菌丝生长、菌丝多糖含量及是否能够诱导猪苓菌核形成进行了研究。方法 用改良的PDA培养基以平皿培养真菌的传统方法对猪苓在不同环境因素作用下菌丝的生长状况进行了分析,用菌落直径来判断猪苓菌丝的生长速度。以苯酚-硫酸法测定不同pH及温度条件下培养的猪苓菌丝的多糖含量。结果 初始pH为8时最适于猪苓菌丝生长;同时在这一条件下成功诱导了猪苓菌核形成;25 ℃是猪苓生长的最适温度;光照不利于猪苓菌丝生长。不同pH值的改良PDA培养基培养的猪苓菌丝多糖含量以pH 8, pH 9和pH 10组多糖含量最高;其次是pH 5组 和pH 6组;多糖含量最低的是pH 4和pH 7组。不同温度条件下培养的猪苓菌丝以5 ℃组多糖含量最高, 其次是15 ℃, 10 ℃及25 ℃ 3个组多糖含量较高, 多糖含量最低的是30 ℃组。结论 环境因子对猪苓菌丝生长发育有着重要的影响,为深入研究猪苓菌丝形成菌核的人工培养提供了参考。     

正交试验优选猪苓多糖长循环脂质体制备工艺的研究

目的研究猪苓多糖长循环脂质体的处方和制备工艺。方法采用逆相蒸发法制备脂质体。以紫外分光光度-Sephadex法测定脂质体中猪苓多糖的包封率和载药量,采用单因素和正交试验法优化猪苓多糖长循环脂质体的处方和制备工艺。结果优化后的脂质体平均包封率为98.24%,平均载药量为27.20%。结论脂质体制备工艺合理,紫外分光光度-Sephadex法测定猪苓多糖长循环脂质体包封率准确性高,重现性好,简便易行。     

Monosaccharide analysis and fingerprinting identification of polysaccharides from Poria cocos and Polyporus umbellatus by HPLC combined with chemometrics methods

Objective: Poria cocos and Polyporus umbellatus are similar medicinal fungi in traditional Chinese medicines. A method for fingerprint analysis of monosaccharide composition of polysaccharides by HPLC combined with chemometrics methods has been developed for characterization and discrimination of them in this research. Methods: The polysaccharides were extracted by decocting in water, and then completely hydrolyzed with hydrochloride. Monosaccharides in the hydrolyzates were derivatized with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) for HPLC analysis. More than 20 batches of P. cocos and P. umbellatus from different regions were analyzed. Results: The fingerprints of P. cocos showed five common characteristic peaks, which were identified by comparing with the reference substances. The five peaks corresponded to the derivatives of mannose, ribose, glucose, galactose, and fucose. At the same time, the fingerprints of P. umbellatus showed eight common characteristic peaks, of which seven were identified as the derivatives of mannose, ribose, rhamnose, glucose, galactose, xylose, and fucose. Moreover, the similarity of their fingerprints was respectively calculated by the Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of TCM published by China Pharmacopoeia Committee (Version 2004A). And the data were further processed by hierarchical cluster analysis (HCA) and principal component analysis (PCA). The similarity evaluation and HCA indicated that there were no significant difference in P. cocos or P. umbellatus samples from different geographical regions, but PCA was performed to characterize the difference in monosaccharide constituents between P. cocos and P. umbellatus, and linear discriminant analysis (LDA) showed the overall correct classification rate was 100%. Conclusion: The fingerprint analysis method of monosaccharide composition of water-soluble polysaccharides can distinguish Poria cocos and Polyporus umbellatus, and can be applied for the authentication or quality control for Poria cocos and Polyporus umbellatus.     

正交设计法优化培养基中美拉德反应条件以提高猪苓菌核产量的研究

 目的 用正交设计法优化培养基中美拉德反应的条件,以提高猪苓菌核产量。方法 以果糖和精氨酸作为美拉德反应的原料,经过调节pH后在一定温度下独立灭菌一定时间,之后与含蛋白胨和无机盐的培养基混合均匀并用于诱导猪苓菌核。以菌核干重为指标,对灭菌前pH值,果糖与精氨酸浓度比,灭菌时间（min）,灭菌温度（℃）4个因素进行了L₉（34）正交实验。结果 极差分析结合方差分析表明,灭菌前pH值对菌核产量具有显著影响。优化后反应条件为：灭菌前pH为10;浓度比为200∶1;灭菌时间为80 min;灭菌温度为121 ℃。菌核产率提高了75%,菌核干重提高到每皿（0.225±0.16） g。结论 相比优化前菌核产率为30%~50%,菌核干重为每皿0.1~0.15 g,新的反应条件显著提高了菌核产量。     

中药猪苓的生药学研究

报道了猪苓的植物来源、性状、显微组织特征、理化鉴别反应,多糖、总灰分、酸不溶性灰分及水溶性浸出物的含量测定,为猪苓的质量控制及药典标准规格的修订提供了参考依据。     

中药猪苓的生药学研究

报道了猪苓的植物来源、性状、显微组织特征、理化鉴别反应,多糖、总灰分、酸不溶性灰分及水溶性浸出物的含量测定,为猪苓的质量控制及药典标准规格的修订提供了参考依据。     

猪苓及猪苓多糖对BBN诱导的膀胱癌大鼠外周血T淋巴细胞亚群表达的影响

目的观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN诱导的膀胱癌大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布的影响。方法药物干预膀胱癌大鼠第6周、第12周后眼眶后静脉丛采血,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+、CD28+、CD25+及TCRγδ+表达变化。结果模型组外周血CD3+、CD4+CD3+和CD8+CD3+、CD28+的T淋巴细胞的百分率(均值)均明显低于空白对照组;药物干预第6周后,PPS及不同剂量猪苓组CD8+CD3+和CD28+与模型组比较均显著升高(P0.05);第12周后,PPS组CD4+CD3+的T淋巴细胞的百分率显著升高(P0.05),不同剂量猪苓组CD28+表达均升高,其中中剂量组升高显著(P0.05)。PPS组TCRγδ+的T淋巴细胞的百分率(均值)同模型组比较显著升高(P0.05)。结论 PPS可通过上调膀胱癌大鼠外周血的CD8+CD3+、CD28+及TCRγδ+T淋巴细胞水平,增强膀胱癌大鼠对抗原的免疫应答水平,从而促进免疫功能的恢复。