地锦草提取物抗真菌作用及对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的影响

目的 对地锦草提取物（EHE）进行体外抗真菌实验,探讨其抗真菌作用机制。方法 采用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》（M38 A）,测定地锦草提取物对82株临床常见真菌的最低抑菌浓度值（MIC）;酶联免疫吸附试验（ELISA）研究其对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的影响。结果 地锦草提取物对红色毛癣菌的平均MIC为446 μg•mL 1,石膏样毛癣菌值的平均MIC为652 μg•mL 1,紫色毛癣菌的平均MIC为1 024 μg•mL 1,许兰毛癣菌的平均MIC为896 μg•mL 1,疣状毛癣菌平均MIC为853 μg•mL 1,犬小孢子菌及4种念珠菌的平均MIC均＞1 024 μg•mL 1;地锦草提取物256 μg•mL 1时,可显著降低红色毛癣菌中角鲨烯环氧化酶的活性（P＜0.01）。结论 地锦草提取物有显著的抗真菌活性,对皮肤癣菌的敏感性比念珠菌高;其抗真菌机制可能与抑制角鲨烯环氧化酶的活性有关。     

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系 HO-8910PM的抑制作用

［摘要］目的观察参一胶囊（Rg3）对高转移人卵巢癌细胞系HO 8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组：阴性对照组（A组）：只加新鲜的全培养液；低浓度组（B组）：含10 μg•mL 1 Rg3培养液；中浓度组（C组）：含20 μg•mL 1 Rg3培养液；高浓度组（D组）：含40 μg•mL 1 Rg3培养液；顺铂阳性对照组（E组）：含10 μg •mL 1顺铂的培养液；顺铂+Rg3联合用药组（F组）：含10 μg•mL 1顺铂+20 μg•mL 1 Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制（CCK 8法）进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO 8910PM细胞有明显的抑制作用，显示了较好的细胞毒活性作用（P＜0.05）。Rg3与顺铂联合用药时，细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似，但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用，Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用，这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。     

温郁金二萜类化合物C对人结肠癌细胞SW620增殖的影响

目的观察温郁金醚提物中二萜类化合物C（以下简称化合物C）体外对人结肠癌细胞SW620生长、细胞凋亡和细胞周期的影响。方法以顺铂（DDP）为阳性对照药物,采用噻唑蓝（MTT）法检测化合物C对SW620细胞增殖的抑制作用; An nexin V FITC标记流式细胞术（FCM）检测化合物C对SW620细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测化合物C对SW620细胞周期的影响。结果MTT法显示化合物C对SW620的半数抑制浓度（IC50）为24.16 μg•mL 1,顺铂为45.80 μg•mL 1;化合物C较低浓度时的抑制率与阳性对照组(DDP组)相似,在30,50,70 μg•mL 1时的抑制率与对照组比较,差异有统计学意义（均P＜0.05）;FCM显示,化合物C能诱导SW620细胞凋亡,其诱导凋亡率呈现一定的浓度和时间依赖性,48 h后化合物C70 μg•mL 1组凋亡率为33.55%;化合物C能将SW620细胞阻滞于G1期,减少肿瘤细胞在S期和G2/M的比例。结论化合物C能诱导SW620细胞凋亡,阻滞其细胞周期,抑制细胞增殖,是温郁金发挥抗肿瘤作用的有效成分之一。     

丝裂霉素C联合原花青素对人膀胱癌BIU87细胞的生长抑制作用

［摘要］目的探讨丝裂霉素C（MMC）与葡萄籽提取物原花青素（grape seed procyanidin extract, GSPE）联合应用对人膀胱癌BIU87细胞的生长抑制作用。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法测定MMC和GSPE单独和联合应用时对人膀胱癌BIU87细胞生长的抑制作用,并应用Chou Talalay联合指数法定量分析药物之间的相互作用效果。结果MMC、GSPE单独应用时,BIU87细胞生长的抑制作用随药物浓度的增加而增加,中效浓度分别为15.422,195.865 μg•mL 1。MMC与GSPE联合应用时,作用效果表现为在低浓度（0%＜fa＜37%）时呈协同作用（CI＜1）,高浓度（37%＜fa＜100%）时呈拮抗作用（CI＞1）,中效浓度为109.496 μg•mL 1 （其中MMC 8.111 μg•mL 1,GSPE 101.385 μg•mL 1）。结论MMC和GSPE相互作用的效果在低浓度时呈协同作用,高浓度时呈拮抗作用。     

镨三元配合物对HL60细胞生长代谢热动力学的影响

目的观察水杨酸硫代脯氨酸镨三元配合物{［Pr（C7H5O3）2（C4H6NO2S）］•2H2O }对体外培养HL 60细胞生长代谢热动力学的影响。方法应用微量量热法绘制［Pr（C7H5O3）2（C4H6NO2S）］•2H2O作用时HL 60细胞生长代谢产热曲线,解析生长代谢速率常数（κ）、最大热输出功率（Pmax）、达峰时间（tmax）及配合物对细胞生长代谢的抑制率（I） 等热动力学参数,实验72 h应用显微观测法检查细胞凋亡情况。结果不同浓度［Pr（C7H5O3）2（C4H6NO2S）］•2H2O处理HL 60细胞后,细胞生长代谢受到不同程度抑制,并呈浓度依赖性;［Pr（C7H5O3）2（C4H6NO2S）］•2H2O达到4.0 μg•mL－1时,肿瘤细胞κ和Pmax明显减小,I明显增大。结论［Pr（C7H5O3）2（C4H6NO2S）］•2H2O影响HL 60细胞生长代谢,且具有剂量 效应关系,其有效作用浓度为4.0 μg•mL－1。     

固相萃取离子色谱法测定反义寡核苷酸药物杂质

目的建立同时测定寡核苷酸原料药中杂质醋酸（MCAA）、二氯乙酸（DCAA）、氯离子（Cl－）含量的固相萃取离子色谱（IC）法。方法Ionpac AS 23（4 mm×250 mm）分析柱;Ionpac AG 23（4 mm×50 mm）保护柱;流动相：0.8 mmol•L－1 碳酸氢钠/4.5 mmol•L－1碳酸钠;抑制型电导检测器。结果MCAA、DCAA和Cl－的标准曲线方程分别为：Y＝ 5.230 7X + 0.014 （r＝0.999 7）,Y＝ 19.762X－0.007 2 （r＝0.999 9）和Y＝507.4X－0.746 2 （r＝0.999 8）;MCAA在0.002～0.400 μg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,DCAA在0.000 624～0.156 μg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,Cl－在2.4×10－3～1.5 mg•mL－1浓度范围内呈良好的线性关系,其检测限分别为0.02,0.312 ng•mL－1和0.01 μg•mL－1。结论该方法操作简便、快速,结果准确,可用于反义寡核苷酸原料药中杂质的控制。     

高效液相梯度洗脱法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中3组分的含量

（1. ［摘要］目的建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中诺氟沙星、甲硝唑和丙酸倍氯米松的含量。方法Kromasil C18 柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）,流动相为甲醇 乙腈 0.025 mol•L 1磷酸溶液（用三乙胺调至pH至3.0） 注射用水,梯度洗脱。结果诺氟沙星、甲硝唑和丙酸倍氯米松的线性范围分别为15.0～150.0 μg•mL 1（r＝0.999 4）, 15.1～151.0 μg•mL 1（r＝0.999 3）和2.6～ 26.0 μg•mL 1（r＝0.999 4）;平均回收率分别为99.5%, 99.7%和99.5%;RSD分别为0.80%,0.78%和0.92%（n＝9）。结论该方法操作简便,快速,准确度较高,适合复方诺氟沙星滴耳液含量测定。     

丁香对幽门螺杆菌的体外抑菌作用

［摘要］目的考察丁香挥发油及丁香酚体外抑制幽门螺杆菌的活性。方法水蒸气蒸馏法提取丁香挥发油,采用高效液相色谱法测定挥发油丁香酚的含量。以氨苄西林为对照,体外法测定丁香挥发油、丁香提取挥发油后的水提取物及丁香酚对8种幽门螺杆菌菌株的最小抑菌浓度（MIC）。结果氨苄西林对8种幽门螺杆菌菌株的MIC范围为1.25～2.50 μg•mL 1,丁香挥发油的MIC范围为5.00～10.00 μg•mL 1,丁香酚的MIC范围为2.50～5.00 μg•mL 1,丁香提取挥发油后的水提取物无抑菌作用。结论丁香抑制幽门螺杆菌的活性成分是其挥发油中的主要成分丁香酚。     

反相高效液相色谱法测定人血浆洛拉曲克浓度

目的建立测定人血浆洛拉曲克浓度的反相高效液相色谱法。方法以DiamonsilTM C18反相柱（150 mm×4.6 mm, 5 μm）为色谱柱,流动相为0.03 mol•L 1醋酸铵 甲醇（40：60）;流速：0.8 mL•min 1;柱温：40 ℃;检测波长： 233 nm。以乙酸乙酯与二氯甲烷（80：20）为提取剂。结果洛拉曲克的高、中、低（50.0, 10.0,1.0 μg•mL 1）3种浓度平均回收率分别为98.72%,97.86%,101.27%,日内、日间差RSD均＜7%（n＝5）;分析方法的检测限为1.0 μg•mL 1;线性范围为1.0～50.0 μg•mL 1。标准曲线方程： Y＝1.73X－5.29,r＝0.999 8（n＝8）。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

慢性阻塞性肺疾病患者小剂量茶碱的血药浓度监测

［摘要］目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者小剂量茶碱治疗的合理血药谷浓度,并分析影响茶碱血药浓度的因素。方法对60例接受小剂量茶碱治疗的患者的血药浓度监测结果进行了回顾性分析。结果茶碱血清浓度＜3 μg•mL 1的 2例,3～6 μg•mL 1的53例,肺心病患者茶碱血药浓度偏高; 嗜烟患者茶碱血药浓度偏低。结论小剂量茶碱治疗COPD患者时,建议血清谷浓度调控在3～6 μg•mL 1。吸烟对茶碱血药浓度有明显影响。     

硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系

目的硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系。方法 Brdu ELISA法测细胞增殖活性;Boyden小室培养测细胞的迁移率;Western blot测细胞uPA、NF-κB的蛋白水平;细胞免疫化学测NF-κB细胞表达及细胞定位。结果 (1)与对照组(无血清培养基组)相比,10%FCS组细胞增殖活性与迁移率明显增高(P<0.05);与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移,硼替佐米浓度为(4μg.L-1),人胃癌SGC-7901细胞增殖活性与迁移率均明显降低(P<0.05);与PDTC组(10μmol.L-1)相比,两者无明显差别;(2)与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB蛋白表达,硼替佐米浓度为(4μg.L-1)时uPA、NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05);与NF-κB特异性抑制剂PDTC组相比,两组uPA、NF-κB表达均无明显差别;硼替佐米浓度为(4μg.L-1)能明显降低NF-κB核蛋白含量,与PDTC组相比,两者无显著差异(P>0.05);(4)细胞免疫化学结果示:硼替佐米(4μg.L-1)抑制10%FCS诱导人胃癌SGC-7901细胞NF-κB核移位。结论①硼替佐米抑制血清诱导胃癌SGC-7901细胞增殖迁移及uPA、NF-κB蛋白表达,②硼替佐米降低胃癌SGC-7901细胞侵袭力可能与其抑制NF-κB活性,降低UPA水平有关。     

丙泊酚对体外内毒素激活人中性粒细胞NF-κB亚单位p65蛋白的影响

目的观察丙泊酚对内毒素(LPS)激活后人体中性粒细胞(PMN)NF-κB p65的表达及对PMN凋亡的影响。方法采集20例健康志愿者外周静脉血,分离PMN后分为五组:C组,加入生理盐水作为对照;LPS组,加入LPS 100ng/L);P1组,LPS+丙泊酚2μg/ml;P2组,LPS+丙泊酚4μg/ml;P3组,LPS+丙泊酚8μg/ml。孵育2.5h后,提取RNA;用RT-PCR法检测p65mRNA,Western blot检测p65蛋白含量,流式细胞术检测PMN凋亡。结果 LPS 100ng/L可以显著激活PMN,使p65表达大量增加。实验剂量的丙泊酚均可不同程度抑制LPS激活后PMN p65的表达(P<0.05);2-8μg/ml浓度的丙泊酚可剂量依赖性增加LPS导致的PMN凋亡(P<0.05或P<0.01)。结论丙泊酚2-8μg/ml可抑制PMN p65的激活,促进LPS激活后的PMN凋亡。     

五灵胶囊中部分化学成分对脂多糖诱导枯否细胞释放炎症因子的影响

目的 观察五灵胶囊(Wuling capsules,WL)中部分化学成分对脂多糖(lipopolysaccharider,LPS)诱导大鼠原代枯否细胞(Kupffer cell,KC)表达ERK(extracellular signal-regulated kinase)和核因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)调节炎症因子和介质的作用。 方法 分离大鼠KC,采用60 μg·L^-1 LPS诱导KC分泌炎症因子及NOS,ELISA测定TNF-α、IL-6、IL-8,比色法测定NOS,Western blot检测全蛋白ERK、p-ERK、NF-κBp50、NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IκK、p-IκB及核、浆蛋白NF-κBp65、p-NF-κBp65的变化。 结果 WL明显下调LPS活化KC表达p-ERK、p-NF-κBp65、p-IκK、p-IκB蛋白,模拟WL混合成分(Mix)及6单体成分明显下调LPS活化KC表达p-ERK和p-NF-κBp65信号通路蛋白。各受试药物组均能降低核内p-NF-κBp65表达,减少p-NF-κBp65入核抑制炎性基因转录,降低活化KC过量分泌TNF-α、IL-6、IL-8和NOS。 结论 WL中五味子醇甲、五味子乙素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA、柴胡皂苷D是干预LPS诱导KC表达ERK、NF-κB信号通路蛋白,抑制炎性因子与介质基因转录而减少TNF-α、IL-6、IL-8和NOS分泌的有效成分。     

冬凌草甲素抑制体内外卵巢癌生长的作用

目的:探讨冬凌草甲素对体内外卵巢癌生长的影响及其作用机制。方法:冬凌草甲素作用人卵巢癌细胞株HO-8910PM后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot检测卵巢癌细胞中核因子(NF)-κB和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达;建立起裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,观察冬凌草甲素对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67、NF-κB和XIAP的阳性表达。结果:HO-8910PM细胞经不同浓度冬凌草甲素(10、20、40μmol·L-1)作用24h后,细胞存活率分别为(80.14±9.84)%、(71.68±6.51)%和(64.58±5.24)%,均低于对照组(96.12±4.23)%,差异有统计学意义(P<0.05)。冬凌草甲素(40μmol·L-1)作用HO-8910PM细胞24h后,诱导(15.9±3.4)%的HO-8910PM细胞发生早期凋亡,高于对照组的(1.7±0.3)%,差异有统计学意义。3种浓度(10、20、40μmol·L-1)的冬凌草甲素作用24h,均可抑制HO-8910PM细胞中NF-κB的表达;而低浓度(10μmol·L-1)冬凌草甲素对HO-8910PM细胞中XIAP蛋白无明显抑制作用,高浓度冬凌草甲素(20和40μmol·L-1)明显抑制XIAP蛋白的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,实验组中Ki-67、NF-κB和XIAP的表达强度均低于对照组(P<0.01)。结论:冬凌草甲素可显著抑制体内外卵巢癌的生长,该作用机制可能是冬凌草甲素通过抑制NF-κB及其调控蛋白XIAP的表达来抑制卵巢癌的生长。     

辛伐他汀对K562细胞NF-κB信号通路的影响

目的 探讨辛伐他汀是否依赖核因子(NF)-κB信号通路分子的变化诱导K562细胞凋亡.方法 体外培养K562细胞,首先用流式细胞术检测辛伐他汀对K562细胞凋亡的影响,RT-PCR分析NF-κB信号通分子转录水平的变化.然后构建裸鼠K562细胞移植瘤模型,TUNEL法检测辛伐他汀对裸鼠移植的K562细胞晚期凋亡的影响,RT-PCR检测裸鼠体内K562细胞NF-κB信号通路分子转录水平的变化.结果 辛伐他汀在体外能明显引起K562细胞发生凋亡,NF-κB通路大多数分子出现差异表达.不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠身上移植的K562细胞发生凋亡,并随药物剂量的增加凋亡率逐渐增高(P＜0.01);辛伐他汀能够引起NF-κB信号通分子在转录水平出现明显差异表达(P＜0.01).结论 辛伐他汀可能通过引起NF-κB信号通路分子的变化来诱导K562细胞凋亡的发生.     

8-羟基喹啉酮对HepG2细胞氧化性DNA损伤的诱导作用(英文)

目的评估8-羟基喹啉酮(CuQ)对HepG2细胞的DNA损伤作用并阐明其可能的作用机制。方法 CuQ 0～4μmol.L-1处理HepG2细胞不同时间后,通过单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤;分光光度法测定过氧化氢酶活性;苯二醛法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)水平;硫代巴比妥酸反应物(TBARS)法检测细胞内脂质过氧化水平;Western印迹法检测NF-κB p65的变化;免疫组化方法检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达水平。结果 HepG2细胞与CuQ 0.5～4μmol.L-1作用1 h后,DNA的迁移距离明显增加(P<0.05),提示CuQ可引起DNA链断裂。CuQ能够造成细胞内GSH水平以及过氧化氢酶活性的降低。随着CuQ剂量的增加及染毒时间的延长,NF-κB由细胞浆逐渐转移至细胞核。CuQ还可以引起细胞内TBARS水平增高及8-OHdG表达水平的增强。采用GSH合成特异抑制剂DL-甲硫氨酸磺酰亚胺(BSO)预处理细胞,可明显增强CuQ对HepG2细胞DNA的损伤(P<0.05)。结论 CuQ可造成HepG2细胞氧化性DNA损伤,其作用机制与氧化应激及NF-κB p65在细胞核蓄积增高有关。     

Composition analysis and hpyerglycemic activity of the fruit of Phyllanthus emblica L.

OBJECTIVE To investigate the hpyerglycemic activity and elucidate the active composition of the fruit of Phyllanthus emblica L.,an edible and medicinal plant used for traditional Chinese medicine and Tibetan medicine to cure the blood disease,bacon disease,liver disease,heart disease and hypertension.METHODS The LO2 normal liver cell lines were used to investigate the hpyerglycemic activity,The LO2 cells were treated with 100,200 and 400μg·mL-1 extracts of P.emblica L.;real-Time PCR was used to detect the expression of glucose transporter type 2(GLUT-2)and peroxisome proliferator-activated receptor-γ(PPARγ)mRNA.The PPRE(peroxisome proliferator response element)and NF-κB activities were detected by luciferase method.The chemical compositions were analyzed by HPLC-MS.RESULTS The expression of GLUT-2 and PPARγmRNA were significantly increased treated with 400μg·mL-1 extracts of P.emblica L.(P<0.05)and in a dose-dependant manner;PPRE activity was significantly increased in a dosedependant manner(P<0.05);however,NF-κB activity induced by LPS was inhibited also in a dose-dependant manner(P<0.05).The chemical composition analyzed by HPLC-MS showed that the gallic acid was the major component in P.emblica L.CONCLUSION P.emblica L.showed promising hpyerglycemic activity and the gallic acid was the main constituent.     

红景天苷对脂多糖诱导的支气管上皮细胞损伤的保护作用

目的：探讨红景天苷对脂多糖（LPS）诱导的正常人支气管上皮细胞（NHBE）损伤的保护作用及机制。方法：培养NHBE细胞,调整其细胞的密度为每毫升含有1＆#215;104个,给予不同浓度的红景天苷（3.3、10、30μg·mL-1）作用24 h,MTT检测细胞的活力,观察红景天苷在正常的情况下对人支气管上皮细胞的影响。在此基础上,以终浓度为2μg·mL-1的LPS作用NHBE细胞6 h,诱导其损伤,然后给予红景天苷24 h,MTT检测细胞活力,收集上清液,ELISA试剂盒检测炎症因子IL-6（白介素-6）、IL-1β（白介素-1β）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）的水平,收集细胞,用Western blot方法测定细胞中的蛋白NF-κB（核因子）、MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）的表达。结果：在正常条件下,红景天苷对人支气管上皮细胞的活力无影响,没有损伤作用。红景天苷可明显降低培养液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平（P〈0.01）,降低细胞中NF-κB、MAPK的表达（P〈0.01）。结论：红景天苷可以通过降低IL-6、 IL-1β、TNF-α的水平来减轻LPS诱导的NHBE细胞的损伤,减轻炎症反应。     

青藤碱对胶原诱导性关节炎小鼠肿瘤坏死因子-α、白介素-17及核因子-κB的影响

目的 观察青藤碱(SIN)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠关节炎指数(AI)评分、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)及滑膜核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响.方法 将30只DBA/1小鼠用随机数字表法分为正常组、CIA组、SIN组3组,每组各10只,诱导CIA组与SIN组小鼠建立CIA模型,予青藤碱(SIN)药物干预SIN组,对三组分别进行AI评分,测定血清TNF-α、IL-17的水平及滑膜NF-κB蛋白的表达.结果 SIN组和CIA组TNF-α、IL-17的水平及滑膜NF-κB蛋白的表达均较正常组升高,且SIN组小鼠的AI评分较CIA组明显降低,血清TNF-α[(170.73±11.05)pg·mL-1比(347.97±13.45)pg·mL-1,F=1021.67,P<0.01]、IL-17[(470.30±122.02)pg·mL-1比(621.78±48.96)pg·mL-1,F=184.42,P<0.01]水平明显减少,滑膜NF-κB[(0.53±0.04)pg·mL-1比(0.84±0.04)pg·mL-1,F=804.05,P<0.01]蛋白的表达下调.结论 SIN能改善CIA小鼠关节肿胀,降低血清TNF-α、IL-17的分泌,这可能与其下调了滑膜NF-κB的表达有关.