硒及抗氧化物抑制小鼠肺Arthus血管炎发生机制新概念的研究

本实验成功地建立了小鼠肺Ａｒｔｈｕｓ血管炎模型，并为研究免疫复合物性炎症损伤发生的机理提供了可靠的基础。通过给小鼠模型服用补体活化抑制剂兼有抗氧化作用的亚硒酸钠或不同的活性氧捕捉剂甘草类黄酮以及ＶｉｔＥ等，发现它们均能抑制小鼠肺Ａｒｔｈｕｓ血管炎的发生，并在动物体内实验验证了补体活化与活性氧的产生之间存在有通过多形核白细胞（ＰＭＮ）的呼吸爆发相互作用，反馈放大引发炎症和组织损伤的关系。这一新概念的     

硒及维生素E抑制补体——中性粒细胞活化反馈机制参与炎症应答的调控

笔者发现并验证补体介导炎症操作的机制是补体活化激活中性粒细胞（ＰＭＮ）呼吸爆发所释放的活性氧自由基（ＲＯＳ）能再次活化补体,在补体－ＰＭＮ－ＲＯＳ之间形成的这一盯互反馈活化、增强炎症应答的辅助机制有其特殊的参与调节炎症应答的作用,即补体活化的抑制或ＲＯＳ的清除皆能阻滞此活化反馈机制而下调炎症应答。为验证此设想,笔者选择补体活化抑制剂亚硒酸钠（ＳＳ）、抗氧化剂维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）与甘草类黄酮（ＧＦ）抑制补体－ＰＭＮ－ＲＯＳ活化反馈机制,在试管实验中利用化学发光技术,在ＰＭＮ及补体混合培养液中以佛波酯（ＴＰＡ）或菊糖单独活化ＰＭＮ或补体后检测活性氧的产生量及补体的活化程度;并在小鼠体内实验中观察肺、肝及皮肤血管炎模型的发生率。结果证实此活化反馈上调炎症应答机制的存在;补体活化的抑制或ＲＯＳ的清除皆能抑制上调炎症应答     

亚硒酸钠在小鼠体内对补体活化的抑制作用

本实验利用火箭免疫电泳(RIE)检测补体C3活化的方法,通过小鼠的体外及体内试验,发现亚硒酸钠(Na_2SeO_3)对小鼠C3在不同活化剂活化的情况下有不同程度的抑制现象。其中对Inulin引起的活化的抑制最为明显,体外和体内实验组与对照组相比均有显著性差异(P<0.05)。而小鼠凝聚IgG引起活化的抑制则弱,实验组与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。说明亚硒酸钠对于补体系统活化的旁路途径有一定的抑制作用。     

亚硒酸钠与维生素C联合应用对银屑病模型抑制作用的研究

目的研究亚硒酸钠与维生素C联合应用对银屑病小鼠模型肝脏、肾脏中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量及阴道上皮有丝分裂的影响。方法使用昆明种雌性小鼠建立阴道上皮有丝分裂银屑病模型。将小鼠随机分为8组,阴性对照组（A组）、阳性对照组（B组）,亚硒酸钠低、中、高剂量组（C、D、E组）,亚硒酸钠-维生素C低、中、高剂量组（F、G、H组）。分别给药12d。最后1次给药1h后,腹腔注射秋水仙碱,脱颈椎处死小鼠。取肝、肾组织制备成匀浆,测其中蛋白含量、SOD、GSH-PX活性和MDA含量。光学显微镜下观察细胞有丝分裂。结果阳性对照组和各补硒组小鼠肝中GSH-PX及SOD活性显著高于阴性对照组(P＜0.05),MDA的含量与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);肾中各组GSH-PX活性显著高于阴性对照组(P＜0.05),SOD的活性及MDA的含量与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。亚硒酸钠及亚硒酸钠-维生素C的各剂量组均可显著抑制小鼠阴道上皮的有丝分裂（P＜0.05）,不同剂量的亚硒酸钠组间及亚硒酸钠-维生素C组间与阳性对照组间差异无统计学意义。结论亚硒酸钠可提高银屑病小鼠肝、肾中GSH-PX活性,促进体内抗氧化系统的作用,有效抑制阴道上皮有丝分裂,且亚硒酸钠与维生素C可能并无协同作用。     

亚硒酸钠、维生素E对被动吸烟大鼠肺部炎症和抗氧化能力的影响

目的研究亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟大鼠肺部炎症和抗氧化能力的影响。方法将大鼠随机分为5组(每组10只),A组:正常对照组;B组:模型组;C组:每天吸烟3次,亚硒酸钠灌胃;D组:每天吸烟3次,维生素E灌胃;E组:每天吸烟3次,维生素E+亚硒酸钠灌胃,连续6周。通过肺组织HE染色观察气道炎症改变、收集支气管肺泡灌洗液进行细胞计数并分类。取血测活性氧类物质(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)。结果各用药组气道炎症浸润较被动吸烟组明显减轻,其SOD、GSH-Px含量均有不同程度的升高(P<0.05),ROS和MDA含量降低(P<0.05)。结论亚硒酸钠、维生素E可对抗被动吸烟引起的氧化损伤和清除过量自由基的作用,从而减轻肺部炎症。     

亚硒酸钠对HL—60细胞生长,分化和环核苷酸水平的影响

研究亚硒酸钠对人急性白血病细胞（ＨＬ－６０细胞，ＡＭＬ－Ｍ２型白血病细胞）生长、分化及胞内环核苷酸水平的影响。方法ＨＬ－６０细胞用ＲＰＭＩ１６４０培养液培养，对比研究加与不加亚硒酸钠的差别，环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）、环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）水平的测定用放射免疫分析法。结果１．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ或３．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠能显著抑制ＨＬ－６０细胞的生长，且呈剂量依赖性，１．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠能促进ＨＬ－６０细胞的分化，对静息的胞内ｃＧＭＰ水平有明显的降低作用，对照组（０．０７±０．０２９）ｐｍｏｌ／１０６ｃｅｌｓ，３０ｍｉｎ，亚硒酸钠组（０．０６±０．０１７）ｐｍｏｌ／１０６ｃｅｌｓ，３０ｍｉｎ（Ｐ＜０．０５）。对肾上腺素刺激的胞内ｃＧＭＰ水平也有明显的降低作用，对照组（０．０７±０．０１８）ｐｍｏｌ／１０６ｃｅｌｓ，３０ｍｉｎ，亚硒酸钠组（０．０５±０．０１４）ｐｍｏｌ／１０６ｃｅｌｓ，３０ｍｉｎ（Ｐ＜０．０５）。结论亚硒酸钠的抑瘤作用可能与降低细胞内ｃＧＭＰ水平有关。     

亚硒酸钠对HL—60细胞的分化诱导作用

目的观察亚硒酸钠对人急性髓系白血病ＨＬ－６０细胞系的诱导分化作用。方法ＨＬ－６０细胞在含８×１０－６ｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠的ＲＰＭＩ１６４０培养液中置３７℃、５％ＣＯ２、９５％空气、饱和湿度培养５天，于第５天查细胞形态学及硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）试验。结果硒在上述条件下可使ＨＬ－６０细胞形态学分类中较成熟细胞的比例增高（Ｐ＜０．０５），ＮＢＴ试验阳性率增高（Ｐ＜０．０１）。结论硒在一定条件下可能有潜在的诱导分化作用     

亚硒酸钠诱导NB4细胞中细胞色素c氧化酶亚基IV的下调机制

目的 探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的过程中,细胞色素c氧化酶亚基IV(COX IV)表达的变化情况及其机制和意义.方法 用20μmol/L亚硒酸钠作用NB4细胞不同时间,Western blot和RT-PCR分别检测COX IV蛋白和mRNA表达的变化.活性氧清除剂预处理细胞后Western blot检测COX IV蛋白表达的变化以及caspase-3的激活.caspase-3抑制剂预处理细胞后Western blot检测COX IV蛋白表达的变化.瞬时转染干扰NB4细胞中COX IV表达后,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 亚硒酸钠诱导NB4细胞COX IV蛋白表达显著下调,但mRNA表达水平无变化.活性氧清除剂能完全逆转亚硒酸钠引起的COX IV表达下调与caspase-3激活.caspase-3抑制剂能部分逆转亚硒酸钠引起的COX IV表达下调.干扰COX IV表达后,亚硒酸钠诱导的细胞凋亡显著增加.结论 在亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,COX IV在蛋白水平显著下调.活性氧介导COX IV下调与caspase-3激活,caspase-3在一定程度上参与COX IV表达下调,抑制COX IV能显著提高NB4细胞对亚硒酸钠诱导凋亡的敏感性.     

地塞米松对补体介导的PMN功能损害的保护实验研究

目的；研究地塞米松对活化补体介导的ＰＭＮ功能损害的保护作用。方法：用酵母多糖经人血清（ＺＡＨＳ）作用于人体ＰＭＮ及小鼠体内ＰＭＮ，选择地塞米松（Ｄｅｘ）起显著保护作用的浓度和时间，进行体内，外保护效能试验。结果：（１）低剂量Ｄｅｘ（０．０８μｇ／ｍｌ）预处理，对极效量ＺＡＨＳ导致正常人，鼠ＰＭＮ功能损害无明显保护作用；大剂量Ｄｅｘ（１．２～１．６μｇ／ｍｌ）在ＰＭＮ应激后第５小时前表现出明显保护作     

亚硒酸钠对荷瘤小鼠体内硒含量,GSH—Px活力和MDA含量的影响

目的：探讨荷瘤小鼠体内硒水平，谷胱甘肽过氧化和的酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化和亚硒酸钠对这种变化的影响。方法：采用ＤＡＮ荧光法、ＤＴＮＢ比色法及ＴＢＡ荧光法分别测定荷瘤及正常小鼠体内微量元素硒的含量、ＧＳＨ－Ｐｘ活力及过氧化脂质产物ＭＤＡ的含量，结果：发现荷瘤小鼠体内全血及肝组织中硒的含量、肝匀浆中ＧＳＨ－Ｐｘ活力均明显低于正常小鼠。亚硒酸钠虽然在该实验剂量下对Ｓ－１８０肉瘤     

口服VitC对小鼠急性肺泡炎的致损伤作用

目的：以小鼠急性肺泡炎动物模型为研究对象，观察口服VitC、VitE对小鼠免疫复合物性肺损伤的作用。方法：以牛血清白蛋白致敏昆明小鼠建立急性肺泡炎动物模型，观察单独口服VitC、VitE及同时口服VitC、VitE对小鼠急性肺泡炎发生率的影响。结果：急性肺泡炎发生率VitE组明显低于阳性对照组，而VitC组和VitE VitC组则与阳性对照组一致，均为100％，漏出性出血的发生率明显高于阳性对照组。结论：VitE可一定程度地抑制小鼠急性肺泡炎的发生，而VitC不仅不能抑制，相反可加重小鼠急性肺泡炎肺损伤的程度。     

抗氧化剂对Cu~(2+)、HOCl及动脉壁细胞诱导的HDL氧化修饰的作用研究

目的 探讨抗氧化剂对高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰的抑制机制,为预防HDL的氧化修饰提供实验依据.方法 将体外新鲜制备的人血浆HDL分别用不同浓度的硫酸铜(CuSO_4)、次氯酸(HOCl)处理或与动脉壁细胞共同温育进行氧化修饰,然后分别测定天然未修饰HDL(N-HDL)、氧化修饰HDL(Ox-HDL)的凝胶电泳相对电泳迁移率(REM)、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、溶血卵磷脂/卵磷脂比率(LPC/PC)的生成及载脂蛋白成分改变.对比相同条件下,加入抗氧化剂叔丁基甲苯(BHT)、Vit E及Vit C后,以上指标的改变.结果 BHT、Vit E及Vit C均可显著抑制由Cu~(2+)和HOCl诱导的Ox-HDL的REM增加、TBARS的生成、卵磷脂的水解,载脂蛋白AⅠ和AⅡ的改变.动脉壁细胞诱导的Ox-HDL的琼脂糖REM增加、TRARS的生成及卵磷脂水解也可被BHT、Vit E及Vit C显著抑制.但不同抗氧化剂的作用方式各有不同.结论 BHT以及Vit E和Vit C能有效抑制体内外HDL的氧化修饰.     

亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的影响

目的　研究亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的保护作用。方法　小鼠置于自制被动吸烟箱中 ,每日吸烟两次 ,用药组小鼠分别给予亚硒酸钠 (0 .3mg/kg)、维生素E(30mg/kg)、亚硒酸钠 (0 .3mg/kg)加维生素E(30mg/kg)灌胃 ,连续 35d。取附睾精子观察精子畸形率 ,测量睾丸、附睾脏器指数 ,光镜下观察睾丸组织显微结构的变化。结果　给药组小鼠精子畸形率显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,脏器指数没有显著性变化 (P >0 .0 5 ) ,吸烟组睾丸组织的显微结构出现不同程度的改变。结论　亚硒酸钠、维生素E对被动吸烟小鼠精子形态起保护作用。     

茶多酚与亚硒酸钠联合对EBV抗原表达的抑制作用

用间接免疫荧光法测定Ｒａｊｉ细胞和Ｂ９５－８细胞ＥＢ病毒抗原的表达。结果显示无细胞毒浓度的茶多酚与亚硒酸钠联合对Ｒａｊｉ细胞ＥＢＶ－ＥＡ表达有显著的抑制作用,优于单纯茶多酚或亚硒酸钠的抑制作用。两药显示相互协同增效的作用 。抑制率与药物浓度相关;单纯茶多酚对Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ－ＶＣＡ表达无抵制作用,但茶多酚能增强亚硒酸钠对Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ－ＶＣＡ表达的抵制作用,抑制率随药物浓度的升高而升高。     

亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901增殖的影响.方法： 应用集落形成试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成的影响;应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响;应用电镜及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用.结果： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关.流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24 h后,细胞周期发生改变,G1期细胞百分率减少,S期细胞百分率增加,DNA直方图上出现典型的亚二倍体细胞的“凋亡峰”;电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边,核膜扭曲等特征.结论： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的增殖具有抑制作用,抑制作用程度与作用浓度和时间呈正相关;亚硒酸钠抑制SGC-7901细胞生长的机理之一是诱导细胞凋亡.     

维生素E、牛黄酸等抗氧化剂对博莱霉素致突变性的拮抗作用

目的观察抗氧化剂(维生素E、牛黄酸、二甲亚砜和维生素C)针对博莱霉素(Bleomycin,BLM)的拮抗作用.方法在人外周血淋巴细胞培养物中注入一定剂量的BLM并一定剂量的抗氧化剂,然后观察淋巴细胞的姐妹染色单体交换率(sister chromatid exchanges,SCE rate)的变化.结果维生素E浓度为5μl/ml时,可显著地拮抗BLM(28.6 nmol/ml)的致突变作用(P＜0.05);而维生素E浓度为10μl/ml时,可极显著地拮抗BLM的作用(P＜0.01);当加入牛黄酸的终浓度为100和200μg/rl时,均可显著地拮抗BLM(28.6nmol/m1)的致突变作用(P＜0.05).结论一定剂量的维生素E和牛黄酸对BLM的致突变性存在着拮抗作用.     

亚硒酸钠对人补体系统激活的影响

用经典的50%溶血法证实,高浓度Na_2SeO_3在体外对CH_(50)有抑制作用,但低浓度Na_2SeO_3对溶血活性有促进作用。Na_2SeO_3对APH_50仅有抑制作用,无增强效应。本文对以上结果的意义进行了讨论。     

Multiple organ injuries after abdominal high energy wounding in animals and the protective effect of antioxidants.

Multiple organ injuries caused by high energy abdominal wounds were studied in 8 pigs and 24 dogs, and at the same time the protective effect of antioxidants in 14 dogs with multiple organ injuries was also studied. The experimental results showed that: 1) more than two organs (six organs at most) were wounded in each of the animals studied; 2) the injuries were characterized by hemorrhaging, tissue rupture and hematoma, and the main pathologic changes were local edema and necrosis; 3) the marked increase of lipid peroxide (LPO) levels in the vital organs indicated that multiple organ injuries could also involve the molecular level; 4) the injuries were due to the direct effect of pressure waves and ischemic reperfusion and not to shock or infection; and 5) antioxidants (vitamin E and Salvia miltiorrhiza Bge.) exhibited significant protective effects against multiple organ injuries through a free radical mechanism.     

新生儿呼吸机相关性肺炎的预防与护理措施

呼吸机相关性肺炎（VAP）：是指患者接受机械通气治疗后,由感染性因素造成的肺实质性炎性反应VAP,指原无肺部感染的患者机械通气治疗48小时后发生肺部感染或原有肺部感染,机械通气治疗48小时以上发生新的肺部感染。国外报道VAP发病率为9%～70%,病死率可达50%～70%。国内报道VAP发病率为70%,病死率可达51.6%。开展新生儿住院病人呼吸机感染的监测,了解呼吸机感染的发病率及危险因素及时采取措施,有效控制医院感染的发生。