谷胱甘肽S—转移酶pi基因与逆转录病毒载体的重组体构建

为了在细胞水平上研究谷胱甘肽Ｓ－转移酶基因的表达活性对化学致癌诱导细胞转化作用的的影响及探讨肿瘤基因预防的可能性，作为第一步，本实验的构建了ＧＳＴ－ｐｉ ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＸＴ１的重组体。     

谷胱甘肽S－转移酶pi基因与逆转录病毒载体的重组体构建

为了在细胞水平上研究谷胱甘肽Ｓ－转移酶ｐｉ（ＧＳＴ－ｐｉ）基因的表达活性对化学致癌物诱导细胞转化作用的影响及探讨肿瘤基因预防的可能性，作为第一步，本实验构建了ＧＳＴ－ｐｉｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＸＴ_１的重组体。     

谷胱甘肽S转移酶与三氧化二砷耐药性的相关研究

目的 探讨谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)与三氧化二砷(As2O3)耐药之间的关系.方法 选用30例急性早幼粒细胞白血病(APL)患者及10例正常对照组的外周血或骨髓,用RT-PCR方法检测GSTπ的表达.结果 APL细胞的GSTπ表达率为36.7%.其中应用As2O3治疗的初治组GSTπ表达率为25%,治疗后复发和耐药的APL的GSTπ表达率为60%,复发或耐药组表达较初治组GSTπ表达明显增高(P<0.05),GSTπ表达较高者临床缓解率低(P<0.05).结论 GSTπ高表达与As2O3耐药密切相关,GSTπ的高表达可作为治疗APL耐药的一个标志.     

大肠癌LoVo/Adr细胞多药耐药性与谷胱甘肽S-转移酶关系的研究

目的 阿霉素诱导大肠癌LoVo细胞产生耐药性的同时观察谷胱甘肽S-转移酶活性和含量的变化，探讨其与耐药的关系。方法 采用阿霉素浓度递增法诱导耐药；采用MTT、法检测耐药性；GST-π检测采用免疫组化染色；谷胱甘肽S-转移酶活性测定采用1氯-2，4-二硝基苯法。结果 建立了人大肠癌多药耐药LoVo／Adr细胞株；LoVo／Adr细胞GST-Ⅱ蛋白表达显著高于LoVo细胞；LoVo／Adr细胞与LoVo细胞GST活性相比，没有显著差异。结论 耐药的LoVo／Adr细胞株其耐药机制与GST有关。     

谷胱甘肽-S-转移酶π与肿瘤耐药

恶性肿瘤患就诊时多数处于中晚期,联合化疗是主要的治疗手段,然而各类肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性又极大地降低了化疗药物的效果。目前研究发现,肿瘤细胞产生耐药的原因极其复杂。在肿瘤细胞产生耐药的机理中,除了P-gp的“药泵”之外,还存在有其他机理如胎盘型谷胱甘肽-S转移酶-π(GST-π)的解毒作用增强、拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ)水平的降低以及MDR相关蛋白(multidrug resistance associated protein,MRP)表达等。     

HepG2 细胞谷胱甘肽含量和谷胱甘肽转移酶活力的诱导

目的：建立一种具有较高ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力的肝细胞系。方法：将ＨｅｐＧ２细胞在０．１,０．３,０．５ｍｇ／Ｌ浓度的ＣＤＤＰ间歇作用下传代１２个月后得到三种稳定的ＣＤＤＰ耐药细胞系ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．３,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．５细胞的ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力,结果用显著性ｔ检验方法作统计学处理。结果：诱导刺激后的子代ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０     

谷胱甘肽S转移酶在耐药非小细胞肺癌中的表达

谷胱甘肽Ｓ转移酶在耐药非小细胞肺癌中的表达冯久贤王恩忠李春海顾伟勇廖美琳谷胱甘肽依赖性酶系在抗癌药耐药性成因中的作用研究，近来受到重视，其中尤以谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）较为令人注目［１］。我们应用免疫细胞化学方法结合体外药敏试验，检测耐药非小细胞肺...     

细胞周期突变体相关蛋白激酶2、P-糖蛋白和谷胱甘肽巯基转移酶-π在宫颈癌中的表达及临床意义

目的  检测宫颈癌中细胞周期突变体（NIMA）相关蛋白激酶（Nek2）与耐药蛋白P-糖蛋白（P-gp）、胱甘肽巯基转移酶-π（GST-π）的表达及其与临床病理特征的相关性。方法  应用免疫组织化学法检测144例宫颈癌组织和32例慢性宫颈炎非癌组织中Nek2、P-gp、GST-π的表达。结果  ①Nek2、P-gp和GST-π在宫颈癌及宫颈炎组织中的阳性表达率分别为（51.4% vs 31.2%）、（55.6% vs 12.5%）和（73.6% vs 53.1%）,组间比较差异有统计学意义（P <0.05）。②Nek2表达与宫颈癌组织学分级、临床分期相关（P <0.05）,与年龄、组织学类型、浸润深度、细胞角蛋白（CK）、CK14、癌胚抗原（CEA）、抗癌基因P16、生存时间无关（P >0.05）。P-gp、GST-π在宫颈癌的阳性表达与以上临床病理特征无相关性（P >0.05）。③宫颈癌中Nek2与P-gp、GST-π表达呈正相关（r =0.193和0.207,P <0.05）。结论  Nek2可能介导宫颈癌中P-gp、GST-π的表达。Nek2、P-gp及GST-π蛋白在宫颈癌发生、发展及耐药机制中发挥重要作用。联合检测对宫颈癌治疗方案的合理制定及化疗反应性的评估可能具有积极的临床指导意义。

     

谷胱甘肽转移酶的研究进展

<正>谷胱甘肽转移酶(glutathione transferases;GSTs;also known as glutathione S-transferases)是由多个基因编码,在机体生物转化、免疫等防御系统中具有解毒和抗氧化等多重功能的超家族蛋白     

Anticancer Drug Resistance of HeLa Cells Transfected With Rat Glutathione S-transferase pi Gene

Objective To establish a cytologic expressing system of rat glutathione S-transferase pi (GST-pi) cDNA for detecting the resistance of HeLa cells to anticancer drugs. Methods The assessment was made with various anticancer drugs (adriamycin, mitomycin, cisplatinum and vincristine) that showed different cytotoxicities in transfectant HeLa cells with pSV-GT containing rat GST-pi cDNA (HeLa/pSV-GT) or control pSV-neo (HeLa/pSV-neo). Expression levels of GST-pi mRNA in HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo were measured by in situ hybridization using Digoxin-labelled cDNA probe. Results HeLa/pSV-GT expressed significantly high degree of GST-pi mRNA, whereas both HeLa/pSV-neo and HeLa cells had very low expression. Cytotoxicities of HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo with 4 anticancer drugs were measured by MTT assay. Drug concentrations for yielding 50% inhibition (IC50) in HeLa/pSV-GT by adriamycin, mitomycin and cisplatinum were 70.13μg/mL, 10.95μg/mL and 16.52μg/mE respectively. In contrast, IC50 in HeLa/pSV-neo was 10.34μg/mL, 7.48μg/mL and 13.70μg/mE respectively. The cytotoxicities of vincristine on both HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo were not significantly different. Conclusions Our findings suggest that HeLa/pSV-GT containing rat GST-pi cDNA is resistant to some anticancer drugs due to overexpression of GST-pi. Also, HeLa/pSV-GT cell line could serve as a useful cytogenetic model for further research.     

急性白血病患者谷胱甘肽S-转移酶和肺耐药相关蛋白的检测及临床意义

目的：探讨急性白血病(AL)患者细胞内谷胱甘肽S-转移酶活力(GST)及肺耐药相关蛋白(LRP)表达与临床疗效的关系。方法：采用化学比色法检测57例AL患者骨髓单个核细胞内GST活力并同时采用免疫细胞化学(SABC)方法检测LRP表达。结果：AL患者细胞内GST活力明显高于对照组(P<0.01); AL患者细胞内GST活力与骨髓中原始及幼稚细胞百分数有一定相关性(r＝0.30, P<0.05)。初治组AL患者细胞内GST活力明显高于化疗后缓解(CR)组(P<0.01),化疗后难治复发组患者细胞内GST活力又明显上升,显著高于缓解组(P<0.01)。化疗后17例AL患者LRP表达阳性,其中13例未缓解(NR), 20例LRP表达阴性,其中CR12例,LRP阳性组疗效显著差于阴性组（P<0.05）,且LRP阳性组NR患者及LRP阴性组NR患者GST活力均明显增高。结论：AL患者细胞内GST活力增高与临床疗效及骨髓原始及幼稚细胞增殖有关;同时检测AL患者GST活力与LRP表达对提高耐药白血病的疗效和预后有一定价值。     

谷胱甘肽硫转移酶K1研究进展

谷胱甘肽硫转移酶K1(glutathione S-transferase kappa 1,GSTK1)是一个参与脂联素分泌和多聚化的关键蛋白,且在线虫中已经证实,GSTK1与能量产生和脂质代谢有关。同时GSTK1表达水平与肥胖呈负相关,并能缓解内质网应激诱导的脂联素水平下降,而且人GSTK1启动子的多态性与胰岛素分泌和脂肪沉积有关,因此,GSTK1可能成为一个治疗胰岛素抵抗及其相关的代谢疾病潜在的药物新靶点。     

A549-ADR与纤维连接蛋白结合后对其耐药性的影响

目的　研究肿瘤细胞与基质粘附对肿瘤耐药性的影响 ,并探讨其机制。方法　应用MTT法研究A5 4 9 ADR耐药细胞与基质成分纤维粘连蛋白 (FN)结合对药物敏感性的影响 ;采用TUNEL法检测细胞凋亡 ,采用流式细胞术观察bcl 2和Bax基因表达。结果　A5 4 9 ADR细胞与FN结合后 ,其耐药性明显增加 (抑制率为 10 2 7% ,对照组为 4 6 0 1% ,P <0 .0 1) ,用抗 β 1整合素抗体阻断其与FN结合 ,其对药物的敏感性又恢复至对照水平 (抑制率为 4 0 86 % ,与对照组比P <0 .0 5 ) ;A5 4 9 ADR细胞与FN结合后 ,bcl 2基因蛋白表达上升 (6 2 0 8% ) ,Bax表达降低 (14 79% ) ,凋亡率 (8 74± 1 0 1) %显著降低 ,对照组为 (16 38±1 0 7) %阻断其与FN结合 ,bcl 2表达明显下降 (2 3 5 9% ) ,而Bax表达上升 (75 83% ) ,凋亡率也升至 (17 2 4± 1.75 ) % (与对照组比P <0 .0 5 )。结论　肿瘤细胞与基质成分结合可上调Bax和下调bcl 2基因表达 ,增强肿瘤细胞的抗凋亡能力 ,从而增加肿瘤耐药性。     

膀胱癌患者血清中谷胱甘肽S—转移酶的研究

测定膀胱癌患者血清中谷胱甘脑Ｓ－转移酶活性，观察该酶在膀胱癌中的作用。方法；化学比色法对５４例膀胱癌患者行ＧＳＴ测定。结果：膀胱癌患者血清ＳＧＴ平均值较对照组明显升高，膀胱癌患者术后ＧＳＴ降低，与对照组无显著性差异；ＧＳＴ含量在膀胱癌分级分期之间无显著性差异。     

P-gp和GST-π在胆囊癌中的表达与化疗耐药的研究

目的　通过检测胆囊癌组织中P -糖蛋白 (P - gp)和胎盘型谷胱苷肽S转移酶(GST -π)的表达状况 ,揭示胆囊癌对化疗不敏感的内在机制。方法　 38例胆囊癌组织石蜡标本 ,12例结石性胆囊炎组织石蜡标本分别进行生物素蛋白链菌素 -生物素 -过氧化物酶免疫组织化学染色 ,按照既定的阳性标准判定染色结果。结果　P - gp和GST -π在胆囊癌的表达阳性率分别为 78.9%和 6 5 .7% ,而在胆囊良性疾病中两者阳性率分别为 2 5 %和 16 .6 % ,两者比较均具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　P - gp、GST -π在胆囊癌中的高表达是造成胆囊癌耐药的重要原因之一     

不明原因不孕症患者谷胱甘肽S-转移酶M1基因遗传多态性

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶M1(GSTM1)基因多态性与不明原因不孕症的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法对不明原因不孕组46例及已生育正常健康女性对照组45例GSTM1基因进行分型,对GSTM1缺失基因型与不明原因不孕症相关性采用Logistic回归分析。结果不明原因不孕组GSTM1缺失率(67.39%)明显高于对照组(35.56%),差别具有统计学意义(P<0.05)。结论 GSTM1基因遗传多态性与不明原因不孕存在相关性,GSTM1的缺失可能是不明原因不孕的高危因素。     

亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠体内谷胱甘肽S-转移酶活力及其基因表达的影响

目的 探讨亚砷酸钠亚慢性染毒对小鼠肝脏和肾脏谷胱甘肽S-转移酶(GST)活力及其基因表达的影响.方法 采用亚慢性毒性实验方法.昆明种小鼠60 只,按体重随机分成正常对照组(C)、低剂量组(L)、中剂量组(M) 和高剂量组(H) 4组,每组15只,分别自由饮用蒸馏水、0.125 mg/kg、0.5 mg/kg和2.0 mg/kg 的亚砷酸钠水溶液,连续染毒90 d,酶联免疫吸附法测定小鼠肝、肾组织谷胱甘肽S-转移酶(GST)活力,采用RT-PCR 法检测GSTO1 mRNA表达.结果 小鼠肝脏和肾脏组织中GST 活力随着砷染毒剂量的增加呈现先升高随后降低的趋势(P<0.05);与正常对照组比较,中、高剂量组小鼠肝、肾GSTO1 mRNA表达上调(P<0.05～0.01).结论 小鼠经不同剂量的亚砷酸钠染毒后,肝脏、肾脏GSTO1 mRNA表达与GST 活力变化一致,提示砷对GST 活力的影响与GSTO1 mRNA表达有关.     

三维肿瘤球模型应用于肿瘤耐药机制研究进展

相比于传统的二维肿瘤细胞培养,三维肿瘤球技术不仅为肿瘤细胞提供与体内相似的生长环境,而且还能最大程度地维持肿瘤细胞的生理功能,因此广泛地应用于肿瘤学研究。特别是三维肿瘤球保留了体内细胞所处微环境的物质及结构基础,更接近于实际的病理生理环境,提高了肿瘤细胞对药物的耐受性,是评价肿瘤治疗手段和肿瘤耐药研究的理想体外模型。本文重点综述了三维肿瘤球形态及微环境诱导产生耐药机制方面的研究,并提出现阶段三维肿瘤球模型存在的问题及今后的发展方向。