阴沟肠杆菌流行菌株产超广谱β-内酰胺酶分析

目的研究江苏苏中地区阴沟肠杆菌流行株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的状况。方法采用改良的双纸片法(MDDT)进行ESBLs的初筛;以ESBLs引物(CTX-M、CTXM-1、CTX-M-2、CTX-M-9、SHV、TEM、VEB、PER型)进行PCR扩增,对扩增产物进行序列分析。结果MDDT初筛结果证明该菌株产超广谱β-内酰胺酶,CTX-M型ESBLs引物有扩增产物,序列分析表明该株阴沟肠杆菌携带CTX-M-3型ESBLs。结论江苏苏中地区阴沟肠杆菌流行株产CTX-M-3型ESBLs,是造成该流行株对三代头孢菌素耐药的重要原因。     

阴沟肠杆菌产诱导型β内酰胺酶及耐药性分析

目的　了解阴沟肠杆菌临床分离株产诱导型 β内酰胺酶及其耐药性。 方法　采用美国德灵DADE产MicroScanAutoScan - 4型微生物分析仪及其NC2 1鉴定板和符合美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)标准的VerSion 2 2分析软件对 1 0 3株阴沟肠杆菌检测产诱导型 β内酰胺酶 (IB)和对 2 0种抗生素的敏感性。 结果　以亚胺培南对阴沟肠杆菌的敏感性最高 (89 3%)。其次为哌拉西林 /三唑巴坦 (6 3 1 %) ,其他 1 8种抗生素的敏感性均 <5 0 %。1 0 3株阴沟肠杆菌中产IB者 70株 (6 8 0 %)。阴沟肠杆菌产IB株对哌拉西林 /三唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟等抗生素的敏感性显著高于不产IB株 (P <0 0 0 5 )。结论　抗生素诱导阴沟肠杆菌产IB率较高 ,且耐药严重。     

阴沟肠杆菌耐药性分析及NDM-1基因检测

目的 探讨阴沟肠杆菌的耐药性以及对亚胺培南耐药菌株进行新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因检测分析,为临床治疗阴沟肠杆菌感染合理用药提供试验依据。方法 试验菌株分离自2011年7月-2012年6月的临床标本,采用西门子Microscan Walkway 40plus全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,应用WHONET5.4对数据进行分析统计;聚合酶链反应(PCR)特异性扩增NDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析。结果 共分离得到35株阴沟肠杆菌,对亚胺培南敏感性最高,敏感率为91.4%,但也出现3株耐药菌株,其次为阿米卡星;对第一代头孢菌素头孢唑林及广谱青霉素的耐药率>90.0%,对其他抗菌药耐药率>40.0%;3株亚胺培南耐药菌株NDM-1检测均为阳性,且同源性为100.0%。结论 多药耐药阴沟肠杆菌及产NDM-1阴沟肠杆菌的出现,造成耐药形势日益严峻,需要加强监测力度。     

基层医院产β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的分析山区基层医院阴沟肠杆菌(ECL)产β-内酰胺酶的耐药现状,指导临床合理使用抗菌药物。方法用纸片扩散法(K-B法)对87株阴沟肠杆菌进行13种抗菌药物的敏感性试验,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的筛选按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的确证法进行,去阻遏持续高产AmpC酶的检测采用双抑制剂扩散协同纸片法检测。结果从87株阴沟肠杆菌中检出产AmpC酶13株,占14.9%,产ESBLs24株,占27.6%,同时表达AmpC酶和ESBLs10株,占11.5%;产酶株对13种抗菌药物均显示了不同程度的耐药性或出现交叉耐药性。结论ESBLs和AmpC酶的产生是阴沟肠杆菌的重要耐药机制。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 监测阴沟肠杆菌医院感染菌株ESBLs的产生及其对常用抗菌药物的耐药性。方法 采用5种底物的“双纸片协同试验”检测ESBLs;体外药敏试验采用K－B法;实验数据处理使用WHONET－5软件。结果 在本组样本的47株阴沟肠杆菌临床分离株中,ESBLs的检出率为38．3％;未发现亚胺培南耐药株,阿米卡星和环丙沙星的耐药率依次为17．0％、29．8％;产ESBLs和不产ESBLs菌株间的耐药率存在显著差异。结论 ESBLs是造成本地区阴沟肠杆菌严重耐药的主要原因之一;阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南;其次为阿米卡星和环丙沙星。     

医院内产β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的检测

目的了解医院高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阴沟肠杆菌的流行情况. 方法用改良三维实验检测86株阴沟肠杆菌中表型可疑产酶的菌株. 结果检出产酶菌26株,其中高产AmpC酶17株,ESBLs 4株,同时高产AmpC酶和ESBLs 5株;产酶菌对多种抗生素的耐药率明显高于不产酶菌. 结论及时准确检测阴沟肠杆菌的产酶株,对指导临床合理使用抗生素、减缓对细菌耐药的选择性压力、避免医院感染的发生和流行有重要意义.     

阴沟肠杆菌不同β-内酰胺酶基因型检测与耐药性研究

目的 了解医院感染阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶的情况,并对产不同β-内酰胺酶型菌株的耐药性进行研究.方法 采用三维试验确证试验检测AmpC酶与超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).聚合酶链反应(PCR)扩增基因,K-B法检测阴沟肠杆菌对13种抗菌药物的耐药情况.结果 80株阴沟肠杆菌中29株ESBLs编码基因结果阳性,3株含有两种不同的基因型,分别为TEM型6株、SHV-2型2株、CTX-M-2型5株、CTX-M-3型8株和CTX-M-9型11株;26株ampC基因PCR扩增呈阳性;产超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)阴沟肠杆菌对美罗培南外的12种抗菌药物的耐药率在66.7%～100.0%,无论是单一产酶株,还是SSBLs菌株,其耐药率均显著高于不产酶株.差异有统计学意义(P＜0.05);美罗堵南仍是阴沟肠杆菌耐药率最低的抗菌药物.结论 阴沟肠杆菌已呈现出多药耐药和高度耐药特征,ESBLs基因型以CTX-M型为主,三维试验与PCR检测具有良好的一致性,产AmpC酶和ESBLs酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因.     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶基因及其流行病学研究

目的分析医院2008-2010年临床分离阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶及其对抗菌药物的耐药性,并了解其耐药基因的传播机制。方法采用改良三维试验筛选AmpC酶,双纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测ESBLs和AmpC酶的基因,采用微量肉汤稀释法分析细菌耐药性,质粒接合试验分析耐药基因的传播特点。结果同时产ESBLs和AmpC酶菌株对三、四代头孢菌素及含酶抑制剂药物的耐药率均>50.0%;45株改良三维试验阳性,14株ESBLs确证试验阳性,ESBLs和AmpC酶的基因阳性者分别为25、38株,分别以TEM-1型、MIR-3型为主,其次为CTX-M-3、DHA-1型,SHV-11型广谱β-内酰胺酶2株,未检测到CIT、MOX、FOX、ACC型AmpC酶的基因,5株接合试验成功。结论阴沟肠杆菌主要携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶、CTX-M-3型ESBLs和MIR-3型AmpC酶,耐药现状严重,应采取积极有效的措施预防多药耐药菌株的播散与暴发流行。     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶的检测及耐药性分析

目的调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶阴沟肠杆菌基因型及其耐药性,以期为临床治疗提供依据。方法使用VITEK-AMS鉴定细菌;采用三维试验检测阴沟肠杆菌的ESBLs与AmpC酶表型;β-内酰胺酶耐药基因型检测采用PCR扩增技术;耐药基因水平传播采用质粒接合试验;根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)指南进行药敏试验。结果86株阴沟肠杆菌中ESBLs携带率为48.8%;CTX-M型为主要类型,其中CTX-M-3亚型为27.9%,CTX-M-9亚型为16.3%,CTX-M-14亚型为3.4%;SHV-12型为18.6%;11株同时产ESBLs与AmpC酶,占12.8%,31株单独产ESBLs(36.0%),8株单独产高产AmpC酶(9.3%);亚胺培南对ESBLs菌株的敏感率为100.0%;8株产ESBLs菌株接合试验成功。结论CTX-M型与SHV-12型是阴沟肠杆菌ESBLs的主要基因型。ESBLs可以通过质粒接合试验进行水平传播。     

44株阴沟肠杆菌耐药基因分析

目的了解解放军第98医院临床分离的阴沟肠杆菌耐药基因存在状况。方法采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析44株阴沟肠杆菌中15种耐药相关基因。结果44株中,12种基因blaTEM、blaOXA-1群、blaMIR、blaDHA、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、intⅠ1、qacE△1-sul1、dfrA1、dfrA17、qnr的阳性株数分别为24株(54.50%)、3株(6.82%)、35株(79.50%)、5株(11.40%)、11株(25.00%)、31株(70.50%)、15株(34.10%)、38株(86.40%)、36株(81.80%)、1株(2.27%)、20株(45.05%)、3株(6.82%),bla0XA-1群基因PCR产物经序列分析确认为blaOXA-1型广谱β-内酰胺酶基因,其他3种基因blaSHV、blaCTX-M-1群、blaOXA-10群均阴性。结论临床分离的阴沟肠杆菌至少存在12种耐药相关基因;在阴沟肠杆菌中检出blaOXA-1、dfrA1、dfrA17和qnr基因均为国内首次报道。     

126株阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏试验

我们从126株阴沟肠杆菌中检出超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)17株,并用头孢噻肟、泰能等8种抗生素作药敏试验,现将结果报告如下.     

阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的研究

目的调查阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的流行状况及基因型。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法,对44株临床分离的阴沟肠杆菌进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测DHA和ACT型AmpC酶基因。结果44株阴沟肠杆菌呈多重耐药;36株质粒AmpC酶基因阳性(81.8%),DHA和ACT-1基因阳性率分别为11.4%、79.5%,而且3株阴沟肠杆菌同时携带DHA和ACT-1基因。结论临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重、质粒AmpC酶基因携带率高;阴沟肠杆菌中检出ACT-1基因为国内首次报道。     

多重耐药阴沟肠杆菌β-内酰胺酶编码基因的研究

目的了解北京朝阳医院临床分离的多重耐药阴沟肠杆菌的β-内酰胺酶编码基因. 方法对12株临床分离的多重耐药的阴沟肠杆菌进行琼脂稀释法药敏试验、改良三维试验法和聚合酶链反应克隆测序. 结果 12株阴沟肠杆菌对多种抗生素耐药,改良三维试验法证实同时产生AmpC酶和ESBLs;其中,9株ESBLs编码基因PCR结果阳性,分别为SHV-2、SHV-12、CTX-M-3和CTX-M-14型ESBLs;对另外3株进行粗酶等电点测定发现,存在7.89和8.0等电点条带,并被克拉维酸抑制;12株细菌ampD和ampC基因PCR扩增均呈阳性,将6株耐药菌进行ampD基因的克隆测序发现均存在羧基端可疑的突变位点. 结论 12株多重耐药的阴沟肠杆菌同时产生≥1种的ESBLs及高产AmpC酶.     

医院感染高产Amp Cβ—内酰胺酶阴沟肠杆菌的分子流行病学研究

目的 了解医院感染中高产Amp Cβ－内酰胺酶阴沟肠杆菌的流行情况。方法 通过药敏实验和等电点分析筛选出高产Amp Cβ－内酰胺酶的阴沟肠杆菌,然后通过诱导实验分析了其Amp Cβ－内酰胺酶表型,最后,通过PFGE分型技术考察了其克隆构成情况。结果 在35株阴沟肠杆菌中,28株（80％）高产Amp Cβ－内酰胺酶,其中18株（65％）属完全去抑制型,10株（35％）属部分去抑制型;28株高产Amp Cβ－内酰胺酶阴沟肠杆菌的染色体DNA指纹图呈17种克隆的多克隆构成模式。结论 阴沟肠杆菌引起的医院感染中流行高产Amp Cβ－内酰胺酶的菌株,完全去抑制型为其主要表型;其内源性感染方式使阴沟肠杆菌医院感染呈多克隆构成模式。     

多重耐药阴沟肠杆菌流行状况及耐药机制的研究

目的了解多重耐药阴沟肠杆菌的流行状况及耐药机制。方法58株临床分离的对第三代头孢菌素耐药的阴沟肠杆菌进行琼脂稀释法药敏试验、表型筛选法和聚合酶链反应克隆测序。结果58株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示，高产AmpC酶株、单产ESBLs株和同时产AmpC酶和ESBLs株的检出率分别为65．52％、13．79％和20．69％；58株阴沟肠杆菌对多种抗菌药物耐药，高产AmpC酶菌株、单产ESBLs菌株和同时产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢哌酮／舒巴坦的敏感率分别为55．3％、87．5％和16．7％；对哌拉西林／他唑巴坦的敏感率分别为28．9％、50％和8．3％；对头孢吡肟的敏感率分别为97．4％、37．5％和16．7％；对亚胺培南的敏感率均为100％；58株临床分离株ESBLs编码基因的测序结果显示，分别为SHV-2、SHV-2a、SHV-12、CTX-M-14和CTX-M-3型ESBLs；58株临床分离株的ampD基因PCR扩增显示49株阳性，占84．48％，对其中8株进行克隆测序，均存在可疑的羧基端突变位点。结论产生AmpC酶和ESBLs是阴沟肠杆菌对头孢菌素耐药的主要机制。     

医院感染高产Amp CB-内酰胺酶阴沟肠杆菌的分子流行病学研究

目的　了解医院感染中高产 Am p Cβ-内酰胺酶阴沟肠杆菌的流行情况。方法　通过药敏实验和等电点分析筛选出高产 Am p Cβ-内酰胺酶的阴沟肠杆菌 ,然后通过诱导实验分析了其 Am p Cβ-内酰胺酶表型 ,最后 ,通过PFGE分型技术考察了其克隆构成情况。结果　在 35株阴沟肠杆菌中 ,2 8株 (80 % )高产 Am p Cβ-内酰胺酶 ,其中18株 (6 5 % )属完全去抑制型 ,10株 (35 % )属部分去抑制型 ;2 8株高产 Am p Cβ-内酰胺酶阴沟肠杆菌的染色体DNA指纹图呈 17种克隆的多克隆构成模式。结论　阴沟肠杆菌引起的医院感染中流行高产 Amp Cβ-内酰胺酶的菌株 ,完全去抑制型为其主要表型 ;其内源性感染方式使阴沟肠杆菌医院感染株呈多克隆构成模式。     

重症监护室阴沟肠杆菌感染的耐药监测

目的对近年耐第三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰胺酶监测,以指导临床用药。方法收集来自重症监护室的各种标本中对第三代头孢耐药的阴沟肠杆菌165株,用三维试验检测ESBLs与AmpC酶。结果165株阴沟肠杆菌中,产ESBLs120株,占72.7%,产AmpC酶40株,占24.24%。结论我院重症监护室对第三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,体外试验表明对亚胺培南敏感率为97.66%,对其他抗生素敏感性差。     

两株携带NDM-1型金属β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的临床特征研究

目的调查分析两株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌临床资料,探讨NDM-1产生的根源及预防和控制的措施。方法收集2012年7月医院培养两株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,改良Hodge试验和金属酶试验检测产酶类型,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因并进行测序。结果两株阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均>8μg/ml,改良Hodge试验阳性,金属酶表型初筛试验阳性,经基因扩增并测序后,与Genebank比对,表明与NDM-1基因有99%的相似性,临床资料显示,该两株菌有一定的同源性,可能有共同的传播途径。结论对碳青霉烯类抗菌药物高度耐药的阴沟肠杆菌有传播的趋势,通过消毒等措施能得到控制。     

多重耐药菌中β-内酰胺酶基因监测

目的了解多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶联链反应(PCR)检测78株多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的TEM、SHV和CTX—M等3种β-内酰胺酶基因,并进行DNA测序。结果 50株铜绿假单胞菌中37株TEM基因阳性(74.0%),未检出SHV和CTX—M基因,28株鲍曼不动杆菌中25株TEM基因阳性(89.3%),2株SHV阳性(7.1%),未检出CTX—M基因。结论多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的β-内酰胺酶基因类型以TEM型较为流行。     

多药耐药肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶基因分析

目的研究临床分离的多药耐药肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,为临床治疗产ESBLs的肠杆菌科细菌提供依据。方法收集2011年5月-2012年5月临床分离的27株肠杆菌科细菌,运用VITEK-2药敏试验复合板进行药敏试验,分析其耐药性,利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增ESBLs基因blaCTX、blaTEM和blaSHV;测序结果与GenBank数据库进行比对分析,以确定ESBLs的主要基因亚型。结果27株肠杆菌科细菌均呈现多药耐药性,其对头孢菌素类、青霉素类和碳青霉烯类的耐药率为40.7%~100.0%;PCR扩增出18株细菌携带2种以上ESBLs基因,6株携带1种ESBLs基因,有3株细菌未检测到ESBLs基因;ESBLs基因亚型主要为blaCTX-M-3、blaTEM-1和blaSHV-12。结论医院多药耐药的肠杆菌科细菌产ESBLs基因较普遍,其主要亚型为blaCTX-M-3、blaTEM-1和blaSHV-12。