载体、免疫佐剂脂质体的研究(摘要)

本文报告了用醇醚水混溶制备免疫佐剂脂质体的方法。此法有节省材料,操作简便并有利于大批量生产等特点。所制脂质体与经典法脂质体相比同样有明量的免疫佐剂作用。同时还证明,增加膜脂浓度、降     

CPS—K的制备及其免疫佐剂活性的观察

自中岛等1979年介绍克雷白氏肺炎杆菌荚膜多糖(CPS-K)对牛r球蛋白有免疫佐剂作用以来,尚未见到其它类似的报告。有关CPS-K对弱抗原的免疫佐剂活性以及它与常用佐剂作用比较的情况等还不太清楚。为进一步评价CPS-K的免疫佐剂作用,我们选用该菌64114株,从菌培养液中提取CPS-K,对其理化性质和批次产品质量进行了分析,并在相同条件下比较了本制品和胞壁酰肽(MDP):Al(OH)_3及脂质体等对弱抗原——牛血清白蛋白(BSA)的佐剂作用强度,工作总结如下。     

超氧化物歧化酶的脂质体载体

类脂被提纯后,当与水相共存时又能自发地重新形成封闭的膜系统,这种重新形成的膜系统称为脂质体。脂质体除可作为研究生物膜的模型外,近年来还发现它可能是一种有希望的药物载体。有各种方法可用来制取脂质体。如溶于有机溶剂的类脂在令溶剂蒸发后,可在水相的参与下形成多层脂质体;在去污剂与磷脂的混合物中移去去污剂形成单层脂质体;溶于乙醇的类脂快速注入缓冲溶液,则可形成小的单层脂质体等。但是所有这些方法形成的脂质体包裹水相的效率都不高,特别是对于生物大分子。     

葡萄糖修饰的载胰岛素脂质体以包封率为指标的制备工艺研究

目的基于乙醇对脂质双分子层膜的去稳定作用制备得较高包封率的载胰岛素脂质体。方法本研究以空白大单室脂质体在乙醇存在的条件下对胰岛素进行主动载药。考察了脂质处方、乙醇浓度、孵育温度、孵育时间、PEG2000-succ-Chol用量、药脂比等对包封率的影响。结果乙醇存在条件下空白大单室脂质体对胰岛素进行主动载药而得粒径（180±70）nm的小多室脂质体,包封率为28%～32%。结论该方法制备所得的胰岛素脂质体比文献报道的包封率提高了近2倍,而且避免了使用有机溶剂,最大程度保护了胰岛素的生物活性。     

脂质体MRI对比剂的研究进展

脂质体作为诊断和治疗靶向药物的载体,进入体内后具有被动靶向和主动靶向2种作用,近年来,随着脂质体制备技术的进展和各种新型脂质体的出现,使其在MR靶向成像中的应用有了较快的发展,介绍了MR脂质体对比剂的特性及其制备的基本原理,总结了不同脂质体对比剂在MRI靶向成像中的应用价值.     

脂质体MRI对比剂的研究进展

脂质体作为诊断和治疗靶向药物的载体,进入体内后具有被动靶向和主动靶向2种作用,近年来,随着脂质体制备技术的进展和各种新型脂质体的出现,使其在MR靶向成像中的应用有了较快的发展,介绍了MR脂质体对比剂的特性及其制备的基本原理,总结了不同脂质体对比剂在MRI靶向成像中的应用价值.     

HER-2靶向硼脂质体的制备与影响因素研究

目的制备具有良好靶向性的硼脂质体，为硼中子俘获治疗的研究与应用建立一个有效的靶向给药途仆方法采用新型的主动载药方法-pH梯度法制备硼脂质体，分析不同药脂比例对包封率的影响，优化Trastuzumab连接到DSPE—PEG-NHS分子微团的时间因素，采用微团转移法将Trastuzumab-PEG-DSPE掺入预先制备的硼脂质体，比较不同时间和温度对掺入量的影响，测试脂质体的稳定性、温度对Trastuzumab与受体结合能力的影响以及硼脂质体的受体靶向特异性。结果制备的硼脂质体大小均匀，直径约为100nm，圆形小囊状，药物包封率高。Trastuzumab与DSPE-PEG-NHS室温下孵育1h可达到足够高的连接率。60℃的水浴中作用4h，90％的Trastuzumab-PEG-DSPE掺入了脂质体脂膜。脂质体稳定，37℃保存2周仍有95％的抗体与脂质体相连。实验所用温度对Trastuzumab与HER-2结合的能力影响不大。制备的硼脂质体与HER-2受体的结合能被浓度不断增高的Trastuzumab所置换。结论本法制备的硼脂质体大小均匀，外观圆整，药物包封率高，有良好稳定性。实验过程对抗体特性无明显影响，硼脂质体具备与HER-2受体特异性结合的能力。     

磁共振分子成像脂质体探针的制备与表征

目的:制备一种磁共振分子成像探针-钆结合空间稳定脂质体(Gd-SLs),并评价其物理属性.方法:利用挤出法制备空间稳定脂质体,表征脂质体粒径、稳定性、钆含量、弛豫率以及体外MR成像特点.结果:所制备之钆结合空间稳定脂质体经高压均质仪过膜后粒径控制于117.4±31.8nm;脂质体Gd载药率达87％～100％;常温下(26℃)Gd-SLs磁共振弛豫率为Gd-DTPA的1.16倍,37℃为1.25倍;体外MR成像显示Gd-SLs与Gd-DTPA两对比剂磁共振T1加权成像作用接近.结论:顺磁性空间稳定脂质体能有效提高磁共振分子探针体内成像信号,制备方法简单,实验操作可控性好,在一定温度范围内性质稳定,具有较高的磁共振弛豫作用,是理想的磁共振分子影像学对比剂载体.     

脂质体庆大霉素治疗慢性骨髓炎的实验研究

目的：探讨不同脂质体庆大霉素对兔胫骨慢性金黄色葡萄球菌骨髓炎的治疗作用。方法：制备阳离子、阴离子、中性脂质体，分别包裹庆大霉素制成不同的庆大霉素脂质体。常规构建兔胫骨骨髓炎模型，采用不同的庆大霉素脂质体或单独使用庆大霉素进行静脉注射治疗3w。治疗后行X线检查和细菌学检查，评价疗效。结果：阳离子庆大霉素脂质体的治疗效果显著优于阴离子、中性脂质体和单独使用庆大霉素，但仍不能达到100％治愈。单独使用庆大霉素出现了较严重的并发症。结论：阳离子脂质体改变了庆大霉素的药代动力学，可有效促进庆大霉素的骨髓内浓聚，是一种有效的非传统抗生素释药载体，对慢性骨髓炎的防治具有一定的应用前景，但在抗生素的选择和使用方法上仍有待进一步研究。     

保护性自身免疫:一种脊髓保护的新方法

综述了保护性自身免疫治疗脊髓损伤的特点 ,实验研究的动物模型、抗原及免疫佐剂等问题。针对髓鞘碱性蛋白 (BMP)的自身免疫T细胞通过提供多种因子而对脊髓起保护作用 ,而动物模型、抗原及免疫佐剂为影响自身免疫的重要因素。因此 ,保护性自身免疫可提供一种较为满意的细胞治疗途径 ,从而有效促进脊髓不完全损伤鼠的神经功能恢复     

脂质体稳定性的研究进展

随着生物技术的不断发展和制备工艺逐步完善，脂质体（tiposomes）作为药物载体的研究愈来愈受到重视，也取得了可喜的进展。然而由卵磷脂和胆固醇等组成的传统脂质体是热力学不稳定体系，在体内外的弱稳定性限制了它的应用。显然，研制稳定的脂质体是走向实用的前提，具有很重要的现实意义和实用价值，笔者结合自身研究就近年来脂质体稳定性研究进展作一概述。     

单克隆抗体研究新进展

单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。本文全面综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体，采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子免疫学方法，快速制备高亲合力的单克隆抗体，改进常规方法制备单抗费时费力且亲合力低的弱点，对后基因时代蛋白质组学等基础研究领域的研究具有巨大的推动作用；同时在生物芯片、临床医学和疾病的诊断与治疗以及空间生命科学等应用领域有着广阔的应用前景。     

马尼地平脂质体的制备及其质量研究

目的优选马尼地平脂质体的处方和制备工艺,并对其进行质量研究。方法采用乙醇注入法制备马尼地平脂质体,并对其形态学、粒径、包封率、初步稳定性等性质进行了研究。结果在透射电子显微镜下观察,制备的马尼地平脂质体为均匀的球状或近球状,平均粒径为233．9nm,包封率为89．6％,脂质体4℃放置稳定。结论选择乙醇注入法优化工艺制备马尼地平脂质体稳定可行,为进一步开发马尼地平新制剂提供了实验依据。     

不同粒径脂质体包裹顺磁性对比剂的体外R1弛豫率及MR增强成像研究

目的 通过制备不同粒径脂质体包裹顺磁性Gd-DTPA,观察其理化特性及对大鼠肝脏的强化作用.材料与方法 采用薄膜蒸发法制备不同粒径脂质体包裹顺磁性Gd-DTPA,观察其理化特性.动物实验选择雄性健康SD大鼠18只(平均分为3组),静脉注射不同粒径的顺磁性对比剂脂质体,于注射对比剂前、15 min后对实验动物进行MRI.测定增强扫描前后肝脏、背景组织的信号强度,计算强化率、对比噪声比(CNR).结果 制备出粒径分别为400 nm、200 nm、78 nm以下的顺磁性脂质体,其平均R1弛豫率分别为0.64、1.05、1.60 min-1·s-1,随着脂质体粒径减小,其包封率下降,体外R1弛豫率增高.静脉注射3种粒径的顺磁性脂质体后,肝脏的强化存在差异,表现为400 nm粒径的脂质体对肝脏的强化作用高于其他2种粒径脂质体,测量肝脏的强化率和CNR较200 nm、78nm脂质体差异有显著统计学意义(P<0.001).结论 脂质体包裹Gd-DTPA对肝脏具有强化作用,粒径大小对其弛豫率和强化作用有影响.     

钆喷替酸葡甲胺-脂质体在兔MRI淋巴成像的应用研究

目的 研究钆喷替酸葡甲胺(Gd-DTPA)脂质体载体的淋巴组织靶向增强效果.材料与方法采用乙醇诱导法制备包裹Gd-DTPA的交错融合脂质体.将12只新西兰兔以数字表法随机分为对照组和反应性增生组,每组6只.反应性增生组采用兔大腿肌肉和腰窝皮下注射蛋黄乳胶的方法建立胭窝、腹股沟和腹膜后淋巴结三组相连续的反应性增生模型.分析各组淋巴结在Gd-DTPA脂质体增强前后的MRI特征,并采用配对t检验进行比较.结果 Gd-DTPA脂质体平均粒径2.2μm,平均包封率为82%,平均载药量为53%.平扫时两组腹膜后淋巴结大小有差异(t=164.21,P<0.01),而信号强度在T_1WI和脂肪抑制T_1WI上均无差异(P值均>0.05).Gd-DT-PA脂质体增强后,腘窝和腹股沟淋巴结在15 min时达到最大强化,SNR与平扫时相比差异有统计学意义(t值分别为76.32和48.39,P值均<0.05).腹膜后淋巴结强化较轻,约在30 min时达到最大强化,但SNR与平扫时相比差异无统计学意义(t=0.57,P>0.05).结论 Gd-DTPA可包裹于脂质体载体内,并可以用MRI显示载体淋巴组织靶向增强效果,为下一步鉴别肿瘤转移性淋巴结与反应性增生淋巴结打下了良好的基础.     

脂质体介导反义寡核苷酸体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

 目的 研究脂质体介导的反义寡核苷酸在体外对乙型肝炎病毒基因复制和表达的抑制.方法 以2.2.15细胞为靶细胞,针对HBV S基因和PreC基因翻译起始区设计合成了16聚硫代反义寡核苷酸(Phosphorothioate AntiflenseOllgormcleotides,PS-ASON),脂质体促进转染.用放射免疫测定法(RLA)测乙型肝炎病毒HBsSg、HBeAg含量.结果 脂质体介导PS-ASON在浓度1μmol/L时特异性抑制90%HBsAg和92%HBeAg的产生,同时未见对细胞的毒性作用.脂质体介导反义寡核苷酸(Antisense Oligonucleotides,ASON)的抗病毒作用显著高于单独用ASON(P<0.01).结论 脂质体介导的ASON是一种很有潜力的抗HBV药物.     

经尿道碘-聚醇醚灌注在开放式前列腺切除术后的应用

目的 :探讨经尿道碘 -聚醇醚 (碘伏 )灌注对开放式前列腺切除术后泌尿系感染的预防和治疗作用。方法 :对156例围手术期前列腺增生病人应用碘 -聚醇醚 (碘伏 )尿道灌注 ,观察术后泌尿系感染的发生率。结果 :经尿道碘-聚醇醚灌注 ,患者术后切口感染、尿道炎症、尿道狭窄、继发性出血、急性附睾炎〔1〕的发生率均明显降低 ,与对照组术后并发证的发生率比较有显著性差异。结论 :在术前及术后经尿道碘 -聚醇醚灌注对术后泌尿系感染的发生可起到明显的预防和治疗作用     

PEG表面修饰黄芩苷脂质体制备工艺研究

目的：通过优化手段筛选最佳处方及工艺，并制备PEG表面修饰黄芩苷脂质体。方法：在建立黄芩苷含量测定方法基础上，通过HPLC法、显微镜法、激光散射法等定性及定量方法考察脂质体的包封率、微粒外观、粒径及其分布等指标，首先单因素对脂质体制备方法、表面活性剂种类、类脂组成比，以及药物使用量进行筛选，确定影响制备脂质体的主要因素，然后采用正交试验法优化黄芩苷脂质体的处方组成及制备工艺。结果：优化后的脂质体其包封率在95．0％以上，50．0％体积径D(0．5)为2．358／μm，体积粒径范围在1．173-12．022μm，占总数98．52％，粒径跨度为0．887。电镜照片显示，脂质体外观圆整而均匀。结论：优化方法科学、可靠，脂质体制备工艺合理。     

正交试验优选冬凌草甲素脂质体制备工艺

目的优选冬凌草甲素脂质体的较优制备工艺。方法以胆固醇、大豆磷脂为载体,采用乙醇注入法制备冬凌草甲素脂质体。采用包封率作为为评价指标,以正交实验设计选出制备脂质体的最佳处方。结果通过正交设计优选出冬凌草甲素脂质体的制备工艺条件为:冬凌草甲素∶卵磷脂为1∶20,胆固醇与卵磷脂质量比为5∶1,超声时间为20 min,温度为50℃。结论该制备工艺得到的脂质体包封率较高,形态较好,方法可行。     

交错融合脂质体的制备

目的研究交错融合脂质体（IFVs）的制备。方法采用改良方法制备交错融合脂质体（IFVs）,应用激光散射粒度分析仪（PCS）对其粒径大小及分布情况进行测定,利用高压液相色谱仪测定其包封率。结果 IFVs脂质体粒径为100 nm左右。包封率为（69.0±5.4）%,远高于其他类型脂质体,并且性质稳定。结论 IFVs是一种大单层脂质体,其特点是粒径均匀（100 nm）,包封容积大,可达20~25μl/μmol脂质,可以携带足够量药物。