龟鹿二仙膏的质量标准研究

龟鹿二仙膏由龟甲、鹿角、党参、枸杞子4味中药组成。具有温肾益精、补气养血之功效。用于久病肾虚，腰酸膝软。精血不足。遗精阳萎等症。原方始载于1569年《医便》中。1764年《兰台轨范》更有详尽记述。本方以龟鹿二仙胶收载于《中国药典》1963年版一部，以龟鹿二仙膏收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第二册(WS3-B-0287—90)。为控制龟鹿二仙膏质量，保证临床用药安全有效，本文对其质量标准进行了研究。     

龟鹿二仙膏的药理学研究

龟鹿二仙膏为古方 ,明代 ( 1569年 )王三才著《医便》记述详细[1] ,为胶剂。 194 9年后 ,本方仍以胶剂收入《中国药典》1963年版一部。 1990年 ,载入《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册 ,为煎膏剂。最近 ,龟鹿二仙膏被列入第一批国家非处方药目录。本品具有温肾益精 ,补气养血作用。临床用于久病肾虚、腰酸膝软、精血不足 ,遗精阳萎[2 ] 。其药理学研究文献报道不多 ,现就手边资料参考国内文献综合概述如下。1　龟鹿二仙胶加减方药理学研究近年来 ,国内医药科技工作者将龟鹿二仙胶原方加减研制成龟鹿二仙胶丸[3] 、龟鹿补肾丸[4 ] 、龟鹿…     

龟鹿二仙膏助阳药理作用研究

目的：观察龟鹿二仙膏助阳的药理作用。方法：测定去势大鼠性腺器官指数及皮质激素阳虚模型小鼠的自主活动增加及常压耐寒冷环境中的存活时间。结果：龟鹿二仙膏能显著增加去势大鼠前列腺及精囊腺指数，使腺细胞增生、扩大、萎缩明显改善；龟鹿二仙膏还能明显提高肾阳虚小鼠自主活动，显著延长在寒冷状态下存活时间。结论：龟鹿二仙膏有较好助阳作用。     

龟鹿二仙膏提高耐力作用研究

目的：研究龟鹿二仙膏的温肾益精、补气养血作用。方法：采用负荷游泳时间及常压密闭环境存活时间试验方法。结果：龟鹿二仙膏可明显延长小鼠负荷游泳时间及在密闭环境中的存活时间。结论：龟鹿二仙膏有较好提高耐力作用。     

龟鹿二仙口服液质量标准研究

目的:通过对龟鹿二仙口服液的质量标准进行再研究,建立更简便易操作的定性、定量方法,提高产品的质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对龟鹿二仙口服液中龟甲、鹿角、党参、枸杞子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对甜菜碱进行含量测定,以丙基酰胺键合硅胶为填充剂,以乙腈-水(80∶20)为流动相,用蒸发光散射检测器检测,理论板数按甜菜碱峰计算应不低于4000。结果:薄层鉴别均斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:建立的方法操作简便、专属性强、重复性好、结果准确,可作为龟鹿二仙口服液的质量控制标准。     

高效液相色谱法测定加味龟鹿二仙膏中甜菜碱含量

目的:建立HPLC测定加味龟鹿二仙膏中甜菜碱含量的方法。方法:采用薄层色谱法鉴别加味龟鹿二仙膏的龟甲、甘氨酸;采用HPLC对制剂中甜菜碱进行含量测定,色谱柱:GL Inertsil ODS-SP色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);柱温:25℃;检测波长:196nm;流动相:乙腈-0.1%三乙胺溶液(磷酸调PH值至7)(80:20);流速:0.8 mL/min。结果:龟甲、甘氨酸的薄层鉴别斑点清晰、专属性强;甜菜碱在10.4606~104.6064μg之间呈良好的线性关系(r=0.9997,n=6),平均回收率为97.57%,RSD%为1.41%(n=9)。结论:所用方法操作简单、重现性好、灵敏度高、结果准确可靠,能有效控制加味龟鹿二仙膏的质量。     

高效液相色谱法测定龟鹿二仙膏中甜菜碱含量

龟鹿二仙膏由龟甲、鹿角、党参、枸杞等4味中药组成，具有温肾益精、补气养血的功效，用于久病肾虚，腰膝酸软，精血不足．遗精阳痿等症。为了更好的控制本品的质量，对其中所含甜菜碱进行含量测定研究。     

龟鹿二仙膏治疗肾虚腰痛120例临床观察

龟鹿二仙膏由龟版、鹿角、党参、枸杞子组成 ,功能温肾益精 ,补气养血。主治久病肾虚 ,腰酸膝软 ,精血不足 ,遗精阳萎。为了进一步评价其治疗肾虚腰痛疗效 ,我们于 1 999年 7月～ 2 0 0 0年 2月以本品与龟鹿补肾丸进行了临床对比观察 ,兹报告如下。1　临床资料1 .1　诊断标准1 .1 .1　腰痛诊断标准　参照《中药新药治疗腰痛的临床研究指导原则》中医诊断标准制订。有典型的一侧或两侧腰部疼痛症状 ;可有反复发作病史 ;排除淋证、水肿、肿瘤、腰骶骨关节疾患以及妇科的月经不调、妊娠等而有腰痛症状者。1 .1 .2　肾虚证辨证标准　参照《中药…     

龟鹿二仙膏治疗虚劳证100例临床疗效观察

运用由龟版、鹿角、党参、枸杞子组成的龟鹿二仙膏,对１００ 例中医诊断为气虚、血虚、肾阴虚、肾阳虚患者进行疗效观察。结果：显效６１ 例,有效３３ 例,无效６ 例,总有效率９４％ 。     

龟鹿二仙膏的临床运用举隅

龟鹿二仙胶又名《四珍胶》,出自《医便》卷一,龟鹿二仙胶由龟板胶、鹿角胶、人参、拘杞组成。人以精、气、神为根本,精不足则无法生气,气不足则无法生神,然而补精必以滋味纯厚的药品为主,具《本草纲目》记载,李时珍日：龟鹿皆灵而有寿,龟首藏于腹,能通任脉,故取甲以补心、补肾、补血,皆以养阴也,鹿鼻常返向尾,能通督脉,故取其角以补命、补精、补气,皆以养阳也,乃物理之玄微,神工之能事也!再加人参、枸杞,益气生精,四者合一,可达精生而气旺,气旺而神昌的境界,久服可延年益寿,故有二仙的美称。     

龟鹿二仙膏在儿科疾病中的运用

龟鹿二仙膏功能为滋补精髓,由鹿角900g,龟版450g,杞子、党参各200g组成.笔者用该方辨证加味,冬季熬膏让患者久服,治疗儿科多种疾病取得满意疗效,现举医案3则如下.     

龟鹿二仙膏方证探讨及临床应用

目的：探讨龟鹿二仙膏的方证思想和临床应用价值。方法：选取2012年1月-2013年7月大学附属医院妇科收治的围绝经期综合征患者96例进行分析,采用龟鹿二仙膏治疗,观察临床疗效及治疗前后临床症状评分。结果：龟鹿二仙膏治疗痊愈64例,好转26例,无效6例,总有效率为93.75%,治疗后中医临床症状评分较治疗前明显下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：龟鹿二仙膏具有补气养血、补精益髓的功效,能够有效提高围绝经期综合征的疗效,缓解患者的临床症状,效果显著。     

基于肾脑相关的龟鹿二仙膏抗阿尔茨海默病作用及其机制

目的 基于“肾脑相关”理论,探讨龟鹿二仙膏对氢化可的松联合β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的阿尔茨海默病（AD）大鼠模型的作用及其机制。方法 采用腹腔注射氢化可的松并脑室注射Aβ诱导大鼠AD模型,龟鹿二仙膏不同浓度进行干预。测定大鼠的海马、肾脏和肾上腺指数;采用Morris水迷宫实验观察大鼠空间学习记忆能力;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清样品中皮质酮（CORT）及睾酮（T）水平;液相色谱-质谱联用（LC-MS）代谢组学技术采集和分析模型大鼠血清代谢数据;利用中药系统药理学数据库及分析平台（TCMSP）、中药分子机制的生物信息学分析工具（BATMAN-TCM）和中医药综合数据库（TCMID）收集龟鹿二仙膏活性成分及相应靶点;利用人类基因数据库（GeneCards）和在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）检索得到的AD相关靶标信息;构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）代谢通路富集分析、基因本体论（GO）富集分析;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠海马组织中白细胞介素-6（IL-6）的表达水平。结果 与模型组比较,龟鹿二仙膏高、中、低剂量组海马指数、肾脏指数和肾上腺指数均显著升高,其中龟鹿二仙膏高剂量组升高最为显著（P<0.01）;龟鹿二仙膏高、低剂量组大鼠穿越平台次数均显著增加（P<0.05,P<0.01）,Ⅲ象限路程（%）和Ⅲ象限时间（%）均显著延长（P<0.05,P<0.01）;龟鹿二仙膏高、中、低剂量组大鼠血清CORT含量均显著降低（P<0.01）;龟鹿二仙膏高、中、低剂量组大鼠海马组织中IL-6表达水平均显著降低（P<0.01）。代谢组学技术共鉴定了24个与AD相关的血清差异代谢物;网络药理学方法共筛选出50个治疗AD的高频共性化合物,高频共性靶点187个,得出磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路在AD复杂的病理机制网络中起到重要作用。结论 龟鹿二仙膏可显著改善氢化可的松并Aβ诱导的AD模型大鼠认知功能障碍,降低血清CORT,抑制海马组织炎症因子IL-6表达,并调节AD模型大鼠的代谢水平,为其临床应用提供依据。     

龟鹿二仙膏对阳虚型少弱精子症大鼠的改善作用及CFTR蛋白表达的影响

目的:观察龟鹿二仙膏对少弱精子症大鼠的改善作用以及睾丸囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)蛋白表达的影响.方法:将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、龟鹿二仙膏组、右归丸组和左卡尼汀组,除正常组外,其余均采用灌胃腺嘌呤造成少弱精子症模型,正常组和模型组给予生理盐水,其余各组灌胃相应药物28 d,最后一次灌胃后2...     

龟鹿二仙胶囊治疗虚损衰老临床研究

龟鹿二仙胶囊是由原龟鹿二仙膏改剂型而成的新药,我院和武汉军区总医院于1999年10月～2000年3月对其治疗虚损衰老进行了临床验证,考察了该药的临床疗效及安全。结果表明,龟鹿二仙胶囊治疗该病证的显效率为62.5%,有效率为97.5%。临床试验中未发现明显不良反应,各项安全性检测指标均无异常变化。现将结果报道如下。 1 一般资料 1.1 病例选择标准 中医辨证属肾虚或兼有气血不足证者,凡年龄在45岁以上,具有神疲乏力、性欲减退、夜尿频数、皮肤干燥、腰膝酸软、畏寒等6项症状以上的,或有上述症状5项并兼有健忘、脱发、头发早白、齿摇、眼花…     

龟鹿二仙胶临床运用举隅

龟鹿二仙胶由鹿角、龟板、枸杞子、人参组成。其性味平和,入五脏,而以肝、肾为主,又善通奇经之任、督,生精、益气、养血、阴阳并补,且补阳而无燥热之害,补阴而无凝滞之弊。临床可将此方作为治疗各科虚证的基本方,兹介绍验案数则。1 阳痿案 年某,男,43岁。夫妻久别重逢,纵行房事,1个月后渐见性欲低下,欲行房事而阴茎不举或举而不坚,滑精,其精液量少而清稀,伴眩晕耳鸣、健忘、腰膝酸痛、神疲乏力。面色黧黑而少光泽,耳轮瘦薄,舌质淡,舌苔薄白.脉弱。证属精气两虚,病位主要在肾。治宜补益精气,方用龟鹿二仙胶加味:龟板30g(击碎,先煎)、鹿茸2g(研细末冲服)、红参15g(另炖)、枸杞子30g、熟地15g、山茱萸12g、锁阳10g、黄芪30g。每日1剂,水煎     

龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制研究

目的:研究龟鹿二仙胶对成骨细胞I型胶原及TGF-β表达的影响,探索龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、龟鹿二仙胶低剂量组、中剂量组、高剂量组、骨化三醇组,每天灌胃1次,持续7 d,末次给药2 h后腹主动脉采血,制成含药血清作用于大鼠成骨样细胞ROS17_2.8株。用MTT法及活细胞形态观察含药血清对成骨细胞增殖及凋亡的影响。用各组含药血清条件培养基培养成骨细胞,应用Western Blot法检测各组成骨细胞I型胶原及TGF-β蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测各组成骨细胞I型胶原及TGF-βmRNA的表达。结果:(1)MTT结果显示:龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无明显增殖。骨化三醇组的成骨细胞有明显增值(P<0.05)。细胞染色提示:骨化三醇组及龟鹿二仙胶组的成骨细胞无显著的凋亡。(2)RTPCR法结果显示:骨化三醇组与龟鹿二仙胶各组COL1A1及COL1A2mRNA的水平均有增加(P<0.01);龟鹿二仙胶中、高剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加较明显(P<0.05),龟鹿二仙胶高剂量组较中剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加不明显(P>0.05);骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平无明显变化(P>0.05);龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平均有增加(P<0.01);且龟鹿二仙胶中、高剂量组TGF-β1、TGF-β2mRNA水平增加差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Western blot结果提示:第24 h,龟鹿二仙胶高剂量组能使成骨细胞COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P<0.05)。第48 h,骨化三醇组、龟鹿二仙胶各组均能使成骨细COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P<0.01);龟鹿二仙胶高、中剂量组之间比较差异没有统计学意义(P>0.05);第24、48 h,骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);在24 h,龟鹿二仙胶高剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有显著增强(P<0.01),龟鹿二仙胶低剂量和中剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);48 h,龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P<0.01)。龟鹿二仙胶高中剂量组之间无显著差异(P>0.05)。结论:龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症机制可能通过调节细胞因子TGF-β,促进I型胶原的表达,为探讨中药促胶原形成治疗骨质疏松提供细胞及分子生物学依据。     

龟鹿二仙汤加味治疗男性少精不育症22例

龟鹿二仙汤加味治疗男性少精不育症２２例广西平果县中医院（５３１４００）李华春黄秀林笔者自１９９０年１１月～１９９３年２月，运用自拟“龟鹿二仙汤”加味治疗男性少精不育症２２例，疗效满意，报道如下。临床资料２２例均系我院门诊患者，婚后夫妇同居３年以上，女...