CK19 CK20和MMP-9mRNA外周血表达与中晚期肺癌临床相关性

目的：检测肺癌外周血中细胞角蛋白19（CK19）mRNA、细胞角蛋白20（CK20）mRNA和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA,探讨其作为判断晚期肺癌外周血检测其转移及判断预后的指标可行性。方法采用RT-PCR技术检测肺癌患者外周血中CK19mRNA、CK20mRNA、MMP-9mRNA的表达量,按表达阴阳性作为标准对其临床资料及短期疗效进行评估。结果 CK19、MMP-9及CK20表达阳性率化疗3疗程后均下降,其中CK19、MMP-9差异有统计学意义（P值0.003、0.007）;CK19mRNA、CK20mRNA和MMP-9mRNA表达阳性率化疗前后与性别,分化等均无相关性（P＆gt;0.05）;其中化疗前CK19mRNA表达Ⅳ期阳性率高于Ⅲ期患者（P=0.01）;腺癌患者CK19mRNA与MMP-9mRNA表达,化疗前表达阳性率明显高于鳞癌差异有统计学意义（P值为0.01、0.04）;化疗后腺癌CK19mRNA、CK20mRNA、MMP-9mRNA表达较鳞癌表达下降明显（P值为0.04、0.03、0.02）;治疗前CK20mRNA和MMP-9mRNA表达与有无疗效存在相关性,差异有统计学意义（P值为0.04、0.0.02）,CK19mRNA表达无相关性。化疗后CK19mRNA、CK20mRNA表达与有无疗效存在相关性,差异有统计学意义（P值为0.01、0.02）,MMP-9mRNA表达无相关性。结论通过CK19、CK20、MMMP-9mRNA表达检测,判断晚期肺癌患者化疗疗效,指导用药,提高晚期患者的生活质量及预后的监测的重要意义。     

荧光定量RT—PCR检测肺癌外周血CK19、CK20mRNA表达

目的 应用荧光定量RT-PCR（Fluorogenic quantitative reverse trailsctiptase po1ymerase chain reaction，RT-PCR）检测肺癌外周血中微转移情况。方法 用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果 103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例，阳性率33．98％；CK20mRNA检测阳性17例，阳性率16．50％，其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性。统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关，与性别、年龄、病理类别无关。结论 用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性，有助于早期筛选亚临床转移。     

腹腔镜与开腹手术对大肠癌微转移的影响

目的观察腹腔镜与开腹手术对大肠癌微转移的影响。方法RT—PCR检测75例经腹腔镜或开腹手术治疗的大肠癌患者术中门静脉血中CK20mRNA的表达。结果2组患者门静脉血中的CK20mRNA表达比较无显著性差异（P〉0．05）。结论腹腔镜与开腹手术比较对大肠癌微转移无促进作用。     

细胞角蛋白19、20 mRNA定量在检测结肠癌患者外周血微转移中的应用

目的探讨细胞角蛋白19、20（CK19、20）mRNA表达在诊断结肠癌患者外周血微转移中的作用。方法随机选择和收集36例结肠癌患者、34例结肠良性疾病患者及32名健康献血员外周血,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ—RT-PCR）测定CK19、20mRNA含量。结果CK19、20mRNA在结肠良性疾病组外周血均未见表达。在健康献血员组只有1例CK19表达阳性,CK20均为阴性。在结肠癌组,CK19检测阳性率为58．3％（21／36）;CK20阳性率为36．1％（13／36）;CK19、20联合检测阳性率为77．8％（28／36）。结肠癌组与结肠良性疾病组或献血员组之间比较,CK19、CK20在外周血表达差异均有显著性（P〈0．05）。结合临床资料分析,结肠癌患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达和淋巴结转移、Dukes分期关系密切（P〈0．05）,而与肿瘤类型及分化程度无关（P〉0．05）。结论CK19、20mRNA可作为检测结肠癌外周血微转移的标志物,两者联合检测可提高检出率。     

腹腔镜CO_2气腹对大肠癌血液转移的影响

目的探讨腹腔镜结直肠癌手术时建立CO_2气腹对肿瘤细胞血液转移的影响。方法选取60例经病理学确诊为结直肠癌患者,将患者按照随机数字表法分为腹腔镜组和开腹组。抽取2组患者术前、术中、术后的外周血样,采用巢式RT-PCR法检测血样中细胞角蛋白20(CK20)的表达,分析不同手术方式对患者外周血肿瘤细胞转移的影响。结果 2组患者外周血CK20mRNA术前、术中、术后不同时间组内、组间阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2组患者的3年生存率比较无显著差异(P0.05)。结论腹腔镜CO_2气腹行腹腔镜结直肠癌切除手术不增加患者外周血CK20mRNA的阳性表达率。     

肺癌患者外周血CK19mRNA 和CyFRA21-1水平的相关性研究

目的　研究肺癌患者外周血细胞角蛋白 1 9(CyFRA2 1 1 )水平和CK1 9mRNA表达水平的相关性 ,并评价其对肺癌临床诊断的价值。方法　用逆转录多聚酶链反应法 (RT PCR)和酶联免疫吸附法 (ELISA)分别测定 91例肺癌、33例良性肺病患者、50例健康人外周血CK1 9mRNA的表达水平和血清CyFRA2 1 1水平。结果　肺癌组患者CK1 9mRNA阳性率和CyFRA2 1 1水平明显高于良性肺病组 (P <0 .0 1 )和健康人组 (P <0 .0 1 )。而且临床分期越晚CK1 9mRNA阳性率和CyFRA2 1 1水平越高 ,CK1 9mRNA对肺癌早期较为敏感。各组织类型间CK1 9mRNA阳性率无显著差异 (P >0 .0 5) ,而CyFRA2 1 1对鳞癌敏感性高于其他类型。结论　肺癌患者外周血细胞角蛋白 1 9(CyFRA2 1 1 )水平和CK1 9mRNA表达水平呈正相关性 ,并对肺癌的早期诊断和病理分型有一定的帮助     

胃肠道肿瘤患者门静脉血CK20mRNA和CEA mRNA检测及其意义

目的 检测胃肠道肿瘤患者门静脉血中CEA mRNA和CK-20 mRNA的表达.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测胃肠道肿瘤患者手术前后门静脉血中循环肿瘤细胞标志物CEAm RNA和CK20 mRNA的表达情况,并对上述指标在外周血中的含量进行检测;同时以非肿瘤手术患者作为对照组.结果 胃肠道肿瘤患者手术后门静脉血CK20 mRNA (79.7%)和CEA mRNA(84.4%)的阳性表达率与手术前(62.5%,67.2%)比较差异具有统计学意义(P<0.05);手术前后门静脉血CK20 mRNA和CEA mRNA的阳性表达率与外周血(43.8%,51.6%)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).胃肠道肿瘤患者术后门静脉血中CK20 mRNA(mean=3.00)和CEA mRNA(mean=3.56)表达量与手术前(mean=2.34,2.58)和外周血(mean=1.16,1.93)比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 门静脉血中CK-20 mRNA,CEA mRNA的表达明显高于外周血.     

结肠癌患者实时荧光定量RT—PCR检测门静脉血CK19 mRNA水平及其临床意义

目的：探讨细胞角蛋白19（Cytokeratin19，CK19）mRNA在结肠癌术中患者门脉血中的表达及临床意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量检测CK19 mRNA在结肠癌手术中患者门脉血中的表达，随访并记录术后24个月时患者的生存情况。结果：90例结肠癌患者门脉血CK19 mRNA阳性者62例，阳性率为66．7％；结肠癌组织CK19 mRNA的表达与分化程度、Dukes分期有相关性（分别rs=0．280，P=0．008；rs=0．367，P〈0．001），且两者之间分别存在线性趋势（精确概率法分别P=0．011；P〈0．001）；CK19 mRNA在肝转移患者中的表达水平明显高于无肝转移组（P=0．049），并且门脉血CK19 mRNA与肝转移间具有一定相关性（rs=0．208，P=0．049）。术中发现肝转移且门脉血CK19 mRNA阳性表达的患者3例，而术中无肝转移但门脉血CK19 mRNA阳性表达的患者59例，其中9例在随访期间出现肝转移，其阳性率分别为4．8％（3／62）和15．3％（9／59）。结论：门脉血CK19 mRNA的表达与结肠癌的分期及分化程度有关，对判断肝脏微转移提供一定的帮助。     

胃癌患者外周血中CK20的表达及临床诊断意义

应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测182例胃癌患者和40例健康志愿者的外周血中CK20 mRNA的表达。结果胃癌组外周血CK20 mRNA阳性表达率为48.9%,健康志愿者组均表达阴性,差异具有统计学意义（P〈0.01）。胃癌患者外周血CK20 mRNA的阳性表达率与胃癌分化状态、TNM分期相关（P〈0.05）。胃癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为胃癌微转移的判断指标。     

大肠癌患者门静脉血CK20mRNA检测的临床意义

目的：检测大肠癌患者门静脉血CK20mRNA的表达情况，探讨其临床意义。方法：用实时定量荧光逆转录聚合酶链（FQ-PCR）方法，检测72例大肠癌患者门静脉及周围静脉血CK20mRNA的表达情况。结果：大肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达的阳性率（72％）高于周围静脉血（43％）（P〈0．01），大肠癌Dukes C，D期门静脉血CK20mRNA高于A，B期（P〈0．01）。结论：门静脉血CK20mRNA表达的检测比周围静脉血检测更准确、敏感，是判断体内隐性播散的可靠方法。     

子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的：探讨子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达对子宫内膜癌微转移诊断的价值。方法：采用RT-PCR方法对40例子宫内膜癌患者及20例子宫良性病变患者外周血CK20 mRNA的表达进行检测。并以子宫内膜癌组织和健康女性外周血为对照。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中均无CK20 mRNA表达；子宫内膜癌组织均有CK20 mRNA表达。40例子宫内膜癌患者术前外周血中，11例检出CK20 mRNA阳性表达，阳性率27．5％。CK20 mRNA阳性检出与临床分期存在显著性相关（P〈0．05），随着临床分期的进展，CK20 mRNA阳性率明显增加。CK20mRNA阳性表达与病理分级无关（P〉0．05）。结论，子宫内膜癌早船可能已出现微量癌细胞的血行播散，CK20可作为子宫内膜癌血行转移的分子标志之一，检测子宫内膜癌患者外周血癌细胞可能成为改进分期、评估预后、提供治疗的参考指标。     

实时荧光定量RT-PCR检测直肠癌术后引流液细胞角蛋白19mRNA的临床意义

目的探讨实时定量PCR技术检测直肠癌术后引流液中细胞角蛋白19（CK-19）mRNA表达的临床意义。方法采用实时定量RT-PCR的技术,检测59例直肠癌根治手术后和15例腹部良性病变术后腹腔引流液中CK-19mRNA的表达。分析直肠癌根治术后腹腔引流液中CK-19mRNA的表达及其与肿瘤侵及深度、腹腔淋巴结转移、肿瘤分化程度的关系。结果直肠癌患者术后腹腔引流液CK一19mRNA表达的阳性率为67．8％（40／59,CK．19mRNA〉4为阳性标准）,明显高于腹部良性病变患者。CKl9mRNA表达情况与浸润深度、淋巴结转移多少、组织学分化程度有关,组间差异具有统计学意义（X^2值分别为8．47、9．19、8．32,P〈0．05或P〈0．01）;结论而且CK19mRNA表达与病理级别具有相关性,淋巴结转移分级越高,直肠癌术后引流液中CK-19mRNA越高（r=0．674,P：0．021）;分化程度越低,术后引流液中CK-19mRNA表达越高（r=-0．741,P=0．014）。结论RT-PCR检测术后腹腔引流液中CK-19mRNA浓度提高直肠癌微转移诊断的敏感性;RT-PCR有助于判断直肠癌术后微转移,是指导术后治疗并评估预后的好方法。     

腹腔灌洗液中CK20m RNA水平与结直肠癌不同术式的研究

目的探讨腹腔灌洗液中CK20m RNA的临床意义以及腹腔镜直肠癌根治术的临床应用价值。方法选择49例直肠癌手术患者,利用RT-PCR技术分别检测以上患者腹腔灌洗液中CK20m RNA表达,从而探究CK20m RNA的临床价值以及评价腹腔镜直肠癌根治术的临床实用性。结果 10例良性病变腹部手术组患者腹腔灌洗液中CK20m RNA无明显表达。39例结直肠癌患者腹腔灌洗液中可见CK20m RNA表达,术前、术中以及术后的总表达率为40.2%(47/117),且术前、术中以及术后CK20m RNA的表达率比较差异无显著性(P0.05)。17例开腹手术组和22例腹腔手术组术前、术中以及术后CK20m RNA阳性表达率的比较差异无显著性(P0.05)。结论腹腔镜结直肠癌根治术治疗结直肠癌安全有效,与开腹手术相比并不增加癌细胞局部种植的风险。     

CK20mRNA诊断大肠癌的价值与意义

实施随机数字表法把我院2010年6月~2011年8月所收治的50例结直肠癌患者均分为治疗组与对照组,所有患者实施结直肠癌根治手术,治疗组在此基础上进行门静脉单次化疗方法。治疗组患者接受手术治疗8d后CK20mRNA阴性表达为60%与对照组患者的24%相比,存在较大差异性(P0.05)。患者外周血CK20mRNA可以作为结直肠癌微转移检测的敏感指标,通过手术前的单次化疗,CK20mRNA已出现显著性的下降,手术前进行5-FU的单次化疗可以有效的降低患者的外周血以及回流入门静脉血中微转移的程度,值得在临床中进一步的使用和推广。     

腹腔镜胃癌根治术治疗进展期胃癌对患者血清应激炎症因子的影响

【目的】探讨腹腔镜胃癌根治术治疗进展期胃癌对患者血清血红素加氧酶‐1（HO‐1）、肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）、白细胞介素‐6（IL‐6）、C 反应蛋白（CRP）水平的影响。【方法】在本院行根治性手术治疗的进展期胃癌患者80例,按照手术方式不同分为腹腔镜组和开腹组,比较两组患者手术情况及手术前后血清 HO‐1、TNF‐α、IL‐6、CRP 含量的差异。【结果】腹腔镜组的手术时间长于开腹组,术中出血量、切口长度、肛门排气时间、住院时间低于开腹组,且差异具有显著性（ P ＜0．05）;两组术后并发症发生率相比较差异无显著性（ P ＞0．05）。手术后腹腔镜组血清 HO‐1、TNF‐α、IL‐6、CRP 均低于开腹组,且差异具有显著性（ P ＜0．05）。【结论】腹腔镜胃癌根治手术较开腹根治手术治疗进展期胃癌其出血量少,切口小、患者恢复快、引起机体的应激反应轻。     

CK20 mRNA和hTERT mRNA在大肠癌围手术期血行微转移中的转录特征

目的 探讨细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20 mRNA和hTERTmRNA的表达,并对不同分化程度、不同Dukes分期的大肠癌患者CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达进行比较.结果 40例大肠癌患者外周血CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达率,术前分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),术中为70.0%(28/40)和70.0%(28/40),术后为10.0%(4/40)和32.5%(13/40).除术后hTERT mRNA阳性率与术前无显著差异(P＞0.05)外,术中外周血CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和表达强度(与内参照β-actin比值)均显著高于术前(P＜0.01,P＜0.05),术后明显低于术前和术中(P＜0.01).hTERT mRNA在低分化肿瘤的表达明显高于高、中分化组(P＜0.05),而CK20mRNA在低分化肿瘤的表达强度低于高、中分化组(P＜0.01).大肠癌围手术期Dukes B期和C D期之间CK20 mRNA和hTERT mRNA均无显著性差异(P＞0.05).结论 大肠癌患者围手术期血行微转移的发生几率较高,病理分化程度低者更易发生,但与Dukes分期无明显相关,CK20 mRNA和hTERT mRNA联合检测对大肠癌血液微转移具有较高的敏感性和特异性,是判断围手术期血行微转移的良好标志物.     

腹腔镜和开腹胃癌根治术患者围术期护理的比较

目的比较腹腔镜和开腹胃癌根治术患者术后恢复情况，探讨两种胃癌根治术患者的围术期护理方法。方法对比分析2004年3月至2007年9月我科339例腹腔镜胃癌根治术和同期284例开腹胃癌根治术的病例，比较两组患者术后疼痛、恢复情况及护理措施。结果腹腔镜组患者术后疼痛程度明显低于开腹组，开始下床活动时间、进流质时间均早于开腹组，差异有统计学意义（P〈0．01）；腹腔镜组患者术后肛门排气、排便、拔除胃管的时间及平均住院日均少于开腹组患者，差异有统计学意义（P〈0．05）；腹腔镜组患者术后并发症发生率为8．85％，开腹组术后并发症发生率为9．86％，两者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论腹腔镜胃癌根治术相对传统开腹手术而言具有创伤小、术后恢复快等优点，其围术期护理的关键在于心理护理、术后病情观察和加强健康教育及饮食指导等。     

RT-PCR检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20 mRNA的表达

目的：检测结直肠癌患者外周血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达．并探讨其临床价值。方法：应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应，检测59例结直肠癌患者、12例原发性肝癌患者和26例对照者外周血中CK20mRNA的表达。结果：对照者及原发性肝癌患者外周血中CK20mRNA均为阴性表达。结直肠癌患者外周血中CK20mRNA阳性表达率为5913％。结直肠癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达率在不同肿瘤病理分化程度中差异无显著性，而在不同Dukes分期和有无淋巴结转移及远处转移患者间差异有显著性（P〈0.05）。结论：检测结直肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达可作为预测肿瘤微转移的评估指标，可监测患者病情变化，识别高危人群，并有助于结直肠癌微转移的判断及鉴别原发性肝细胞肝癌和结直肠癌肝转移。[著者文摘]     

胃癌术后外周血CK20 mRNA及腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA、TNF-α的变化分析

目的探讨胃癌患者手术后外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA、腹腔冲洗液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、癌胚抗原(CEA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化。方法选取我院2015年1月-2016年9月实施胃癌根治手术的117例患者,根据手术方法分为腹腔镜组60例、传统组(传统开腹手术)57例,采用ELISA法检测两组患者手术开始时、手术结束时的腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA及TNF-α水平,采用RT-PCR法检测术前及术后72h患者外周血中CK20 mRNA水平。结果手术开始时,腹腔镜组和传统组的腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA及TNF-α水平比较,差异均无统计学意义(P0.05);手术结束时,腹腔镜组的腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA及TNF-α水平低于传统组(P0.05);两组患者手术结束时腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA及TNF-α水平均较手术开始时显著的升高(P0.05);术前,腹腔镜组和传统组的外周血中CK20 mRNA水平比较,差异均无统计学意义(P0.05);术后72h,腹腔镜组的外周血中CK20 mRNA水平低于传统组(P0.05);两组患者术后72h外周血中CK20 mRNA水平较术前显著的升高(P0.05)。结论胃癌患者术后腹腔冲洗液中IL-6、IL-10、CEA及TNF-α、外周血CK20 mRNA水平均会升高,提示手术可能加大肿瘤发生微转移的风险,尤其是传统开腹手术的风险更大。