腺病毒介导BDNF基因转染对大鼠视神经损伤后视网膜中SOD、MDA水平的影响

目的:腺病毒介导脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)转染对大鼠视神经损伤后视网膜中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。方法:建立大鼠视神经夹挫伤模型,随机分为BDNF腺病毒组、lac-Z腺病毒组和生理盐水组,将药物经玻璃体途径注射入大鼠眼内,并设正常大鼠对照。观察各组不同时间视网膜组织中MDA和SOD的含量变化。结果:正常SD大鼠视网膜组织MDA的含量为(5.21±1.32)nmol/ml,SOD的含量为(1751.57±180.55)U/g·pro。大鼠视神经夹伤后MDA含量升高,SOD含量降低。BDNF腺病毒组视网膜MDA含量为(6.67±1.36)nmol/ml(3d)、(5.72±1.66)nmol/ml(7d)、(5.54±1.03)nmol/ml(14d)and(5.33±1.45)nmol/ml(21d),低于两损伤对照组,而SOD含量为(158.55±173.39)U/g·pro(3d)、(161.24±184.57)U/g·pro(7d)、(1694.49±184.30)U/g·pro(14d)和(1721.75±179.86)U/g·pro(21d),高于两损伤对照组。在3 d、1 wk和2 wk时有显著统计学差异(P<0.05),两对照组间在各时间点均无统计学差异。结论:腺病毒介导BDNF转染对视神经损伤后视网膜损伤具有早期防护作用,其作用可能与BDNF刺激局部的SOD含量增加有关。眼科学报 2002;18:249-252.     

阿魏酸钠对兔实验性高眼压视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferlate,SF)对实验性高眼压视网膜缺血-再灌注(retinal ischemic reperfusion,RIR)损伤的保护作用及机制,方法采用眼内灌注法,前房灌注生理盐水建立RIR损伤模型32只新西兰大白兔随机分为SF治疗组、生理盐水对照组,每组16兔.2组于再灌注后立即按50 mg·kg-1体质量耳缘静脉推注25 g·L-1SF和生理盐水,每隔24 h推注相同量的药物和生理盐水.每组分别于推注后24 h、72 h空气栓塞法处死动物,用硫代巴比妥分光光度法(TBA)测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性结果再灌注24 h后,对照组视网膜MDA含量为(3.434±1.003)μmol·g-1,较治疗组(1.394±0.564)μmol·g-1升高(P＜0.05),SOD含量为(70.734±1.329)U·mg-1,低于治疗组(98.892±8.979)U·mg-1(P＜0.05);再灌注72 h后,对照组视网膜MDA含量为(2.639±1.412)μmol·g-1,高于治疗组(1.459±1.552)μmol·g-1(P＜0.05),SOD含量为(113.169±0.072)U·mg-1,低于治疗组(139.222±10.066)U·mg-1(P＜0.05)结论 SF注射液可通过降低视网膜组织MDA含量,提高SOD活性,对新西兰大白兔实验性高眼压RIR损伤起一定的保护作用.     

Nogo受体在早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用

目的:探讨Nogo受体(nogo receptor,NgR)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及机制。方法:链脲佐菌素诱导SD大鼠DM模型,实验分4组,对照组;DM组;siNgR组:DM大鼠玻璃体内给予NgR反义核苷酸序列;siRNA空白组:DM大鼠玻璃体内给予阴性核苷酸序列。1mo后TUNEL染色检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡,试剂盒检测视网膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western-blot检测视网膜NgR及caspase-3含量。结果:对照组、DM组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为3.74±0.49,7.21±0.96,6.41±1.34及4.02±0.53nmol/mg prot。与对照组相比,DM组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡增加,NgR及caspase-3表达上调,MDA含量升高(P<0.05),而siNgR组视网膜RGC数量、NgR及caspase-3表达、MDA含量较对照组均无明显变化(P>0.05)。结论:NgR表达增加是糖尿病RGC凋亡的重要原因之一,其机制可能与NgR诱导视网膜氧化应激、上调caspase-3表达有关。     

川芎嗪对过氧化氢致大鼠视网膜神经节细胞氧化损伤的抑制作用及机制

目的　探讨川芎嗪对H₂O₂诱导的大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）氧化损伤的抑制作用及其机制。方法　在DMEM培养基中培养RGC-5细胞。将细胞分成5组:正常对照组:不做任何处理；阴性对照组:用20 g·L^-1川芎嗪孵育24 h；氧化损伤组:用100 μmol·L^-1的H₂O₂孵育24 h；川芎嗪低浓度组:用20 g·L^-1川芎嗪孵育24 h后加入100 μmol·L^-1的H₂O₂孵育12 h；川芎嗪高浓度组:用40 g·L^-1川芎嗪孵育24 h后加入100 μmol·L^-1 的H₂O₂孵育12 h。通过MTT法测定细胞增殖情况，荧光标记法检测RGC-5细胞内活性氧含量，Hoechst-PI染色观察细胞凋亡情况，使用721D分光光度计测定细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果　MTT法测定结果显示，氧化损伤组RGC-5细胞活性明显下降(24.67%±2.90%)，与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与氧化损伤组比较，川芎嗪低、高浓度组RGC-5细胞活性分别提高到51.33%±4.35%和60.00%±3.65%，差异均有统计学意义(均为P<0.05)。荧光标记法显示，氧化损伤组DCF荧光信号明显增强，不同浓度川芎嗪干预后，荧光信号强度逐渐减弱。Hoechst-PI染色显示，氧化损伤组凋亡细胞数增多，甚至出现红染的坏死细胞，细胞凋亡率为66.00%±2.98%；川芎嗪干预后，凋亡及坏死细胞逐渐减少，川芎嗪低、高浓度组细胞凋亡率分别为52.33%±4.11%和46.04%±3.52%，两组细胞凋亡率与氧化损伤组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与阴性对照组比较，氧化损伤组RGC-5细胞内SOD、GSH-PX含量明显下降，MDA含量升高，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与氧化损伤组比较，川芎嗪高浓度组SOD、GSH-PX含量升高，MDA含量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与氧化损伤组比较，川芎嗪低浓度组 SOD 与MDA含量变化不大（均为P>0.05），GSH-PX含量升高（P<0.05）。结论　川芎嗪通过改变RGC-5细胞内抗氧化酶表达发挥对氧化损伤的RGC的保护作用。     

兔视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位的变化观察

目的观察兔视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）线粒体跨膜电位（mitochondrial transmembrane potentials,△ψm）的变化。方法选用新西兰白兔32只,分为对照组和损伤组,损伤组再根据损伤后不同时间分为3d、7d、14d组,共4组,每组8只兔16眼。采用Rh123染色,流式细胞术测定RGC△ψm。结果正常新西兰白兔RGC△ψm为3836.67±21.32。在损伤后3d、7d、14d,视网膜细胞△ψm分别为3055.41±7.74、1822.07±18.66、2617.38±7.37。各时间点的△ψm均明显低于正常对照组,且各时间点间△ψm差异有统计学意义（P〈0.05）。结论△ψm在RGC凋亡早期的观测中有一定的意义,并且能进行定量分析研究。     

大鼠视神经损伤视网膜内P38丝裂原活化蛋白激酶活性的表达

目的:动态观察视神经损伤后视网膜中P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性的表达变化和早期细胞凋亡情况。方法:制作大鼠视神经钳夹伤模型后设立对照组、假手术组和视神经夹伤组,应用免疫组化方法及流式细胞仪分别检测视神经损伤后1,6,12,24h;15,30d共6个时间点3组大鼠视网膜中磷酸化(活化)P38MAPK的表达和早期细胞凋亡率,同时对视网膜形态学改变进行观察。结果:视神经损伤诱导视网膜神经节细胞(RGC)严重丧失,损伤后1~15dRGC快速减少,15d后缓慢减少。在正常对照组、假手术组磷酸化P38MAPK表达阴性,视神经损伤后P38MAPK活性的表达于6h检测到表达,逐渐增加至24h阳性表达达高峰,15d表达下降,30d消失,具有统计学意义(P<0.01)。视神经损伤后早期细胞凋亡率逐渐上升,24h达最高8.9%,随后下降。结论:视神经不完全损伤刺激了大鼠视网膜中P38MAPK的活性表达,与早期细胞凋亡率变化相似。P38MAPK通路与视神经损伤诱导的大鼠视网膜RGC凋亡密切相关。     

银杏叶制剂EGb 761对外伤后视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨银杏叶提取物制剂EGb 761对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞(RGC)存活的影响.方法 大鼠48只经荧光金逆行标记后制备视神经损伤的动物模型,随机分为治疗组和对照组,两组分别给予EGb 761 150 mg/kg·d和生理盐水灌胃.在视神经损伤后4d、7d及14d观察视网膜铺片,进行RGC计数.结果 大鼠视神经损伤后4d、7d及14d,RGC数量持续减少,但治疗组均高于对照组,各时间点的差异均有统计学意义(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).结论 EGb761可促进视神经损伤后RGC的存活,对RGC有保护作用.     

Colivelin对视神经保护作用的初步研究

目的初步探讨Colivelin对大鼠外伤性视神经损伤后的神经保护作用和机理,及其保护效果是否具有剂量依赖性。方法 40只健康2月龄Wistar大鼠,随机分为模型组、安慰剂组及Colivelin低剂量组(10-6 μmol·L-1 Colivelin)、Colivelin中剂量组(10-4μmol·L-1Colivelin)、Colivelin高剂量组(10-2 μmol·L-1 Colivelin),每组8只。40只大鼠均做单侧视神经损伤模型,模型组另一侧未做任何处理的8眼为空白对照组。应用无创血管夹建立大鼠视神经夹伤模型,造模后30 min Colivelin治疗组玻璃体内分别注射不同浓度Colivelin 5 μL,安慰剂组注射5μLPBS缓冲液,模型组和空白对照组不给予任何治疗。注药后7d,通过视网膜切片技术,进行HE染色观察视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)的形态及数目,TUNEL染色法检测RGC的凋亡以及免疫组织化学法检测视网膜中caspase-3的表达。结果 HE染色可见空白对照组视网膜各层细胞排列整齐密集,模型组、安慰剂组、Colivelin治疗组均可见部分RGC核固缩,但随着Colivelin注射浓度的增加,RGC发生核固缩的数量减少。RGC计数:空白对照组每400倍光镜视野下RGC数量为25.750±1.264,模型组为8.236±1.239,安慰剂组为8.514±1.222,Colivelin低剂量组为14.500±1.021,Colivelin中剂量组为16.250±1.319,Colivelin高剂量组为18.097±1.323,除模型组与安慰剂组之间差异无统计学意义(P>0.05)外,其他各组之间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL染色:模型组和安慰剂组注药后7 d TUNEL染色可见大量凋亡细胞,Colivelin治疗组凋亡细胞数量随Colivelin注射浓度的增加依次递减。RGC细胞凋亡率:模型组为(60.928±2.961)%,安慰剂组为(61.446±2.755)%,Colivelin低剂量组为(58.432±2.835)%,Colivelin中剂量组为(51.948±2.802)%,Colivelin高剂量组为(47.656±2.331)%。Caspase-3表达:模型组、安慰剂组及Colivelin低剂量组、中剂量组、高剂量组均可见caspase-3表达。平均光密度值显示,模型组和安慰剂组相比caspase-3表达无明显差异(分别为0.482±0.012和0.486±0.012),均高于Colivelin治疗组(均为P<0.05),并且Colivelin低剂量组、中剂量组、高剂量组组间差异亦均有统计学意义(分别为0.411±0.017、0.326±0.018、0.234±0.016;均为P<0.05)。结论 Colivelin能有效增加视神经损伤后RGC的数量,抑制其凋亡,减少caspase-3表达,且这一作用呈剂量依赖性。     

罗格列酮对高糖诱导视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的 探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对高糖诱导视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)损伤的保护作用.方法 体外培养大鼠RGC细胞株RGC-5细胞,50 mol·L-1葡萄糖孵育细胞诱导损伤.应用CCK-8法测定并计算细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,全自动氨基酸分析仪测定细胞谷氨酸(glutamic acid,Glu)释放量,测定细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性.结果 高糖(50 mol·L-1)以时间依赖的方式抑制了RGC-5细胞的生长,高糖处理24 h、48 h和72 h生长抑制率分别为(22.37±3.49)％、(42.18±6.34)％和(57.33±5.39)％(均为P ＜0.05);与高糖组比较,高糖+不同浓度RSG组(0.1×10-6 mol·L-1、10-6 mol·L-1、10×10-6 mol·L-1)处理48 h以剂量依赖的方式降低了高糖诱导的RGC-5细胞生长:生长抑制率高糖组(42.18±6.34)％,高糖+不同浓度RSG组分别为(35.66±4.73)％、(27.35±4.15)％和(25.17±3.42)％(均为P＜0.05).与对照组比较,高糖处理24 h、48 h和72 h以时间依赖的方式促进了细胞凋亡(均为P＜0.05);与高糖组比较,高糖+不同浓度RSG组(0.1×10-6 mol·L-1、10-6 mol·L-1和10×10-6mol·L-1)处理48 h以剂量依赖的方式降低了高糖诱导的RGC-5细胞凋亡:高糖组凋亡率为(31.55±5.34)％,高糖+不同浓度RSG组分别为(23.75±3.72)％、(18.75±2.17)％和(17.53±3.05)％(均为P＜0.05).与对照组比较,高糖组Glu释放量显著增加:2组分别为(85.64±12.75)μg·L-1和(246.84±33.48)μg·L-1(P＜0.05).与高糖组比较,高糖+不同浓度RSG(0.1×10-6mol·L-1、10-6 mol·L-1和10×10-6mol·L-1)处理48 h组Glu的释放以剂量依赖的方式减少:高糖组Glu释放量为(246.84 ±33.48)μg·L-1,高糖+不同浓度RSG组分别为(175.34±23.69)μg·L-1、(117.25±18.76) μg·L-1和(109.34±15.54) μg·L-1(均为P＜0.05).与对照组比较,高糖组SOD活性显著降低:分别为(3.06±0.38) kU·g-1和(0.56±0.07)kU·g-1(均为P＜0.05),而MAD水平显著增加:分别为(5.67±0.76) μmol·g-1和(37.64±4.37) μmol·g-1(均为P＜0.05).与高糖组相比较,高糖+不同浓度RSG处理48 h组细胞中SOD活性以剂量依赖的方式增加(均为P＜0.05),而MAD水平显著降低(均为P＜0.05).结论 RSG抑制了高糖诱导的RGC损伤,其机制与RSG减少了RGC中Glu的释放和抑制氧化应激有关.     

地塞米松对兔视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞存活及Nogo-A表达的影响

目的观察地塞米松对家兔视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)存活的影响及损伤视神经、视网膜Nogo-A表达的变化。方法采用兔球后视神经钳夹伤模型,健康成年家兔分为正常对照组、损伤组、治疗组。分别于损伤后3d、7d、14d处死动物,观察单位面积RGC存活数量及损伤后Nogo-A在视神经、视网膜的表达变化。结果视神经损伤后,治疗组RGC的存活数高于损伤组及对照组(P<0.01)。对照组、损伤组损伤后3d、7d、14d视神经、视网膜Nogo-A表达增强,至损伤后7d达高峰;治疗组视神经、视网膜表达亦增强,各时间点均弱于损伤组、对照组,差异有显著统计学意义(P<0·01)。结论视神经损伤后,地塞米松能够增加RGC的存活数量,能够下调No-go-A的表达,这可能是地塞米松治疗作用机制之一。     

静脉注射α-晶体蛋白对视网膜神经节细胞的保护作用及对重要脏器的影响

目的 观察静脉注射α-晶体蛋白对Long Evans大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞(RGC)存活的保护作用及对重要脏器的影响.方法 23只Long Evans大鼠用于本实验.荧光金经双侧上丘及外侧膝状体逆行标记RGC,7 d后制作视神经钳夹伤模型.3只作为正常对照组,其余20只随机分为生理盐水对照组以及1×10-2g/L、1×10-1 g/L、1 g/Lα-晶体蛋白组,每组5只大鼠.视神经钳夹伤后经尾静脉分别注射1.25 ml的等渗生理盐水及3个浓度的α-晶体蛋白,每2天重复注射1次,共7次.2周后对实验大鼠行RGC计数,并对肝、肾、脑、脾、肺等脏器进行病理观察.结果 正常对照组RGC计数(2074±150)个/mm2,视神经钳夹伤后2周时RGC计数,生理盐水对照组(85±15)个/mm2,1×10-2g/L α-晶体蛋白组(124±26)个/mm2,1×10-1g/L α-晶体蛋白组(128±31)个/mm2,1 g/Lα-晶体蛋白组(164±20)个/mm2.正常对照组RGC计数显著高于其他组,3个浓度α-晶体蛋白组存活的RGC数均显著高于生理盐水对照组(F=18.660,P＜0.01).各组肝、肾、脑、脾、肺病理观察未见充血、肿大、炎症等病理改变.结论 静脉注射α-晶体蛋白对视神经损伤后RGC存活具有一定保护作用,所用α-晶体蛋白浓度对重要脏器无病理性影响.

Abstract：

Objective To investigate the effects of intravenous injection of α-crystallin on retinal ganglion cells (RGC) and some important organs of the Long Evans rats. Methods RGC were retrogradelabeled by fluorogold through bilateral superior colliculus and lateral geniculate body for seven days before optic nerve crush injury. Twenty-three Long Evans rats were used for this study, including three rats of normal control group and 20 rats of experimental group. Twenty rats were randomly divided into saline control group and three α-crystallin injection groups, which received tail vein injection of 1.25 ml isotonic saline and three different concentrations (1 × 10-2 , 1 × 10-1 and 1 g/L) of α-crystallin respectively, once every two days and totally seven times. After two weeks, the labeled RGC were counted, and the pathological changes on liver, kidney, brain, spleen and the lungs were investigated. Results Compared with the normal control group, although the number of RGC markedly decreased after two weeks of optic nerve crush injury in every group, the number of RGC in α-crystallin-treated groups was more than those in the saline control group. There were 2074± 150 RGC per mm2 in normal control group, 85 ± 15 RGC per mm2 in saline control group, 124±26 RGC per mm2 in 1 × 10-2 g/L α-crystallin group, 128± 31 RGC per mm2 in 1 × 10-1 g/L α-crystallin group, 164 ± 20 RGC per mm2 in 1 g/L α-crystallin group (F= 18. 660,P＜0. 01). No congestion, swelling, inflammation and other pathological changes were found in liver,kidney, brain, spleen and lung. Conclusions Intravenous injection of α-crystallin protein has protective effects on RGC after the optic nerve crush injury, and no significant effects on important organs.     

视盘内注射组织凝血酶原激活剂安全性的电生理学评价(英文)

目的:探讨视盘内注射组织凝血酶原激活剂的电生理学安全性。方法:首先将记录VEP的电极植入兔颅骨内。经兔睫状体扁平部将25μg tPA,12.5μg tPA及BSS注入视神经内0.1mL,并与第四组正常眼作比较(n=6)。注入后1,3,7,14和24d行裂隙灯及间接眼底镜检查,记录VEP及ERG。结果:检查未发现视神经内注射tPA对视神经和视网膜有明显的毒性作用和其它损伤。各组VEP第1个波峰的潜伏期分别是24.6±1.5, 24.1±1.9, 24.0±2.0和24.6±1.3mS(P=0.4112);振幅分别是124±42, 145±41, 132±48和117±29μV(P=0.0649)。各组ERG的a波的潜伏期分别是6.0±0.4, 5.9±0.4, 5.9±0.5和5.8±0.3mS(P=0.6279);振幅分别是110±14, 112±15, 110±16和108±11μV(P=0.7248)。b波的振幅分别是151±12,148±14, 144±16和141±20μV(P=0.0957)。结论:经睫状体扁平部向兔视神经内注射tPA,安全可行。     

木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠TLR4/Syk/NF-κB信号通路及视网膜的影响

目的 探讨木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠Toll样受体4(TLR4)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子-κB (NF-κB)信号通路及视网膜的影响.方法 40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、木犀草素低剂量组(5 mg·kg-1)、木犀草素高剂量组(10 mg·kg-1),每组10只,除对照组外,其余...     

富血小板血浆在兔外伤性视神经损伤中的修复作用及其机制

目的:研究自体富血小板血浆(PRP)对兔外伤性视神经损伤及视网膜的修复作用及机制。方法:选取清洁级成年新西兰白兔40只,构建兔右眼视神经钳夹损伤模型,将造模成功的36只新西兰白兔按照随机数表法随机分为模型对照组、生理盐水对照组和PRP组,每组12只,均以右眼为实验眼,另取12只健康未造模兔作为正常对照组。抽取兔自体血制...     

灯盏细辛对大鼠视神经压榨伤后视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨中草药灯盏细辛对大鼠标定性视神经压榨伤所致的视网膜神经节细胞(RGC)损伤的防护和修复作用。方法　 4 2只健康SD大鼠随机均分为A组和B组。两组均用特制微型视神经夹直接夹持视神经 ,制作成单眼视神经部分压榨伤模型后 ,A组不予任何治疗 ,B组予以灯盏细辛治疗 ,直至处死动物。以上两组按致伤日至处死日动物的存活时间又分为 :A1组和B1组 (损伤后 4d) ,A2 组和B2 组 (损伤后 14d) ,A3 组和B3 组 (损伤后 2 1d) ,每组各 7只大鼠。于处死前 3d双上丘直接注射 3%快蓝标记双眼RGC。处死日行眼球摘除术后 ,将双眼全视网膜组织铺片置于荧光显微镜下 ,在距视乳头 1mm处的颞上、颞下、鼻下及鼻上 4处作荧光摄影 ,并输入计算机经图像分析仪计数RGC。计算RGC标识率 ,即 (损伤眼RGC数 /未损伤眼RGC数 )× 10 0 % ,并进行统计学分析。结果　A组大鼠中 ,A1、A2 及A3 组的RGC标识率分别为 (77 79± 7 11) %、(6 3 76± 3 79) %、(5 4 6 6±4 75 ) % ;B组大鼠中 ,B1、B2 及B3 组的RGC标识率分别为 (80 13± 12 0 3) %、(78 17± 9 19) %及(83 5 9± 12 6 1) %。A2 和A3 组分别与B2 和B3 组比较 ,差异均有非常显著意义 (t=14 10 8,36 2 0 3;P<0 0 1)。结论　大鼠标定性视神经压榨伤后用灯盏细辛治疗 ,     

藏红花提取液对慢性高眼压兔视网膜SOD和MDA的影响

目的:探讨实验性慢性高眼压兔视网膜SOD和MDA含量的变化及藏红花提取液的保护作用。方法:新西兰家兔24只,随机分为正常对照组、高眼压组、治疗I组和治疗II组,每组6只12眼。高眼压组和2个治疗组兔的眼前房内注射3g/L复方卡波姆溶液0.2mL,造成慢性高眼压模型。治疗I,II组兔每日经耳缘静脉推注藏红花提取液,20mg和80mg原药/kg。在7,14d后处死各组半数动物,检测视网膜SOD,MDA含量,并进行组间比较分析。结果:造模7d后高眼压组、治疗I组和II组家兔视网膜组织中的SOD值均明显低于对照组,有显著统计学差异(P<0.05);但治疗I,II组的SOD值均明显高于高眼压组,且治疗II组高于治疗I组(P<0.05)。在14d时,高眼压组与2个治疗组的SOD值均已接近对照组水平,差异无显著性(P>0.05)。造模后7d,高眼压组视网膜组织中的MDA含量明显高于对照组,有显著统计学差异(P<0.01)。治疗I组、II组的MDA含量均低于高眼压组(P<0.01),但仍明显高于对照组(P<0.01)。造模后14d,高眼压组、治疗I组和II组的MDA水平均进一步升高,但与对照组相比仍略高(P<0.01)。结论:藏红花提取液在高眼压早期能有效提高慢性高眼压下视网膜中SOD活性,降低MDA含量。     

褪黑素对高糖诱导白内障形成抑制作用的实验研究

目的:观察褪黑素(melatonin,MLT)对高糖诱导体外培养兔晶状体白内障形成的抑制作用。方法:选取发育正常的兔晶状体,随机分为3组:A组空白对照组、B组高糖处理组、C组实验组(在高糖处理的基础上加MLT,浓度为50μmol/L)。观察不同培养时间(48,72,96h)各组晶状体混浊程度。通过黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD);化学比色法测定过氧化氢酶(catalase,CAT);硫代巴比妥酸法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA),观察不同时间各组晶状体的生物化学变化。结果:晶状体混浊情况:培养96h后,A组晶状体无明显变化,晶状体完全透明为80%,Ⅱ级混浊为20%;B组晶状体混浊逐渐加重,晶状体Ⅳ级混浊为20%,Ⅴ级混浊为80%;C组晶状体完全透明为60%,Ⅱ级混浊为40%。晶状体生化指标的测定:C组兔晶状体组织中的SOD,CAT含量高于B组(P<0.01),C组兔晶状体组织中MDA含量低于B组(P<0.01)。结论:MLT可抑制高糖诱发的兔晶状体的氧化损伤,延缓和减轻高糖诱导的兔白内障的发生和发展。     

木犀草素调控Nrf2/HO-1通路保护视网膜色素上皮细胞氧化损伤

目的:探讨木犀草素对H2O2诱导的视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:将ARPE-19细胞分为对照组、H2O2组、不同剂量木犀草素组和Nrf2抑制剂组,除对照组外均采用100μmol/L H2O2制备RPE氧化损伤模型。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力并确定木犀草素处理浓度,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)含量,采用试剂盒法检测细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用Western blot检测细胞Caspase-3、多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、核因子E2相关因子2(Nrf2)及血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果:100μmol/L木犀草素对ARPE-19具有毒性作用,因此选择25μmol/L和50μmol/L木犀草素进行后续实验。与H2O2组比较,25μmol/L和50μmol/L木犀草素组细胞活力明显升高,凋亡率降低,ROS和MDA含量明显减少,SOD活性明显升高,Caspase-3和PARP蛋白表达水平明显降低,Bcl-2、Nrf2及HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与50μmol/L木犀草素组比较,Nrf2抑制剂组细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,ROS和MDA含量明显升高[(654.96±26.99)vs(446.52±29.42),(3.89±0.29)nmol/mL vs(2.06±0.19)nmol/mL],SOD活性明显降低[(13.83±1.49)U/mL vs(22.69±1.83)U/mL],Caspase-3和PARP蛋白表达水平明显升高,Bcl-2、Nrf2及HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:木犀草素能够改善H2O2诱导的RPE细胞氧化损伤,其作用机制与激活Nrf2/HO-1通路有关。