实验性肝纤维化TGF-β1／Smad的表达及γ-干扰素对其的作用CSCD

目的观察Y-干扰索（IFN-Y）对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法30只雄性大鼠用CCl4诱导致肝纤维化,随机分成2组（模型组、IFN-Y治疗组）,连续用药12周,观察肝组织病理、血清透明质酸（hyaluronicacid,HA）、血清转化生长因子B,（transforminggrowthfactorβ1,TGF—β1）、肝组织切片TGF—β1、转化生长因子BI型受体（transforminggrowthfactorBreceptor,T13R·I）、Smad2/3,,的表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;Y-干扰素治疗组纤维化程度较模型组显著改善,差异有统计学意义（P〈0．05）;②肝纤维化指标（HA、TGF—β1）：Y-干扰素治疗组大鼠HA及TGF—β1较模型组均降低（P〈0．05）,③TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与模型组相比,IFN-Y治疗组大鼠肝脏中TGF-β1、TβR—I和Smad,蛋白表达均显著减弱,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IFN-Y治疗组具有显著抗肝纤维化作用,对TGF—β1／Smad信号转导通路的影响可能为其作用机理之一。     

ROCK I及TGF-β1在慢性血栓栓塞性肺动脉高压大鼠肺小动脉的表达

目的：观察Rho激酶（ROCK I）及转化生长因子β1（TGF—β1）在慢性血栓栓塞性肺动脉高压大鼠肺小动脉表达的动态变化。方法：雄性Wistar大鼠64只，随机分为8组，每组8只：初始对照组、栓塞3d组、1周组、2周组、4周组、8周组、12周组、终末对照组。采血制备血栓，颈静脉注入，2周后第2次栓塞，全程腹腔注射氨甲环酸。达实验设定日期后，测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、肺动脉相对中膜厚度（PAMT）、管壁面积／管总面积（WA／TA）、右室肥厚指数（RVHI），原位杂交检测ROCK I mRNA表达，免疫组化检测TGF—β1蛋白表达。结果：栓塞4周组至12周组大鼠随时间延长mPAP明显增高（均P〈0．01）；PAMT、WA／TA在4周后随时间延长显著增高（4周组P〈0．05，8周、12周组P〈0．01）；8周后RVHI较对照组明显增高（8周组P〈0．05，12周组P〈0．01）；栓塞后ROCK I mRNA原位杂交染色强度随时间延长出现增高趋势（3d组至2周组P〈0．05，4周组至12周组P〈0．01），TGF—β1蛋白免疫组化染色强度随时间延长出现增高趋势（1周组、2周组P〈0．05，4周组至12周组P〈0．01）。相关分析表明，ROCK I mRNA及TGF—β1蛋白与mPAP、RVHI及血管重构指标均呈正相关（均P〈0．01）；ROCKImRNA与TGF—β1蛋白表达呈正相关（r=0．612，P〈0．01）。结论：ROCKI和TGF—β1均可能参与慢性血栓栓塞性肺动脉高压、肺血管重构的病理生理过程，此过程中Rho／Rho激酶信号通路可能是TGF—β1发挥生物学效应的重要途径之一。     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1/Smad蛋白的动态表达及意义

目的 探讨转化生长因子TGF-β1/Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用.方法 50只健康雄性SD大鼠分为2组:正常组和模型组,模型组大鼠利用40％ CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达.结果 ①肝组织病理:与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生.模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义(P＜0.05);②TGF-β1/Smad基因蛋白:免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF-β1、转化生长因子βⅠ型受体(TβR-Ⅰ)、Smad2/3、Smad7蛋白表达均显著增强(P＜0.01),模型组大鼠肝脏TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P ＜0.05或0.01);模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P＜0.05或0.01).结论 肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1/Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展.     

TGF-β1／Smad信号转导通路在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中TGF—β1／Smad的表达,探求TGF—β1／Smad信号转导通路在子痫前期发病中的作用。方法采用免疫组织化学法检测40例子痫前期（轻、重度）和正常孕妇15例正常妊娠妇女胎盘中TGF-β1以及Smad3、Smad4、Smad7的分布和表达,采用TUNEL法检测三组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF-β以及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7在正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF-β1以及Smad3、Smad4在正常妊娠组、子痫前期轻度组和重度组的表达强度及范围均呈逐渐升高趋势,Smad7在正常妊娠组、子痫前期轻度和重度组表达强度及范围依次呈逐渐下降趋势。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。重度子痫前期组胎盘滋养细胞凋亡（1．02）％显著高于子痫前期轻度组（0．73）％,子痫前期轻度组显著高于正常妊娠组（0．38）％,P〈0．05。滋养细胞TGF—β1的表达与滋养细胞凋亡具有相关性（r=0．96,P〈0．05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF—β1可能是通过Smad信号转导蛋白抑制滋养细胞浸润,诱导细胞凋亡。     

柴芪益肝颗粒防治四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的作用

目的观察柴芪益肝颗粒治疗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的疗效及其对Leptin、TGF—β1和IL-13因子的影响。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、柴芪益肝颗粒组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组和空白对照组,每组10只。大鼠腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化,光镜观察肝组织病理学改变,放射免疫分析法检测肝纤四项,液相芯片检测血清细胞因子。结果与模型组比较,柴芪益肝颗粒组肝脏病理变化显著减轻,肝小叶结构基本清晰,细胞索、肝窦无明显异常;与模型组比较,透明质酸（P=0．001）、层粘连蛋白（P=0．005）和Ⅳ型胶原（P=0．000）水平显著降低,瘦素（P=0．012）、转化生长因子131（TGF-β1）（P=0．000）和白介素13（IL-13）（P=0．016）水平亦显著降低,差异均有统计学意义。结论柴芪益肝颗粒显著改善肝纤维化,可能与其通过降低瘦素、TGF—β1和IL-13水平,抑制细胞外基质沉积有关。     

高糖输注及罗格列酮干预对大鼠载脂蛋白M表达的影响

目的观察高浓度葡萄糖输注对大鼠载脂蛋白M（apoM）mRNA的表达的影响及罗格列酮干预的作用,并探讨相关机制。方法雄性SD大鼠随机分为5％葡萄糖组（对照组）、25％葡萄糖组（H组）、罗格列酮＋5％葡萄糖组（RN组）、罗格列酮＋25％葡萄糖组（RH组）4组。分两批独立的实验完成,一批应用高胰岛素．正常血糖钳夹（HEC）实验评价葡萄糖输注率（GIR）,一批直接取肝脏提取总RNA,检测apoMmRNA表达水平及肝X受体途径（LXR）基因和PPAR-β/δ基因表达情况。结果葡萄糖和罗格列酮对GIR均有影响（均为P〈0．01）,并且两者的交互作用差异有统计学意义（P〈0．01）。25％葡萄糖下调大鼠肝脏apoMmRNA表达（P〈0．05）,而罗格列酮明显增高大鼠肝脏apoMmRNA的表达（P〈0．0001）,但两者的交互作用差异无统计学意义（P〉0．05）。25％葡萄糖显著抑制大鼠肝脏LXR-β（P〈0．01）、SHP1（P〈0．01）、LRH1（P〈0．01）、ABCA1（P〈0．01）、PPAR．13／8（P〈0．01）基因的表达;而罗格列酮仅降低SHP1（P〈0．01）及ABCA1（P〈O．05）基因的表达。罗格列酮显著抑制正常大鼠肝脏ABCA1mRNA的表达（P〈0．05）,但在高血糖状态下,罗格列酮则明显升高大鼠肝脏ABCA1mRNA水平（P〈0．01）。双因素方差分析表明罗格列酮和25％葡萄糖对大鼠肝脏ABCA1mRNA影响的交互作用差异有统计学意义（P〈0．01）。结论高浓度葡萄糖和罗格列酮对apoM的调节作用是相对独立的,高浓度葡萄糖有可能主要通过LRH1和（或）ABCA1途径下调apoM基因的表达。     

加味四逆散抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的探讨加味四逆散抗大鼠肝纤维化的作用。方法采用二甲基亚硝胺（DMN）致肝纤维化的方法对健康雄性SD大鼠进行造模，以秋水仙碱为阳性对照组。经加味四逆散治疗4周后测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、透明质酸（HA）及Ⅳ型胶原（C—Ⅳ）水平，并检测肝组织羟脯氨酸（HyP），同时观察肝组织的病理改变。结果加味四逆散治疗后，可显著降低血清ALT（P〈0．01）、ALP（P〈0．01）、GGT（P〈0．05）、HA（P〈0．01）、C-Ⅳ（P〈0．05）及肝组织HyP（P〈0．01），升高TP（P〈0．05）及ALB（P〈0．01）。肝组织病理切片表明，用药后病理改变明显减轻。结论加味四逆散对实验性大鼠有明显的抗肝纤维化作用。     

TGFβ1，CTGF信号转导通路的变化在实验性小鼠肝纤维发生中的作用

 摘要：目的 探讨实验性肝纤维化小鼠肝组织中TGFβ1,CTGF信号转导通路的变化及意义。方法30只C57BL6/J小鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型组,采用10%的CCL4橄榄油腹腔注射诱导小鼠肝纤维化模型,对照组给予生理盐水灌胃,共造模8周。观察血清ALT、HA水平,HE染色、Masson染色观察肝组织炎症及纤维化程度,免疫组化法和RT-PCR法对肝组织α-SMA、TGFβ1、TGFβRⅡ、Smad3,Smad7,CTGF蛋白和mRNA水平进行检测,并与对照组肝组织进行比较。结果 模型组小鼠血清ALT及HA水平明显高于对照组;模型组小鼠肝组织α-SMA、TGFβ1、TGFβRII、Smad3、CTGF蛋白表达和TGFβ1、Smad3、CTGF mRNA表达明显高于对照组,而模型组肝组织Smad7蛋白和Smad7 mRNA表达较对照组小鼠显著降低。结论 TGFβ1和CTGF信号转导通路过度活化,Smad7表达和负调节TGFβ、CTGF信号转导通路的功能被抑制可能与肝纤维化的发生和发展密切相关。     

低分子肝素联合乌司他丁治疗急性百草枯中毒大鼠肺纤维化的实验研究

目的探讨低分子肝素联合乌司他丁减轻急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺纤维化的可能作用机制。方法55只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组（A组）、模型组（B组）、治疗组（C组）;B、C组禁食1h后经口一次灌胃百草枯75mg／kg制作PQ大鼠肺纤维化模型,A组经口一次性注人等量生理盐水;c组造模后皮下注射低分子肝素钠1000U／d,同时腹腔注射乌司他丁10万U,共14d,A、B组给予0．2ml／d生理盐水皮下注射。分别于造模后1、3、7、14、28d测定血清转化生长因子β1（TGFβ1）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）含量;并取肺组织做HE染色。结果与A组比较,B组血清TGF-β1第3天始明显升高（P〈0．01）,血清MMP-9于第7天逐渐上升（P〈0．05）,第28天明显升高（P〈0．01）;与B组各相同时间点比较,C组MMP-9水平下降,至第7天差异有统计学意义（P〈0．05）,第28天出现明显下降（P〈0．01）;而血清TGF．131在第14天开始出现明显下降（P〈0．01）。B组于造模后早期即出现肺泡壁增厚,炎症细胞浸润明显,毛细血管充血、水肿等,14d肉眼可见肺表面溃疡形成,镜下可见肺泡间隔成纤维母细胞、肌纤维细胞增生,肺泡塌陷;C组于14d时镜下可见有肺泡壁毛细血管充血,炎性细胞浸润较B组轻,肺纤维化程度也有所减轻。结论低分子肝素联合乌司他丁可减少MMP-9的合成,从而减轻大鼠纤维化程度,其途径可能通过减少TGF．Bl的合成。     

沙利度胺对大鼠TNBS结肠炎肠壁纤维化的影响及其机制

目的：探讨沙利度胺对大鼠2,4,6-三硝基苯甲酸（2,4,6-trinitrobenzene sulphonic acids,TNBS）结肠炎肠壁纤维化的影响及其机制。方法：将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组及对照组,每组15只。除正常组外,其余各组给予TNBS灌肠诱导大鼠结肠炎模型后,治疗组每日给予沙利度胺灌胃。28d后处死所有大鼠取病变结肠组织,病理切片行HE染色及Masson染色,观察和评估结肠损伤及纤维化程度。Elisa及Western印迹检测TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原,MMP-2,MMP-9及组织金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMP-1）的表达水平。结果：与正常组相比,模型组大鼠结肠组织发生了明显的纤维化改变,TIMP-1,TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原表达水平显著升高（均P〈O．05）;MMP-2及MMP-9蛋白的表达水平下降（均P〈O．05）。治疗组大鼠结肠纤维化程度较模型组显著改善,TIMP-1,TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原水平较模型组下降（均P〈0．051;MMP．2及MMP-9蛋白水平较模型组升高（均P〈0．05）。与对照组相比,模型组上述指标差异无统计学意义（均P〉O．05）。结论：沙利度胺能够明显减轻大鼠TNBS结肠炎的肠壁纤维化程度,其主要作用机制是通过抑制TGF-β1的表达,从而抑制胶原的生成,并调节细胞外基质的生成降解平衡而达到抑制纤维化的作用。     

肝卵圆细胞对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:探讨肝卵圆细胞(HOCs)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路蛋白表达的影响。方法:采用CCl4和复方因素制备HF大鼠模型,取模型组大鼠分离纯化HOCs,从门静脉植入HF大鼠肝组织内,连续观察30d,同时以五灵胶囊为阳性对照。在植入后8d、15d、23d、30d各组大鼠尾静脉采血,酶法测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),实验结束取肝组织Masson染色观察肝组织形态学变化,Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(ERK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-ERK)、转化生长因子β受体Ⅰ(TβRI)、转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)、果蝇MAD类似基因2/3(Smad2/3)、果蝇MAD类似基因7(Smad7)蛋白的表达。结果:HOCs植入组与五灵胶囊组在植入后15d、23d、30dAST、ALT水平显著降低;肝组织胶原纤维增生程度明显减轻;肝组织表达ERK、p-ERK、TβRI、TβRⅡ蛋白作用显著降低,表达Smad7的作用显著增加。结论:植入HOCs可阻止大鼠HF的进展,其作用机制可能与其抑制肝组织内TGF-β/Smad信号通路p-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白的表达有关。     

血清VEGF及TGF—β1在肝纤维化患者中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及转化生长因子13。（TGF．13．）在肝纤维化患者中的表达及其意义。方法：选择66例肝纤维化患者为观察组,另选择100名体检健康者为正常对照组,采用免疫组织化学方法检测两组血清VEGF及TGF．B,浓度。结果：观察组血清VEGF及TGF-13,浓度为（110．87±22．64）ng／L和（15．08±3．27）μg／L,显著高于对照组（15．98±4．75）ng／L和（7．17±1．86）μg／L（t值分别为20．166、11．066、P均〈0．001）;观察组s1、s2、s3、及S4期患者血清VEGF分别为（84．25±16．86）、（101．87±26．70）、（118．04±20．75）、（134．65±25．73）ng／L（F=15．689,P〈0．05）,TGF-β1分别为（10．87±2,64）、（13．06±2．74）、（17．87±3．28）、（22．76±4．75）μg／L（F=12．438,P〈0．05）;肝纤维化患者血清VEGF与TGF－β1水平呈正相关（r=0．532,P〈0．05）。结论：血清VEGF与TGF-13,水平与肝纤维化的发生发展密切相关,二者联检可作为诊断及判断病情的血清学指标。     

丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠肝脏Smads分子表达的影响

目的: 探讨丹芍化纤胶囊对大鼠实验性肝纤维化Smad2/3、Smad4和Smad7表达的影响,从而评价Smad分子作为抗纤维化靶点的应用价值。方法: 雄性Wistar大鼠48只分为正常组(n=16)、肝纤维化模型组(n=16)、丹芍化纤胶囊治疗组(n=16),除正常组外,其余采用CCl₄、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后治疗组予以丹芍化纤胶囊(1 g/kg)灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT),光镜下观察肝组织纤维化程度,检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量,同时用免疫组化SABC法、免疫印迹(Western blotting)和实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 法检测肝组织中Smad2/3、Smad4和Smad7的蛋白及mRNA的表达。结果: 治疗组与肝纤维化模型组比较,肝脏指数、血清HA及ALT显著下降,肝纤维化程度显著减轻,尿Hyp排出明显增加。治疗组肝组织中Smad7的蛋白和mRNA的表达水平与肝纤维化模型组相比均显著增高,而Smad2/3、Smad4的蛋白表达与肝纤维化模型组相比则明显降低,但mRNA水平仅轻度下降,与肝纤维化模型组比较差异不显著。结论: 中药丹芍化纤胶囊治疗大鼠肝纤维化可能主要是通过调节Smad7的基因转录和蛋白质翻译,从而发挥其反馈性抑制TGF-β/Smad促纤维化信号转导作用,这可能是丹芍化纤胶囊抗肝纤维化的作用机制之一;Smad7可能是丹芍化纤胶囊作用的一个药物靶点。     

Monocyte-derived immature dendritic cells negatively regulate hepatic stellate cells in vitro by secreting IL-10

The development of liver fibrosis is associated with inflammatory responses resulting from chronic liver disease. Immature dendritic cells (imDCs) play an important role in modulating the inflammatory environment of the liver. This study investigated the effects of imDCs on the regulation of hepatic stellate cells (HSCs) during liver fibrosis. We isolated and induced imDCs from monocytes of healthy volunteers, activated LX-2 cells with TGF-β to establish in vivo liver fibrosis HSCs model, and then set up a cell co-culture system with transwell membranes. imDC surface markers and apoptosis rates of LX-2 cells were detected by flow cytometry. The concentration of IL-10 secreted by imDC was measured through ELISA. The expression of α-SMA in LX-2 after co-culture was examined by qRT?PCR. Proliferation of LX-2 cells were detected by CCK-8. The western blot was used to illustrate the LX-2 activation-related proteins such as Smad3/7 and TGF-β1. The imDCs co-culture group and the interleukin-10 (IL-10) treatment group had similar results, as they were both able to increase apoptosis, inhibit proliferation, downregulate α-SMA mRNA, and reduce TGF-β1 and Smad3 protein expression in LX-2 cells. Additionally, the Smad7 protein level was increased after treatment with imDC and IL-10. However, the results in the IL-10 antagonist group showed the opposite trend to that of imDCs and IL-10 groups. Thus, these results suggest that imDC secretion of IL-10 negatively regulates activated LX-2 cells, probably via inhibition of the TGF-β1/Smad3 pathway and increased expression of Smad7 protein. This may be a potential therapeutic target for liver fibrosis.     

转化生长因子β1对肌成纤维细胞膜型基质金属蛋白酶1的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF-β1）对鼠肌成纤维细胞（C2C12细胞）分泌膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）的影响,探讨其内在机制。方法用不同浓度的TGF-β1（0、1、5、10ng/mL）干预C2C12细胞5h,200pmol/L siRNA-smad3转染C2C12细胞24h,用Western blot和Northern blot方法测定MT1-MMP及其mRNA表达。结果0、1、5、10ng/mLTGF-β1干预C2C12细胞5h,Western blot半定量检测MT1-MMP的结果分别为2.86±0.28、2.05±0.31、1.60±0.21、1.02±0.24,F=224.9,P〈0.01;Northern blot定性结果显示,mRNA条带显示逐渐变弱。5ng/mLTGF-β1干预C2C12细胞4、12、24h,Western blot半定量检测结果分别为1.02±0.29、0.80±0.21、0.4±0.12,各时间点值比较,均P〈0.05。Northern blot定性结果显示,mRNA条带显示随时间延长而逐渐变弱。200pmol/L siRNA-smad3转染C2C12细胞24h,再用5ng/mLTGF-β1干预C2C12细胞5h,半定量Western blot检测结果显示：内对照组0.82±0.12（siRNA-control＋5ng/mLTGF-β1）、空白对照组1.61±0.21（siRNA-control）、实验组1.84±0.23（siRNA-Smad3＋5ng/mLTGF-β1）,内对照组和实验组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;Northern blot定性结果显示：MT1-MMPmRNA表达在实验组和空白对照组较强,而内对照组较弱。结论TGF-β1抑制鼠C2C12细胞分泌MT1-MMP,呈剂量和时间依赖性;siRNA阻断Smad3表达可消除TGF-β1对MT1-MMP的抑制作用。     

抗IGFBPrP1抗体对小鼠肝纤维化的预防作用及其机制的研究

目的: 明确抗胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)抗体能否预防硫代乙酰胺(TAA)诱导的小鼠肝纤维化的形成,同时探讨其机制。方法: 将24只雄性C57BL/6野生型小鼠随机分为正常对照组、TAA 4周组和TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组,每组8只,观察肝组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blotting检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、Smad3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagen Ⅰ、Ⅲ)及IGFBPrP1的表达。结果: TAA 4周组肝损伤严重,α-SMA、TGF-β₁、Smad3、p-Smad2/3、FN、collagen Ⅰ、Ⅲ及IGFBPrP1的表达明显高于正常对照组(P＜0.01),TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组肝损伤减轻,上述各指标表达均低于TAA 4周组(P＜0.01)。IGFBPrP1与TGF-β₁、Smad3、p-Smad2/3 、FN及collagen Ⅰ的表达呈正相关(P＜0.01)。结论: 抗IGFBPrP1抗体可预防TAA诱导的小鼠肝纤维化的形成,其机制为抑制肝星状细胞的活化和减少细胞核内p-Smad2/3的表达、抑制TGF-β₁/Smad3信号通路,进而导致细胞外基质在肝组织中沉积减少。     

丹参素对肝星状细胞TGF-β信号转导的影响

目的： 观察丹参素对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导活化的大鼠肝星状细胞(HSCs)Smad信号转导通路的影响。方法：体外分离、培养大鼠肝HSCs,用不同浓度丹参素作用于HSCs,检测丹参素对HSCs增殖和TGF-β1刺激后HSCs增殖的影响;观察丹参素对TGF-β1刺激HSCs表达α-SMA的影响;观察HSCs转化生长因子受体(TβRⅠ、Ⅱ)的表达;观察丹参素和TGF-β1作用HSCs后,其Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达的变化。结果：(1)丹参素在0.0625 mmol/L-1 mmol/L时,对HSCs的生长增殖具有抑制作用 (P<0.05);丹参素对TGF-β1诱导的HSCs增殖也具有明显的抑制作用 (P<0.05)。(2)丹参素0.25 mmol/ L作用HSCs能下调α-SMA的表达(P<0.05),也能下调TGF-β1诱导的HSCs的α-SMA表达(P<0.05)。（3）HSCs中TβRⅠ、Ⅱ的表达定位于细胞膜上,丹参素能下调活化HSCs中TβRⅠ、Ⅱ的表达（P<0.05或P<0.01）。 (4) TGF-β1促进HSCs中Smad2、Smad3、Smad7 mRNA的表达（P<0.01）;丹参素能下调TGF-β1诱导的HSCs内Smad2、Smad3 mRNA的表达(P<0.05),并能上调Smad7 mRNA表达(P<0.05)。 结论：体外细胞实验表明,丹参素能通过下调活化HSCs细胞膜上TβRⅠ、Ⅱ蛋白的表达来抑制HSCs的活化增殖。丹参素能上调HSCs内Smad7 mRNA表达,并下调Smad2、Smad3 mRNA表达,抑制HSCs活化,并抑制TGF-β1诱导的HSCs活化。