绿原酸减轻脓毒症诱导的小鼠急性肾损伤：基于抑制caspase-1经典细胞焦亡信号通路

目的 探讨caspase-1经典的细胞焦亡信号通路在绿原酸治疗急性肾损伤小鼠中的作用及机制。方法 将24只C57Bl/6J小鼠随机分成4组,每组6只：假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿刺组（CLP组）、CLP+地塞米松组（CLP+DXM组）、CLP+绿原酸组（CLP+CGA组）。Sham组小鼠仅开腹未造模,CLP组CLP+DXM组和CLP+CGA组小鼠均盲肠结扎穿刺（CLP）造模。Sham组、CLP组、CLP+DXM组和CLP+CGA组在造模后持续静脉泵注生理盐水10 mg/kg、生理盐水10 mg/kg,注地塞米松1μg/kg和绿原酸15 mg/kg 6 h。各组均在注射药物结束后8 h,比较各组小鼠7 d生存率,肾组织大体形态、HE染色,肾组织细胞凋亡及肾功能相关指标尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、肾损伤分子1(KIM-1);及肾组织NLRP3炎性小体和caspase-1通路关键蛋白表达情况。结果 绿原酸干预后提高了小鼠7 d生存率,肾组织肾小球毛细血管充血、肾间质水肿、肾小管上皮细胞肿胀程度明显减轻（P<0.05）,降低了肾功能指标BUN、Scr、KIM-1水平;NLRP...     

NLRP3炎性小体在胃癌细胞中的表达及对其焦亡、增殖、侵袭、迁移的影响

目的 研究胃癌细胞中NLRP3炎性小体的表达及其对增殖、侵袭和迁移的影响。并初步探讨NLRP3介导caspase-1依赖的焦亡信号通路在胃癌发展中的作用。 方法qRT-PCR和Western blotting法分别检测人胃黏膜上皮细胞(GES-1)和人胃癌细胞(MKN45及MGC803)中NLRP3、caspase-1表达;随后下调NLRP3,检测胃癌细胞NLRP3、caspase-1 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测GSDMD、白细胞介素(IL)-18、IL-1β蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液上清液中IL-1β、IL-18含量;乳酸脱氢酶(LDH)实验、流式细胞术检测细胞焦亡;CCK-8法及细胞周期试剂盒检测细胞增殖情况;Transwell和划痕实验检测胃癌细胞侵袭和迁移能力。 结果NLRP3、caspase-1在胃癌细胞中较GES-1表达增高(P < 0.01)。下调NLRP3后,胃癌细胞LDH释放率及焦亡率显著降低(P < 0.01);GSDMD、IL-1β、IL-18表达降低(P < 0.01);细胞增殖阻滞在G₁期(P < 0.01);细胞增殖以及侵袭迁移能力显著减弱。 结论NLRP3在胃癌中高表达,其表达影响胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移以及其介导的caspase-1依赖焦亡信号通路关键蛋白的表达。     

细胞焦亡在脓毒症相关急性肾损伤中的研究进展

脓毒症相关急性肾损伤(sepsis associated acute kidney injury,SA-AKI)常见于严重脓毒症患者,脓毒症急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者病死率和患慢性肾病的风险显著增加。细胞焦亡是一种调节性细胞死亡,其主要特征是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的激活和细胞膜孔的形成。近年来,大量研究表明细胞焦亡参与脓毒症以及SA-AKI的炎性反应和免疫调节,细胞焦亡与细胞凋亡、坏死性凋亡、自噬及铁死亡在SA-AKI中存在重要作用并相互影响。本文系统综述了细胞焦亡在SA-AKI中的病理生理机制及研究进展,探讨其在脓毒症治疗方面的临床应用前景。     

NLRP3炎性小体与周围神经损伤关系的研究进展

NLRP3通过改变免疫反应在各种疾病中发挥着关键作用。免疫系统和神经系统之间存在着诸多联系,故其在中枢和外周神经病理学中也起着关键作用。在周围神经损伤后,炎症不仅出现在损伤部位,同时也出现在脊髓神经元部位,炎性小体在其中起着关键作用,并串扰其他信号共同参与损伤后的生物过程。该综述探讨了周围神经损伤后炎性小体带来的直接或间接的影响,以及可能的治疗靶点与机制。     

大黄酚通过激活NLRP3炎症小体诱导胃癌细胞焦亡的机制研究

目的:探索大黄酚诱导人胃癌细胞焦亡的作用及其可能的作用机制.方法:不同浓度大黄酚(0、5、10μmol/L)和NLRP3抑制剂、caspase-1抑制剂先后处理人胃癌MKN28细胞,CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术检测细胞焦亡;实时荧光定量PCR检测焦亡、NLRP3炎症小体相关蛋白的mRNA水平;Western ...     

NLRP3炎性小体在骨质疏松中的研究进展

骨质疏松(OP)是一种全身性骨骼疾病,其特点是骨量减少及骨组织微结构的退变。炎症和免疫调控破骨细胞和成骨细胞的功能在骨质疏松发生发展中起重要作用。NLRP3炎性小体是细胞内能够识别多种多样的内源性及外源性危险信号,并与接头蛋白(ASC)以及半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)组装形成一种被称为“炎性小体”的多蛋白复合体,使促炎因子成熟(如IL-1β和IL-18),引起细胞焦亡等病理改变。现就NLRP3引起的细胞焦亡(pyroptosis)在骨质疏松中的作用及最新研究进展进行综述,以期为骨质疏松的治疗提供一种新的策略,为指导骨质疏松药物研发提供理论依据。     

NLRP3炎症小体介导单核细胞增生李斯特菌感染小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡

目的:探讨单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)感染引起小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡作用机制.方法:体内实验,C57B/6小鼠分为Lm组和阴性对照组(NC组),分别经小鼠尾静脉注射Lm菌液5×104 CFU/鼠和无菌PBS,24 h后取脾脏、肝脏、脑组织,蛋白质印迹法检测焦亡及核苷酸结合...     

姜黄素通过NLRP3炎性体信号通路在肺泡巨噬细胞焦亡模型中的作用机制

目的：研究姜黄素通过NLRP3炎性体信号通路在LPS/尼日利亚菌素诱导肺泡巨噬细胞焦亡的作用机制。方法：大鼠巨噬细胞系NR8383,正常复苏后,用含10%胎牛血清、80%F12K培养基在37℃、5%CO₂的条件下培养,每2～3天传代1次。将对数生长期细胞NR8383离心处理,800 r/min, 10 min,离心后对细胞进行计数,之后接种于96孔板中,每孔接种2×10⁴个细胞,每孔加100μl的细胞培养液。接种12 h后随机分为空白对照组、姜黄素组、LPS组、LPS+姜黄素组、LPS+尼日利亚菌素处理组、LPS+尼日利亚菌素+姜黄素处理组,按照程序对细胞进行加样处理,然后置培养板于37℃,5%CO₂孵箱中培养,3个重复/组。各组分别加入相应的药物或试剂后,置培养板于37℃,5%CO₂孵箱中培养。2 h后加入CCK-8进行反应,3 h后检测各组细胞的OD值。加样反应2 h后,Western印迹检测细胞中NLRP3、GSDMD等焦亡相关蛋白表达情况。结果：细胞培养在有血清的情况下,与空白组相比,姜黄素...     

经NLRP3通路的细胞焦亡在神经退行性疾病中的研究进展

越来越多的研究发现,参与细胞焦亡中的NLRP3炎症小体被抑制启动或激活后,可以起到一定的减少神经炎症反应、延缓神经退行性疾病进展的作用。因此,现就依赖NLRP3炎症小体的细胞焦亡在神经退行性疾病中的最新研究进展进行综述。     

右美托咪定预处理通过抑制NLRP3炎性小体激活减轻大鼠肠缺血再灌注诱导的急性肺损伤

目的 探讨右美托咪定（Dex）对大鼠肠缺血再灌注（II/R）所致急性肺损伤（ALI）的保护作用以及核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活性的影响。方法 将32只健康雄性SD大鼠,随机分为4组（8只/组）。假手术组（Sham组）仅暴露肠系膜上动脉（SMA）,肠缺血再灌注组（II/R组）阻断SMA 1 h后再灌注2 h,II/R+右美托咪定处理组（Dex+II/R组）右美托咪定干预后行再灌注,Dex假手术组（Dex组）右美托咪定预处理假手术组。Sham组和II/R组腹腔注射等量生理盐水。采取夹闭SMA 1 h再灌注2 h的方法建立肠缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠肺部组织湿/干质量比值（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性,HE染色评估肺组织病理学变化以及行肺损伤评分;ELISA检测肺部组织中炎性因子TNF-α、IL-18、IL-1β水平;Western blot检测肺部组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）蛋白的表达水平。结果 相较于Sham组,II/R组肺组织病理损伤明显,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达显著升高（P<0.05）,肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达增加（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达减少（P<0.05）;相较于II/R组,Dex+II/R组肺组织病理损伤轻微,W/D值、MPO活性及肺组织中的TNF-α、IL-18、IL-1β表达明显下降（P<0.05）,肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达明显下降（P<0.05）,p-AMPK蛋白表达明显增加（P<0.05）。结论 右托美咪定通过对NLRP3炎性小体激活的抑制,减轻炎性反应,进而改善大鼠II/R所致的ALI。     

NLRP3介导的细胞焦亡在大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用

【摘要】目的 探讨细胞焦亡在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及机制。方法 将75只SD大鼠随机分为对照组、缺血/再灌注组、 YVAD组、YVAD+缺血/再灌注组、MCC950组、MCC950+缺血/再灌注组。其中对照组、YVAD组、MCC950组分别为10只,其余各组分别为15只。在建立心肌缺血/再灌注损伤的大鼠模型过程中,缺血/再灌注组、YVAD+缺血/再灌注组、MCC950+缺血/再灌注组各死亡1~4只。检测对照组、缺血/再灌注组心肌组织中Tunel染色阳性率,NLRP3炎症小体、caspase 1、IL 1β及GSDMD N表达情况。检测对照组、YVAD组、缺血/再灌注组和YVAD+缺血/再灌注组的Tunel染色阳性率、心肌梗死面积、Caspase 1、IL 1β及GSDMD N表达情况。最后检测对照组、MCC950组、缺血/再灌注组和MCC950+缺血/再灌注组Tunel染色阳性率、心肌梗死面积、Caspase 1、IL 1β及GSDMD N表达。结果 缺血/再灌注后心肌细胞焦亡情况：缺血/再灌注组Tunel染色阳性率、心肌梗死面积、NLRP3、Caspase 1、IL 1β及GSDMD N的表达明显高于对照组(均P＜005)。干预焦亡后的情况：YVAD+缺血/再灌注组Tunel染色阳性率、心肌梗死面积、Caspase 1(成熟体)、IL 1β及GSDMD N的表达均高于对照组,明显低于缺血/再灌注组(均P＜005)。 抑制NLRP3表达后的情况：MCC950+缺血/再灌注组Tunel染色阳性率、心肌梗死面积、Caspase 1、IL 1β及GSDMD N表达水平虽高于对照组,明显低于缺血/再灌注组(均P＜005)。结论 大鼠心肌的缺血/再灌注损伤与NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡有关。     

血红素加氧酶通过抑制NLRP3炎性小体的活化减轻小鼠骨骼肌萎缩

目的 探讨诱导血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)是否通过抑制NLRP3炎性小体的活化减轻小鼠骨骼肌萎缩.方法 32只8周龄雄性C57BL/6小鼠按照简单随机抽样法分为正常组、尾悬吊组(采用尾悬吊法建立下肢肌萎缩模型)、氯化血红素组(在尾悬吊组建模基础上腹腔注射10 mg/μL的氯化血红素hem...     

细胞焦亡在肾脏疾病中的作用

细胞焦亡是一种依赖于半胱天冬氨酸蛋白酶caspase-1/4/5/11且由GSDMD介导并伴有炎性介质释放的程序性细胞死亡。NLRP3炎性小体调控细胞焦亡并促使炎性因子的活化与释放。NLRP3炎性小体调控的细胞焦亡参与多种肾脏疾病的病理生理过程。本文就NLRP3-caspase-1介导的细胞焦亡在肾脏疾病中的作用研究进展做一简述。     

柚皮素通过调控巨噬细胞NLRP3炎症小体活化对脓毒症致急性肺损伤的影响

目的 探讨柚皮素(NAR)调控巨噬细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化对脓毒症致急性肺损伤的影响.方法 采用随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、柚皮素低剂量组(25 mg/kg)和柚皮素高剂量组(75 mg/kg),每组15只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,并于术后6、1...     

辣椒碱通过上调NLRP3炎性小体诱导胃癌MGC-803细胞转移

[目的]探讨辣椒碱对胃癌MGC-803细胞转移的诱导作用及其对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体活化的影响。[方法]采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测MGC-803细胞培养液中炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,蛋白免疫印迹（Western Blot）方法分析细胞中NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）表达水平,采用Transwell法检测MGC-803细胞的迁移能力,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）含量。[结果]辣椒碱处理MGC-803后,培养液中炎性因子IL-1β、IL-6及TNF-α释放量明显升高、NLRP3表达量增加,同时间质样标志物Vimentin的表达升高、上皮样标志物E-cadherin表达降低,但用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞之后,炎性因子表达量下调、NLRP3及Vimentin蛋白表达减低、E-cadherin表达升高,并且MCC950处理后能抑制辣椒碱增加的细胞迁移数量;ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）能逆转辣椒碱诱导结肠癌细胞NLRP3的蛋白水平及炎性因子释放。[结论]辣椒碱通过促进MGC-803细胞内ROS的表达水平来激活NLRP3炎性小体,进而促进胃癌细胞的迁移。     

卡维地洛对ox-LDL诱导内皮细胞中NLRP3炎症小体介导焦亡及炎症的影响

目的研究卡维地洛对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞中NLRP3炎症小体介导焦亡及炎症的调控作用。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组、低剂量组(0.01 mmol/L)、高剂量组(0.1 mmol/L);转染阴性对照腺病毒(Ad-NC)或过表达NLRP3腺病毒(Ad-NLRP3)后分为Ad-NC组、Ad-NC+ox-LDL组、Ad-NC+高剂量组、Ad-NLRP3+高剂量组。检测各组细胞活力和白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量,以及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1表达水平。 结果ox-LDL组细胞活力低于对照组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均高于对照组(P＜0.05)。低剂量组和高剂量组细胞活力高于ox-LDL组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均低于ox-LDL组(P＜0.05)。转染NLRP3腺病毒后,Ad-NLRP3+高剂量组和Ad-NC+ox-LDL组细胞活力低于Ad-NC+高剂量组,IL-1β、IL-18及GSDMD-N、NLRP3、Cleaved Caspase-1均高于Ad-NC+高剂量组(P＜0.05)。 结论卡维地洛显著抑制ox-LDL诱导HUVEC中NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡及炎症反应。     

中医药调控NLRP3炎性小体治疗脓毒症多器官损伤的研究进展

脓毒症是宿主对感染的免疫反应失调引起的全身炎症反应,会导致危及生命的器官功能障碍。核苷酸结合寡聚结构域（Nod）样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在先天免疫系统中扮演着重要角色。研究表明,在脓毒症多器官损伤的进程中,NLRP3炎症小体的活化可导致全身炎症水平加重。因此,阐明NLRP3炎症小体的活化机制及其在脓毒症多器官损伤中的致病作用至关重要。该文将综述上述研究的最新研究进展,从NLRP3炎症小体的角度阐述中医药对脓毒症的治疗作用,为脓毒症多器官损伤的治疗提供一些参考。     

NLRP3炎性小体与动脉粥样硬化相关性研究进展

NLRP3炎性小体是模式识别受体激活后所形成的一种多蛋白复合体。活化的NLRP3炎性小体可使caspase-1前体转变为有活性的caspase-1,促进白介素（IL）-1β和IL-18的成熟和分泌,进而引发机体的炎性反应。动脉粥样硬化作为心脑血管疾病的发病基础,严重威胁着人类的健康。近年研究结果表明,动脉粥样硬化是一种慢性炎性反应性疾病。炎性小体在动脉粥样硬化炎性反应中发挥关键作用,其中NLRP3炎性小体与动脉粥样硬化的形成有着密切联系。本文就NLRP3炎性小体活化机制及其与动脉粥样硬化的相关性进行综述。