EPO多克隆抗体抑制EPO促CFU-E形成研究

目的:探讨EPO多克隆抗体是否具有对抗EPO促红系形成的功能。方法:对大鼠骨髓进行定向体外红系集落形成单位(CFU-E)培养,观察CFU-E数量,判定EPO多克隆抗体对红系增殖活性的影响。结果:与常规培养组比较,EPO多克隆抗体培养组CFU-E明显减少,P<0.01,差别有非常显著性。结论:EPO抗体可抑制EPO促红系形成,其可作为治疗高原红细胞增多症病人的药物进一步研究。     

胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段抑制EPO促CFU-E形成的研究

目的:观察胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段能否抑制EPO促红系形成。方法:对大鼠骨髓进行红系定向体外培养,加入胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段干预,观察红系集落形成单位(CFU-E)之数量,判定胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段对红系增殖活性的影响。结果:胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段加入干预培养后,CFU-E数量明显减少(P<0.01)。结论:胰蛋白酶酶切EPO之多肽产物体外能对抗EPO,抑制红系增殖。其可作为治疗高原红细胞增多症的可能药物进一步研究。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的 了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例,正常对照22例身体健康者,应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU-E,CFU-E)增殖能力,BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Epo)的反应能力。结果 HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E集落数分别高于正常对照。Epo对HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E刺激明显,与正常对照组比较BFU-E集落数差异显著(P<0.05);CFU-E集落数差异显著(P<0.01)。结论 HAPC骨髓红系祖细胞增殖能力增强,对Epo敏感性增高。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例，正常对照22例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU，CFu-E)增殖能力，BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Ep0)的反应能力。结果HAPc惠老骨髓BFU-E，CFUE集落数分别高于正常对照。Ep0对HAPc患者骨髓BFUE，CFu-E刺激明显，与正常对照组比较BFu-E集落数差异显著(P＜0．05)；CFU-E集落数差异显著(P＜0.01)；结论HAPc骨髓红系祖细胞增殖能力增强，对Epo敏感性增高。     

EPO单克隆抗体抑制CFU-E研究

目的 探讨EPO单克隆抗体是否具有抑制红系集落形成单位（CFU-E）形成的功能.方法 对大鼠骨髓进行定向体外CFU-E培养,按以下条件进行分组培养：空白对照组（不加EPO）、常规组（加EPO,不加EPO单克隆抗体）、EPO单克隆抗体干预组（EPO＋EPO单克隆抗体）.培养168 h后,观察各组CFU-E数量.结果 空白对照组、常规组、EPO单克隆抗体干预组的CFU-E集数落分别为0.0±0.0、151.8±23.3和10.7±3.9.EPO单克隆抗体干预组与常规组比较,CFU-E集落数存在非常显著性差异（P＜0.01）.结论 该EPO单克隆抗体可明显抑制CFU-E形成,即抑制红细胞系的增殖,是治疗高原红细胞增多症的可能药物.     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

目的:探讨促红细胞生成素(Epo)多克隆抗体是否具有拮抗Epo所致的高原红细胞增多症患者骨髓红系增殖活性的功能。方法:抽取高原红细胞增多症病人骨髓,分离单个核细胞,进行红系定向体外培养,观察加入Epo及Epo多克隆抗体对红系集落形成单位(CFU-E)的影响。结果:Epo多克隆抗体体外能抑制高原红细胞增多症病人骨髓红系增殖。结论:Epo抗体可以显著拮抗Epo促红细胞增生作用。     

基因重组干扰素γ对骨髓增生异常综合征病人治疗作用的体外…

用基因重组干扰素γ（ＩＦＮ－γ）对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人造血祖细胞的作用进行了体外观察，结果：（１）ＩＦＮ－γ体外对非血液病对照病人的红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒系祖母细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）无明显促增殖作用，而对ＭＤＳ病人的ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ有明显促增殖作用，其作用呈剂量依赖型，在１Ｕ／ｍｌ时作用最小，１００Ｕ／ｍｌ时作用最强，（２）ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ原ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ     

基因重组干扰素γ对骨髓增生异常综合征

用基因重组干扰素（ＩＦＮ－γ）对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人造血祖细胞的作用进行了体外观察，结果：①ＩＦＮ－γ体外对非血液病对照组病人的红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）无明显促增殖作用，而对ＭＤＳ病人的ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ有明显促增殖作用。其作用呈剂量依赖型，在ＩＵ／ｍｌ时作用最小，１００Ｕ／ｍｌ时作用最强；②ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ原ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ增殖正常组加入ＩＦＮ－γ后集落数增加最明显，而对增殖明显减低组集落数无明显增加；③ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ不同亚型病人ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ作用不同，其中对转化中原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ－Ｔ）型病人有效率较高。     

人类造血干细胞研究进展

在生长发育过程中,多能造血干细胞首先自我增殖,然后分化成为各系造血祖细胞如中性粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU-GM)、红系造血祖细胞(CFU-E)、巨核系造血祖细胞(CFU-Meg)以及嗜酸粒系造血祖细胞(CFU-Eo)等,最后由各系造血祖细胞进一步分化为成熟的外周血细胞,从而维持外周血细胞数量的稳定,保证了血液系统正常生理功能的完成。     

用人尿中提取的红细胞生成素进行人骨髓红系祖细胞体外培养

本文介绍用从再生障碍性贫血病人尿中提取的EPO制剂进行人骨髓红系祖细胞体外培养的结果.在EPO为0.1～1u/ml的剂量范围内,CFU-E产率与EPO剂量呈良好线性关系,与同时用日本EPO制剂培养所得的结果相同.在BFU-E培养中,加入EPO 1u/ml,集落产率也与日本制剂相似.用普通显微镜和电子显微镜对集落和细胞进行的观察说明,集落中大部分是幼稚红细胞.     

重组红细胞生成素在围手术期的应用

红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)是由肾脏分泌的一种调节红系祖细胞生长的细胞因子。它既可以作为分裂原始红系祖细胞池扩大,又可作为分化原始祖细胞向幼红细胞,乃至成熟红细胞方向分化和成熟。因此,EPO已作     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

促红细胞生成素(Erythropoieti Epo)是促进骨髓红系祖细胞生长、增殖、分化和成熟的主要刺激因子,在高原红细胞增多症(HAPC)发病机理中起关键性作用。本文采用Epo多克隆抗体作为Epo拮抗剂,观察其抑制红系增殖、分化和成熟的作用,为临床应用Epo抗体治疗高原红细胞增多症提供理论依据。作者随机选取高原红细胞增多症患者8例,对其均进行临床检查及血液化验,于髂骨抽取骨髓,分离单个核细胞,在高原现场(海拔3680m)做以下条件骨髓培养:空白对照培养(既不加Epo,亦不加Epo抗体);加Epo常规培养(加Epo,但不加Epo抗体);加Epo抗体实验培养(既加Ep…     

人白介素9在大肠杆菌中的高表达

1989年杨育中教授成功地克隆与表达了人成熟白介素9(IL-9),各国学者对其生物学活性进行了深入研究,发现人IL-9与造血调控密切相关。富集人骨髓及外周血中细胞膜表面标志CD34~+DR~+/CD34~+DR~+D33的红系造血祖细胞或早期红系造血细胞,观察IL-9单独或协同促红细胞生成素(EPO)均可明显增加红系爆式集落(BFU-E)及红系集落形成(CFU-E),且与多种造血因子有较好的协同作用。最近还发现IL-9可提高T细胞系存活率,IL-9与其相应受体结合,传递生物信息,进一步拓宽了细胞因子的生物学活性范围。运用基因工程手段获得大量IL-9,无疑对基础医学研究及潜在临床应用具有较重要意义。通过PCR扩增获得IL-9基因片段,然后优化转译起始序列,选取大肠杆菌(E.coli)偏性碱基终止密码子TAA等条件,构建了人IL-9重组表达质粒pBV-HIL-9,重组人IL-9约占菌体总蛋白的20%,实现了人IL-9在大肠杆菌中高表达。     

低剂量率γ线连续照射后造血损伤与恢复的长期观察

小鼠经低剂量率(70拉德/天)γ线连续照射25天后,造血干细胞和造血祖细胞数量大幅度减少。在连续观察的一年期间,虽然骨髓有核细胞数和晚红系祖细胞(CFU-E)很快恢复到了正常水平,但造血干细胞(CFU-S)、祖细胞(BFU-E、CFU-GM)却始终处于低下状态,其水平相当于向年龄正常动物的50～70%.骨髓造血微环境也同时受到不同程度的破坏,停止照射詹半年其CFU-F只恢复至正常的70%.这些结果表明,小鼠经低剂量率γ线连续照射后,造血组织中存在着潜在的损伤,它是产生一系列辐射远后效应的重要原因。     

IFN-γ拮抗60Coγ射线刺激肺成纤维细胞增殖的机制研究

目的 探讨IFN-γ 拮抗⁶⁰Co γ 射线刺激人肺成纤维细胞(HLF)增殖的机制。方法 应用MTT比色法,观察TGF-β1、受照后大鼠血清促HLF增殖的时效和量效关系及IFN-γ对增殖的影响;用ELISA检测受照后大鼠血清、肺组织TGF-β1水平及IFN-γ 对照后大鼠血清促HLF合成TGF-β1的影响。结果 TGF-β1有促HLF增殖的作用;受照后大鼠血清能促HLF增殖并合成TGF-β1;IFN-γ 显著拮抗血清的上述作用;受照后1～4周大鼠血清和肺组织TGF-β1水平逐渐增加。结论 TGF-β1参与γ 射线刺激HLF增殖的作用,而IFN-γ在一定程度上抑制HLF合成TGF-β1,并拮抗其促HLF增殖的作用。     

人骨髓与胎肝造血细胞在体内培养条件下的增殖与分化

人胚胎发育中的造血活动可以分为胎盘、卵黄囊造血期(1—2个月),肝、脾造血期(2—6个月),骨髓造血期(4个月以后开始,直至成年)等三个阶段。在胎龄为3—5个月的胎肝组织中可以见到大量的不同发育阶段的红系细胞。Hassan等应用体外血浆凝块培养技术证明了胎肝细胞中存在着丰富的红系造血祖细胞(>1000CFU-E/10~5)。虽     

促红细胞生成素和甲泼尼龙对损伤星形胶质细胞增殖的影响

目的研究在促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）和甲泼尼龙（Methylprednisolone,MPSS）干预下对损伤星形胶质细胞增殖的影响,探讨EPO和MPSS联合应用在脊髓损伤中的作用。方法取自SD大鼠大脑原代培养星形胶质细胞,缺营养培养3h后分别在促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）和甲泼尼龙（erythropoietin,EPO）的培养基中培养24、48小时后,MTT法检测星形胶质细胞增殖活性的变化。结果缺营养可抑制星形胶质细胞增殖,促红细胞生成素和甲泼尼龙对正常细胞增殖无明显影响作用,EPO和MPSS均促进损伤细胞增殖,两者联合减量应用对细胞增殖有明显影响作用。结论 EPO＋MPSS（半量组）联合减量应用对星形胶质细胞增殖作用表达的升高作用优于单独应用甲泼尼龙。     

高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外培养观察

目的：观察高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外增殖情况。方法：采用微量甲基纤维素培养法对１０例高原红细胞增多症（高红组）及１０例高原健康人（对照组）的骨髓细胞进行体外培养。结果：在无促红细胞生成素刺激时,高红组及对照组皆无ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成。高红组的ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数随促红细胞生成素的浓度增加而增加（Ｐ＜０．０１）,当促红细胞生成素浓度达到８ｕ／ｍｌ时,ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ的集落数不再明显增加（Ｐ＞０．０５）,对照组对促红细胞生成素的刺激时反应与高红组相一致。在同一浓度促红细胞生成素刺激时,两组ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞自身无增殖能力,其增殖必须有促红细胞生成素的刺激,促红细胞生成素的增高是高原红细胞增多症发病的一个因素,但其发病还存在其他机制。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞凋亡异常的研究

目的：了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系祖细胞在细胞凋亡方面是否存在异常；方法：应用造血干细胞体外培养技术对红系祖细胞进行动态观察，培养72小时以后细胞染色观察细胞形态，应用凋亡细胞检测盒了解细胞凋亡发生率；结果：高原红细胞组与正常对照组均发生细胞凋亡，但发生率程度不一，高原红细胞凋亡少于正常对照(P＜0．05)；结论：高原红细胞增多症红系祖细胞存在凋亡异常，需进一步研究是否存在基因表达异常。     

高原红细胞增多症及药物防治

目的:了解高原红细胞增多症(highalti-tude polycythemia,HAPC)发病机制与治疗药物的研究进展。方法:查阅并研究了近15年国内外文献。结果:缺氧使肾合成促红细胞生成素(erythro-poietin;EPO)引发HAPC,腺苷(adenosine;AD)参与EPO合成调节;RBC膜收缩蛋白异常致RBC变形力降低,骨髓造血细胞对EPO过度敏感,骨髓红系祖细胞凋亡减少等亦是HAPC发病因素。治疗药血管紧张素转换酶抑制剂对纤溶抑制状态有效;乙酰唑胺降低HCT和EPO,提高动脉PaO2和SaO2;AD受体拮抗剂茶碱类,减少EPO与RBC生成,提高肺通气量;一些中药和中成药作用全面,疗效肯定。结论:HAPC启动因素是缺氧致肾脏合成/分泌EPO;血管紧张素转换酶抑制剂、AD受体阻断药是很有前途的HAPC治疗药;中药及其制剂值得进一步开发。