硫化氢对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：观察硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的影响。方法：将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8)：正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治 疗(NaHS+DM)组和NaHS对照(NaHS)组。采用腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素复制1型糖尿病大鼠模型。造模成功后， NaHS+DM组和NaHS组大鼠腹腔注射56 μmol/kg NaHS溶液进行干预治疗。8周后，分别测定各组大鼠血清和肾组织中 总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase，T-NOS)、iNOS活性和一氧化氮(NO)水平；测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物 酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性；采用透射电镜观察肾皮质超微结构变化；Western印迹检测肾组织iNOS蛋白 表达。结果：与NC组相比，NaHS组各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05)，而DM组大鼠血清和肾组织中T-NOS， iNOS活性和NO水平均显著增高(P<0.01)；肾组织GSH-Px活性明显下降(P<0.01)。电镜观察显示DM组大鼠肾小球基底 膜增厚、系膜基质增多，足突融合；iNOS蛋白表达明显升高。与DM组相比，NaHS+DM组血清和肾T-NOS，iNOS活 性和NO水平明显下降(P<0.01)，GSH-Px活性明显升高(P<0.01)，肾超微结构损伤明显减轻，iNOS蛋白表达显著降低 (P<0.01)。结论：H2S对1型糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用，其机制可能与下调iNOS活性和蛋白表达，降低肾NO生 成相关。     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏线粒体氧化应激的影响

目的研究吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏线粒体氧化应激的影响。方法采用链脲菌素诱导糖尿病模型,按随机数字表法将40只大鼠分为正常对照组、正常对照治疗组、糖尿病组和糖尿病治疗组,每组10只。正常对照治疗组和糖尿病治疗组给予吡格列酮10mg·kg-1·d-1灌胃,正常对照组和糖尿病组给予等剂量溶媒灌胃。第10周末测定血糖、肾质量指数、24h尿蛋白定量;检测各组大鼠肾脏线粒体丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量和锰超氧化物岐化酶(Mn-SOD)、总一氧化氮合酶(T-NOS)活性。结果糖尿病治疗组与糖尿病组比较,血糖差异无统计学意义(P>0.05),但肾质量指数和24h尿蛋白定量明显降低(P<0.01)。与正常对照组比较,糖尿病组肾脏线粒体MDA、NO含量及T-NOS酶活性升高,Mn-SOD活性降低(P<0.05或P<0.01);与糖尿病组比较,糖尿病治疗组肾脏线粒体MDA、NO含量及T-NOS酶活性下降、Mn-SOD活性升高(P<0.05或P<0.01)。结论早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体存在明显氧化应激反应,吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏线粒体有一定的抗氧化作用,这可能是其不依赖降糖的肾脏保护作用机制之一。     

盐酸吡格列酮对2型糖尿病患者血管内皮功能的影响

目的 观察盐酸吡格列酮对2型糖尿病患者血管内皮功能相关指标的影响.方法 随机选择40例初诊或应用口服降糖药治疗血糖控制不理想的2型糖尿病患者为治疗组(在原有降糖药基础上加用盐酸吡格列酮30 mg/d).32例正常体检者作为正常对照组.治疗组在治疗前后测定血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的水平.结果 经3个月治疗,治疗组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(P2hPG)均有明显下降(P＜0.05).血清ET-1水平降低,而NO及NOS水平增加(P＜0.05).线性相关分析发现,治疗组血清ET-1与FPG呈显著正相关(r=0.382,P=0.036),而NO与FPG负相关(r=-0.403,P=0.021).ET-1与NO水平显著负相关(r=-0.363,P=0.041).NO与总一氧化氮合酶(total nitricoxidesynthase T-NOS)水平显著正相关(r=0.363,P=0.042).结论 吡格列酮不仅能够显著降低血糖水平,并且具有降低ET-1水平、增加NO及NOS水平的作用,从而能够有效地保护血管内皮功能.     

安宫牛黄丸药效组分对内毒素损伤小鼠脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:观察安宫牛黄丸药效组分对内毒素损伤小鼠脑组织一氧化氮(nitric oxide,NO)系统的影响,探讨安宫牛黄丸药效组分与安宫牛黄丸的等效性、中药药效组分理论的可行性及其阻抑内毒素致脑损伤作用的可能的机制。方法:以小鼠腹腔注射脂多糖建立内毒素损伤模型;HE染色观察脑组织病理损伤情况;生化法检测脑组织中NO和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)含量。结果:内毒素损伤小鼠脑组织出现以神经细胞肿胀、核固缩、胶质细胞增生、淋巴细胞浸润为特征的病理变化;NO含量明显增多,总一氧化氮合酶(T-NOS)和诱导型一氧化氮(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活力显著增强。安宫牛黄丸及其药效组分各剂量组小鼠脑组织病理变化减轻,神经细胞肿胀、核固缩、胶质细胞增生等病变有所好转;NO含量、T-NOS、iNOS活力均有不同程度降低。结论:安宫牛黄丸药效组分对脑损伤有保护作用,提示该药效组分与安宫牛黄丸的开窍、醒神功效具有一致性。其可能通过阻抑iNOS诱导产生过量的NO,产生神经保护作用。     

氨基胍对糖尿病大鼠一氧化氮一氧化氮合酶及尿蛋白的影响

目的探讨氨基胍(AG)对早期糖尿病(DM)大鼠NO、一氧化氮合酶(NOS)活性及24 h尿蛋白排泄量(24 hUPE)的影响。方法选择健康清洁级Wistar大鼠40只,检测24 hUPE、血清NO、总一氧化氮合酶(tNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性等5项指标后,用链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg制备成糖尿病大鼠模型,将其随机分为对照组和氨基胍组(AG组)。于8周末时再检测大鼠的上述5项指标并进行统计分析。结果对照组在8周末时24 hUPE、NO和iNOS均高于造模前(P<0.01或P<0.05),AG组:24 hUPE高于造模前(P<0.01),tNOSi、NOS、cNOS低于造模前(P<0.01或P<0.05)。8周末时AG组5项指标均低于对照组(P<0.05)。结论糖尿病患者早期应用AG可通过降低血NOS活性、NO生成量及其它机制,使24 hUPE减少,减轻肾脏的损害。     

一氧化氮在阿托伐他汀钙抗动脉粥样硬化中的作用

目的：观察一氧化氮（nitric oxide,NO）气体信号通路体系对他汀类降脂药物阿托伐他汀钙的抗动脉粥样硬化作用的影响。方法：雄性SD大鼠60只随机分为：正常对照组（Control组）,高脂饮食组（HF组）,阿托伐他汀钙（atorvastatin,ATV）组（ATV组）,阿托伐他汀钙+ N’-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐（N’-nitro-L-arginie methyl ester,L-NAME）组（ATV+ L-NAME组）。在给予高脂饮食后,继续ATV和ATV联合L-NAME各治疗13～15周。观察主动脉弓的病理变化;测定各组血脂水平;测量NO、总一氧化氮合酶（total-nitric oxide synthase,T-NOS）活力、内皮性一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）以及eNOS的信使核糖核酸（eNOSmRNA）水平。结果：与Control组相比,HF组及ATV+L-NAME组大鼠主动脉弓均出现显著的动脉粥样硬化病理损害,HF组血脂水平变化明显（P<0.05）,血清NO、eNOS水平、T-NOS活力及降主动脉eNOSmRNA表达水平明显下降（P<0.05）。与HF组比较,ATV组主动脉粥样硬化病变较轻,血脂含量明显下降（P<0.05）,血清NO、eNOS水平、T-NOS活力以及降主动脉eNOSmRNA表达水平明显增高（P<0.05）。与对照及ATV组别比较,ATV+L-NAME组大鼠血脂均升高明显（P<0.05）,而血清 NO、eNOS含量及T-NOS活力均明显下降（P<0.05）。结论：ATV提高了大鼠血清NO体系的含量和活性,阻断大鼠NO通路后使ATV的抗动脉粥样硬化作用明显减弱。     

诱导型一氧化氮合酶与胶质瘤

一氧化氮(nitri oxide,NO)是人体内一种生物活性分子.近年的研究表明,它与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关.肿瘤组织中的NO主要由诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)催化合成,本文仅就iNOS与脑胶质瘤的关系作一综述.     

一氧化氮及其合酶在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见的并发症之一,也是糖尿病致命的主要原因,但其发病机制尚未阐明。近年来的研究表明,一氧化氮（nitric oxide,NO）及一氧化氮合酶（nitric oxide sythase,NOS）在DN中的作用越来越多的受到人们的重视,随着研究工作的不断深入,它们在DN中的变化过程和所起的作用将更加清楚,并成为寻找治疗糖尿病新的突破口。     

糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合酶异构体mRNA表达初步研究

目的 :研究糖尿病大鼠肾脏三种一氧化氮合酶异构体mRNA表达。方法 :大鼠随机分成 2组 :单肾切组、糖尿病组。实验第 8周 ,应用RT -PCR技术检测大鼠肾皮质诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)、内皮型一氧化氮合酶 (ecNOS)及神经元型一氧化氮合酶 (bNOS)的mRNA表达。并同时检测大鼠肾皮质总一氧化氮合酶(NOS)活性及NO含量。结果 :糖尿病大鼠尿蛋白排泄率较单肾切组明显升高 (P <0 .0 1) ;糖尿病大鼠肾皮质iNOS、ecNOS及bNOS的mRNA表达较单肾切组明显增强 (均P <0 .0 1) ;糖尿病大鼠肾皮质NOS活性也较单肾切组明显增强 (P <0 .0 5 ) ;然而糖尿病大鼠肾皮质NO含量却较对照组大鼠明显降低 (P <0 .0 1)。结论 :糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合成障碍 ,灭活加速。     

NO、NOS在早期糖尿病肾病大鼠血清中的变化

目的观察早期糖尿病肾病大鼠血清中一氧化氮（NO）、一氮化氮合酶（NOS）的变化。方法将20只健康雄性大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组,每组10只。糖尿病组大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型。第10周末测定2组血糖、肾重／体质量、24h尿蛋白定量;检测各组血清NO含量及总一氧化氮合酶（T-NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和结构型一氧化氮合酶（eNOS）活性。结果糖尿病组血糖、肾重／体质量、24h尿蛋白定量、NO水平及T-NOS、iNOS活性均较正常对照组明显增加（均P〈0．01）;eNOS活性2组间比较无显著差异（P〉0．05）。结论早期糖尿病肾病大鼠血清NO含量和iNOS活性明显升高。     

肝细胞生长因子在2型糖尿病大鼠肾脏病变中的作用

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在糖尿病肾脏病变发生发展中的作用。方法雄性Wistar大鼠70只,随机分为实验组和对照组,实验组40只,喂以高热量饲料2个月后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg;对照组30只,喂以普通饲料2个月后,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液。两组分别于注射前、注射后1个月、2个月、3个月和6个月各处死6只,取血测定血清HGF、胰岛素水平等,光镜及电镜观察肾脏形态学改变。结果成模后1个月后肾小球体积开始增大,2个月更明显,3个月及6个月体积显著下降;成模后2个月出现明显蛋白尿,肾小球基底膜3个月时就已显著增厚,6个月时更为严重;血HGF 1个月后即明显增高,至2个月时达最高值,以后逐渐降低,但始终高于对照组(P<0.01)。结论HGF在糖尿病肾脏病变的发生发展中可能对肾脏具有保护作用。     

糖尿病肾损害对半乳糖凝集素-3和内皮一氧化氮合酶的影响

目的:探讨正常和糖尿病肾脏半乳糖凝集素(Galectin)-3和内皮一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平改变及其与糖尿病肾病(DN)的关系。方法:选取30只健康成年雄性SD大鼠,随机分为基础对照、正常对照(NC)和糖尿病(DM)组,DM组一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ),72h后测定随机血糖如大于16.7mmol/L,则稳定1周确定成模;NC组注射等量的枸橼酸液;于4、8周末提取肾脏总RNA作逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),凝胶图谱成像分析系统分析mRNA表达结果。结果:1Galectin-3 mRNA在糖尿病组8周时开始表达,与正常组和糖尿病4周时有显著差异;2eNOS mRNA在正常和糖尿病肾脏均有表达且存在显著性差异,但随DN病程进展表达无明显增加。结论:Galectin-3和eNOS的表达是DN发病过程中机体的适应性改变,可能会延缓血糖对肾脏的损害。     

安体舒通对糖尿病肾病大鼠肝细胞生长因子的影响

目的:探讨安体舒通(Antisterone)对实验性糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响及其可能机制。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病组(DN组)和安体舒通治疗组(AT组),同时设正常对照组(NC组)。记录FBG、Scr及24 h尿微量白蛋白(24 h Upro)等指标。ELISA和Western blot法分别检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、HGF的表达情况。结果:⑴DN组和AT组大鼠FBG、SCr、24 h Upro和RHI水平较NC组显著升高(P均<0.01),其中AT组Scr、24 h Upro和RHI均低于DN组(P<0.05,P<0.01);⑵DN组、AT组肾皮质TGF-β1蛋白表达较NC组显著升高(P<0.05),且AT组低于DN组(P<0.05);⑶DN组、AT组HGF表达量显著低于NC组(P<0.01),但AT组高于DN组(P<0.05)。结论:安体舒通可上调HGF的表达,减轻肾小球系膜区增生,延缓糖尿病大鼠肾脏病进展。     

芎嗪对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的　探讨川芎嗪对实验大鼠糖尿病肾病的预防作用。方法　ＳＤ 大鼠３０ 只,分为正常对照组（ＮＣ）、糖尿病对照组（ＤＣ）和糖尿病治疗组（ＤＴ） 。各糖尿病组以四氧嘧啶腹腔内注射制成糖尿病模型。ＤＴ 组采用川芎嗪３０ｍｇ·ｋｇ－ １ 腹腔内注射,每周５ 次,共１２ｗｋ 。取肾脏行光镜和电镜检查,并行蛋白糖基化产物测定。统计学处理采用方差分析。结果　川芎嗪治疗可明显降低糖尿病大鼠肾组织中蛋白糖基化产物水平（ＤＴ与ＤＣ相比,Ｐ＜０ ．０１）;电镜则显示,ＤＣ肾小球基底膜明显不均匀增厚,而ＤＴ 大鼠病变较轻。结论　川芎嗪治疗可减慢实验大鼠ＤＮ 的进展。     

黄芪对糖尿病肾病大鼠尾加压素Ⅱ表达的影响

目的探讨黄芪对糖尿病肾病大鼠表达的影响。方法采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法建立大鼠糖尿病肾病模型。将大鼠分为正常对照组（NC,n=10）、糖尿病肾病组（DN,n=10）、黄芪治疗组（HZ,n=10）（予黄芪注射液5 ml/kg灌胃）。于14周末处死动物,进行以下实验：测定血糖（BG）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）和尿蛋白定量（24 h UTP）;免疫组织化学技术检测UⅡ蛋白表达,RT-PCR技术检测UⅡmRNA表达。结果与NC组相比,各模型组肾脏肥大指数（KI）、BG、TC、TG、Scr、BUN和24 h UTP明显升高,HDL明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;HZ组的上述指标与DN组比较,则有明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。与NC组比较,DN组肾组织UⅡ表达增加,UⅡmRNA表达增加（P〈0.01）;与DN组比较,HZ组肾组织UⅡ表达明显降低,UⅡmRNA表达显著减少（P〈0.05）。结论黄芪可治疗糖尿病肾病,其机制可能与降低肾组织UⅡ蛋白及其mRNA的过度表达有关。     

山药多糖对糖尿病肾病大鼠肾功能及肾MCP-1表达的影响

目的探讨山药多糖（Chineseyampolysaccharides,CYP）对糖尿病肾病（Diabeticnephropathy,DN）大鼠肾功能及肾脏单核细胞趋化蛋白-1（Monocytechemptacticprotein-1,MCP-1）mRNA表达的影响。方法70只wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病模型组,后者以链脲佐菌素（sTZ）60mg·kg-’诱导糖尿病肾病大鼠模型,成模大鼠按干预方法分为糖尿病肾病模型组（DN组）、氯沙坦（LsT组）和CYP低、中、高剂量（cYP_L、CYP-M、cYP-H）5组,给药后6周及8周末,采用放射性免疫法观察大鼠24h尿蛋白水平;采用自动生化仪检测血清中血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）水平;采用Real—timePCR法观察肾组织CMP-1 mRNA表达。结果与DN组比较,LST组及CYP中、高剂量组24h尿蛋白、血糖、尿素氮、肌酐水平均显著降低;同时下调大鼠肾组织CMP-1 mRNA的表达。结论CYP能降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白、尿素氮和肌酐水平,并下调肾组织CMP-1 mRNA的表达,提示早期应用CYP有预防和减轻肾损伤的可能。     

激活素A及卵泡抑素基因在糖尿病大鼠肾脏表达的实验研究

目的:探讨激活素A(ACT-A)及卵泡抑素(FS)基因在糖尿病大鼠肾脏的表达及可能机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分成对照组(NC)和糖尿病组(DM),腹腔注射STZ诱导糖尿病模型。各组分别在术后4、8、12和16周处死6只大鼠。观察各组肾重/体重(KW/BW)、24h尿白蛋白排泄率(AER)及肌酐清除率(Ccr)的变化。real time-PCR检测各组肾组织ACT-A及FS基因的表达。结果:与NC组相比,DM组大鼠从第8周末开始KW/BW、AER及Ccr均显著上升(P<0.01),16周末时达峰值。DM组大鼠从第4周末开始ACT-A mRNA表达逐渐增加,第12周末时达峰值(P<0.01)。FS mRNA在NC组各时间点大鼠肾组织大量表达,而在DM组其表达量呈逐渐下降趋势,第16周时只能检测到基础量表达。结论:ACT-A及FS表达失衡在DN的进行性发展中发挥了重要作用。     

甜菜碱对糖尿病肾病小鼠的治疗作用及其机制

目的探讨分子伴侣甜菜碱(betaine)对糖尿病肾病小鼠的治疗作用及机制。方法 db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)组和甜菜碱治疗组(DN+B),db/m小鼠作为正常对照组,每组18只。在治疗第4、8、12周末分别采用实时荧光定量PCR和Western blot技术测定GRP78的表达水平,ELISA测定尿单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的含量,常规病理和生化方法检测肾脏病理、血糖(blood glucose,BG)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)的动态改变。结果①与同期正常对照组比较,DN组小鼠的BG、BUN、24 h UAER、MCP-1均明显升高(P<0.05),甜菜碱治疗后可明显降低BG、BUN、24 h UAER、MCP-1水平(P<0.05),而对Scr无明显影响。②与正常对照组比较,12周时DN组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜细胞增生,系膜基质积聚,而甜菜碱治疗后可明显抑制肾脏的病理变化。③与正常对照组比较,DN组小鼠肾脏组织GRP78 mRNA和蛋白质表达水平均显著升高(P<0.05),甜菜碱治疗后可明显抑制GRP78的表达(P<0.05)。结论甜菜碱可能通过减轻内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)及相关的炎症反应治疗DN小鼠。     

信号蛋白Smad1对2型糖尿病肾病诊断意义的初步研究

目的探讨信号蛋白Smad1在2型糖尿病肾病诊断中的价值。方法选择我院2型糖尿病患者50例,根据24 h尿微量白蛋白定量分为2组:糖尿病无肾病组27例和糖尿病肾病组23例;同期相匹配的健康体检者24例为正常对照组,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定所有受试者血和尿中Smad1的水平。结果血Smad1在正常对照组为41.4(32.8,66.7)ng/L,糖尿病无肾病组为23.6(19.7,29.3)ng/L,糖尿病肾病组为24.3(22.3,25.9)ng/L。尿Smad1在正常对照组32.7(29.1,36.7)ng/L,糖尿病无肾病组24.3(17.0,32.1)ng/L,糖尿病肾病组19.1(13.8,23.6)ng/L。血和尿Smad1在糖尿病无肾病组和糖尿病肾病组均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但在糖尿病无肾病组和糖尿病肾病组间差异无统计学意义(P>0.05)。多元线性回归分析显示,血和尿Smad1与肾功能相关指标均无相关性。结论信号蛋白Smad1可能不是2型糖尿病肾病诊断中一个有价值的指标。     

川芎嗪、山莨菪碱、蝮蛇抗栓酶及卡托普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的　探讨川芎嗪、山莨菪碱、蝮蛇抗栓酶及卡托普利对实验大鼠糖尿病肾病 (DN)的预防作用。方法　SD大鼠 6 0只 ,分为正常对照组、糖尿病组及各糖尿病治疗组。以四氧嘧啶腹腔内注射制成糖尿病模型。各治疗组分别给予上述药物治疗 ,每周 5次 ,共 14周。取肾脏行光镜和电镜检查 ,并进行图像分析 ,同时测定蛋白糖基化产物 (GP)。结果　与糖尿病组比较 ,各治疗组肾组织中水平明显降低 (P <0 .0 1) ;除蝮蛇抗栓酶组外 ,其他治疗组大鼠肾小球截面积亦明显缩小 (P <0 .0 5 ) ;糖尿病组大鼠肾小球基底膜显著不均匀增厚 ,而各治疗组病变较轻 ,尤以卡托普利组疗效最为明显。结论　改善微循环、血液流变学及血流动力学治疗可减慢实验大鼠DN的进展。