一株福氏志贺菌中同时检出CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS

目的明确1株福氏志贺菌RJ506对第3代头孢菌素和氟喹诺酮同时耐药的分子机制。方法通过E-test检测RJ506对各抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),接合试验了解耐药性是否由质粒介导;用聚合酶链反应(PCR)分别扩增染色体和质粒介导的喹诺酮耐药基因并进行序列分析,检测染色体介导耐药的突变位点和质粒介导耐药的基因型;用PCR扩增CTX-M各组超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因并进行序列分析,检测ESBLs的基因型。结果RJ506对头孢噻肟和环丙沙星同时耐药,其染色体DNA旋转酶gyrA亚基的83位发现Ser→Leu突变,而gyrB和parC未见突变;该菌株同时含有ESBLs基因blaCTX-M-3和喹诺酮耐药基因qnrS,且分别位于不同的可接合质粒上。结论本实验在国内的志贺菌中检出质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS和CTX-M-3型ESBLs。     

检出1株产超广谱β-内酰胺酶福氏志贺菌

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由质粒介导的,能赋予细菌对青霉素类、头孢菌素类及单环β-内酰胺类抗菌药物耐药的一类酶。自1983年德国首次报道产ESBLs的肺炎克雷伯菌以来,世界各国均出现了产ESBLs细菌感染的病例,目前产ES-     

产超广谱β内酰胺酶福氏志贺菌一例

超广谱β内酰胺酶(ESBLs)是一类由细菌质粒介导的能水解头孢噻肟、头孢他啶等三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素的β-内酰胺酶(SEA)。可被BLA抑制剂如克拉维酸等所抑制．大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是主要的产ESBLs菌。产ESBLs菌不仅对三代头孢菌素和氨曲南耐药．ESBLs还可以通过接合、转化和转导等形式使耐药基因在细菌间扩散。从而造成严重的耐药菌的扩散和院内交叉感染。因此。必须严格按“抗微生物药敏实验的执行标准”，做好日常ESBLs检测．使临床有效地控制耐药菌的产生和交叉感染。     

济南地区产ESBL福氏志贺菌耐药性及耐药基因型分析

摘要：目的：了解产ESBL福氏志贺菌的耐药特征及传播方式,确定产ESBL菌株流行基因型。 方法：用纸片扩散法对产ESBL菌株初步筛选,PCR检测编码ESBL的基因,用接合试验确认产ESBL菌株耐药性的传递方式。 结果：53株福氏志贺菌中16株（30.2%）产ESBL。药敏结果显示,16株产ESBL福氏志贺菌对氨苄西林、头孢噻肟、四环素、氯霉素、磺胺甲噁唑和甲氧苄啶完全耐药,对头孢西丁、亚胺培南和庆大霉素完全敏感,其中75.0%（12/16）的菌株对头孢他啶、头孢吡肟和氨曲南耐药,37.5%（6/16）对环丙沙星耐药;所有产ESBL株接合试验阳性;16株产ESBL志贺菌扩增出CTX-M、TEM和OXA基因,测序结果分别为bla_CTX-M-15(12/16)和bla_CTX-M-14(4/16)、bla_TEM-1（11/16）、bla_OXA-30(16/16)。 结论: 济南地区福氏志贺菌存在严重多重耐药现象,流行的ESBL基因型为CTX-M-14和CTX-M-15。     

大便中检出产超广谱β-内酰胺酶的福氏志贺菌1例

2005年7月从1例门诊患者的大便中分离出产ESBLs福氏志贺菌，报道如下：患者，女，20岁，1月前突发高热，腹痛腹泻，粘液脓血便，有呕吐症状，应用氨苄青霉素、头孢曲松等抗生素20d，症状减轻，仍腹泻4～5次／日。于2005年7月来本院就诊，T37．5℃，粪常规WBC40～50个／HP，RBC5—6个／HP，送粪细菌培养测SS琼脂板可见无色透明湿润中等菌落，涂片镜检为革兰氏阴性杆状菌。葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖，氧化酶试验阴性，吲哚试验阴性，硫化氢阴性，甲基红试验阳性，不产赖氨酸脱羧酶，不利用柠檬酸盐，与福氏志贺菌多价血清发生凝集。本菌对亚胺培南、头孢西丁、头孢哌酮／舒巴坦、庆大霉素、诺氟沙星均敏感；氨苄西林、     

质粒介导的超广谱β-内酰胺酶的检测

由于 β 内酰胺酶 (ESBLs)类抗生素的广泛应用 ,耐药菌株不断增加 ,因此我们开展了超广谱 β 内酰胺酶的检测 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　标本来源　分离菌株为我院检验科 2 0 0 0年 1至 2月血、中段尿、痰、脓汁标本。1.2　培养基　Mueller Hinton琼脂。1.3　药敏纸片　北京天坛生物技术公司提供。1.4　接种　按标准片法的规定进行[1] 。初筛试验 :将菌液涂布于M N琼脂平板上贴上药敏试纸 ,头孢泊肟 10 μg或头孢他啶 30 μg或氨曲南 30 μg或头孢曲松 30 μg或头孢噻肟 30 μg(使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的灵敏度 )…     

氟喹诺酮耐药志贺菌中质粒介导qnr基因的检测

目的检测志贺菌对氟喹诺酮抗菌药物的耐药情况,探讨氟喹诺酮耐药与志贺菌携带质粒介导qnr基因的关系。方法用纸片扩散法对100株志贺菌（福氏志贺菌50株,宋内志贺菌50株）进行耐药性检测,聚合酶链反应（PCR）检测志贺菌质粒介导qnr基因并进行DNA测序,分析qnr基因的存在与药敏结果的关系。结果 100株志贺菌中有9株检出qnr基因,检出率为9%（9/100）,福氏志贺菌为4%（2/50）,宋内志贺菌为14%（7/50）;qnr基因阳性菌株对氧氟沙星的耐药率（11.1%）高于阴性菌株（5.5%）,但差异无统计学意义。qnr基因阳性菌株对5种氟喹诺酮药物的抑菌圈中位数比较均缩小。结论宋内志贺菌质粒介导氟喹诺酮耐药qnr基因的携带率明显高于福氏志贺菌;志贺菌若携带质粒介导qnr基因则会导致对氟喹诺酮药物的敏感性下降。     

上海地区志贺菌耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的 了解上海地区志贺菌的耐药特征,明确其所携带ESBLs的基因型.方法 用K-B纸片扩散法对收集到的216株临床分离的志贺菌进行耐药性检测和ESBLs确证试验;采用接合试验了解耐药性是否由质粒介导;用CTX-M通用引物对产ESBLs的菌株的耐药基因进行PCR扩增.结果 药敏结果显示志贺菌对萘啶酸、氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦和复方磺胺甲口恶唑的敏感率均低于50%,对头孢噻肟的敏感率为81.5%,ESBLs的检出率为18.5%(40/216),其中87.5%(35/40)的ESBLs接合试验阳性.PCR扩增显示CTX-M基因阳性率为90%(36/40),序列分析证实其型别主要为CTX-M-14(20/40)、CTX-M-15(13/40)和CTX-M-3(3/40).结论 上海地区志贺菌呈多重耐药,对第三代头孢菌素耐药性有增高趋势.上海地区志贺菌所携带ESBLs的基因型主要为CTX-M-14、CTX-M-15和CTX-M-3.     

临床分离志贺菌中产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性分析

目的 了解北京地区临床分离志贺菌携带CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因型及耐药特征。 方法 收集2008-2011年本地区分离出的志贺菌83株,聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M型ESBLs耐药基因,明确基因型,阳性产物序列在GenBank上进行比对确定基因亚型,并通过DNAman软件对核酸序列进行分析;对携带CTX-M型ESBLs耐药基因菌株按照Kirby-Bauer法进行药物敏感性试验,测定志贺菌对8种头孢类抗生素耐药情况。 结果 83株志贺菌中,13株携带CTX-M型ESBLs基因,阳性率为15.66%。对DNA序列进行比对、分析均为CTX-M-9型中的CTX-M-14亚型,未发现单核苷酸多态性(SNPs)位点。药敏结果显示,13株携带CTX-M型ESBLs基因菌株对头孢噻吩、头孢唑林、头孢噻肟等头孢类抗生素耐药,对头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟和头孢哌酮等头孢类抗生素均敏感,部分菌株对氨曲南耐药。 结论 本地区志贺菌中CTX-M型ESBLs以CTX-M-14亚型为主,基因结构稳定,携带CTX-M-14型ESBLs菌株呈多重耐药。     

质粒介导的志贺菌产超广谱β内酰胺酶及其耐药基因型

目的 探讨产生超广谱β内酰胺酶(ESBLs)志贺菌的特性及与耐药质粒的关系.方法 用K-B法做药敏试验并筛选可疑产ESBLs志贺菌株;ESBLs表型确证试验检测可疑产ESBIs志贺菌;采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组β内酰胺酶通用引物进行PCR检测,TEM、CTX-M-9组全编码基因引物进行PCR测定,对扩增产物进行DNA序列分析;对产ESBLs志贺菌进行接合传递试验,供体菌和接合子用稀释法进行MIC测定.结果 在275株志贺菌中有12株为产ESBLs志贺菌,其中8株志贺菌基因型为CTX-M-14型,4株为CTX-M-3型;产ESBLs志贺菌接合传递试验全部阳性,其接合子只对β内酰胺类抗生素耐药.结论 本地区志贺菌对β内酰胺类抗生素的严重交叉耐药是由ESBLs所致,产ESBLs志贺菌可通过质粒传递耐药性.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药分析

目的　了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、耐药特点,指导临床合理用药。方法　采用纸片扩散法(K -B法)对产ESBLs肺炎克雷伯菌的体外抗生素耐药性作了初步研究。结果产ESBLs细菌对哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋新、头孢噻肟的耐药性高达81.8%～10 0 .0 % ,对头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦的耐药性铰低,分期为2 7.3%、36 .4 % ,对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类的耐药率分别达到5 9.1%、6 3.6 %、95 .5 % ,所有受试菌对亚胺培南均敏感。结论　治疗ES BLs菌引起的感染,最有效的抗菌药物是亚胺培南,其次是β-内酰胺酶抑制剂的复合物。     

大肠埃希菌耐药特征及质粒介导喹诺酮耐药基因分布北大核心CSCD

目的调查大肠埃希菌分离株的耐药特征及质粒介导喹诺酮耐药基因流行状况。方法纸片扩散（K-B）法进行药物敏感试验,采用双纸片法检测产超广谱β内酰胺酶（ESBL）,聚合酶链反应（PCR）检测qnr A、qnr B、qnr C、qnr D、qnr S、aac（6＇）-Ib、qep A基因,限制性酶切反应确定aac（6＇）-Ib-cr基因型。结果 179株大肠埃希菌中95株ESBL表型确证试验阳性,检出率为53.1%;产ESBL菌株未见对美罗培南耐药,对亚胺培南耐药率极低（1.1%）,对阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦耐药率皆低于30%,对哌拉西林、头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率皆高于70%,对庆大霉素、头孢他啶、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率在60%~70%;PCR扩增结果显示产ESBL菌株,具有qnr基因9株（9.5%）,其中qnr A 2株、qnr B 5株、qnr S 2株。非产ESBL菌株,具有qnr B基因3株（3.6%）;酶切反应显示产和非产ESBL菌株具有aac（6＇）-Ib-cr基因分别为21株（22.1%）和5株（6.0%）。所有菌株皆未检测到qep A基因。结论产ESBL大肠埃希菌呈现多重耐药趋势,质粒介导喹诺酮耐药基因以aac（6＇）-Ib-cr基因型为主。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药分析

目的了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的发生比例及其对临床上常用的20种抗菌药物耐药变化。方法收集2008～2009年本院各类临床标本中分离的大肠埃希菌,用ATB Expression微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果 2008～2009年产ESBLs的大肠埃希菌分离率分别为45.51%(71/156)、55.93%(99/177)(P0.05)。2年来ESBLs阳性的大肠埃希菌对临床常用的20种抗菌药物药敏表现出较高耐药性,耐药率上升差异有统计学意义(P0.05),非产ESBLs的大肠埃希菌对大多数抗菌药物仍保持较高的敏感率。结论应加强对大肠埃希菌ESBLs的监测,合理使用抗菌药物,对于有效控制产ESBLs大肠埃希菌的播散和流行是一项重要措施。     

铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶、质粒介导AmpC酶基因分布及流行特征分析

目的研究临床分离铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导AmpC酶的基因分布及流行特性,为细菌耐药性的监控提供依据。方法回顾性调查5年间临床分离的铜绿假单胞菌的分布和耐药情况。选取每年同一时间段的临床连续分离株共169株,用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、VEB、PER、GES、TLA、IBC、CTX-M、OXA等β-内酰胺酶基因和AmpC酶基因。使用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析菌株间的同源性。结果铜绿假单胞菌主要分离自呼吸道(痰标本),占75.7%;对复方磺胺甲噁唑和头孢曲松耐药情况严重,耐药率分别为91.9%和91.7%;对其他主要抗菌药物的耐药率分别为头孢他啶46.7%、亚胺培南38.2%、左旋氧氟沙星30.2%、环丙沙星28.3%、阿米卡星5.0%。169株铜绿假单胞菌中产TEM、CTX-M、OXA和GES型β-内酰胺酶菌株84株(49.7%);质粒介导AmpC酶23株(13.6%)。PFGE结果显示铜绿假单胞菌仅3株具有同源性,呈散发流行。结论铜绿假单胞菌临床感染率高,呈多重耐药且散发流行趋势。     

产超广谱β-内酰胺酶多重耐药的肺炎克雷伯菌相关基因研究

目的 了解山西地区五家医院多重耐药的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）的耐药特点,并研究其产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamaes,ESBLs）多重耐药的KP相关基因的流行情况.方法 收集2010年1月-2012年12月山西地区五家医院临床标本中分离的KP2516株,采用药敏试验（K-B法）和ESBLs确证实验筛选多重耐药的KP,采用PCR法扩增ESBLs多重耐药的KP相关基因,选取阳性产物进行测序并在Genbank进行分析.结果 2516株KP中,筛选出40株产ESBLs的多重耐药KP.PCR法基因扩增检测出40株blaTEM型,1株SHV型和4株KPC型;检测出染色体介导的GyrA型32株,质粒介导的qnrA型8株,qnrB型15株,以及qnrS型2株;没有检出金属酶NDM-1基因.结论 多重耐药的KP耐药机制非常复杂,多重耐药菌株的出现导致同一菌株中同时携带几种基因.因此,应加强临床病例的监测,合理使用抗菌药物,减少泛耐药菌株的传播.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药情况分析

目的调查萍乡市人民医院痰标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集萍乡市人民医院2014年7月至12月临床分离肺炎克雷伯菌的169例痰标本,对产ESBLs肺炎克雷伯菌和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行对比分析,了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药情况。结果 169例检出肺炎克雷伯菌的痰标本中,分离出产ESBLs阳性株76株,其阳性率为44.97%;肺炎克雷伯菌产ESBLs株与非产ESBLs株对14种抗生素耐药情况的比较:除两者对亚胺培南的耐药率均为0外,对其他抗生素产ESBLs株的耐药率均高于非产ESBLs株。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况严重,但对亚胺培南、美罗培南和哌拉西林/他唑巴坦呈现较高敏感性。     

超广谱β-内酰胺酶耐药菌株质粒谱分析

目的研究新生儿病房中产生超广谱β-内酰胺酶(extend spectrum β-lactamase,ESBLs)细菌株的流行情况.方法对1999年1～9月新生儿病房住院患儿的痰、脓、脐分泌物、咽拭子、血流及病区常用器具进行培养及药敏试验.选取33株2～3月流行期间的ESBLs菌进行质粒提取和质粒谱分析.结果有6组相同的质粒带,其百分率分别为45.4%、15.2%、9%、9%、12.1%、9%.新生儿病房暖箱水箱中的ESBLs菌为45.4%质粒带组,成为引起本次爆发流行株.结论调查ESBLs耐药菌株的流行在控制医院感染中可能具有重要意义.     

上海发现同时产CYM-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌

目的研究大肠埃希菌同时产质粒型头孢菌素酶(AmpC酶)及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药表型及基因型特点。方法在242株大肠埃希菌中用多重聚合酶链反应(PCR)检测质粒AmpC酶;对确认为产CIT群质粒AmpC酶的菌株进行PCR、克隆、测序;接合试验证实耐药基因的可传递性;PCR及测序确定ESBL的基因;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点(PI);微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)。结果12株产CIT群酶细菌所携带AmpC酶基因均为blaCMY-2(PI 9.0),且均携带blaTEM-1(PI 5.4),9株同时携带blaCTX-M-14(PI8.0),无菌株携带blaSHV-like;12株产CMY-质粒AmpC酶细菌有4株接合实验阳性,经PCR证实接合子均传递了blaCMY-2,并有1株同时传递了blaCTX-M-14;多数产CMY-2型酶的细菌呈多重耐药,并有1株菌对碳青霉烯类药物耐药。结论在上海地区首次发现同时产CMY-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型ESBL的大肠埃希菌。     

上海发现同时产CYM-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌

目的研究大肠埃希菌同时产质粒型头孢菌素酶（AmpC酶）及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的耐药表型及基因型特点。方法在242株大肠埃希菌中用多重聚合酶链反应（PCR）检测质粒AmpC酶;对确认为产CIT群质粒AmpC酶的菌株进行PCR、克隆、测序;接合试验证实耐药基因的可传递性;PCR及测序确定ESBL的基因;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点（PI）;微量稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）。结果12株产CIT群酶细菌所携带AmpC酶基因均为blaCMY-2（PI 9.0）,且均携带blaTEM-1（PI 5.4）,9株同时携带blaCTX-M-14（PI8.0）,无菌株携带blaSHV-like;12株产CMY-质粒AmpC酶细菌有4株接合实验阳性,经PCR证实接合子均传递了blaCMY-2,并有1株同时传递了blaCTX-M-14;多数产CMY-2型酶的细菌呈多重耐药,并有1株菌对碳青霉烯类药物耐药。结论在上海地区首次发现同时产CMY-2型质粒AmpC酶及CTX-M-14型ESBL的大肠埃希菌。     

肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性

目的了解浙江省金华市中心医院临床分离肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率及其耐药性。方法采用纸片扩散法（K-B）检测肺炎克雷伯菌对18种常用抗菌药物的敏感性。按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的ESBLs表型确证试验检测;聚合酶链反应（PCR）检测菌株中的质粒AmpC酶基因和CTX-M型ESBLs基因。并对阳性扩增产物进行测序明确其基因亚型;接合试验了解质粒AmpC酶基因和ESBLs基因的可转移性;肠杆菌科细菌基因间重复一致序列（ERIC-PCR）分析菌株的同源性。结果 101株肺炎克雷伯菌中35.6%（36/101）的菌株ESBLs表型确证试验阳性,其中77.8%（28/36）的菌株含CTX-M型ESBL基因,以CTX-M-15和CTX-M-14基因型为主。11.9%（12/101）的菌株产质粒AmpC酶基因,DNA测序证实为DHA-1型质粒AmpC酶。5.9%（6/101）的菌株同时产质粒AmpC酶和ESBLs。结论我院存在同时产质粒AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的流行,质粒AmpC基因型别主要为DHA-1型,ESBLs基因型别主要为CTX-M-14或CTX-M-15型。耐药基因可通过接合的方式从供体菌转移至敏感细菌,临床上应加强对此类菌株的监测。