miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移及SIRT1表达的调控

目的观察前列腺癌PC-3细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)-221和miRNA-222对细胞增殖和迁移的作用,以及对沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响。方法设立无处理细胞组(简称control组)、转染空载质粒pEX-5组(简称pEX-5组)、转染miRNA-221反义抑制质粒组(简称miRNA-221抑制组)、转染miRNA-222反义抑制质粒组(简称miRNA-222抑制组),应用细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞增殖的影响;采用细胞划痕修复实验检测miRNA-221和miRNA-222对细胞迁移能力的影响;采用免疫印迹法和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测SIRT1在蛋白水平和mRNA水平的变化;采用miRNAanda靶标进行预测分析。结果在成功抑制了PC-3细胞中miRNA-221或miRNA-222的表达后,连续7 d检测细胞活性,miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的细胞活性(A450 nm值)较pEX-5组降低1.5~2.0倍,自第3天起两组之间即有明显差异(t=6.7,P0.01;t=5.3,P0.01);划痕实验显示,miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的迁移能力明显低于pEX-5组。miRNA-221抑制组、miRNA-222抑制组中SIRT1蛋白的相对表达量分别为(0.26±0.021)、(0.21±0.005 8),与pEX-5组(0.14±0.017)比较差异均有统计学意义(t值分别为6.3、6.4,P均0.05);而SIRT1 mRNA的表达水平3组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-221和miRNA-222能促进前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移能力,影响SIRT1蛋白的表达。     

miRNA-195在膀胱癌细胞中功能的研究

目的研究微小RNA(miRNA)-195对人膀胱癌细胞5637增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法利用阳离子脂质体方法将miRNA-195转染至人膀胱癌细胞5637(miRNA-195组),同时以只转染病毒载体的5637细胞作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测转染细胞中miRNA-195的表达量。采用噻唑蓝(MTT)法、细胞计数法和集落形成实验测定miRNA-195对5637细胞体外增殖的影响。采用划痕试验、Transwell实验、Matrigel肿瘤细胞侵袭实验检测miRNA-195对5637细胞迁移、侵袭能力的影响。结果实时荧光定量PCR检测结果表明转染后的5637细胞高表达miRNA-195。MTT法、细胞计数法及集落形成实验证明miRNA-195可以抑制5637细胞在体外的增殖,miRNA-195组和对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。划痕实验、Transwell实验以及Matrigel肿瘤细胞侵袭实验证明miRNA-195可以抑制5637细胞的迁移和侵袭能力,miRNA-195组和对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-195能够抑制膀胱癌细胞5637在体外的增殖、迁移以及侵袭能力。     

结缔组织生长因子反义寡核苷酸对胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子表达及细胞增殖与侵袭的影响

目的 通过研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及细胞增殖与侵袭力的影响,深入探讨CTGF在胰腺癌发生、发展中的作用机制,为CTGF ASODN在胰腺癌基因治疗中的运用奠定理论基础.方法 经脂质体介导将CTGF ASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990,荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测转染细胞CTGF、MMP-9与VEGF mRNA与蛋白表达;噻唑盐(MTT)比色法检测转染细胞的增殖活性;采用Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 (1)荧光显微镜及流式细胞仪检测显示CTGF ASODN可成功转染SW1990细胞.(2)反义组、无义组和单加脂质体组细胞CTGF mRNA表达量分别为0.24±0.09、0.67±0.21、0.63±0.18,反义组较其他组的mRNA表达明显减少(P<0.01);相应的CTGF蛋白表达量分别为0.19±0.07、0.75±0.26、0.71±0.23;相应的MMP-9 mRNA表达量分别为0.21±0.12、0.78±0.35、0.81±0.37;相应的VEGF mRNA表达量分别为0.16±0.06、0.42±0.22、0.43±0.28;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.68±0.22、1.97±0.46、1.92±0.39;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.27±0.07、0.52±0.19、0.55±0.18,反义组CTGF、MMP-9和VEGF的表达较其他组显著降低(P<0.01).(3)反义组、无义组、单加脂质体组细胞增殖活性分别为1.67±0.14、2.34±0.17、2.29±0.21,反义组较其他组细胞增殖被显著抑制(P<0.01).(4)反义组、无义组、单加脂质体组微孔滤膜外侧细胞数分别为24.88±6.17、52.37±8.62、55.49±8.83,反义组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少(P<0.01).结论 CTGF ASODN转染可有效抑制SW1990细胞CTGF的表达,并降低其MMP-9、VEGF的表达及细胞增殖活性与细胞侵袭力.     

miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222与脑胶质瘤发生发展的相关性

目的:研究miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222与脑胶质瘤发生发展的相关性,为脑胶质瘤的早期诊断提供相关依据。方法:选取2011年4月至2015年4月第四军医大学第一附属医院西京医院收治的60例经病理证实为胶质瘤的患者作为实验组,分为低级别组(经检查肿瘤级别为I级和II级)和高级别组(经检查肿瘤级别为III级和IV级)。另选取15例经体检证实为健康人作为对照组。使用RT-q PCR检测3组血清miRNA-21、miRNA-221和miRNA-222含量,并且进行比较。结果:3组血清miRNA-21(F=5.497,P=0.006)、miRNA-221(F=7.615,P=0.001)和miRNA-222(F=6.304,P=0.003)含量差异有统计学意义;血清miRNA-21、miRNA-221含量在对照组最低,在高级别组最高,差异有统计学意义(P0.05);血清miRNA-222含量高级别组高于对照组(P0.05),而低级别组与对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论:脑胶质瘤患者的血清miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222都呈高表达状态,提示其与脑胶质瘤的形成和发展有密切联系;监测血清miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222的含量可以对脑胶质瘤患者的早期诊断、分级和预后评估等提供重要依据。     

miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的探究miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖、凋亡的作用及相关机制。方法取SDP级健康雄性SD大鼠作为实验对象,取血管平滑肌细胞(VSMC)消化离心后,转染50nmol/L miRNA-146a反义寡核苷酸、错义链和同等剂量磷酸盐缓冲液(PBS),进行对照比较。结果实验组细胞在转染后48h内VSMC的数目和吸光度值均低于其他两组,细胞凋亡率明显高于其他两组,核因子κBp65、PCNA的表达水平低于其他两组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论miRNA-146a可促进VSMC的增殖,抑制细胞凋亡的进行,这一作用机制与核因子κBp65、PCNA表达水平增高有关。     

miR-145通过调控MMP-2、MMP-9的表达对卵巢癌细胞调亡、增殖、迁移的影响

目的研究微小RNA-145(miR-145)通过调控基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达对卵巢癌细胞调亡、增殖、迁移的影响。方法将卵巢癌细胞株随机分为3组,其中对照组为单纯卵巢癌细胞株,不做其他处理,进行正常培养;miR-145组为含miR-145质粒的慢病毒转染的卵巢癌细胞株;NC组为含NC质粒的慢病毒转染的卵巢癌细胞株。检测3组卵巢癌细胞的凋亡、增殖、迁移情况。检测3组MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达水平。结果与对照组、NC组比较,miR-145组卵巢癌细胞凋亡率明显升高,卵巢癌细胞增殖数、迁移数明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组与NC组卵巢癌细胞凋亡率、增殖数、迁移数差异无统计学意义(P>0.05)。miR-145组MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达水平均低于NC组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组与NC组MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-145可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移,促进调亡,其作用机制可能与miR-145能降低MMP-2、MMP-9的表达有关。     

上调miRNA-22表达对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭的影响及与VEGF和P53蛋白表达的关系研究

目的研究上调miRNA-22表达对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭的影响及与血管内皮生长因子(VEGF)和P53蛋白表达的关系。方法前瞻性收集新疆维吾尔自治区人民医院的卵巢癌组织标本112例(A组)、卵巢癌旁组织标本85例(B组)及正常卵巢组织标本75例(C组)。采用实时荧光定量PCR法对三组标本中的miRNA-22表达量进行检测。将卵巢癌SKOV-3细胞株分为转染miRNA-22-mimic(转染组)、miRNA-22-NC(空白载体组)及正常对照组。采用实时荧光定量PCR法对各组细胞中的miRNA-22表达量进行测定,通过Transwell小室法对各组细胞的侵袭能力进行检测,并用Western blot法对各组细胞中的P53及VEGF蛋白表达情况进行检测。结果 A组miRNA-22表达量较B、C组均明显下降(P 0. 05),而B、C组miRNA-22表达量的比较,并无显著差异(P 0. 05)。相比正常对照组与空白载体组,转染组细胞中的miRNA-22表达量明显升高(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组细胞中miRNA-22表达量的比较,无显著差异(P 0. 05)。Transwell小室法检测结果发现,转染组卵巢癌SKOV-3细胞株侵袭能力较正常对照组与空白载体组明显减弱(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组侵袭细胞数的比较,无显著差异(P 0. 05)。Western blot法检测结果发现,转染组细胞中P53和VEGF蛋白表达水平较正常对照组与空白载体组明显下降(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组细胞中P53和VEGF蛋白表达水平的比较,无显著差异(P 0. 05)。结论上调miRNA-22表达可起到阻滞卵巢癌SKOV-3细胞株侵袭的作用,其机制可能与P53和VEGF蛋白表达水平下降密切相关。     

基质金属蛋白酶-26促进乳腺癌细胞的黏附、迁移和侵袭

目的获得稳定表达MMP-26蛋白的乳腺癌细胞株,明确MMP-26蛋白在乳腺癌细胞黏附、迁移和侵袭中的作用。方法将含有MMP-26基因全长序列的pcDNA3.1质粒稳定转染人乳腺癌MCF-7细胞株,筛选阳性表达克隆扩大培养,对比其转染前后在Matrigel上的黏附和铺展能力以及在Boyden小室中的迁移和侵袭能力的差异。结果RT-PCR和细胞免疫荧光结果显示转染组MMP-26 mRNA及蛋白均稳定高表达;MMP-26转染细胞在Matrigel的黏附和铺展速度大于对照组,其黏附率与对照组比较差异有显著性,P〈0.01;MMP-26转染组细胞在Boyden小室中的迁移速度和侵袭能力明显增强,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）。而MMP-26抗体对其有明显的抑制作用。结论MMP-26能有效的促进乳腺癌细胞在Matrigel上的粘附、迁移和侵袭能力,其可能在乳腺癌的早期侵袭中发挥重要作用。     

miRNA-381靶向PTEN对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及相关机制研究

目的 探讨与研究miRNA-381靶向10号染色体上磷酸酶与张力蛋白同源缺失基因(PTEN)对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及相关机制。方法 将处于对数生长期的BGC-823细胞平均分为三组:对照组、实验1组与实验2组,分别转染miRNA NC 20 nmol/L与miRNA-381 mimic 20 nmol/L、40 nmol/L。采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞迁移情况,实时定量PCR检测miRNA-381表达情况,Western blotting检测PTEN蛋白表达情况。结果 转染后24 h、48 h,实验1组与实验2组的细胞增殖指数、细胞迁移指数、miRNA-381表达量高于对照组,差异均具有统计学意义(P 0. 05);实验2组高于实验1组,两组比较差异具有统计学意义(P 0. 05)。实验2组与实验1组的细胞凋亡指数、PTEN蛋白相对表达量均显著低于对照组,实验2组也较实验1组显著降低,差异均具有统计学意义(P 0. 05)。与转染后24 h相比,转染后48 h三组细胞增殖指数、凋亡指数、迁移指数以及miRNA-381相对表达量均显著增加,而PTEN蛋白相对表达量仅对照组显著增加,两个实验组均显著降低(P 0. 05)。结论 在胃癌细胞中,miRNA-381可通过靶向抑制PTEN表达,从而促进胃癌细胞增殖与迁移,抑制胃癌细胞的凋亡。     

miRNA-630在鼻咽癌中的表达情况及与不良预后的相关性分析

目的探讨微小RNA(miRNA)-630在鼻咽癌中的表达情况及与鼻咽癌患者预后的相关性。方法从NCBI-GEO网站中下载了GSE70970、GSE43329和GSE12452共3个独立的鼻咽癌芯片数据,使用Graphpad prism 7对miRNA-630的表达差异进行统计分析;对miRNA-630的表达进行了受试者工作特征曲线(ROC)和Kaplan-Meier生存曲线分析。采用SPSS22.0对miRNA-630表达量、肿瘤病理(T)和淋巴结转移(N)指标建立了单因素和多因素COX风险比例模型。采用RT-qPCR检测鼻咽癌组织和正常组织标本中miRNA-630的表达情况。培养CEN2细胞,分为3组,分别仅加入磷酸盐缓冲液(对照组)、转染空载(空载组)和miRNA-630(miRNA-630组),采用MTT法测定细胞生长情况。最后,预测并验证miRNA-630在鼻咽癌中致癌的机制。结果 miRNA-630在鼻咽癌组织中的表达量明显高于正常组织(P0.05)。转染miRNA-630载体48、72、96h后,miRNA-630组细胞水平明显高于对照组和空载组(P0.05)。miRNA-630组的CNE2细胞中TP53INP2基因和蛋白表达水平明显低于对照组和空载组(P0.05)。结论 miRNA-630在鼻咽癌中高表达,与不良预后相关,miRNA-630的高表达可促进鼻咽癌细胞的增殖,可作为鼻咽癌预后的独立预测因子;其作用机制可能与靶向抑制TP53INP2有关。     

微RNA-449a在胃癌中的表达及其功能研究

目的探讨微RNA（miRNA）－449a在胃癌中的表达及其功能。方法采用逆转录荧光定量聚合酶链式反应PCR）检测miRNA-449a在胃癌组织和配对的正常组织中的表达,分析miRNA-449a与临床病理参数之间的关系。并将miRNA-449a模拟物转染胃癌细胞后进行细胞增殖分析。结果74．63％的癌组织中miRNA-449a表达下降．miRNA-449a在胃癌组织中的表达明显低于配对正常组织,差异有统计学意义（t=2．04,P〈0．05）。miRNA-449a表达在胃癌的肿瘤大小和胃癌临床分期（TNM）各组间均存在明显差异,差异有统计学意义（X2分别=9．69、9．41,P均〈0．05）,而miRNA-449a表达在不同性别和年龄之间的差异均无统计学意义（X2分别=0．04、0．01,P均〉0．05）。与阴性对照比较．miRNA-449a模拟物明显抑制胃癌细胞的增殖,差异有统计学意义（t=2t．67,P〈0．05）。结论miRNA—449a在胃癌组织中呈低表达,抑制胃癌细胞增殖,可能发挥抑癌基因的作用。     

肾透明细胞癌组织中miRNA-185水平的变化及其意义

目的探讨肾透明细胞癌组织中微小RNA-185（miRNA-185）水平的变化及其意义。方法提取22例手术患者肾癌组织和癌旁正常组织中的miRNAs,用RT-PCR的方法初步检测miRNA-185在肾癌组织和癌旁正常组织中的表达情况。采用Real-time PCR的方法定量分析miRNA-185在肾癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。结果电泳结果显示,miRNA-185和U6 RNA均呈单一条带,其所处的位置及其在正常组织和癌组织中的表达情况符合前期的预计。Real-time PCR结果显示,miRNA-185在肾癌组组织中呈高表达,较癌旁组组织平均升高5.14倍。22例标本中有17例（77%）肾癌组组织中miRNA-185阳性表达率为77.3%（17/22）,明显高于癌旁组的22.7%（5/22）（P〈0.05）。G1期的4例肾癌标本均较相应的癌旁正常组织呈现低表达,高表达的则离散分布在G2和G3期。相关性分析结果显示,miRNA-185在肾透明细胞癌组织中的相对表达量与肾癌病理学分期呈正相关（r=0.58,P〈0.05）。结论 miRNA-185在肾癌组织中呈显著高表达,提示其与肾透明细胞癌的发生与演进有关,有望成为指导肾透明细胞癌诊断、治疗、预后的新靶点。     

微小RNA-221在宣威肺癌细胞中对靶基因p53正向凋亡调控因子调控机制的研究

目的探讨宣威肺癌细胞中微小RNA-221(miR-221)对靶基因p53正向凋亡调控因子(PUMA)的调控机制。方法在宣威肺癌细胞株(XWLC-05)中转染miR-221过表达/抑制表达载体后,将实验分为4组,Control组:未转染任何质粒;Scramble组:转染PUMA质粒;Over-miR-221+PUMA组:转染miR-221过表达载体、PUMA质粒;In-miR-221+PUMA组:转染miR-221抑制表达载体、PUMA质粒。应用实时荧光定量PCR技术检测各组PUMA在mRNA水平的表达差异。荧光素酶报告实验验证PUMA是否为miR221的靶基因。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析miR221对细胞增殖的影响。检测Caspase3/7、9活性分析miR221对细胞凋亡的影响。结果 miR-221可以直接作用于PUMA基因的3’UTR端(t=-8.662,12.761,P<0.001);过表达转染组能够有效地促进宣威细胞增殖,抑制表达转染组能够有效地抑制宣威细胞增殖(24 h:F=98.181,P<0.001;48 h:F=109.561,P<0.001;72 h F=143.782,P<0.001)。在抑制表达转染组中Caspase3/7、9的酶活性是升高的(t=12.851,15.491,P<0.001);而过表达转染组中Caspase 3/7、9酶活性与Control组及Scramble组差异无统计学意义(t=-2.181,P=0.061;t=-2.056,P=0.074);各组PUMA基因的表达差异无统计学意义(H=1.262,P=0.532)。结论 PUMA为miR-221的靶基因之一,miR-221可能通过负向调控靶基因PUMA参与宣威肺癌的发生、发展。     

Downregulation of miR-221 enhances the sensitivity of human oral squamous cell carcinoma cells to Adriamycin through upregulation of TIMP3 expression

Aberrantly expressed microRNAs (miRNAs) are involved in oral tumorigenesis since they can alter the expression of proteins involved in cancer progression. It remains unclear whether miRNA-221 influences the resistance of human oral squamous cell carcinoma cells to Adriamycin. We therefore investigated the role of miR-221 in the sensitivity of oral squamous cell carcinoma cells to chemotherapy. Tca8113 and UM2 cells were treated with different concentrations of Adriamycin. Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) revealed miR-221 upregulation after Adriamycin treatment of Tca8113 and UM2 cells. By using miR-221 inhibitor mimics, we found that depleting cells of miR-221 increases the sensitivity of the cells to Adriamycin. The expression of tissue inhibitor of metalloproteinase-3 (TIMP3), a target of miR-221, was decreased in cells treated with Adriamycin. TIMP3 depletion reversed the effect of a miR-221 inhibitor mimics on cell survival rates and apoptosis. Together, these results reveal that silencing of miR-221 enhances the sensitivity of human oral squamous cell carcinoma cells to Adriamycin through upregulation of TIMP3 expression.     

血清miRNA-10b和miRNA-34a在子宫内膜异位症患者中的表达及与术后复发关系研究

目的探讨血清微小RNA（miRNA）-10b和miRNA-34a在子宫内膜异位症（EMT）患者中的表达及与术后复发关系。 方法选择就诊于承德医学院附属医院妇科2017年1月~2019年12月子宫内膜异位症患者126例作为观察组；另选择同期健康育龄期女性89例作为对照组。所有EMT患者均随访1年，采用门诊、电话或微信等方式，观察患者术后复发情况。采用实时荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法测定血清miRNA-10b和miRNA-34a表达。比较EMT组与对照组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量；复发组与未复发组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量；采用ROC曲线分析miRNA-10b和miRNA-34a对EMT术后复发预测价值；采用多因素Logistic回归分析EMT术后复发危险因素；采用Pearson分析miRNA-10b和miRNA-34a与术后复发相关性。 结果EMT组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量高于对照组（P＜0.05）。随访1年，均完成随访，复发29例，未复发97例。复发组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量高于未复发组（P＜0.05）。经ROC曲线分析显示，miRNA-10b预测EMT术后复发中，敏感度为68.75%，特异度为69.23%；miRNA-34a预测EMT术后复发中，敏感度为66.67%，特异度为57.14%。经多因素Logistic回归分析显示，miRNA-10b和miRNA-34a为影响EMT术后复发危险因素。经Pearson分析，miRNA-10b和miRNA-34a与术后复发呈正相关。 结论血清miRNA-10b和miRNA-34a在EMT患者中表达升高，与术后复发呈正相关，且为影响EMT术后复发危险因素，及对EMT术后复发预测敏感度和特异度良好。     

肿瘤教育血小板源性miRNA-122和miRNA-21在肝癌早期诊断中的应用研究

目的 探究肝癌患者肿瘤教育血小板源性微小RNA(miRNA)-122和miRNA-21的表达水平及其对肝癌的诊断价值.方法 选取2021年12月在该院诊治的15例原发性肝癌患者及同期在该院行健康体检的15例体检健康者分别作为肝癌组和健康对照组.采用低速离心法提取受试者血浆中的血小板,采用实时荧光定量PCR检测富血小板悬...     

荧光定量分析人皮肤瘢痕疙瘩组织中miRNA-34s的表达

背景：通过分析不同肿瘤组织与正常组织miRNA表达谱的差异,有可能筛选到特异性好、灵敏度高、可作为特定肿瘤分子标志物的miRNA。目的：采用实时荧光定量RT-PCR检测miRNA-34家族（miRNA-34s：miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的差异表达,分析评价microRNA-34s在瘢痕疙瘩形成发展的作用及可能的机制影响。方法：收集手术切除瘢痕疙瘩组织（10例）和正常皮肤（2例）;TRIZOL法提取标本的总RNAs并进行质检,再采用 Ambion′s miRNA Isolation Kit 从总 RNAs 中分离 microRNA,采用实时荧光定量 RT-PCR 技术检测miRNA-34s（miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织中的表达水平。结果与结论：miRNA-34s（miRNA-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织中均呈下调表达（P＜0.01）。表明该家族成员参与了瘢痕疙瘩的形成发展,下调表达的miRNA-34s可能导致了瘢痕疙瘩的肿瘤性生长。     

茎环引物fqRT-PCR检测心肌梗死后重构患者血清miRNA-21的表达及其临床意义

目的建立茎环引物实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（fqRT-PCR）检测微小RNA（miRNA）的定量检测方法。方法选择300例心肌梗死患者作为心肌梗死组,心肌梗死组患者根据病情再分为急性组、亚急性组及慢性组;同期选取100例健康体检者作为对照组。采用茎环引物fqRT-PCR、金纳米-分子信标fqRT-PCR检测其血清miRNA-21表达水平。结果急性期、慢性期心肌梗死患者血清miRNA-21表达水平高于亚急性期和对照组（P〈0.05）,亚急性期患者的血清miRNA-21表达水平高于对照组（P〈0.05）。茎环引物fqRT-PCR检测miRNA-21,最低检出102 copies/μL的稀释标本,而金纳米-分子信标fqRT-PCR最低检出105 copies/μL的稀释标本。茎环引物fqRT-PCR与金纳米-分子信标fqRT-PCR检测miRNA-21比较,节约464个引物,节省时间208min。结论茎环引物fqRT-PCR检测miRNA具有快速、灵敏、重复性好,可用于临床定量分析miRNA。     

微小RNA-21和肿瘤抑素在膀胱癌中的表达及其相关性的研究

目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情况。结果膀胱癌患者中微小RNA-21和肿瘤抑素的阳性表达率分别是69.4%和43.9%。与浅表性和分化较好的膀胱癌相比,侵袭性和分化差的癌细胞中微小RNA-21表达上调明显,而肿瘤抑素表达则显著下调,组间比较（P〈0.01）,差异有统计学意义。有68例患者存在微小RNA-21和肿瘤抑素共表达,两者之间呈负相关（P〈0.05）,差异也具有统计学意义。结论微小RNA-21和肿瘤抑素共表达失调可能促进膀胱癌的发生发展,抑制微小RNA-21表达,上调肿瘤抑素水平有希望成为有效治疗膀胱癌的一种新方法 。