硬性透气性角膜接触镜材料体外溶菌酶的短期吸附动力学

背景：镜片沉淀物的形成是角膜接触镜配戴的常见问题之一,其中蛋白沉淀最易形成。研究氟硅丙烯酸酯硬镜溶菌酶吸附动力学可进一步完善硬镜蛋白吸附数据,为降低其表面蛋白吸附量和预防硬镜表面污染提供有意义的指导。 目的：考察氟硅丙烯酸酯硬镜在体外对溶菌酶的吸附情况。 方法：配制质量浓度为2.0 g/L溶菌酶溶液(溶液Ⅰ)及不同浓度三氟乙酸溶液;解析率实验,将对照组与实验组镜片浸入溶液Ⅰ37 ℃振荡孵育,Hank’s平衡盐溶液清洗氟硅丙烯酸酯硬镜,然后将对照组镜片浸入去离子水中,实验组镜片浸入不同浓度三氟乙酸,于不同时间点取出;溶菌酶短期吸附动力学实验,对照组镜片浸入去离子水中,实验组镜片浸入溶液Ⅰ37 ℃振荡孵育不同时间点,Hank’s平衡盐溶液清洗氟硅丙烯酸酯硬镜,后用0.2%三氟乙酸解析吸附溶菌酶;BCA法测定各溶液中溶菌酶的量。 结果与结论：氟硅丙烯酸酯硬镜吸附溶菌酶可用三氟乙酸解析,三氟乙酸解析溶菌酶受解析时间和解析浓度的影响。三氟乙酸解析溶菌酶最佳时间1 h,最适浓度0.2%。氟硅丙烯酸酯硬镜吸附溶菌酶(体外模拟24 h),10 min~1 h溶菌酶吸附量递增,1 h达吸附饱和,1~24 h吸附量稳定,饱和吸附量为0.349 mg/cm2。解析时间为10,30 min时,溶菌酶解析率较低,40 min~24 h解析率较好(90%~100%)。 关键词：氟硅丙烯酸酯硬镜;溶菌酶;短期;吸附动力学;解析率 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.022     

磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附

背景：磷灰石-硅灰石生物玻璃陶瓷是近年发展起来的优良骨修复支架材料，可为种子细胞提供良好的生长环境。但是细胞与载体的相互作用及变化机制尚未完全清楚。 目的：考察溶胶-凝胶法制备的磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附行为，探讨温度、溶液pH值、质量浓度对谷氨酸吸附量的影响。 设计、时间及地点：观察实验，于2008-03/09在四川大学材料科学与工程学院完成。 材料：用溶胶-凝胶法制备的磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷。 方法：将片状磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷浸泡于谷氨酸溶液中，改变谷氨酸溶液质量浓度、pH值、温度等吸附条件。 主要观察指标：测量不同条件下的谷氨酸吸附量。 结果：①磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷初次对谷氨酸吸附时，属于Freundlich型吸附，包括物理吸附和化学吸附。②谷氨酸较适宜的吸附条件为pH 3.4或者8，温度为37 ℃左右。 结论：磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附受溶液pH值、温度、谷氨酸质量浓度等因素的影响，且存在一定的规律。     

复合壳聚糖纳米微球聚乳酸-羟基乙酸/纳米羟基磷灰石缓释载体系统对蛋白的缓释作用

背景：聚乳酸-羟基乙酸支架材料具有良好的生物相容性、无毒、可以良好的塑性,并具有一定的强度和韧性。但其降解产物为酸性,会影响局部pH值变化,不利组织生长。 目的：制备能够良好缓释蛋白类药物的复合支架。 方法：以牛血清蛋白为模型药物,以离子凝胶法制备壳聚糖微球。将微球与纳米羟基磷灰石和聚乳酸-羟基乙酸按一定比例混合,以冰粒子为致孔剂,采用粒子沥虑-冷冻干燥复合工艺制备CMs/nHA/PLGA复合缓释支架。利用扫描电镜、透射电镜、压泵仪和力学性能测试仪检测复合支架的形态和性能,并考察其在体外对蛋白类药物释放的规律。 结果与结论：制备的壳聚糖纳米微球形态良好,呈规则球形或类球形,粒径分布在220~770 nm,以380~650 nm为多。微球对药物的载药量为39.2%,包封率为68.3%,两者均与牛血清蛋白的初始量相关,载药量随牛血清蛋白初始量的增加而增加,包封率则反之。复合支架呈白色多孔状,孔径为125~355 mm,孔与孔之间联通良好,孔隙率达83.4%,压缩强度为1.4~ 2.1 MPa,10周降解率为28.6%。PLGA/nHA支架对牛血清蛋白的2 d累积释放量为85%,而壳聚糖和CMs/nHA/PLGA复合支架对牛血清蛋白的9 d累积释放量分别是为48.9%和35.7%。提示制作的壳聚糖纳米微球和CMs/nHA/PLGA支架材料对牛血清蛋白有良好的缓释作用,复合支架材料形态好,强度和降解速率合适。     

可注射生物降解聚合物聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸温敏凝胶的体外释药行为

背景：蓖麻毒素具有强烈的细胞毒活性，但缺乏特异性，全身用药可导致严重毒副作用，采用缓释载体包载进行间质化疗可达到提高肿瘤局部治疗效应，并且避免全身毒性的效果。 目的: 制备可注射可生物降解的聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸温敏型凝胶，观察其作为蓖麻毒素缓释载体的体外药物释放行为。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007/08-12在福建医科大学医药生物工程中心完成。 材料:蓖麻毒素由福建省超声医学研究所纯化，纯度达95%。DL-丙交酯、L-乙交酯由北京元生融科技有限公司提供。 方法：采用开环聚合法合成聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸聚合物。 主要观察指标：试管翻转法测定相转变温度，高效凝胶渗透色谱法测定相对分子质量，核磁共振推测聚合物嵌段比例，酶联免疫吸附法测定凝胶包载蓖麻毒素的体外释放行为，高效液相色谱法检测释放蓖麻毒素结构完整性，MTT法测定体外释放蓖麻毒素的细胞毒活性。 结果:合成的聚合物具有反向热敏性，质量浓度为230 g/L时的相转变温度为26 ℃。聚合物质均分子质量为8 027，数均分子质量为 6 643，多元分散系数为1.17, 聚乙二醇与聚乳酸嵌段比例约为3∶2。载药凝胶在体外持续释放蓖麻毒素达18 d，并且较好地保持了蓖麻毒素结构稳定性和细胞毒活性。 结论：合成的聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸聚合物是蓖麻毒素较理想的药物缓释载体。     

壳聚糖微球/纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸复合支架制备及其蛋白缓释效果：与单纯纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸支架、壳聚糖微球的比较

背景：骨组织工程骨构建中如何使生长因子持续高效发挥作用是影响成骨速度和质量的关键,现多以各种材料的微球或支架作为缓释载体,但缓释作用有待提高。 目的：实验拟制备壳聚糖微球,然后复合到纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸支架上,形成双重缓释作用,并测量对牛血清白蛋白的释放效果。 方法：以牛血清白蛋白为模型药物,采用乳化交联法制备壳聚糖微球。将微球与纳米羟基磷灰石、聚乳酸-羟基乙酸按一定比例混合,以冰粒子为致孔剂,采用冷冻干燥法制备壳聚糖微球/纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸复合支架。利用扫描电镜、激光粒度分析仪、压泵仪和力学性能测试仪检测复合支架的形态性能,考察药物在缓释支架上的体外释放规律。 结果与结论：所制备的壳聚糖微球形态良好,呈规则圆球形,粒径集中分布在20~40 μm,微球药物包封率为86.5%,载药量为0.8%,随牛血清白蛋白初始用量的增加,载药量可升高至2.6%,但包封率下降至74.1%。壳聚糖微球能均匀分布在聚乳酸-羟基乙酸支架上,形成壳聚糖微球/纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸复合支架,孔径为100~400 μm,孔隙率> 80%,压缩强度为1.1~2.3 MPa,10周降解率为26.5%。单纯纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸支架其牛血清白蛋白在36 h累积释放量达85%以上,壳聚糖微球其牛血清白蛋白10 d累积释放量为33.6%,复合支架其牛血清白蛋白40 d累积释放量为81.5%。结果证实包埋壳聚糖微球的纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸支架其压缩强度和降解速率合适,对蛋白类药物具有良好的缓释作用,有望作为组织工程的支架材料和生长因子的缓释载体。 关键词：聚乳酸-羟基乙酸;支架;壳聚糖;缓释载体;骨修复材料,组织工程;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.017     

聚(N-异丙基丙烯酰胺)基共聚物结构对抗蛋白吸附性能的影响**

背景：阻抗非特异性蛋白吸附是材料具备生物相容性的关键,赋予人造材料生物相容性的重要方法之一是表面预吸附亲水聚合物以阻断蛋白吸附。 目的：以聚苯乙烯微球为疏水基材,考察基于聚异丙基丙烯酰胺的两亲梳状嵌段共聚物在表面的预吸附及其抗蛋白(溶菌酶)吸附效果。分析共聚物结构如亲水性聚乙烯基吡咯烷酮或聚氧化乙烯梳状支链链长和数量对蛋白阻抗性能的影响。 设计、时间及地点：观察实验,于2007-11/2008-11在北京化工大学材料科学与工程学院完成。 材料：以单分散聚苯乙烯微球作为模拟疏水材料表面;以溶菌酶为蛋白模型。 方法：①定性分析：在聚苯乙烯微球水介质悬浮液(0.1 g/L)中加入聚异丙基丙烯酰胺基水溶性共聚物(0.1 g/L),使微球在室温下预吸附聚合物24 h以形成亲水层,然后与溶菌酶混合(0.1 g/L),在37 ℃下恒温24 h后测定微球表观粒径和悬浮液浊度,并通过微球凝并和絮凝状况考察共聚物的蛋白吸附程度。②蛋白吸附定量分析：采用高速离心(15 000 r/min)法从含溶菌酶蛋白的聚苯乙烯悬浮液中分离出上清液,用紫外(280 nm)分光光度法测定经聚苯乙烯微球表面吸附后,液相蛋白质量浓度的下降值,由此推算蛋白在聚苯乙烯表面的吸附量。 主要观察指标：聚苯乙烯微球的表观粒径和凝并微球的表观粒径;微球悬浮液和蛋白溶液混合物的浊度、水相残余蛋白质量浓度。 结果：①37 ℃下未经预吸附改性的聚苯乙烯微球与溶菌酶接触后,因蛋白在聚苯乙烯表面吸附导致悬浮液发生絮凝、浊度显著下降的现象,原始聚苯乙烯表面蛋白吸附量达25.5 mg/m2。②经聚异丙基丙烯酰胺基两亲梳状共聚物预吸附改性聚苯乙烯后,共聚物表面蛋白吸附量显著降低,因而悬浮液未出现絮凝而仅有轻度凝并。 结论：①在聚苯乙烯微球表面预吸附聚异丙基丙烯酰胺基两亲梳状嵌段共聚物可抑制蛋白在聚苯乙烯表面吸附。②共聚物的结构对其抗蛋白吸附性能有显著影响。共聚物中适量的亲水支链单元(VP或EO)可获得良好蛋白阻抗性能,但是过多的亲水支链会造成预吸附层不稳定,不利于抗蛋白吸附。 关键词：PNIPAM基共聚物;表面改性;抗蛋白吸附     

心肌内双层多孔生物可降解性药物缓释支架的制备**☆◆

目的：制备心肌内双层多孔生物可降解性药物缓释支架，评估其对透室壁性心肌血管重建术后心肌孔道的作用效果。 方法：以聚己内酯为材料，以牛血清白蛋白为模型药物，以聚乳酸-聚乙醇酸共聚物为药物载体，制备成生物可降解性药物缓释支架。采用考马斯亮蓝试剂法对支架上牛血清白蛋白含量及体外释放量进行测定，万能材料测定仪测定支架的力学性能。制备猪慢性心肌局部缺血模型，体内评估该支架在透室壁性心肌血管重建术后对心肌孔道的作用效果。 结果：该支架牛血清白蛋白携带量为每支架 10 mg，30 d后牛血清白蛋白释放量达80%，支架压缩80%时承受的应力为1.2 MPa，在透室壁性心肌血管重建后可保持心肌孔道通畅。 结论：成功制备心肌内双层多孔生物可降解性药物缓释支架，能承受心肌压力并达到缓慢控制释放药物的效果，可维持透室壁性心肌血管重建后的心肌孔道通畅。     

血管内皮生长因子/纳米晶胶原基骨缓释系统与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性

背景：利用载体或缓释系统负载生长因子,既能保护生长因子的生物活性,又可以使生长因子缓慢释放,从而持续促进细胞生长及组织修复再生,是目前控制释放载体材料应用研究的方向之一。 目的：观察血管内皮生长因子/纳米晶胶原基骨缓释系统的体外缓释效果及与种子细胞的生物相容性。 方法：人骨髓间充质干细胞经体外诱导培养、扩增后种植于血管内皮生长因子+肝素/纤维连接蛋白+纳米晶胶原基骨支架(实验组)和单纯的纳米晶胶原基骨支架(对照组)行体外培养。测定缓释支架材料上血管内皮生长因子的释放量和持续时间;种植细胞后细胞的黏附率;培养3,7,10,14 d时支架材料中细胞数、碱性磷酸酶活性以及细胞在材料上的生长状况。 结果与结论：①该缓释支架具有一定的血管内皮生长因子缓释效果,持续时间可达14 d。②第3代人骨髓间充质干细胞经成骨诱导培养,可表达成骨细胞表型：碱性磷酸酶细胞化学染色、I型胶原免疫荧光染色均为阳性。③体外实验显示该缓释支架与人骨髓间充质干细胞具有优良的生物相容性：相同时间点实验组的细胞黏附率、支架上细胞数量及细胞碱性磷酸酶活性均明显高于对照组;扫描电镜发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。 关键词：血管内皮生长因子;肝素;纤维连接蛋白;纳米晶胶原基骨;人骨髓间充质干细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.019     

纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的制备及性能

背景：羟基磷灰石与高分子复合材料作为组织工程材料的报道很多,但多为粉体材料或块状材料,用于修复治疗时均存在一定的局限性。 目的：制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合缓释微球,观察其体外释药特性。 设计、时间及地点：重复测量设计,于2008-01/10 在北京工业大学材料科学与工程学院生物功能高分子实验室完成。 材料：纳米羟基磷灰石、壳聚糖、明胶、庆大霉素。 方法：利用微波辅助法,在pH=7的条件下,制备了针状羟基磷灰石。采用W/O型复乳化-交联技术制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球。 主要观察指标：①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的表面形貌、粒径分布。②载药复合微球的载药量、包封率及药物累积释放率。 结果：①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,其粒径主要集中在10~30μm,壳聚糖-明胶对羟基磷灰石形成了很好的包覆。②复合微球平均载药量32.97%,平均包封率49.20%,在3 d内对庆大霉素的释放达到88%左右。 结论：所制备的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,粒径分布窄,再分散性好,3 d内能维持有效的药物浓度。     

药物缓释载体材料类型及其临床应用

摘要 目的：文章对目前国内外几种重要载体材料的临床应用情况进行了阐述。 方法：作者以“药物载体，缓释材料，生物降解”为检索词，在中国期刊全文数据通据库(CNKI：1989/2010)，采用电子检索的方式对所有相关文献进行了详细检索。排除Meta分析及重复性研究，最终入选20篇文献进入结果分析。 结果：生物降解性合成高分子材料安全、可靠，有良好的生物相容性，成为药物缓释载体的首选材料；壳聚糖作为药物缓释载体在减少给药次数，降低药物毒副作用，提高药物疗效等方面具有重要作用；纳米纤维载体可明显增强药物缓释效果；纤维蛋白生物相容性好, 是良好的药物缓释载体。 结论：药物控制释放体系在机体内可以显示出被动靶向以及缓释等多种优点，它是药物缓释体系的重要组成部分，也是影响药效的主要因素。 关键词：药物载体；缓释材料；生物降解；壳聚糖；纳米纤维；纤维蛋白 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.031     

介孔二氧化硅微球的淀粉复合止血敷料

背景：止血是外伤急救的重要环节。 目的：研制一种新型的介孔二氧化硅微球/淀粉复合止血敷料，并观察其止血效果。 方法：采用溶胶-凝胶法，以三嵌段共聚物pluronic(P123)为模板剂，合成孔径在5 nm左右的介孔氧化硅微球，将其与淀粉复合，制备介孔氧化硅微球/淀粉复合止血敷料，通过动物实验观察复合材料的止血性能。 结果与结论：介孔氧化硅微球/淀粉复合材料不仅具有很强的吸水性能，而且还具有明显的体外凝血性能，能显著地缩短部分凝血活酶时间和凝血酶原时间。介孔氧化硅微球/淀粉复合材料能够阻止兔背部皮肤及肝脏伤口的流血和缩短其流血时间，具有明显的止血效果。     

多孔无机材料在生物医学和医药领域中的应用★

多孔无机材料是一类具有规则孔结构的固态化合物，可以是晶体或是无定形的，由于其内部孔腔尺寸分布范围宽和拓扑学结构的多样性成为一类性能优异的新型功能材料。多孔无机材料具有离子交换、择形吸附和催化等与生化过程密切相关的独特性能，被广泛地应用在吸附、非均相催化、各类载体和离子交换等领域，受到全世界研究者的普遍关注。文章综述了近年来多孔无机材料在生物医学和医药领域中的研究状况及发展前景，目前对于多孔无机材料在生物医学和医药领域中的研究致力于固定化酶、模拟酶、生物传感器、缓/控释药物载体、抗菌助剂及抗癌药物助剂等诸多方面的应用。     

The effects of high molecular weight- and low molecular weight-heparins on superoxide ion production and degranulation by human polymorphonuclear leukocytes

High molecular weight (HMW) and low molecular weight (LMW) heparins affected superoxide ion production and degranulation by polymorphonuclear leukocytes (PMNL) isolated from either chronic hemodialyzed patients or healthy controls. Low concentrations in HMW-heparin, below 1.76 aXa IU/ml for patients and 1.34 aXa IU/ml for controls, increased O₂⁻ production started by phorbol myristate acetate. High concentrations above these values decreased it. Increasing LMW-heparin concentrations constantly decreased O₂⁻ production using the same stimulus. Myeloperoxidase (MPO) released by PMNL was found to be significantly HMW- and LMW-heparins dose-dependent. The addition of calcium chloride significantly increased MPO release. Lactoferrin release was not dose-dependent of HMW- or LMW-heparins. However, an increase of the percentage of positive responses for lactoferrin release was observed in the simultaneous presence of HMW-heparin and CaCl₂, compared to HMW-heparin alone. Lysozyme release was also not dose-dependent of HMW- or LMW-heparins. An increase of the percentage of positive responses for lysozyme release was observed in the presence of CaCl₂ alone compared to HMW-heparin.     

仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原的制备及其细胞相容性

摘要 背景：目前骨组织工程常用的支架材料主要有无机材料、有机高分子材料及天然衍生材料等，上述材料各有优缺点，为了充分发挥各类材料的优势，弥补其不足，目前多采用联合材料制备复合支架。 目的：制备新型仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原，并观察其对骨髓间充质干细胞增殖、黏附及分化的影响。 方法：制备壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原复合支架材料，扫描电镜观察支架材料表面微观形貌；采用真空吸附法将骨形态发生蛋白7多肽与支架材料复合，高效液相色谱仪检测骨形态发生蛋白7多肽在体外的释放规律；将骨髓间充质干细胞接种到复合骨形态发生蛋白7多肽的仿生支架材料上，以未复合多肽的支架材料作为对照，检测支架材料表面细胞增殖、黏附率、生长形态及碱性磷酸酶活性。 结果与结论：壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原支架材料呈多孔状，孔径10~100 µm；骨形态发生蛋白7多肽可以从支架材料中缓慢释出；在复合多肽的仿生支架材料表面，骨髓间充质干细胞的黏附及向成骨细胞方向分化能力均明显强于对照组(P < 0.05)，而增殖能力与对照组差异无显著性意义(P > 0.05)。说明新型仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原是一种理想的骨组织工程支架材料，具有良好的细胞相容性。 关键词：支架材料；骨形态发生蛋白7多肽；壳聚糖；胶原；纳米羟基磷灰石；骨组织工程；细胞相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.08.014     

LYSOZYME ACTIVITY IN CEREBROSPINAL FLUID

Lysozyme activity was measured in cerebrospinal fluid (CSF) from 114 patients with inflammatory (bacterial and serous meningitis, poly-radiculitis, encephalitis) and non-inflammatory (multiple sclerosis, CNS tumors, cerebral vascular diseases) CNS diseases. Highly elevated values were found consistently in patients with bacterial meningitis. Elevated values were found also in patients with encephalitis, poly-radiculitis, multiple sclerosis and CNS tumors, but a considerable overlapping between these groups and normal controls precludes the use of CSF lysozyme measurements as a diagnostic aid in the latter disease groups. Simultaneous measurements of lysozyme, albumin and IgG in CSF and serum suggested that the mechanism for increased CSF lysozyme values in bacterial meningitis is mainly a breakdown of the blood/brain barrier, whereas the increased CSF lysozyme values in the remaining groups of patients are more likely caused by production of lysozyme by cells within the meninges (neutrophilic granulocytes, monocytes?).     

壳寡糖对大肠杆菌的抑制作用

背景：已有实验证明,抗菌抑菌作用是壳寡糖的最主要活性之一。 目的：研究壳寡糖对大肠杆菌的抑菌效果。 设计、时间及地点：生物工程实验,于2007-06/2008-10在河南师范大学微生物实验室完成。 材料：壳聚糖为郑州世纪百川食品添加剂有限公司产品,脱乙酰度93%,相对分子质量290 000。 方法：高产壳聚糖酶菌株接种至5 L的发酵罐中发酵培养,所得壳聚糖酶粗酶液经乙醇沉淀获得壳聚糖混合酶。壳聚糖混合酶经过 HiTrap SP阳离子交换柱分离纯化得壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶,分别用壳聚糖混合酶,壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶降解质量浓度10.0 g/L壳聚糖,最终制备5种不同相对分子质量壳寡糖S 1,S 2,S 3,S 4,S 5,相对分子质量分别为500,2 100,3 700,5 200,9 000,在不同浓度不同pH值下对大肠杆菌抑菌活性进行实验分析。 主要观察指标：不同相对分子质量的壳寡糖对大肠杆菌生长的影响;不同质量浓度壳寡糖对大肠杆菌抑菌活性;pH值对壳寡糖抑菌活性的影响。 结果：在8 h之内,5种壳寡糖对大肠杆菌均有明显的抑菌效果。培养8 h之后：S1,S4和S5的抑菌效果逐渐减弱。培养16 h之后：S1培养基中大肠杆菌的数量超过正常状态。相对分子质量2 100的壳寡糖对大肠杆菌抗菌作用最强。其抑菌作用随壳寡糖质量浓度的增加而增强。测得pH值5.0,5.5,6.0,6.5和 7.0壳寡糖S2溶液对大肠杆菌抑菌活性分别为0.097,0.086,0.061,0.081,0.091,在pH值6.0附近,壳寡糖S2对大肠杆菌抑制作用最好。 结论：壳寡糖的相对分子质量大小是抑制大肠杆菌生长的主要影响因素。     

Stimulation of platelet surface sialyltransferase activity by platelet aggregating agents

Effect of platelet aggregating agents and aspirin on the platelet surface sialyltransferase activity was investigated on intact twice-washed human platelet preparations. The optimum conditions for assay of the enzyme activity on intact human platelet preparations were determined as follows: a) pH 7.0–7.6, b) temperature 24°C–37°C, c) time of incubation 60 min, d) Mn⁺⁺ 8 × 10^?4 ? 2 × 10^?3M, e) fetuin concentration 0.5 mg/ml and f) CMP-¹⁴C-sialic acid concentration 12 μM. Under these optimum conditions, collagen at 100 μg/ml and 200 μg/ml induced a 3-fold increase of the surface enzyme activity. Epinephrine at 1 μM and 10 μM increased the enzyme activity to 149% and 152% respectively. There was some variation in the extent of stimulation from one platelet suspension to another. Adenosine diphosphate alone did not stimulate the enzyme activity. When fibrinogen was added, the enzyme activity was stimulated to 133% above the basal value. By contrast, aspirin at 10 μg/ml depressed the enzyme activity to 61% of the basal activity. Higher concentrations of aspirin did not depress the enzyme activity further. Similar inhibitory effect was noted when aspirin at a dosage of 650 mg was given to 2 normal subjects. The data provided suggestive evidence for a close relationship between platelet surface sialyltransferase activity and platelet aggregation.     

海藻酸钙凝胶微球的制备和pH敏感释放★

背景：大多数蛋白质和多肽药物存在稳定性差、生物利用度低等缺点，为提高其生物利用度，目前常用将蛋白类药物包裹在高分子材料中，制成缓释控释体系。由于蛋白质外层的载体材料能起到一定保护作用，因此可增加此类药物的稳定性。 目的：以含水率为指标，通过正交实验设计，找出制备海藻酸钙微球的最佳条件。并以牛血清白蛋白为模型药物，考察微球载药性能及pH环境下的释放规律。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007-10/2009-05在四川大学高分子科学与工程实验楼完成。 材料：海藻酸钠、无水氯化钙由成都科龙试剂公司提供，牛血清白蛋白由上海伯奥生物科技有限公司提供。 方法：采用滴制法制备了海藻酸钙微球，考察了海藻酸钠质量分数、氯化钙质量分数、交联时间对微球含水率的影响。采用牛血清白蛋白作为模型药物，对优化条件下海藻酸钠凝胶微球进行载药量和释放行为的考察。 主要观察指标：微球中牛血清白蛋白包封率及在不同pH介质中白蛋白的释放行为。 结果：当海藻酸钠质量分数、氯化钙质量分数均为2.0%，交联时间为6 h，所得微球含水率最高能达到70%。pH溶胀实验显示，微球在盐酸溶液，氯化钠溶液中不溶胀，而在磷酸盐缓冲液中溶胀体现一定的pH敏感性。微球载药量约为5%，包封率为70%左右。对药物释放曲线几种模型方程进行拟合，发现释放曲线不符合Higuchi释放模型。 结论：滴制法制备海藻酸钠微球条件温和，不接触有机溶剂。微球含水率高具有pH敏感性且能有效载药，适合作为蛋白质和多肽药物包裹材料。 关键词：海藻酸钠微球；最佳条件；牛血清白蛋白；控制释放     

Characterization of phospholipase A2 secretion from human platelets

Human platelets secreted phospholipase A₂ in a dose- and time-dependent manner when challenged with thrombin, 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (TPA), or collagen. Enzyme release was maximal at concentrations of 0.1 units/ml of thrombin, 100 nM TPA, or 2 μg/ml of collagen; and complete by 2 min in platelets treated with thrombin or TPA. Cells challenged with collagen required up to 5 min for maximal secretion. Besides dose and time functions, phospholipase A₂ secretion was also dependent on platelet concentration and the levels of bovine serum albumin in the incubation medium. The secreted enzyme was soluble and exhibited substrate and Ca²⁺ requirements similar to a detergent-solubilized, partially purified phospholipase A₂ from whole platelets [Kramer et al., Biochim. Biophys. Acta (1988) 959, 269–279]. The pH optimum of the secreted enzyme, however, was 1–2 units lower than the pH optimum of the phospholipase A₂ from whole cells. Secreted phospholipase A₂ hydrolyzed phosphatidylethanolamine at 5–12 times the rate of phosphatidylcholine when the substrates were present in pure form. These apparent differences in activity were greatly diminished, though, when 1:1 molar mixtures of the two substrates were employed. Because phospholipase A₂ catalyzes a key reaction during the formation of bioactive arachidonate metabolites, the secretion of this enzyme from platelets may be important in the regulation of thrombosis.     

梯度掺锶羟基磷灰石仿生理条件下pH值稳定性与掺锶量

背景：锶掺入羟基磷灰石中不仅可以改善其降解性，而且还可以赋予羟基磷灰石材料一定的骨诱导性，但制备过程中由于使用酸性较强的稀磷酸为固化液，可能使掺锶羟基磷灰石的酸性增大。 目的：观察梯度掺锶羟基磷灰石仿生理条件下的pH值稳定性。 方法：配制标准的缓冲溶液，采用磷酸钙骨水泥水化方法制备摩尔分数为0%，1%，5%和10%掺锶羟基磷灰石梯度材料，每组取6个平行试样紫外线照射灭菌3 h备用。按照掺锶羟基磷灰石粉末质量:浸提递质=1g∶10 mL比例配制浸提掖，置于孵箱中，不同时间点测量梯度材料的pH值。 结果与结论：不同时间点测量在培养液中浸泡的材料pH值均稳定呈现弱碱性。提示，掺锶羟基磷灰石的pH值稳定呈现弱碱性，有利于成骨和内环境的稳定。