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1.
肝癌细胞流变特性及其与细胞骨架结构的相关性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究正常肝细胞和肝癌细胞流变特性与细胞骨架结构的相关性。方法:以微管吸吮技术测定两种细胞的粘弹性系数和细胞在2ug/mlIV 型胶原/1.25ug/ml层连蛋白(laminin,LN )复合裱衬表面上的粘附力,以秋水仙素(colchicine,Col)和细胞松弛素D(cytochlasin,CD)处理细胞研究其对细胞粘性系数和粘附力的影响,结果:在质量浓度为1-60mg/L的Col作用下,肝细胞弹性系数及粘附力总体上明显增高或趋于增高,而肝癌细胞弹性系数及粘附力明显降低,在质量浓度为0.25-5.00mg/L的CD作用下,两种细胞焯弹性系数及粘附力均明显降低,肝癌细胞弹性系数K1,K2值及粘附力的下降幅度明显大于肝细胞相应值的下降幅度,细胞在IV型胶原/LN复合裱衬表面附力与细胞粘弹性系数呈相同的变化趋势,肝癌细胞粘附力变化与细胞弹性系数K1,K2的变化呈度正相关(P<0.01)。结论:在CD和Col作用下肝细胞和肝癌细胞的流变特性呈不同的效应方式或强度,反映了肝细胞和肝癌细胞骨架结构和机能状态的差异。 相似文献
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目的 :探讨体外培养白血病源性树突状细胞 (DC)及其对T细胞杀伤活性的影响。方法 :从慢性髓细胞性白血病 (CML)患者外周血中分离单个核细胞 ,加入 1× 10 6U/L粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、1×10 6U/L白细胞介素 (IL) 4和 5 0× 10 3 U/L肿瘤坏死因子 (TNF α) ,每 3~ 4天换液 1次 ,连续培养 14天 ,获得DC。取外周血单个核细胞加入 5 0 0× 10 3 U/LIL 2 ,培养至第 7天 ,把细胞分成两组 ,其中一组加入培养的DC ,两组细胞继续培养 3~ 4天 ,然后测定T细胞杀伤活性。结果 :DC具有典型的树状突起 ,高表达CD1a,具有慢粒特异性染色体t(9;2 2 ) ,能增强T细胞对白血病细胞的杀伤活性。结论 :在体外利用细胞因子可以把CML细胞诱导分化成具有刺激T细胞产生细胞毒性反应的白血病源性DC。 相似文献
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溃疡性结肠炎肠上皮细胞的凋亡和增殖 总被引:4,自引:1,他引:3
目的探讨溃疡性结肠炎(UC)上皮细胞凋亡与增殖的失调在UC上皮屏障破坏中所起的作用.方法选取35例UC患者和15例对照者,经肠镜取活检,作组织学检查以明确诊断和有无异型增生.分别采用M30Cttideath和Ki-67两种单抗,通过免疫组织化学SP法检测上皮细胞凋亡和增殖.结果UC上皮细胞凋亡指数(M30)及凋亡增殖比与对照组相比增高,差异有非常显著意义(P<0.01),而增殖指数(Ki-67)与对照组相比无统计学意义(P>0.05);UC的M30阳性凋亡细胞不仅呈灶性分布于肠腔表面,而且隐窝底部及闭锁的腺腔内也有上皮细胞提前凋亡;UC的Ki-67阳性增殖细胞可超越隐窝下1/3的正常范围而达上1/3甚至隐窝顶部.结论UC上皮细胞提前凋亡以及凋亡和增殖比的失调也许是导致上皮屏障缺失的一个重要原因. 相似文献
4.
目的 探讨肝细胞水化状态 ,即容积改变时对肝细胞凋亡的影响。方法 动态观察不等渗培养条件下大鼠肝细胞凋亡数 ,[3 H]亮氨酸、[3 H]TdR掺入量 ,及同期培养大鼠肝细胞上清液中ALT、AST、LDH活性。结果 各培养组肝细胞凋亡数随培养时间延长有增高趋势 ,以高渗组较明显 ,于培养 12 0min平均达到了 10 .17个 /每低倍镜视野 ,但与另两组相比无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;低渗组肝细胞凋亡增加数与 [3 H]亮氨酸和 [3 H]TdR掺入抑制量之间均无平行关系 ,R值分别为 0 .2 765和 0 .65 68(P >0 .0 5 ) ;高渗组两者间有明显的平行关系 ,R值分别为 0 .93 0 7(P <0 .0 5 )和 0 .9988(P <0 .0 0 1)。培养上清液ALT、AST、LDH活性在正常范围内波动。结论 高渗状态可能诱发肝细胞凋亡 ,但仍是肝细胞对环境变化的生理反应之一。 相似文献
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目的:研究一种简便实用的大鼠Kupffer细胞(KCs)的分离与鉴定方法.方法:原位两步灌流法对大鼠肝脏进行冲洗消化;利用Percoll液进行不连续密度梯度离心分离KCs;;选择性贴壁纯化KCs;台盼蓝染色法鉴定细胞存活率;吞噬实验鉴定细胞功能;ED1单克隆抗体免疫荧光细胞化学鉴定KCs;显微镜下观察KCs形态变化.结果:获取的KCs数量为(2.41±0.32)×107/只,其中活细胞数量占(92.3±2.12)%;吞噬实验显示(95.2±2.58)%的细胞内存在碳素颗粒;免疫荧光化学检测证明KCs纯度为(96.3±1.46)%;在显微镜下观察KCs形态,36h细胞形态变得不规则,3d后呈星形或多角形,体外培养可以存活7~10d.结论:此种KCs分离方法操作相对简便,获取的细胞数量、活性功能、纯度等方面均能达到进一步的实验要求,值得推广. 相似文献
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人心肌细胞电生理研究,始于60年代。当时由于标本难得,分离心肌细胞技术上存在困难,而影响了心肌细胞电生理学的研究。80年代,由于膜片钳技术的应用、心脏外科和心脏移植手术的开展,人心肌细胞电生理学研究得到了飞速的发展。90年代以来,随着心肌细胞电生理学特别是心肌细胞离子流(离子通道)学研究不断深入,Drouin等在动物实验的基础上证实了人类心肌中存在M细胞,从而为心律失常的发生机制及抗心律失常药物的作用开拓了新的理论。 相似文献
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用人胃癌细胞抗原致敏成熟树突状细胞(DC)。将DC活化的特异性细胞毒性T细胞(CTL)注射到胃癌裸鼠体内。用流式细胞术(FCM)检测移植瘤细胞C0/G1、S、G2/M期细胞凋亡情况。结果DC活化的特异性CTL作用于裸鼠皮下移植瘤,可显著抑制其生长,瘤细胞出现不同程度的坏死、变性。特异性CTL作用后,裸鼠皮下移植瘤细胞的增殖指数(PI)为(24.39±2.46)%,显著低于非抗原特异CTL作用后组的(31.24±3.85)%和对照组的(32.78±4.17)%;凋亡细胞比率为(15.83±2.77)%,显著高于非抗原特异CTL组的(7.28±2.26)%和对照组的(9.15±1.33)%,P均〈0.05。认为胃癌细胞抗原致敏DCs活化的CTL在体内可特异性的抑制裸鼠移植瘤细胞生长、增殖,促进瘤细胞凋亡,有效预防裸鼠移植瘤的发生。 相似文献
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胆管细胞的增生与凋亡研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
临床上常见的胆管病变主要是由以下因素引起的胆管上皮损伤:(1)免疫调节性胆管病,如原发性硬化性胆管炎(PSC)、移植物抗宿主病、原发性胆汁性肝硬化(PBC);(2)感染性胆管病,如巨细胞病毒或隐孢子虫感染;(3)缺血,如肝移植后的肝动脉狭窄、慢性移植排斥;(4)毒性化合物;(5)发育异常引起的胆道疾病,如囊性纤维病和胆道闭锁;(6)胆管癌。从病理学角度看,这些胆管病均存在胆管细胞的死亡(凋亡或坏死)、胆小管增生、不同程度的门管区炎症和纤维化以及胆汁的性质或量的改变等病理特征。 相似文献
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目的 构建可溶性肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体TRAIL基因表达载体并研究其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响。方法 采用重叠延伸PCR法克隆含有TNF-α信号肽的人TRAIL基因,并将其连入pUCm-1载体。测序正确后克隆入表达载体pcDNA3.1中。采用Gene-Companion^TM非脂质体型聚阳离子转染试剂体外瞬时转染人膀胱癌EJ细胞,RT—PCR法检测目的基因mRNA水平的表达,Western blot检测细胞培养上清中目的基因的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞存活。结果 成功构建了可分泌表达的人可溶性TRAIL表达载体,体外转染TRAIL的EJ细胞凋亡率均显著高于未转染细胞及转染空载体细胞的凋亡率,并明显抑制细胞存活,细胞存活率为51.34%,明显低于末转染细胞及转染空载体的细胞存活率。结论 所构建的可溶性TRAIL表达载体转染肿瘤细胞可诱导细胞凋亡及抑制肿瘤细胞的生长存活。 相似文献
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不同预处理对去细胞瓣细胞黏附率的影响 总被引:6,自引:1,他引:5
目的:探讨不同预处理对去细胞瓣细胞黏附率的影响。方法:取新鲜猪主动脉瓣,用胰蛋白酶加TritonX100去除细胞,分别给予磷酸缓冲液(PBS)、多聚赖氨酸(PLL)和未灭活胎牛血清(FBS)包被处理瓣膜。然后种植大鼠主动脉肌成纤维细胞,甲基噻唑基四唑试验检测瓣膜细胞黏附率,并苏木精-伊红染色和扫描电镜形态学观察。结果:FBS处理组的细胞黏附率高于其他两组,光镜和扫描电镜显示肌成纤维细胞在去细胞瓣表面形成连续的细胞层。结论:FBS预处理能较好地改善去细胞瓣的细胞黏附。 相似文献
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狂犬病毒在Vero细胞上的传代适应 总被引:6,自引:0,他引:6
我国目前使用的是原代地鼠肾细胞狂犬疫苗(PHKC-RV),它是狂犬病毒北京株经原代地鼠肾细胞和豚鼠脑相继传代后制备的。尽管无明显的副反应,但就目前应用的情况看,其效力远不及HDCV,疫苗的制备需大量的地鼠,病毒产量也低。若用传代细胞生产狂犬病疫苗,可以降低成本,缓解地鼠供求紧张的状况,缓解人用狂犬病疫苗供不应求的状况,而且可以带来较高的经济效益。 Vero细胞是经WHO检定合格并推荐作为生产人用灭活狂犬病疫苗的传代细胞。它不但来源方便, 相似文献
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胰岛β细胞凋亡与糖尿病 总被引:1,自引:0,他引:1
曹仁贤 《国外医学:内分泌学分册》1997,17(2):83-86
细胞凋亡的过程是受基因调控的主动过程,与细胞凋亡相关的基因中,C-myc基因可诱导细胞凋亡,抑癌基因P53,其野生型诱导细胞凋亡,而突变型却抑制细胞凋亡;bcl-2基因是人体细胞长寿基因,该基因产物通过抵抗多种形式的细胞凋亡来延长细胞寿命。糖尿病的发生与胰岛β细胞凋亡密切相关。胰岛淀粉样多肽能诱导β细胞凋亡,这与Ⅱ型糖尿病的发生有关,细胞因子在I型糖尿病发病中起重要作用。IL-1β、INF-α、I 相似文献
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肝脏非实质细胞的功能 总被引:2,自引:0,他引:2
随着分子生物学和细胞生物学的进展,人们对肝脏各种类型细胞的功能和结构也有了更进一步的了解。肝脏的功能就是肝脏各型细胞功能的总和。然而以往人们常把肝脏功能与肝细胞的功能相混淆,忽视了肝脏非实质细胞的功能。本文仅就肝脏非实质细胞的种类和特异功能作一简述。一、肝脏细胞的种类肝脏细胞分为肝实质细胞和非实质细胞,非实质细胞又可分为:肝窦内皮细胞、枯否氏细胞、Ito细胞和隐窝细胞。它们在整个肝脏细胞中(除外胆管细胞和血管细 相似文献
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胰岛素作为一种多功能的激素类蛋白 ,在体内不仅调节着糖、脂肪和蛋白质代谢 ,还促进某些细胞的分裂和增殖[1] 。肝星状细胞 (hepaticstellatecells,HSCs)被视为肝纤维化发生的中心环节。研究HSCs激活和增殖的因素 ,将有助于阐明肝纤维化的发病机制。我们旨在了解胰岛素对HSCs的生长、增殖作用 ,为探讨肝纤维化的发病机制提供依据。 一、材料和方法1.HSCs的分离、培养及鉴定 :改良Friedman等[2 ] 分离HSCs的方法 ,采用Ⅳ型胶原酶和链酶蛋白酶循环消化分离HSCs,结蛋白 (Desmin… 相似文献
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江岩 《国外医学:老年医学分册》1995,16(4):168-170
老化的T细胞发生三项相互联系的改变:表达D44^10,CD45RB^h1的幼稚T细胞减少,表达CD44^h1,CD45RB^10的记忆T细胞增多;T细胞激动剂ConA,αCD3抗体、SEB或钙离子导入剂lonomycin诱发的钙信号减小;T细胞被激活后,IL-2产生、辅助功能、细胞毒功能和增生等应答性功能反应降低。 相似文献