Toll样受体5激动剂CBLB502蛋白的辐射防护作用

目的研究CBLB502蛋白辐射防护作用。方法 HCT116细胞经CBLB502刺激后,Western印迹法检测NF-κB入核,碱性磷酸酶报告基因法检测CBLB502对NF-κB报告基因的激活。150只C57BL/6J小鼠接受8.0 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg共5组,观察小鼠受照后30 d存活率和平均生存时间。另外40只小鼠接受6.5 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS、WR2721、CBLB502 0.2 mg/kg组和正常对照组,照射前1 d和照后30 d内检测外周血细胞。结果 CBLB502可明显促进HCT116细胞NF-κB入核(P<0.01)并呈剂量依赖性激活NF-κB报告基因(r=0.998 3)。CBLB502显著提高8.0 Gy60Coγ射线照射后小鼠的存活率,PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg组小鼠照后30 d存活率分别为0、83.3%、13.3%、66.7%和100%;照射后小鼠平均存活时间除0.02 mg/kg给药组与PBS对照相比无差异外,其余各给药组较PBS对照组有显著提高。6.5 Gy60Coγ射线照射后小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板急剧下降,CBLB502 0.2 mg/kg组上述指标降低持续时间较照射对照组明显缩短,开始恢复时间提前,各指标最低值亦明显高于照射对照组。结论 CBLB502蛋白具有体外生物学活性并对急性放射病小鼠有明显的辐射防护作用。     

染料木素对小鼠辐射造血损伤保护作用的研究

目的 探讨染料木素(genistein,GEN)对小鼠辐射损伤的防护作用.方法 6.0 Gy γ射线全身照射前24 h,GEN以160 mg/kg剂量给小鼠灌胃,通过对辐射后小鼠30 d存活率、外周血象、骨髓有核细胞(bone marrow nucleated cells,BMNCs)计数、内源性脾集落生成单位(endogenous colony forming unit of spleen,endoCFUs)和粒细胞-单核细胞集落生成单位(granulocyte-macrophage colony forming unit,CFU-GM)形成等观察,研究GEN对小鼠辐射损伤的防护作用,并与已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)的防护作用相比较.结果 辐射前给予GEN可显著提高辐射损伤小鼠30 d生存率,endoCFUs生成数较辐射对照组提高3.47倍,BMNCs和CFU-GM生成数也明显较对照组增多,并可促进外周血中白细胞、红细胞、淋巴细胞及血小板等恢复,且GEN在提高辐射后小鼠的30 d存活率和促进BMNCs、白细胞及淋巴细胞恢复的作用强于DES.结论 GEN具有明显的辐射防护作用,可提高照射小鼠的存活率.该作用可能与其降低骨髓造血细胞的辐射敏感性、减少射线对造血细胞的直接或间接损伤、提高残留造血细胞的增殖分化能力、促进受损造血系统恢复和重建有关.     

人参皂苷对60Co照射小鼠不良反应的影响

目的:探讨人参皂苷对60Co照射小鼠不良反应的影响.方法:小鼠经60Co-射线全身1次均匀照射后,每天灌胃人参皂苷,观察外周血白细胞的动态变化和骨髓造血功能以及免疫器官重量和细胞数的变化.结果:人参皂苷可显著增加受照小鼠外周血白细胞数,促进骨髓造血功能恢复,减轻受照小鼠胸腺和脾脏重量的降低,明显增加其胸腺细胞和脾细胞数.结论:人参皂苷对辐射所致的造血功能、免疫器官损伤均有保护作用.     

补肾泻肝方对辐射小鼠造血功能的保护作用

目的：探索补肾泻肝方（Bu Shen Xie Gan Fang,简称补泻方、BXF）改善辐射所致小鼠造血抑制的作用机制。方法：在急性辐射损伤模型上，观察BXF对辐射小鼠外周血象、骨髓造血功能的影响；用TUNEL法检测补泻方对辐射诱导的小鼠造血细胞凋亡的影响。结果：补泻方能显提高辐照小鼠外周血白细胞计数，显提高受照小鼠30d存活率；显增加7．5Gy受照小鼠骨髓造血祖细胞产量、内源性脾结节数量、骨髓有核细胞计数及脏器指数。小鼠造血细胞接受4Gy照射，于照后2h就可检测到显的细胞凋亡，于照后6－12h达高峰。补泻方能明显减少接受2－4Gy照射6h后辐射诱导的造血细胞凋亡。结论：补泻方改善辐射所致小鼠造血系统抑制的作用机制是与其显减少辐射所致的造血细胞凋亡有关。     

人工合成成骨生长肽对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用

目的　探讨人工合成成骨生长肽 (sOGP)对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用 ,阐明其剂量 效应关系。方法　以 4 .0和 7.5Gy13 7Csγ射线照射小鼠为模型 ,采用皮下注射和肌肉注射 2种给药途径连续 8d给予sOGP ,剂量范围为 0 .0 39～ 6 4 0nmol/(kg·d) ,观察外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓粒系造血祖细胞集落形成(CFU G)、骨髓细胞分类和骨髓切片组织学等的变化。结果　sOGP能加快受照小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞数的恢复 ,在一定的剂量范围内呈明显的剂量依赖性 ,并能刺激髓外造血 ;促进 (CFU G)形成作用显著高于重组人粒系集落刺激因子 (rhG CSF)约 2倍 ;骨髓病理学观察显示sOGP能加快受照小鼠骨髓造血组织损伤的恢复 ,刺激骨髓粒系增生。结论　sOGP可明显促进受照射小鼠造血功能的恢复 ,其机制可能是通过作用于早期造血阶段或 (及 )改善微环境进而促进造血。     

高原缺氧条件下急性放射损伤造血系统变化特点的研究

目的：探讨高原缺氧条件下,急性放射损伤小鼠存活率和造血系统的变化特点。方法：小鼠模拟5000m高原缺氧3d后,接受6Gy一次性γ射线全身照射,照后继续在缺氧条件下饲养,观察其存活率。外周血指标,骨髓有核细胞数,血清TGF－β1和EPO的含量,CFU－GM和CFU－E集落形成能力的改变,实验动物血清对CFU－GM和CFU－E集落形成的影响。结果：发现模拟高原缺氧条件下可提高急性放射损伤小鼠的存活率,并在照射后第3天,表现为外周血红细胞和骨髓红系造血损伤较平原照射损伤为但外周血白细胞和骨髓粒系造血损伤则有所加重。结论：模拟高原缺氧条件,可使小鼠红系造血功能对急性放射损伤的抗性有所增强。     

NADH对昆明小鼠辐照后造血系统的影响

目的探讨NADH对小鼠辐照后造血系统的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为3组,每组20只,实验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别为正常对照组、辐照前注入生理盐水组和辐照前注射NADH药物组。生理盐水和NADH药物均采用腹腔注射,2次/d,照射前3 d给药。辐照采用6.0 Gy 60Co一次性辐照小鼠。尾静脉采血计数连续观察辐射后不同时期对外周血白细胞总数的影响;辐照后24 h,取股骨骨髓涂片,显微镜下计算骨髓有核细胞数和其分裂指数;通过DNA琼脂糖凝胶电泳观察昆明小鼠辐照后24、48 h骨髓细胞凋亡的改变。结果NADH能够抑制受照后小鼠外周血白细胞减小,增加骨髓有核细胞数及分裂指数,但并不能抑制DNA凋亡片段形成。结论NADH能够明显抑制辐射诱导的造血系统损伤,但并不通过抑制骨髓细胞凋亡途径。     

银耳制剂辐时防护作用原理的研究 Ⅰ.对小鼠造血系统的影响

腹腔注射银耳可使照射小鼠造血功能明显改善:照后9天股骨有核细胞数、内源性脾集落数、~3H-TdR 参入骨髓及脾脏的比值显著升高;银耳对造血细胞数及细胞的辐射敏感性均无显著影响,血清集落刺激因子水平在给药后6小时升至高峰,3～7天则低于正常,这可能有利于辐射损伤造血细胞的修复,从而加速造血功能的恢复。     

NADH对昆明小鼠辐照后造血系统的影响

目的 探讨NADH对小鼠辐照后造血系统的影响。方法 昆明小鼠60只．随机分为3组，每组20只，实验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别为正常对照组、辐照前注入生理盐水组和辐照前注射NADH药物组。生理盐水和NADH药物均采用腹腔注射，2次／d，照射前3d给药。辐照采用6．0Gy ^60Co一次性辐照小鼠。尾静脉采血计数连续观察辐射后不同时期对外周血白细胞总数的影响；辐照后24h，取股骨骨髓涂片，显微镜下计算骨髓有核细胞数和其分裂指数；通过DNA琼脂糖凝胶电泳观察昆明小鼠辐照后24、48h骨髓细胞凋亡的改变。结果 NADH能够抑制受照后小鼠外周血白细胞减小,增加骨髓有核细胞数及分裂指数,但并不能抑制DNA凋亡片段形成。结论 NADH能够明显抑制辐射诱导的造血系统损伤,但并不通过抑制骨髓细胞凋亡途径。     

元参组方对小鼠造血干细胞的增殖作用

目的研究元参组方对正常或受射线照射小鼠造血系统的作用。方法分别给正常和受致死剂量γ射线照射小鼠皮下注射,按Till的方法进行脾集落形成单位造血干细胞（CFU-S）测定,观察外周血细胞和骨髓、脾脏中的CFU-S的变化。结果该元参组方不仅对正常小鼠和受7.0Gy照射小鼠外周血细胞、血小板、脾脏中的CFU-S有持续升高作用,而且受照射小鼠存活率提高30%。结论元参组方能促使造血干细胞的增殖与分化,对急性放射性损伤有治疗作用。     

参芪扶正注射液对化疗后小鼠造血功能影响的实验研究

目的 探讨参芪扶正注射液对化疗后小鼠造血功能的影响.方法 用5-氟尿嘧啶（5-FU）225 mg/kg腹腔注射复制骨髓抑制动物模型,治疗组给予参芪扶正注射液5 ml/kg,对照组给予同剂量生理盐水.治疗1周后,做血细胞计数、各系造血祖细胞集落（CFU-GM、CFU-E、CFU-MK）培养和骨髓病理检查.结果 参芪扶正注射液能升高外周血细胞计数：治疗组小鼠外周血的红细胞、白细胞和血小板计数均高于对照组（P〈0.05）.促进造血祖细胞增殖：治疗组小鼠的CFU-GM、CFU-E、CFU-MK集落数均大于对照组（P〈0.05）.改善骨髓抑制：骨髓病理检查对照组出现大片空白区,造血细胞稀少,而治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富.结论 化疗后小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,参芪扶正注射液能通过促进骨髓各系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成.     

移植前输注供体细胞的小鼠单倍体相合骨髓移植实验

目的建立小鼠非清髓性单倍体相合骨髓移植模型,探讨移植前输注供体细胞的造血干细胞植入效果。方法以CB6F1雌性小鼠为受鼠,C57BL/6雄性小鼠为供鼠,移植前3d经尾静脉输注供鼠脾细胞或骨髓细胞3×107,输注细胞后24h和48h分别通过腹腔注射阿糖胞苷0.015g/d,移植前1d予450cGy全身照射（TBI）,移植当天输注供鼠骨髓有核细胞5×107/只。监测受鼠白细胞恢复、Y染色体性别决定基因（SRY）以及外周血供鼠CD3＋细胞嵌合状态。结果单纯给予TBI小鼠均存活,且移植后30d白细胞恢复正常,TBI＋骨髓细胞移植（TBI＋BMT）组移植后14、30、60d时外周血SRY基因PCR检测结果均阳性,60d供体CD3^＋细胞嵌合率达54.4%。移植前输注供体脾细胞组嵌合率最高,移植后60d达93.5%±4.8%,优于移植前输注供体骨髓细胞组（P〈0.05）。结论 450cGy TBI的非清髓性预处理可以成功建立非清髓性单倍体相合骨髓移植模型,移植前输注供体脾细胞可促进造血干细胞植入。     

磷酸羟基哌喹对血液系统辐射损伤保护作用的实验研究

目的研究磷酸羟基哌喹对辐射损伤小鼠血液系统的保护作用。方法40只昆明小鼠,随机分为5组（HPQP低、中、高剂量组,空白对照组和正常组）,除正常组外,其余各组给予4.5 Gy60Co-γ射线全身照射,以外周血白细胞、血小板计数观察辐射后小鼠的血液系统变化,初步观察药物对血液系统的影响,并筛选出药物的合适剂量;另取24只小鼠,随机分为3组（用药组、对照组、正常组）,以此前确定的磷酸羟基哌喹最适剂量于照射前灌胃给药,予9.0 Gy60Co-γ射线全身照射,照射后第9天处死小鼠,以脾结节法、骨髓有核细胞计数法、骨髓病理观察药物对小鼠造血功能的影响。结果磷酸羟基哌喹可促进辐射后小鼠白细胞恢复（P〈0.01）,降低死亡率（P〈0.01）,使脾结节（CFU-S）数、骨髓有核细胞数明显增加（P〈0.01）。结论磷酸羟基哌喹对辐射损伤小鼠血液系统有保护作用。     

低氧放疗对骨髓和外周淋巴细胞保护作用的研究

①目的 探讨低氧放疗对小鼠骨髓有核细胞及外周淋巴细胞的保护作用，旨在为临床应用提供实验依据。②方法 选昆明小鼠并随机分为低氧照射组和常规照射组。前者吸体积分数0．105的低氧混合气体5min后，立即用^60钻γ线照射其横膈以下的半身，并持续低氧至照射完毕；后者仅常规照射；取小鼠骨髓有核细胞及外周淋巴细胞，分别检测其微核细胞率（MCF），用直线相关及回归的方法进行统计学处理。③结果 低氧照射对骨髓及外周淋巴细胞的放射防护因子（RPF）分别为1．48和1．39。④结论 低氧放疗对小鼠骨髓有核细胞及外周淋巴细胞具有一定的保护作用，这为临床上特别是腹盆部采用低氧大野放疗提供了实验依据。     

巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠骨髓造血组织面积和基质细胞粘附力的影响

目的：研究藏药巴桑母酥油丸对放射线．化学复合损伤小鼠骨髓造血组织面积和基质细胞粘附能力的影响,探究桑母酥油丸促进其外周血像恢复的机制。方法：放射线一化学复合损伤小鼠灌胃巴桑母酥油丸14d后,制股骨切片,用图像分析软件测其骨髓造血组织面积百分比;进行骨髓基质细胞培养,测其对骨髓细胞黏附能力。结果：巴桑母酥油丸组的骨髓造血组织面积百分比显著高于空白组和生理盐水组;骨髓基质细胞培养第7、14、20d后对骨髓细胞的黏附力亦均显著高于空白组与生理盐水组。结论：促进骨髓造血组织恢复、提高基质细胞对造血细胞粘附力可能是巴桑母酥油丸经干预骨髓造血微环境进而促进放射线一化学复合损伤小鼠外周血像恢复的途径之一。,     

Effects of Weiganfi on the Hemopoietic Function of the Myelosuppressed Anemic Mice

To study the effect of Weiganli （维肝力） on bone marrow hemopoiesis. Methods： The effects of Weiganli on the peripheral blood picture and the number of bone marrow nucleated cells （BMCs） were observed in myelosuppressed anemic model mice, and the effects of Weiganli on the growth of colony forming unit-granulocyte macrophage （CFU-GM）, colony forming unit-erythroid （CFU-E）, burst forming unit-erythroid （BFU-E）, colony forming unit-megkaryocyte （CFU-Meg） were investigated by in vitro cell culture technique. The hemopoietic stem cells （HSCs, c-kit＋） in bone marrow were double stained with fluorescent antibody PE-C-Kit and FITC-CD45, and the HSCs （c-kit＋） were counted by flow cytometer with CD45/SSC （side scatter） gating. Results： Peripheral blood cell counts and the number of BMCs were significantly improved after Weiganli administration; and bone marrow hemopoietic stem/progenitor cells were significantly increased. Conclusion： Weiganli can effectively promote the recovery of hemopoietic function in the mvelosuooressed anemic mice.     

枸杞对小鼠辐射损伤后造血系统修复的影响

目的 探讨枸杞在小鼠辐射损伤后造血系统修复过程中的作用。方法 小鼠随机分为3组,正常对照组不做任何处理,喂饲正常饲料;另外2组,给予4.5Gy照射后,喂饲正常饲料或添加枸杞的饲料,1个月后,处死小鼠,应用流式细胞仪分析外周血、脾脏、胸腺及骨髓中各种血细胞。结果 枸杞饲料组小鼠,外周血B细胞增多,骨髓前体B细胞及未成熟B细胞增多,造血干、祖细胞均显著减少。结论 枸杞促进辐射损伤后造血干细胞动员,加速造血系统的恢复。     

小鼠同种异基因骨髓移植aGVHD动物模型的建立

目的：建立一个德定可靠的异基因骨髓移植（allogeneic bone marrow transplantation,Allo-BMT）急性移植物抗宿主病（acute graft-vetsus-host disease,aGVHD）动物模型,为Allo-BMT中aGVHD研究提供理想的实验平台。方法：以雄性C57BL／6（H-2b）为供鼠,雌性BALB／C（H-2d）为受鼠,受鼠致死性全身照射（total body irradiation,TBI）（8.0Gy）预处理后,在移植物中混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞以引起不同程度的aGVHD。根据存活期、外周血白细胞计数、临床表现及病理检查等判断aGVHD程度。结果：单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现aGVHD,75％的小鼠长期存活（〉30d）。混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞的Allo-BMT小鼠出现aGVHD的时间和程度均有差异,其中骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合组小鼠,均可在相对集中的时间内（8-15d）观察到典型的aGVHD临床和病理改变。结论：建立Allo-BMT aGVHD模型需要加入一定比例的脾细胞,供鼠骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合进行的Allo-BMT,可作为理想的aGVHD动物模型。     

Panaxdiol Saponins Component Promotes Hematopoiesis and Modulates T Lymphocyte Dysregulation in Aplastic Anemia Model Mice

Objective: To investigate the potential efficacy of panaxadiol saponins component (PDS-C) in the treatment of aplastic anemia (AA) model mice. Methods: Totally 70 mice were divided into 7 groups as follows: normal, model, low-, medium-, high-dose PDS-C (20, 40, 80 mg/kg, namely L-, M-, H-PDS-C), cyclosporine (40 mg/kg), and andriol (25 mg/kg) groups, respectively. An immune-mediated AA mouse model was established in BALB/c mice by exposing to 5.0 Gy total body irradiation at 1.0 Gy/min, and injecting with lymphocytes from DBA mice. On day 4 after establishment of AA model, all drugs were intragastrically administered daily for 15 days, respectively, while the mice in the normal and model groups were administered with saline solution. After treatment, the peripheral blood counts, bone marrow pathological examination, colony forming assay of bone marrow culture, T lymphocyte subpopulation analysis, as well as T-bet, GATA-3 and FoxP3 proteins were detected by flow cytometry and Western blot. Results: The peripheral blood of white blood cell (WBC), platelet, neutrophil counts and hemoglobin (Hb) concentration were significantly decreased in the model group compared with the normal group (all P<0.01). In response to 3 dose PDS-C treatment, the WBC, platelet, neutrophil counts were significantly increased at a dose-dependent manner compared with the model group (all P<0.01). The myelosuppression status of AA was significantly reduced in M-, H-PDS-C groups, and hematopoietic cell quantity of bone marrow was more abundant than the model group. The colony numbers of myeloid, erythroid and megakaryocytic progenitor cells in the model group were less than those of the normal mice in bone marrow culture, while, PDS-C therapy enhanced proliferation of hematopoietic progenitor cells by significantly increasing colony numbers (all P<0.01). Furthermore, PDS-C therapy increased peripheral blood CD3+ and CD3+CD4+ cells and reduced CD3+CD8+ cells (P<0.05 or P<0.01). Meanwhile, PDS-C treatment at medium- and high doses groups also increased CD4+CD25+FoxP3+ cells, downregulated T-bet protein expression, and upregulated GATA-3 and FoxP3 protein expressions in spleen cells (P<0.05). Conclusion: PDS-C possesses dual activities, promoting proliferation hematopoietic progenitor cells and modulating T lymphocyte immune functions in the treatment of AA model mice.