突触后致密物质-95多肽疫苗对神经病理性痛大鼠脊髓脑源性神经营养因子mRNA表达的影响

目的 观察突触后致密物质-95(PSD-95)多肽疫苗对大鼠神经病理性痛的影响.方法 成年雌性SD大鼠,制备保留性神经损伤(SNI)模型,7d后选取SNI模型成功的大鼠24只,随机分为4组(n=6):NP组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、匙孔虫戚血蓝蛋白(KLH)组及PSD-95组.PSD-95组沿背部两侧皮下多点注射PSD-95多肽疫苗3次,每隔2周注射1次;PBS、KLH组分别给予PBS和KLH.分别于制备SNI前1 d(基础值)、第1次免疫前1d及第3次免疫后7d和14 d(T0-3)时测定机械痛阈;于T3时处死大鼠,取脊髓腰膨大组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA表达.结果 与T0时比较,T1时各组机械痛阈均降低(13.2±1.1比1.9±0.5:12.9±0.9比1.9 ±0.7;13.5±1.0比1.8±0.5;13.1±1.1比1.7±0.6);T2、T3时NP、PBS和KLH组机械痛阈降低(2.4±0.6、2.5±0.6;3.2±0.9、3.4±0.8;3.3±0.8、3.5±1.1)(P＜0.05).与T1时比较,PSD-95组T2、T3时机械痛阈升高(1.7±0.6比10.5 ±2.1、11.2±1.9),BDNF mRNA表达下调(1.48±0.21比0.92±0.13、0.88 ±0.12)(P＜0.05);PBS组和KLH组其余时点各指标差异无统计学意义(P＞0.05).与NP组比较,T2、T3时PSD-95组机械痛阈升高(2.4±0.6比10.5±2.1;2.5±0.6比11.2±1.9),BDNF mRNA表达下调(1.48±0.17比0.92 ±0.13;1.52±0.23比0.88±0.12)(P ＜0.05);PBS组和KLH组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PSD-95多肽疫苗对神经病理性痛大鼠具有镇痛作用,其机制可能与下调脊髓BDNF mRNA的表达有关.     

氨基胍对局灶性脑缺血诱导大鼠脑神经元凋亡的影响

目的观察选择性诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(AG)对局灶性脑缺血诱导大鼠脑神经元凋亡的影响,探讨AG对脑缺血大鼠脑神经元的保护作用及其机制。方法健康雄性SD大鼠54只,体重250-300 g,随机分为3组:假手术组(SH组)、缺血组(IS组)、AG治疗组(AG组),每组18只。每组按给药时机分为3个亚组:缺血2 h组、缺血6 h组、缺血12 h组,每亚组6只。IS、AG组采用插线法制备大鼠大脑中动脉阻断模型。AG组每次腹腔注射AG 100 mg/kg,每日2次,连续3 d。IS 组给予等量的生理盐水。治疗后大鼠断头取脑,采用流式细胞仪测定脑组织神经元凋亡率、Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达及Bcl-2蛋白与Bax蛋白比值(Bcl-2/Bax)。结果与SH组比较,IS、AG组各亚组神经元凋亡率及Bax蛋白表达升高,AG组各亚组Bcl-2蛋白表达升高,IS、AG组各亚组Bcl-2/Bax降低(P <0.01);与IS组比较,AG组各亚组神经元凋亡率降低,AG组各亚组Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax升高,AG组Bax蛋白表达降低(P<0.05或0.01)。结论AG通过增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,调节Bcl-2/Bax平衡,对脑缺血大鼠脑神经元产生一定程度的保护作用。     

L-精氨酸对局灶性脑缺血大鼠神经元凋亡的影响

目的 评价L-精氨酸(L-arg)对局灶性脑缺血大鼠神经元凋亡的影响.方法 健康雄性SD大鼠56只,体重250～300 g,随机分为7组(n=8):假手术组(SH组)、脑缺血2 h组(Is1组)、脑缺血2 h L-arg治疗组(L-arg1组)、脑缺血6 h组(IS2组)、脑缺血6 h L-arg治疗组(L-arg2组)、脑缺血12h组(IS3组)及脑缺血12 h L-arg治疗组(L-arg3组).采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型.各L-arg治疗组分别于脑缺血后腹腔注射L-精氨酸500 mg/kg,2次/d,治疗3 d;IS组给予等容量生理盐水.治疗3 d后取脑,测定缺血区域神经元凋亡率、Caspase-3蛋白、Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达水平.结果 与SH组比较,IS1组、IS2组和IS3组神经元凋亡率升高,Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值降低(P＜0.01);与IS1组和IS2组比较,L-arg1组和L-arg2组神经元凋亡率降低,Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值升高(P＜0.01).IS3组与L-arg3组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 L-arg可减少脑缺血早期大鼠神经元凋亡,具有一定的治疗作用,其机制可能与下调Caspase-3蛋白表达、调节Bcl-2/Bax蛋白平衡有关.     

缺血预处理联合阿魏酸钠对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨脑缺血预处理联合阿魏酸钠对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用四血管阻断法复制全脑缺血模型，动物随机分为对照组、缺血预处理组、缺血预处理 阿魏酸钠组和缺血组，采用免疫组织化学染色、TUNEL染色等方法观察各组动物在脑缺血再灌注后皮层和海马CA1区Fas蛋白、Caspase-8蛋白的表达、神经元数及凋亡细胞计数的情况。结果 阿魏酸钠 缺血预处理组凋亡细胞数较缺血组和缺血预处理组显著减少，缺血7d时皮层及海马CA1区神经元无明显丢失，而缺血组神经元大量丢失。缺血预处理 阿魏酸钠组Fas阳性细胞与缺血组相比显著减少，Caspase-8蛋白阳性细胞则较缺血预处理组和缺血组显著减少。结论 缺血预处理联合阿魏酸钠可以进一步加强缺血预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。其机制可能是通过减少脑缺血后神经元Caspase-8蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡。     

缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法36只雄性SD 大鼠随机分为3组(n=12),对照组:即单纯缺血再灌注组;缺血后处理15s组(I-15 s组):大脑中动脉线栓阻闭(MCAO)90 min后,再灌注15 s,缺血15 s,反复3次;缺血后处理30 s组(I-30 s组):MCAO 90 min后,再灌注30 s,缺血30 s,反复3次。再灌注24 h后对所有动物行神经功能障碍评分(NDS),然后取大脑测定脑梗死容积。结果再灌注24 h后I-15 s和I-30 s组NDS与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。再灌注24 h后脑梗死容积I-15s组为(271±97)mm3,I-30 s组为(217±85)mm3,小于对照组[(378±103)mm3](P<0.01),I-15 s和I-30 s组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血后处理可减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠脑的病理性损伤。     

乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时脑组织突触后致密物质95活化的影响

目的 探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时脑组织突触后致密物质95(PSD95)活化的影响.方法 雄性清洁级SD大鼠32只,体重280 ～ 300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、乳化异氟醚组(EI组)和脂肪乳剂组(LE组).采用大脑中动脉阻塞法制备局灶性脑缺血再灌注模型.EI组和LE组分别腹腔注射8％乳化异氟醚10.5 ml/mg或30％脂肪乳10.5 ml/mg,24h后制备模型.再灌注6h时行神经功能缺陷评分,随机取4只大鼠,处死后取缺血侧海马和皮层组织,采用Western blot法检测磷酸化的PSD95( pPSD95)的表达水平.再灌注24 h时,随机取4只大鼠,处死后取脑组织,计算脑梗死体积百分比.结果 S组未见神经功能缺陷和脑梗死发生.与S组比较,I/R组、EI组和LE组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比、海马和皮质pPSD95表达水平升高(P＜0.01);与I/R组比较,EI组神经功能缺陷评分、脑梗死体积百分比、海马和皮质pPSD95表达水平降低(P＜0.05),LE组差异无统计学意义(P＞0.05).结论乳化异氟醚可通过抑制脑组织PSD95的活化,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

Neuroprotective efficacy of intra-arterial and intravenous magnesium sulfate in a rat model of transient focal cerebral ischemia

Summary ?Background. Many neurovascular procedures necessitate temporary occlusion of cerebral arteries. In this situation neuroprotective drugs may increase the safety of the procedures. Magnesium may inhibit ischemic damage by anti-excitotoxic, calcium channel blocking and vasodilatory action. Some evidence suggests that intra-arterial administration might provide a much higher degree of protection than intravenous treatment. In this study the neuroprotective efficacy of intra-arterial and intravenous magnesium administration was examined in a rat model of transient focal ischemia. Methods. 34 male Sprague-Dawley rats were subjected to 90 minutes of middle cerebral artery occlusion (MCAO) by an intraluminal thread. Before ischemia, animals received an infusion of either (1) vehicle (0.9% NaCl) (2) MgSO₄ intra-arterially or (3) MgSO₄ intravenously. Local cortical blood flow (LCBF) was continuously measured by laser-Doppler flowmetry. Functional deficits were quantified daily, infarct volumes were assessed histologically after 7 days. Findings. There was no difference between the treatment groups concerning LCBF. Magnesium serum levels increased from ∼1 mmol/l to ∼1.8 mmol/l by either route of administration. Both intra-arterial and intravenous treatment improved neurological recovery and equally reduced total infarct volume by ∼25%. Interpretation. The results indicate that there is no advantage of intra-arterial over intravenous magnesium administration. A comparison with previous studies suggests that even within the normal range of serum magnesium concentrations, low-normal levels may be hazardous and high-normal levels may be protective in transient focal ischemia. Published online June 4, 2003     

Dose finding study of intravenous magnesium sulphate in transient focal cerebral ischemia in rats

Summary Background. During many neurovascular procedures temporary occlusion of cerebral arteries is inevitable. Neuroprotective drugs may reduce the risk of cerebral infarction in this situation. Increasing evidence indicates neuroprotective properties of magnesium in cerebral ischemia. Previous experimental studies on the neuroprotective efficacy of magnesium-treatment in transient focal ischemia provide widely differing results using different magnesium doses and treatment-regimens. The present study was conducted to find the maximum protective dose of intravenous magnesium sulphate in a rat model of transient focal ischemia.Methods. 45 male Sprague-Dawley rats were subjected to 90 minutes of middle cerebral artery occlusion (MCAO) by an intraluminal thread. Animals were randomly assigned to one of 4 treatment arms: (1) vehicle (2) MgSO₄ 1×0.75mmol/kg (3) MgSO₄ 2×1mmol/kg (4) MgSO₄ 1mmol/kg+0.5mmol/kg/h. Local cortical blood flow (LCBF) was continuously measured by laser-Doppler flowmetry. Functional deficits were quantified daily, infarct volumes were assessed histologically after 7 days.Results. Magnesium serum levels below 3mmol/l were well tolerated by the animals. Above 3mmol/l cardiodepressive effects limited neuroprotection. Total infarct volumes in groups 3 and 4 were significantly reduced by 32% and 42%, respectively, compared to controls. Postoperative neurological recovery was significantly improved in magnesium-treated groups.Conclusion. Continuous magnesium-administration with stable serum concentrations between 2 and 3mmol/l offered the best protection and was well tolerated. Serum concentrations above 3mmol/l should not be exceeded. An elevation of magnesium serum levels could be useful for brain tissue protection during procedures which are prone to the risk of temporary vessel occlusion.     

单次电针预处理诱导大鼠局灶性脑缺血耐受的时程

目的 探讨单次电针预处理能否诱导局灶性脑缺血耐受及其时程。方法 48只健康雄性SD大鼠(280～320g),随机分为6组(n=8):对照组和电针1～5组(EA1～5)。对照组未行任何预处理;电针1～5组分别在电针刺激百会穴30min后0.5、1、2、3和24 h给予局灶性脑缺血。采用颈内动脉尼龙线线栓法致大脑中动脉栓塞(120 min)模型,观察再灌注后24 h时神经功能损害并取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积。结果术后动物均存活。电针刺激百会穴30 min后2 h和24 h给予局灶性脑缺血,再灌注24 h时神经功能缺陷评分明显低于对照组(P<0.05),脑梗死容积明显小于对照组(P<0.01),其它时间点与对照组差异无显著性。结论 单次电针刺激百会穴30 min,可诱导双相大脑局灶性缺血耐受,即急性缺血耐受出现在预处理后2 h,延迟缺血耐受出现在预处理后24 h。     

异氟醚对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 探讨异氟醚对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用。方法 32只雄性SD大鼠,280～320 g,随机分为四组,假手术组:仅分离血管,不留置线拴;脑缺血组:缺血前吸入纯氧30min行2h大脑中动脉栓塞(MCAO);0.9％和1.5％异氟醚组:分别在MCA0前吸入0.9％和1.5％异氟醚30 min。监测缺血/再灌注期间鼓膜温度变化,测定再灌注22 h和70 h时脑梗死体积及再灌注22h时光、电镜的病理改变。结果 缺血侧鼓膜温度较非缺血侧明显降低,最大温差达0.78℃±0.35℃。异氟醚轻度缩小再灌注22 h和70 h时的脑梗死体积,且1.5％异氟醚对再灌注70 h时梗死体积百分比减小的效果优于0.9％异氟醚。光、电镜结果提示异氟醚能减轻局灶性脑缺血/再灌注损伤对神经元、线粒体和内皮细胞的损害。结论缺血前吸入0.9％和1.5％异氟醚对大鼠局灶性脑缺血,再灌注损伤,可产生一定程度的保护作用。     

氨基氧乙酸对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的 评价氨基氧乙酸对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠80只,体重250～280 g,月龄2.5个月,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n＝16):假手术组(S组)、脑缺血组(Ⅰ组)、低、中、高剂量氨基氧乙酸组(AL组、AM组和AH组).Ⅰ组、AL组、AM组和AH组采用线栓法(阻塞大脑中动脉)制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型.AL组、AM组和AH组于缺血3h时分别腹腔注射氨基氧乙酸25、50、100 μmol/kg,S组和Ⅰ组给予等容量生理盐水1ml/kg.每组于给予氨基氧乙酸后21 h时取8只大鼠,进行神经功能缺陷评分,然后处死大鼠,取脑组织,分离皮层、海马、纹状体,测定胱硫醚-β合酶( CBS)活性.每组于给予氨基氧乙酸后21 h时处死另外8只大鼠,取脑组织,测定脑梗死体积.结果 与S组比较,Ⅰ组神经功能缺陷评分、皮层和海马CBS活性升高,脑梗死体积扩大(P<0.05),纹状体CBS活性差异无统计学意义(P＞0.05);与Ⅰ组比较,AM组和AH组神经功能缺陷评分、皮层和海马CBS活性降低,脑梗死体积缩小,纹状体CBS活性差异无统计学意义(P＞0.05);AL组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 氨基氧乙酸可减轻大鼠局灶性脑缺血损伤,其机制与抑制CBS活性,减少H2S生成有关.     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后细胞凋亡的影响

目的：观察异丙酚对大鼠局灶性脑缺血／再灌注后细胞凋亡的影响。方法：雄性SD大鼠，采用可逆性大脑中动脉内线栓法建立局灶性脑缺血／再灌注模型。缺血2h，再灌注2h后断头取脑，采用脱氧核昔酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记技术检测细胞凋亡变化。HE染色，光镜观察细胞结构的改变。结果：光镜检查发现，异丙酚组细胞肿胀坏死明显减轻，异丙酚可显著减少脑缺血／再灌注后神经细胞的调亡。结论：静脉麻醉药异丙酚具有拮抗大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤作用，对缺血／再灌注的神经细胞有明显的保护作用。     

SP600125抗大鼠脑缺血/再灌注中海马细胞凋亡的作用

目的 探讨JNK特异性抑制剂-SP600125对大鼠脑缺血/再灌注(schemia/reperfusion,I/R)中海马细胞凋亡的作用.方法 雄性SD大鼠54只,体重量230 g～250 g,采用双盲随机方法分成假手术组(SH组),I/R组,JNK抑制剂SP600125组(SP组),每组根据再灌注时间分为30 min、24 h和72h 3个亚组,每亚组6只动物.采用4-VO法建立SD大鼠脑缺血模型,于缺血前30 min侧脑室注射二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO),DMSO及JNK抑制剂SP600125(溶媒采用DMSO),容积均为10μl.脑I/R后24、72 h测定其行为学改变,分别在30 min、24 h和72 h等时间点,取脑组织,免疫组织化学方法测定海马CA1区Bcl-2和Bax蛋白表达阳性细胞数量和凋亡锥体细胞数量.结果 全脑I/R使大鼠的垂直运动次数(4.8±2.0,9.1±3.4)和平衡木积分(2.3±1.2,3.5±0.9)显著减少(P＜0.05),I/R组的减少最为显著 ;脑I/R后海马CA1区凋亡神经元细胞数目(40.5±5.1)显著低于I/R组(P＜0.01) ;全脑I/R 24 h后,海马CA1区Bcl-2和Bax阳性锥体细胞数目(89.7±8.4,40.5±2.3)显著增加(P＜0.01),再灌注24 h组增加最多 ;SP600125可以增加Bcl-2蛋白表达、减少Bax蛋白表达.结论 SP600125对大鼠脑I/R中海马细胞的凋亡具有保护作用,此机制涉及抑制JNK信号转导通路.     

脂氧素A4对大鼠永久性局灶性脑缺血时炎性反应的影响

目的 评价脂氧素A4对大鼠永久性局灶性脑缺血时炎性反应的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,体重200P250 g,随机分为3组(n=24):假手术组(S组)、永久性局部脑缺血组(PFCI组)和脂氧素A4组(LXA4组).PFCI组和LXA4组采用改良线栓法制备大鼠局部永久性脑缺血模型.LXA4组于脑缺血后经右侧侧脑室注射LXA4100 ng/5μl(溶于5μl生理盐水中),S组和PFCI组经右侧侧脑室注射生理盐水5μl,均在10 min内注射完毕.分别于缺血6、12、24 h,断头处死6只大鼠,取脑组织,测定缺血侧脑皮质髓过氧化物酶(MPO)的活性和TNF-α、IL-10、转化生长因子β1(TG-β1)的含量.于缺血24 h,观察脑组织病理学改变,测定缺血侧脑皮质胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达和神经元凋亡水平.结果 与S组比较,PFCI组和LXA4组神经功能缺陷评分、脑皮质MPO活性、TNF-α、IL-10和TGF-β1的含量、神经元凋亡水平均升高,GFAP表达上调(P＜0.05或0.01);与PFCI组比较,LXA4组神经功能缺陷评分、脑皮质MPO活性、TNF-α含量和神经元凋亡水平降低,IL-10和TGF-β1的含量升高,GFAP表达下调(P＜0.05或0.01).结论 脂氧素A4可通过抑制炎性反应减轻大鼠永久性局灶性脑缺血损伤.     

异丙酚对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡经时反应进程的影响

目的 观察异丙酚对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡经时反应进程的影响。方法 雄性sD大鼠60只,随机分为对照组和异丙酚组,每组30只,采用大脑中动脉线栓法诱发局灶性脑 缺血再灌注模型,缺血90 min,异丙酚组于缺血前即刻腹腔注射异丙酚80 mg·kg-1,对照组给予等量生 理盐水。分别于再灌注3 h、6 h、24 h、3 d、5 d、7 d时各处死5只大鼠,取脑组织,采用末端脱氧核酸转移 酶介导的三磷酸去氧鸟苷生物素原位刻痕标记技术,结合电镜观察检测细胞凋亡情况,计算TUNEL 阳性率、凋亡细胞阳性率和凋亡细胞比率。结果 对照组TUNEL阳性率再灌注6 h达高峰(P< 0．01)。对照组凋亡细咆阳性率再灌注6 h以后升高,24 h达高峰(P<0．01)。异丙酚组再灌注各时间 点TUNEL阳性率、凋亡细胞阳性率和凋亡细胞比率再灌注6 h～3 d时低于对照组(P<0．05或0．01)。 结论 异丙酚可减轻局灶性脑缺血再灌注诱发的脑细胞凋亡,最显著效果出现在再灌注6 h～3 d。     

Neuroprotective effect of mivazerol, an alpha 2-agonist, after transient forebrain ischemia in rats

BACKGROUND: We examined whether mivazerol, an alpha2-agonist, had neuroprotective effects after transient forebrain ischemia in rats. METHODS: Male Sprague-Dawley rats, anesthetized with halothane, were assigned to one of four groups (n=10 each): control (C, normal saline) and mivazerol 10 microg/kg (M10), 20 microg/kg (M20) and 40 microg/kg (M40) groups. Thirty minutes after drug administration, forebrain ischemia was induced with hemorrhagic hypotension and bilateral carotid artery occlusion for 10 min, and then the brain was reperfused. The neurologic outcome was evaluated 24 h, 48 h and 7 days after ischemia, followed by histologic evaluation. RESULTS: The survival rate during 7 days was significantly lower in group M40 than in groups M10 and M20 (P<0.05). The neurologic outcome was significantly better in groups M10 and M20 than in group M40 7 days after ischemia (P<0.05). The number of intact neurons in hippocampal CA1 was significantly greater in group M20 than in the other groups (P<0.05). Neuronal injury in the neocortex was significantly less in group M20 than in groups C and M40 (P<0.05). CONCLUSIONS: Our results suggest that mivazerol, up to 20 microg/kg, provides neuroprotective effects, whereas 40 microg/kg may exaggerate neuronal injury after transient forebrain ischemia in rats.     

帕瑞昔布钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 评价帕瑞昔布钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠54只,体重300～350 g,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和帕瑞昔布钠组(P组).I/R组和P组采用电凝左侧大脑中动脉、夹闭双侧颈总动脉60 min时进行再灌注的方法制备脑缺血再灌注模型.P组分别于缺血前15 min和再灌注11 h时静脉注射帕瑞昔布钠4 mg/kg,S组和I/R组给予等容量生理盐水.再灌注72 h时进行神经功能评分,然后取脑组织,测定脑梗死体积、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平.结果 与S组比较,I/R组神经功能评分降低,脑梗死体积扩大,TNF-α和BDNF表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,P组神经功能评分升高,脑梗死体积缩小,TNF-α表达下调,BDNF表达上调(P＜0.05).结论帕瑞昔布钠可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其机制与抑制炎性反应和上调BDNF表达有关.     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时NF-κB活化和Bcl-2、Caspase-3基因表达的影响

目的观察异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注时NF-κB的活化和Bcl-2、Caspase-3基因表达的影响,并探讨其脑保护的机制。方法 90只雄性Wistar大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,随机将大鼠分为假手术组、缺血再灌注组(I／R)和异丙酚组(缺血前10 min腹腔注射异丙酚100 mg·kg-1)。各组根据再灌注时间不同又分为缺血2 h再灌注2、3、6、12、24、72 h亚组, 每亚组各5只大鼠。于再灌注2、6、12、24 h,采用免疫组织化学染色法分析NF-κB的移位,蛋白质印迹法检测NF-κB的表达量。于再灌注3、6、24、72 h,采用原位杂交法法检测脑组织Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA的表达。于再灌注24 h作神经功能缺陷评分及苏木精-伊红(HE)染色观察缺血皮层组织形态学变化。结果与假手术组比较,I／R组缺血侧大脑皮层NF-κB于再灌注2-24 h明显从细胞浆移位于细胞核内,NF-κB和Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA的表达量增加(P<0．01),大鼠神经功能缺陷评分升高(P<0．01),组织形态学观察可见皮层水肿、淤血,神经元变性坏死。与I／R组比较,异丙酚组NF- κB从细胞浆向细胞核的移位被抑制,NF-κB和Caspase-3 mRNA的表达量减少(P<0．05),Bcl-2 mRNA 的表达量增加(P<0．05),神经功能缺陷评分降低(P<0．05),缺血大脑皮层组织形态学损伤减轻。结论异丙酚的脑保护作用可能与其抑制NF-κB的活化,上调Bcl-2基因和下调Caspase-3基因的表达,从而抑制神经组织细胞凋亡有关。     

重组血红素氧合酶-1基因腺相关病毒对慢性脑缺血大鼠认知功能的影响

目的 观察重组血红素氧合酶-1（HO-1）基因腺相关病毒（AAV）对慢性脑缺血大鼠认知功能的影响。方法 40只健康雄性SD大鼠，随机分为5组（n=8）：假手术组（SH组）、慢性脑缺血1月组（11组）、慢性脑缺血3月组（13组）、基因治疗1月组（G1组）和基因治疗3月组（G3组）。SH组、11组及13组大鼠小脑延髓池注射生理盐水10μl，1周后I1组和I3组结扎双侧颈总动脉造成脑缺血，并分别观察1个月或3个月，SH组仅分离颈总动脉不结扎。G1组和G3组小脑延髓池注射重组HO-1基因AAV，1周后结扎双侧颈总动脉，分别观察1个月或3个月。跳台法测试大鼠学习、记忆能力，免疫组化法测定海马HO-1蛋白的表达，逆转录．聚合酶链反应测定海马HO-1mRNA的表达。结果 与SH组比较，I1组、I3组学习、记忆能力下降（P〈0．05），I1组、I3组间差异无统计学意义；G1组学习能力下降（P〉0．05）。G1组学习、记忆能力强于I1组，G3组学习、记忆能力强于I3组（P〈0．05），G1组、G3组间学习、记忆能力差异无统计学意义。SH组、I1组、I3组海马有少量散在的HO-1蛋白表达和HO-1mRNA（390bp）基础表达。G1组和G3组海马HO-1蛋白和HO-1mRNA表达高于SH组、I1组和I3组（P〈0．05）。结论 小脑延髓池注射重组HO-1基因AVV可改善慢性脑缺血大鼠的认知功能。