SARS病毒基因和特异性抗体检测效果评估

目的 :评估严重急性呼吸综合征 (SARS)病毒基因检测和特异性抗体检测效果。方法 :采用巢式反转录PCR检测健康人、普通发热患者、不同时期 SARS患者痰标本中的 SARS病毒核酸即 RNA;采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)法检测上述几组血清标本中的特异性抗体 Ig G和 Ig M。结果 :SARS患者住院 6 d～ 5 7d期间 ,采用巢式 RT-PCR检测痰 SARS病毒基因 ,5 6例患者中 34例阳性 ,阳性率 6 0 .7% ;而采用间接 EL ISA检测血清抗 SARS病毒抗体 ,5 6例患者中 32例阳性 ,阳性率为 5 7.1%。两种方法均阳性的有 15例 ,均阴性的有 6例。2种病原学诊断方法检测2 0例正常人和 15例发热非 SARS患者 ,结果均为阴性。住院 6 d～ 13d组 (92 .3% )巢式 RT- PCR基因阳性率明显高于 EL ISA特异性抗体阳性率 (7.7% ) ;住院 >35 d组巢式 RT- PCR基因阳性率 (36 .8% )则明显低于 EL ISA特异性抗体阳性率 (94 .7% ) (P<0 .0 1)。结论 :痰中 SARS病毒基因检测可用于 SARS的早期诊断 ,这对于提前确诊和治疗SARS患者 ,以及尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查 ,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

SARS病毒基因和特异性抗体检测效果评估

目的:评估严重急性呼吸综合征(SARS)病毒基因检测和特异性抗体检测效果.方法:采用巢式反转录PCR检测健康人、普通发热患者、不同时期SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上述几组血清标本中的特异性抗体IgG和IgM.结果:SARS患者住院6 d～57 d期间,采用巢式RT-PCR检测痰SARS病毒基因,56例患者中34例阳性,阳性率60.7 %;而采用间接ELISA检测血清抗SARS病毒抗体,56例患者中32例阳性,阳性率为57.1 %.两种方法均阳性的有15例,均阴性的有6例.2种病原学诊断方法检测20例正常人和15例发热非SARS患者,结果均为阴性.住院6 d～13 d组(92.3 %)巢式RT-PCR基因阳性率明显高于ELISA特异性抗体阳性率(7.7 %);住院>35 d组巢式RT-PCR基因阳性率(36.8 %)则明显低于ELISA特异性抗体阳性率(94.7 %)(P<0.01).结论:痰中SARS病毒基因检测可用于SARS的早期诊断,这对于提前确诊和治疗SARS患者,以及尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义.血清特异性抗体检测可用于流行病学调查,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义.     

严重急性呼吸综合征病原学诊断方法研究进展

严重急性呼吸综合征是由SARS病毒引起的一种急性呼吸道传染病。在传染性疚病的诊断中，病原学的诊断对确诊病例具有重要意义。本文对SARS病毒基因组和SARS病原学诊断方法的国内外的研究情况进行了综述。SARS--CoV的分离培养是SARS病原学诊断的金标准，但不适于常规开展。PCR检测SARS病毒核酸可作为SARS早期诊断的重要指标，但PCR假阳性和假阴性的问题尚有待解决。免疫法检测血清中抗SARS病毒特异性抗体可作为SARS确诊的辅助诊断依据，但不能用于早期诊断。多个部位、多份标本、多种方法联合检测可增加敏感性，减少假阴性；严格执行实验室操作标准，避免假阳性；多个实验室联合检测，可提高实验的准确性。     

严重急性呼吸综合征患者肺组织包被抗原的特异性研究

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。方法：匀浆SARS患者尸检肺组织、非SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)，同时检测SARS患者及正常献血员血清中的IgG。结果：SARS患者及正常献血员血清用SARS尸检患者与非SARS患者肺组织包被抗原检测，两种组织包被抗原检测的阳性率间无统计学差异；而用非SARS患者肺组织包被抗原检测的阳性率和用羊、猪、大鼠肺组织包被抗原检测的阳性率均具有统计学差异。结论：SARS患者肺组织及非SARS患者肺组织中存在相同的抗原；其他动物中可能也存在该抗原，但可能因为其他抗原干扰而不适于用该方法检测。     

严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体

目的：建立特异性的检测严重急性呼吸综合征(SARS)相关抗体的血清学方法。方法：制备SARS患者肺组织包被抗原，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SARS患者血清中特异性抗体。结果：SARS患者血清中存在SARS相关的抗人肺组织抗体，其阳性率达92．86％(26／28)，正常献血员为11．43％(12／105)，统计学分析表明，SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。结论：SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程；检测该抗体可能有助于SARS的早期诊断。     

严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究

目的：检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中SARS相关抗体的抗原特异性。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体，并采用抗原抗体的预孵育，吸附血清中抗原特异性抗体，检测其抗原特异性。结果：SARS患者血清与SARS患者肺组织以及非SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非SARS患者肺组织孵育后，其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收，吸收率为100％。结论：本组SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，其对SARS致病机制的意义值得进一步研究。     

SARS患者血清特异性抗体的检测及临床诊断意义

目的 :评估临床诊断SARS患者血清特异性抗体产生规律对疾病诊断的意义。方法 :随机选取不同病程临床诊断为SARS的患者 15 6例 ,通过酶联免疫吸附的方法分别检测患者血清中特异性IgG型和IgM型抗体水平 ,分析SARS特异性抗体的产生与疾病病程的关系及对临床诊断的意义。结果 :血清IgG型抗体阳性 118例 ,阳性率为 75 .6 %。IgM型抗体阳性 6 5例 ,阳性率为 4 1.7%。IgG、IgM均为阴性 37例 ,占 2 3.7%。IgG型抗体产生阳性率随病程延长而逐渐增高 ,病程为 5 0～ 6 0d组阳性率最高达到了 94 .5 %。IgM型抗体阳性率也随病程延长而逐渐增高 ,但在病程 4 0～ 5 0d抗体阳性率即达最高 ,随后迅速下降。IgG与IgM抗体阳性率在其各自不同病程差异均十分显著 (P <0 .0 1)结论 :SARS患者血清特异性抗体检测可以作为SARS临床诊断的重要参考指标 ,但目前尚不宜作为诊断的金标准 ,SARS特异性IgG、IgM抗体同为阴性不能完全排除SARS诊断     

免疫滴金技术检测肾综合征出血热特异性抗体458例

目的：为探索一种更为简便、快速、特异、灵敏的肾综合征出血热（HFRS）抗体的检测方法。方法：458例HFRS病人血清同时采用免疫滴金法（CGIDA）与酶联免疫吸附法（ELLISA）对比检测特异性免疫球蛋白M抗体（抗HV－IgM）、免疫荧光法（IFAT）对比检测特异性免疫球蛋G抗体（抗HV－IgG0并以20例发热待查、48例病毒性肝炎血清作对照。结果：458例HFRS病人血清，以CGIDA法检测抗HV－IgM，阳性358例，与ELISA法作结果评价时，CGIDA灵敏度80％，特异度100％；以CGIDA法检测抗HV－IgG，阳性386例，与IFAT法作结果评价时，CGIDA灵敏度91％，特异度100％。结论：CGIDA法检测HFRS特异性抗体分别与ELLISA法及IFAT法对照，均有简便、快速、特异、灵敏之优点，检测抗HV－IgM，CGIDA法敏感性差于ELISA法，但是无假阳性；检测抗HV－IgM，CGIDA法的灵敏度高于IFAT法。     

SARS病毒基因检测结果与患者病情、病程和体液免疫的关系研究

目的:研究严重急性呼吸综合征患者的病情、病程和特异性抗体产生对SARS病毒基因阳性检出率的影响.方法:采用巢式反转录PCR检测健康人,发烧非SARS患者,不同时期和不同病情SARS患者以及存不存在特异性抗体的SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA.结果:巢式RT-PCR检测SARS患者痰标本中的SARS病毒RNA的敏感度为60.0 %.6 d～10 d组阳性检出率最高,为100 %,高于11 d～25 d组,而11 d～25 d组的阳性检出率又高于＞25 d组(P＜0.01);病情轻组比病情重组的阳性检出率高(P＜0.05);抗体阴性组比抗体阳性组检出率高(P＜0.05).结论:SARS病毒基因检测阳性率在轻病情组比重病情组高,住院时间短组比住院时间长组高,血清特异性抗体阴性组比阳性组高.     

SARS病毒基因检测结果与患者病情、病程和体液免疫的关系研究

目的:研究严重急性呼吸综合征患者的病情、病程和特异性抗体产生对SARS病毒基因阳性检出率的影响。方法:采用巢式反转录PCR检测健康人,发烧非SARS患者,不同时期和不同病情SARS患者以及存不存在特异性抗体的SARS患者痰标本中的SARS病毒核酸即RNA。结果:巢式RT—PCR检测SARS患者痰标本中的SARS病毒RNA的敏感度为60.0％。6 d～10 d组阳性检出率最高,为100％,高于11 d～25 d组,而11 d～25 d组的阳性检出率又高于>25 d组(P<0.01);病情轻组比病情重组的阳性检出率高(P<0.05);抗体阴性组比抗体阳性组检出率高(P<0.05)。结论:SARS病毒基因检测阳性率在轻病情组比重病情组高,住院时间短组比住院时间长组高,血清特异性抗体阴性组比阳性组高。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的比较

目的：比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对SARS患者特异性抗体的检出情况。方法：采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、发热非SARS患者、不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果：双抗原夹心法的阳性检出率为73．6％，而间接法的阳性检出率为57．5％，前者对SARS患者各时期特异性抗体的阳性检出率高于间接法，特别是住院第1周的阳性检出率为30％，而间接法对住院第1周的阳性检出率为0％。结论：双抗原夹心法检测SARS患者特异性抗体优于间接法。     

儿科患者与医务人员血清冠状病毒(变异株)抗体检测

目的本次严重急性呼吸综合征(SARS)流行中,儿童发病率低、症状轻,推测儿童可能存在保护性抗体.对儿科非SARS患者及医务人员进行血清冠状病毒(变异株)抗体检测,试剂盒为北京华大吉比爱生物技术有限公司冠状病毒(变异株)IgG抗体检测试剂盒(国药试字2003004批号20030501).方法用酶联免疫吸附法(ELISA),检测2001及2003年的168例非SARS患儿的血清标本,及与这些患儿有密切接触的171份医务人员血清标本,以86份成人非感染非医务人员血清标本做对照.结果非SARS患儿2001年77份血清标本阳性32例(41.56%),2003年91份阳性36例(39.56 %),医务人员抗体阳性2例(1.17%),成人对照为0%.儿童冠状病毒(变异株)抗体阳性率有随年龄增长逐渐下降的趋势.抗体滴度中位数在2003年患儿(0.200)、2001年患儿(0.170)、医务人员(0.019)及非感染成人(0.054)间存在极显著性差异.结论在非SARS患儿中冠状病毒(变异株)抗体阳性率高达40%,显著高于成人,与其密切接触的医务人员抗体阳性的检出率与对照组无明显差异,抗体滴度无升高.     

惠州市少年儿童SARS冠状病毒抗体调查分析

目的　分析惠州市少年儿童人群SARS CoV抗体水平情况。　方法　抽取惠州市学生、学龄前儿童血清标本共 10 2 8人份 ,采用酶联免疫方法进行SARS病毒IgG抗体检测。　结果　 10 2 8份样本 ,SARS病毒IgG抗体阳性率为 2 40 % (2 5 /10 2 8)。学龄前儿童 (0～ 6岁 )阳性率为 4 0 0 % (2 0 /5 0 1) ,其中男童阳性率为 4 0 1% (9/2 74) ,女童为3 96% (9/2 2 7) ,男、女童之间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;学生儿童 (7～ 14岁 )的阳性率为 0 95 % (5 /5 2 7) ,其中男生阳性率为 1 3 5 % (4 /2 96) ,女生为 0 43 % (1/2 3 1) ,男生和女生差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,而学龄前组儿童抗体阳性率明显高于学生组 (P <0 0 5 )　结论　通过对少年儿童人群SARS CoV抗体水平的监测 ,可预防SARS的流行趋势 ,及早作好预防措施     

血清抗转铁蛋白抗体的表达与子宫内膜异位症患者的关系

目的建立一种ELISA方法，检测患者血清中抗转铁蛋白抗体，评价其对子宫内膜异位症的诊断价值。方法用转铁蛋白抗原包被、间接ELISA方法检测患者血清中抗转铁蛋白抗体。采集患者血清，分3组：盆腔内异症组38例，Ⅰ、Ⅱ期20例，Ⅲ期9例，Ⅳ期9例；妇科良性疾病对照组30例；正常对照组40例。结果内异症患者血清中抗转铁蛋白抗体阳性率高达94．7％，正常对照组阳性率为2．5％，良性疾病对照组阳性率为0％，内异症组与两对照组比较差异有显著意义（P均〈0．01）。间接ELISA法诊断内异症临床敏感性为94．7％，特异性为98．6％，诊断符合率为96．5％。内异症各组阳性率比较差异无显著意义（P〉0．05）。结论用转铁蛋白抗原包被的间接ELISA法检测血清中抗转铁蛋白抗体诊断内异症敏感性、特异性强，诊断符合率高，可试作为内异症辅助诊断及疗效检测的一种非创伤性指标。     

SARS病房工作的医护人员血清中特异抗体测定分析

目的检测密切接触SARS患者的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平,对SARS病毒有无隐性感染作初步调查.方法分别用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,ⅡFA)检测200例正常人,200例在SARS病房工作1个月的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平.结果正常人及医护人员血清中未检测到SARS病毒IgM及IgG抗体.结论不同于普通的流行性传染性疾病,SARS病毒可能不具有隐性感染性.     

2 132 例不同人群血清中SARS-CoV抗体水平调查

目的：探讨SARS-CoV(IgG)抗体检测辅助诊断非典型肺炎的临床应用价值。方法：采用ELISA方法及蛋白芯片法对2132例不同人群的血液标本检测SARS-CoV(IgG)抗体，分析SAILS康复者与其它疾病患者和正常人群抗体水平的差异。结果：用ELISA方法测定SARS康复者、肾病、恶性肿瘤、肺部疾病和糖尿病患者、其它疾病的SARS-CoV(IgG)抗体阳性率分别为75．6％(118／156)、29．3％(22／75)、22．3％(19／85)、22．7％(10／44)、13．6％(8／59)，500例健康查体人员全部为阴性，500例密切接触人员也为阴性。蛋白芯片方法测定SARS康复者的抗体阳性率为86％，对62例ELISA方法阳性的非SARS患者测定，仅发现4例阳性。结论：SARS-CoV(IgG)抗体可辅助回顾性诊断是否有SARS-CoV的感染。与ELISA方法相比，蛋白芯片方法具有更高的特异性和灵敏度。     

25例SARS新型冠状病毒基因测定研究

目的 应用分子生物学技术，早期诊断及鉴别诊断SARS。方法采用RT—PCR及巢式PCR的方法，扩增新型冠状病毒的保守片段，确定患者有无新型冠状病毒感染。结果 25例不同临床表现的患者均扩增出新型冠状病毒的保守片段。结论 应用RT—PCR及巢式PCR扩增新型冠状病毒基因的方法有助于SARS早期诊断及鉴别诊断。     

SARS患者、医务人员及疫区公众创伤后应激障碍的调查研究

目的调查SARS相关3类人群创伤后应激障碍(PTSD)的发生情况及主要影响因素.方法使用自拟应激源-认知情况问卷、事件影响量表(IES-R)、领悟社会支持量表(PSSS)、简易应对方式问卷(SCSQ)、自尊量表(SES)、艾森克个性问卷(EPQ)作为工具,对SARS患者、一线医务人员及疫区公众进行调查.结果1.SARS患者、一线医务人员、疫区公众PTSD症状检出率分别是:55.1%、25.8%、31.18%;SARS患者PTSD症状的检出率最高(P＜0.01).2.3类人群PTSD的发生率不同的主要原因是应激源强度与特征的不同;消极应对方式是SARS患者、公众的危险因素,自尊是SARS患者和一线医务人员的保护因素,社会支持是一线医务人员的保护因素.3.相比2003年9月的第一次调查,2004年9月第二次调查IES-R条目严重出现率明显下降.结论1.在SARS事件应激暴露强度不同的各人群中均产生了PTSD症状,SARS患者的PTSD症状检出率最高.2.组间差异的主要原因是应激源强度,不同人群产生PTSD的影响因素不完全相同.3.随着时间改变PTSD症状逐渐减轻.