非小细胞肺癌血清miR-191的表达及意义

目的:探讨血清miR-191对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的诊断价值及临床特征。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测65例非小细胞肺癌患者血清和65例健康人血清中miR-191的表达量,分析血清miR-191的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系,通过绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果:非小细胞肺癌患者血清miR-191相对表达水平高于正常对照组(P＜0.05),其表达与临床分期、病理类型及淋巴结转移显著相关（P＜0.05）,而与性别、年龄及吸烟史无相关性(P＞0.05);miR-191的ROC曲线下面积AUC=0.951,其诊断非小细胞肺癌的灵敏度为87.3%,特异度为92.3%。结论:血清miR-191测定的诊断性能较高,有望作为诊断非小细胞肺癌的潜在分子标志物。     

血清miR-141和miR-145联合检测非小细胞肺癌

目的:探讨miR-141、miR-145作为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)生物标志物的诊断价值.方法:采用实时荧光定量PCR技术检测80例正常人和80例非小细胞肺癌患者血清中miR-141、miR-145的表达量,分析miR-141、miR-145的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系,并绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值.结果:非小细胞肺癌患者miR-141、miR-145表达与对照组比较有统计学差异(P＜0.05),二者联合的诊断效能分别为:灵敏度92％ (95％ CI:0.86 ～0.96),特异度83％,(95％CI:0.73～0.88),阳性预测值(PPV) 86％,阴性预测值(NPV) 92％.结论:血清中miR-141、miR-145测定的诊断性能较高,可以作为非小细胞肺癌的潜在的诊断标志物.     

miR-486在非小细胞肺癌血液中表达及意义

目的:对比分析非小细胞肺癌患者肿瘤组织、瘤旁组织和外周血清中miR-486的表达情况,探讨miR-486是否有可能成为新的非小细胞肺癌标记物。方法:选取20例临床上确诊并进行外科治疗的非小细胞肺癌病例,每个病例取3块肿瘤组织,3块正常肺组织以及3×10ml外周血液样本。另选取20例健康志愿者抽取3×10ml外周血液作为对照。提取总RNA进行qRT-PCR实验。分析外周血清和肿瘤组织中miR-486的表达情况。结果:miR-486在非小细胞肺癌肿瘤组织中呈低表达状态（P＜0.05）,其在瘤组织内的表达与外周血清中的表达呈正相关性（P＜0.05）。结论:miR-486在人体外周血清中的表达与非小细胞肺癌存在正相关性,提示外周血清中miR-486可以成为非小细胞肺癌的预警因子。     

miRNAs在肺癌中的作用

"这些miRNAs在血清中的高表达是非小细胞肺癌的血液生物标记物……" 肺癌居全球癌症死亡原因的首位,但迄今尚无有效针对这一致命疾患的诊断和预测性生物标记物.新证据表明,miRNAs具有以细胞周期依赖性方式调节转录及翻译的潜能,这为我们在分子水平深入理解癌症开拓了新视野[1,2].     

血清外泌体miRNAs联合CA72-4在胃癌诊断中的价值分析

  目的  筛选胃癌患者及健康人血清外泌体miRNAs,探究miRNAs联合肿瘤标记物在胃癌诊断中的价值。  方法  选取2020年4月至2021年4月在苏州大学附属第一医院确诊胃癌的46例患者为胃癌组,同期20例健康体检者为对照组,收集两组血清标本,行血清外泌体miRNAs测序,筛选并验证差异性表达的miRNAs,将验证后的miRNAs表达水平、肿瘤标志物数值与胃癌诊断行Spearman相关分析,并绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic ,ROC）曲线,分别分析外泌体miRNAs、CA72-4及两者联合在胃癌诊断中的价值。  结果  两组血清外泌体共筛选出376个差异表达的miRNAs,经q-PCR验证,仅4个miRNAs差异具有统计学意义,采用ROC曲线判断外泌体miRNAs在胃癌诊断中的效能:miR-1323、miR-26a-5p、miR-202-3p、miR-96-5p诊断胃癌的曲线下面积（area under curve,AUC）分别为0.908、0.815、0.570、0.547,灵敏度分别为71.7%、67.4%、30.4%、19.6%,特异度分别100%、85.0%、90.0%、100%。Spearman相关分析结果提示:miR-26a-5p、miR-1323和CA72-4与胃癌诊断相关,ROC曲线显示:miR-26a-5p、miR-1323和CA72-4三者联合诊断的曲线下面积为0.967,高于三者单独诊断效能,其灵敏度和特异度分别为87.0%、100%。  结论  联合检测血清外泌体miR-26a-5p、miR-1323和CA72-4的表达水平,在胃癌诊断中具有潜在价值。      

血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌的诊断价值

目的:研究血清和尿液中外泌体miRNAs的表达水平对肾细胞癌(RCC)的诊断价值。方法:选择本院2018年11月至2020年08月诊治的68例RCC患者（RCC组）进行前瞻性分析，并将RCC患者根据临床分期进行分组，以本院同期收治的60例肾脏良性病变患者作为对照组。检测患者血清和尿液中外泌体miRNAs相对表达量，分析血清和尿液中外泌体miRNAs在肾细胞癌中的诊断价值。结果:RCC组患者血清、尿液中miR-210、miR-21、miR-153、miR-1233和miR-221表达量均明显高于对照组，miR-34a表达量均明显低于对照组（P＜0.05）；血清中ROC曲线显示AUC最大的为miR-221，其诊断敏感度为79.40%，特异度为95.00%；尿液中最大的为miR-34a，其敏感度为85.30%，特异度为88.30%；不同临床分期RCC患者的血清miR-210、miR-153表达量以及尿液miR-153表达量无显著差异（P＞0.05），但血清和尿液中的miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量以及尿液miR-210表达量在不同分期RCC患者中存在显著差异（P＜0.05）；血清中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）；尿液中，miR-210、miR-153与临床分期无相关性（P＞0.05），miR-21、miR-1233、miR-221与临床分期呈正相关，miR-34a与临床分期呈负相关（P＜0.05）。结论:RCC患者血清、尿液外泌体miR-210、miR-21、miR-34a、miR-153、miR-1233和miR-221表达量较良性肾脏病变患者存在显著差异，同时miR-21、miR-34a、miR-1233、miR-221表达量均与RCC患者病理分期存在显著相关性，可为疾病进展评估提供参考。     

肺癌相关miRNAs研究进展

肺癌的发生发展为复杂的多基因事件,microRNAs（miRNAs）参与其中并发挥重要作用。miR-NAs为一系列长约19-25nt的内源性非编码微小RNA,可抑制靶基因转录或蛋白翻译从而沉默靶基因的表达。部分miRNAs在肺癌组织中表达上调,并证明可负性调节抑癌基因。亦有部分miRNAs在肺癌组织中表达下调,被认为是抑癌基因且其中一部分也已得到证实,在临床潜在应用方面,目前研究证实miR-101可发挥放疗增敏效应,而miR-134、miR-379与miR-495或有助于指导肺癌化疗用药的选择。通过回顾最新文献,本文对肺癌高度相关的miRNAs及其靶基因进行了总结,并在生物学效应、潜在靶基因、基因诊断、治疗、预测预后等方面进行探讨。     

MiR-34b和miR-155在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测肺癌组织及癌旁正常组织中miR-34b和miR-155的表达水平及其与肺癌临床病理特征之间的关系。方法:收集50例非小细胞肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常肺组织标本,运用 Real-time PCR检测 miR-34b和miR-155在肺癌组织和癌旁正常肺组织中的表达情况,分析其表达与肺癌临床病理特征之间的关系。结果:Real-time PCR 检测显示在50例非小细胞肺癌组织中 miR-34b的表达显著低于癌旁正常肺组织(P=0.019),而miR-155的表达显著高于癌旁正常肺组织(P=0.000)。MiR-34b和miR-155的表达与淋巴结转移情况显著相关（P均＜0.05,miR-34b呈负相关,miR-155呈正相关）;与性别、年龄、病理类型及肿瘤分化程度无明显相关;miR-34b的表达与临床病理分期无显著相关,而miR-155表达与临床病理分期显著相关。结论:MiR-34b和miR-155的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展相关,其可能成为肺癌的筛查、诊断及治疗的肿瘤标志物。     

VEGF及 MMP表达与非小细胞肺癌的关系研究

目的：分析VEGF及MMP表达与非小细胞肺癌的关系。方法选取75例非小细胞肺癌患者为观察组,并同时选取75例健康人员为对照组,然后检测两组的血清VEGF及MMP相关指标,并采用Logistic分析上述血清指标与非小细胞肺癌的关系。结果观察组血清VEGF及MMP相关指标均水平均高于对照组,且观察组中腺癌及临床分期较晚患者血清VEGF及MMP相关指标水平均高于鳞癌患者及临床分期较早的患者,Logistic分析上述血清指标均与非小细胞肺癌有密切的关系,P均＜0．05。结论非小细胞肺癌患者的血清VEGF及MMP相关指标均处于较高的表达水平,且肿瘤病理分型及临床分期均对其表达影响较大,上述指标均与非小细胞肺癌有密切的关系。     

非小细胞肺癌中miR-19a和miR-19b的表达及临床意义

目的:分析miR-19a、miR-19b在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:非小细胞肺癌手术标本61例及其癌旁正常组织,提取总RNA,采用实时定量PCR方法检测miR-19a、miR-19b在非小细胞肺癌及其癌旁正常组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:miR-19a、miR-19b在非小细胞肺癌组织中的表达高于对应的癌旁正常肺组织,其表达与临床分期、病理类型及淋巴结有无转移相关（P<0.05）。而在不同年龄、性别和吸烟史患者间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:miR-19a、miR-19b高表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分型及有无淋巴结转移密切相关,miR-19a、miR-19b有可能成为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物之一。     

非小细胞肺癌血清miR－197和miR－203的表达及意义

目的：检测外周血清miR－197、miR－203在非小细胞肺癌的表达及对非小细胞肺癌诊断的意义。方法：采用实时荧光定量PCR检测80例正常人和80例非小细胞肺癌患者血清中miR－197、miR－203的表达量,绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果：miR－197和miR－203在NSCLC血清中均高表达,miR－197在两组中表达有差异[（4．23±0．38）vs （1．25±0．24）,P＜0．05],miR－203在两组中表达有差异[（3．32±0．21）vs （1．32±0．42）,P＜0．05]。miR－197诊断非小细胞肺癌的AUC值为0．83（95％CI：0．68～0．93）,而miR－203则为0．76（95％CI：0．60～0．87）。联合miR－197与miR－203诊断非小细胞肺癌的AUC值提高至0．93（95％CI：0．70～0．98）。结论：非小细胞肺癌外周血中miR－197、miR－203呈高表达,与NSCLC临床TNM分期、淋巴结转移关系密切。ROC曲线分析显示联合检测miR－197、miR－203特异度及灵敏度均可达90％,有望作为诊断NSCLC的潜在分子标志物。     

miR-103通过抑制MED26的表达促进小细胞肺癌细胞的增殖

目的:研究miR-103对小细胞肺癌细胞增殖的影响及其作用机制.方法:Real-time PCR法检测miR-103在人小细胞肺癌组织和细胞中的表达.将miR-103 inhibitor转染到人小细胞肺癌细胞中,通过CCK8实验检测小细胞肺癌细胞的增殖活性.Real-time PCR和Western blotting检测转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞中MED26 mRNA和蛋白的表达变化.通过双萤光素酶报告基因验证miR-103与MED26的作用机制.结果:miR-103在小细胞肺癌组织和人小细胞肺癌细胞系NCI-H1688中的表达均高于癌旁组织和对照细胞系.转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞的增殖活性显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 inhibitor后小细胞肺癌细胞中MED26的mRNA表达水平高于对照组.双萤光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103 mimics的实验组中MED26 3’-UTR报告基因活性显著降低(P＜0.05).转染MED26后能显著抑制小细胞肺癌细胞增殖活性.结论:miR-103可以通过抑制MED26的表达来促进小细胞肺癌细胞的增殖.     

小细胞肺癌中miR-194-5p的表达及与MEX3a的相关性

目的:检测小细胞肺癌中微小RNA-194-5p(miR-194-5p)的表达,探讨其临床意义,并关注其与重组人类核糖核酸结合蛋白3a(MEX3a)的关系.方法:选择小细胞肺癌患者共51例作为观察组,分别选择大细胞癌10例、典型类癌10例、不典型类癌5例作为对照组.应用实时荧光定量PCR法检测miR-194-5p的表达,...     

miR-127在肺癌中的表达及功能

 目的 探讨miR-127在肺癌中的表达及对其肺癌细胞生物学特性的影响。方法 收集20例患者的肺癌组织及癌旁组织，通过实时荧光定量PCR检测miR-127在肺癌及癌旁组织中的表达水平。应用mimics转染A549细胞株，采用平板克隆、MTT法检测miR-127 mimics组、空白载体转染组（NC）肺癌细胞的增殖活性。Transwell实验计算肺癌细胞过膜数量，研究miR-127与肺癌细胞迁移作用的关系。结果 miR-127在肺癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（0.55±0.05 vs. 1.45±0.13, P=0.001）。肺癌组织中miR-127的表达随着病理分期恶性程度的增高而降低（H=6.528, P=0.034）。平板克隆及MTT实验结果显示miR-127 mimics组的细胞活性及增殖明显受抑制（P=0.0032; P=0.0045），Transwell实验显示miR-127 mimics组的细胞过膜数量（79±18/视野）明显低于NC组（352±21/视野），差异有统计学意义（P=0.002）。结论 miR-127在肺癌组织中低表达，其在抑制肺癌细胞的增殖和转移过程中发挥重要作用，可作为肺癌的潜在临床诊断标志物。     

miR-31在结直肠癌患者血清中的表达及对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响

背景与目的：microRNA与肿瘤关系密切,血清miRNAs可以作为筛选和监测结直肠癌的有效指标。该研究旨在检测结直肠癌患者血清中miR-31的表达水平,并分析miR-31对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法：收集40例结直肠癌患者和35例健康人群作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR),检测其血清miR-31的表达水平,并分析结直肠癌患者血清miR-31的表达水平与临床病理特征之间的关系。采用脂质体转染将miR-31模拟物(miR-31 mimics)和抑制剂(miR-31 inhibitor)转染到HCT116细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期改变。结果：结直肠癌患者血清中miR-31的表达显著高于健康对照组,miR-31表达与结直肠癌分化程度有关。转染miR-31mimics组HCT116细胞生长增快,而转染miR-31抑制剂后细胞增殖能力明显降低(P＜0.01);同时miR-31mimics组细胞凋亡所占比例较miR-31抑制剂组和阴性对照组(miR-control,NC)明显减少,尤其是晚期凋亡细胞减少为著;转染miR-31抑制剂组,G1期细胞较miR-31 mimics组和NC组明显增多。结论：miR-31在结直肠癌患者血清中表达显著上调,miR-31可能通过促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡而参与了结直肠癌的发展进程,有望成为结直肠癌诊断的标志物。     

The expression and function of microRNA-203 in lung cancer

We aimed to determine the expression of microRNA-203 (miR-203) in human lung cancer cell lines and to evaluate the effects of miR-203 by targeting survivin, on the lung cancer cell line 95-D to provide potential new strategies for treating lung cancer. The expression of miR-203 was detected using quantitative real-time PCR (qRT-PCR) in the in vitro cultured lung cancer cells A549, HCC827, NCI-H1299, and 95-D as well as in normal human bronchial epithelial cells. Following a 72-h transfection with the miR-203 precursor in 95-D lung cancer cells, the change in miR-203 expression was detected using qRT-PCR and the resulting effect on survivin protein expression was ascertained by Western blot analysis. The influence of miR-203 on the viability of 95-D lung cancer cells was evaluated using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The effect of miR-203 on 95-D cell proliferation was analyzed using flow cytometry. The consequences of miR-203 expression on 95-D cell apoptosis were analyzed by Annexin V/propidium iodide double staining coupled with flow cytometry. The role of miR-203 in the invasive potential of 95-D cells was studied using a transwell chamber assay. A luciferase reporter gene system was used to verify that survivin is a target gene for miR-203. By qRT-PCR, the expression of miR-203 was lower in lung cancer cells than in normal bronchial epithelial cells (p?<?0.01), and the expression of miR-203 in 95-D lung cancer cells was significantly higher after a 72-h transfection with the miR-203 precursor (p?<?0.01). After a 72-h transfection with the miR-203 precursor, survivin protein levels in 95-D cells were significantly decreased (p?<?0.01). Cell viability, as assessed with an MTT assay, decreased following an increase in miR-203 expression (p?<?0.05). The flow cytometry results indicated that after miR-203 expression increased, the cell proliferation index decreased (p?<?0.05) and the number of apoptotic cells increased (p?<?0.01). Increased miR-203 expression led to a significant decrease in the number of cells that migrated through a transwell chamber membrane (p?<?0.01). The luciferase reporter gene system demonstrated that the relative luciferase activity significantly decreased after transfection with the miR-203 precursor (p?<?0.05). The expression of miR-203 is downregulated in lung cancer cells. miR-203 negatively regulates survivin protein expression and inhibits the proliferation and invasion of lung cancer cells. Therapeutic strategies that enhance miR-203 expression or silence survivin could potentially benefit lung cancer patients.     

肺癌患者血清中血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的:采用ELISA法检测肺癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）含量变化,以探讨其改变与肺癌临床诊断以及预后的关系。方法:原发性肺癌患者50例,取空腹静脉血4ml,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中VEGF的水平,同时检测肺良性病变及健康体检者各50例,分别作为良性对照组及健康对照组。结果:肺癌组VEGF表达水平明显高于肺良性疾病组和健康对照组,有统计学意义（P＜0.05）;小细胞肺癌高于非小细胞肺癌,淋巴结转移者高于无转移者,差异均显著（P＜0.05）;且依TNM分期的早晚呈上升趋势,即:VEGF水平Ⅳ期＞Ⅲ期＞Ⅱ期＞Ⅰ期,组间差异显著（P＜0.05）;而血清VEGF水平与患者生存期呈负相关(r=-0.38,P＜0.05)。结论:检测肿瘤患者血清中VEGF的水平变化,对于肺癌的诊断和预后具有重要意义。